化学发光酶联免疫法检测汉坦病毒IgM抗体的研究

目的建立化学发光酶联免疫分析法（CLEIA）检测肾综合征出血热（HFRS）患者血清中IgM抗体。方法以抗人IgM-μ链抗体包被黑色不透明聚乙烯板，辣根过氧化物酶标记汉坦病毒核蛋白作为检测抗原以及luminol-H2O2作为发光底物，建立CLEIA法并对CLEIA与IgM抗体捕获酶联免疫吸附法（MacELISA）进行比较。结果CLEIA与MacELISA相关系数0．97；对于51份确诊的HFRS患者急性期血清CLEIA检测敏感度100％，MacELISA为90．2％；对48份正常人血清两种方法检测特异度均为100％；CLEIA次内变异系数范围5．02％-12．7％，次间变异系数范围0．4％～7．0％，与MacELISA相当。结论化学发光酶联免疫分析法是一种更为灵敏，准确和稳定的方法，适用于检测HFRS早期患者血清中IgM抗体。     

酶联免疫法（ELISA）在检测肝纤维化指标中的应用

目的 探讨酶联免疫法（ELISA）在检测血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PcⅢ）、Ⅳ型胶原（CIV）、层粘蛋白（LN）中的应用。方法 利用ELISA与放射免疫分析法（RIA）分别检测116例慢性肝炎组、215例正常组和36例肝硬化组的血清HA、PCⅢ、CIV、LN，比较二者的优缺点。结果 两种方法结果无差异（p〉0．05）。结论 ELISA法准确、简便和安全，可代替RIA法。     

酶联免疫法(ELISA)在检测肝纤维化指标中的应用

目的探讨酶联免疫法(ELISA)在检测血清透明质酸(HA) 、Ⅲ型前胶原(PCⅢ) 、Ⅳ型胶原(CIV)、层粘蛋白(LN)中的应用.方法利用ELISA与放射免疫分析法(RIA)分别检测116例慢性肝炎组、215例正常组和36例肝硬化组的血清HA、PCⅢ、CIV、LN,比较二者的优缺点.结果两种方法结果无差异(p>0.05).结论 ELISA法准确、简便和安全,可代替RIA法.     

化学发光法和酶联免疫法在乙型肝炎病毒血清学检验中的效果比较

目的 比较化学发光法和酶联免疫法在乙型肝炎病毒血清学检验中的效果。方法 选取2017年2月~2019年5月我院收治的疑似乙型肝炎患者63例作为研究对象,均予以酶联免疫法、化学发光法进行血清学检验,以荧光定量PCR为金标准,比较两种检验方式准确性、血清学指标检出率。结果 共63例疑似乙肝患者,荧光定量PCR检验阳性38例、阴性25例;酶联免疫法和化学发光法中准确度、灵敏度、特异度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。38例乙肝阳性患者中,酶联免疫法HBsAb、HBcAb阳性检出率与化学发光法比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;酶联免疫法HBeAb、HBeAg、HBsAg阳性检出率低于化学发光法,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 乙型肝炎病毒血清学检验中,采用酶联免疫法、化学发光法均具良好诊断效果,但在血清标志物检验中,化学发光法检出效果更佳,有利于保证临床诊断准确性。     

化学发光法检测肝纤维化血清学指标的临床应用

目的探讨化学发光法检测肝纤维化指标包括三型前胶原N端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CⅣ）、层粘蛋白（LN）及透明质酸（HA）对肝纤维化的诊断价值。方法用化学发光法检测132例乙型病毒性肝炎患者血清中肝纤维化四项指标的水平,评价四项指标鉴别诊断肝炎及肝硬化的价值。结果乙型肝炎组、肝癌组、肝硬化组血清中的四项指标依次升高,均与正常对照组差异有统计学意义（P〈0.01）。ROC曲线显示,PⅢNP、CIV、LN、HA的曲线下面积分别为0.680、0.825、0.716、0.825,灵敏度分别为39.1%、87.0%、87.0%、82.6%,特异性分别为89.8%、69.3%、53.4%、86.4%,准确性分别为79.09%、72.73%、78.18%、85.45%。在联合检测中,HA＋PⅢNP组合的灵敏度为83.0%,特异性为80.0%,准确性为80.1%。结论单个指标检测,HA是四项指标中鉴别诊断肝炎与肝硬化最有价值的一项,通过HA联合其他指标进行分析,其中HA＋PⅢNP组合特异性、准确性最高。     

化学发光法和酶联免疫法作为筛选试验测定丙肝抗体的评价

目的比较化学发光法(CLIA)和酶联免疫法(EIA)测抗-HCV对诊断HCV感染的检出率,分析CLIA测定抗-HCV作为HCV感染初筛试验的重要临床意义。方法分别用CLIA、EIA方法检测所有临床标本中的抗-HCV,选取抗-HCV初筛阳性样本进行HCV RNA确认试验。结果 6461例样本中,EIA和CLIA测抗-HCV阳性率分别为2.86%和3.17%;确认试验中,CLIA法抗-HCV阳性与HCV RNA的符合率为97.1%,显著高于EIA组(91.9%)。EIA法测抗-HCV,S:CO>5.0以上,与HCV RNA检测符合率可达100%;弱阳性样本,与HCV RNA符合率为69.7%;CLIA法测抗-HCV,S:CO>2.0以上,与HCV RNA检测符合率可达100%;弱阳性样本,与HCV RNA符合率为92.9%。有31例样本CLIA法抗-HCV和HCV RNA阳性,而EIA法抗-HCV阴性;有4例样本EIA法检测为阳性,而CLIA法和PCR确认试验均为阴性。结论CLIA法测抗-HCV作为HCV感染初筛实验,与传统EIA相比,特异性和阳性预测值更高,有效降低了假阳性率,有利于临床医生对HCV感染患者的早期诊断和治疗。     

化学发光法与酶联免疫吸附分析法联合测定癌胚抗原的应用

目的通过酶联免疫吸附分析法（ELISA）与磁粒子捕获免疫发光法（ICA）联合测定血癌胚抗原（CEA）进行分析和探讨。方法预先用ELISA对检测CEA的血清标品进行分组,然后根据浓度级别分组再检测血清CEA的浓度。结果ELISA和ICA联合检测血CEA,可大大节约非常昂贵的ICA试剂,又能快速发出检验报告。结论该方法无论是医院或者病患者都带来了非常可观的经济效益。     

化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用分析

目的 通过对比,探讨了化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值.方法 选取2013年5月至2015年5月在我院的疑似乙型肝炎患者80例,抽取空腹血液样本后都分别进行乙肝病毒以及核心抗体的化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测,并对其检测结果进行分析.结果 化学发光酶免疫分析法检出乙型肝炎病毒阳性78例,检出率为97.5％;而ELISA检出乙型肝炎病毒阳性76例,检出率为95.0％,两种方法的检出率对比差异无统计学意义(P＞0.05).化学发光酶免疫分析法对于乙肝病毒核心抗体IgM与IgG的检测阳性率分别为80.0％和70.0％,而ELISA法检测两种抗体的阳性率则分别为18.8％和20.0％,化学发光酶免疫分析法对乙肝核心抗体IgM与IgG的检测阳性率明显高于ELISA法(P＜0.05).ELISA法检出HBc-IgM的最低限为0.135 IU/ml,检出HBc-IgM最低限为0.143 IU/ml;化学发光酶免疫分析法检出HBc-IgM最低限为0.032 IU/ml,检出HBc-IgG最低限为0.038 IU/ml.结论 化学发光酶免疫分析法在乙型肝炎检测中具有高的检出率,尤其对乙肝病毒的核心抗体的检测敏感度较高,值得在临床推广应用.     

TTV酶联免疫方法的建立及其初步应用

目的 建立检测TTV的酶免疫技术,了解不同型肝炎患者血清中抗－TTV抗体的分布情况,并结合TTV DNA的检测分析两者的关系。方法 以原核表达的TTV ORF1蛋白为抗原建立检测抗－TTV的酶联免疫吸附试验（ELISA）方法,采用该方法检测不同肝炎患者中抗－TTV抗体;在套式聚合酶链反应（PCR）方法检测血清标本中TTV DNA。结果 所建立的检测TTV的ELISA方法具有较好的特异性,不同别肝炎患者中抗－TTV抗体阳性率分别为：甲型肝炎患者10.5%（4／38）,乙型肝炎患者12.5%（16／128）,丙型肝炎患者8.3%(7/84),丁型肝炎患者7.7%(30/93),健康人群1.3%(1/78)。统计学分析表明,非甲－庚型肝炎患者抗－TTV阳性率显著高于其他型肝炎患者（P＜0.01）,而正常人群则显著低于肝炎患者（P＜0.05）。抗－TTV阳性率与TTV DNA阳性率存在相关性（P＜0.05）。结论 在不同型肝炎患者中均可检出抗-TTV抗体,但以非甲－庚型肝炎患者阳性率高;TTV抗体可与基因同时存在于患者血清中,抗－TTV抗体可能类似抗－HCV, 是一传染性标志。     

化学发光免疫法测定人体甲状腺激素的性能验证及其临床应用

目的 评估化学发光免疫系统在临床甲状腺素检测中的应用效果.方法 选取我院2018年6月至2019年11月区间内的100例甲亢患者、100例甲低患者和100例甲状腺功能正常者作为试验对象,将化学发光免疫法(CLIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫测定法(RAI)检测结果比较.结果 使用化学发光免疫系统实测血清促甲状腺素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)时,所得线性范围、准确度、总精密度均较好,标准变异系数(CV)1.58％～6.44％、灵敏度较高且方法总回收率在99.7％～104.6％;且实际样本检测结果优于ELISA法、RAI法.结论 利用化学发光免疫法对甲状腺功能异常患者进行血清中甲状腺素及其抗体检测,可显著提高检测结果准确性并缩短检测周期,具有较高的临床医学推广价值.     

血清肝纤维化指标及PAPP指数与肝纤维化的相关性研究

目的探讨血清肝纤四项,即Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）、透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢNP）以及PAPP指数,即凝血酶原时间（PT）、血清谷丙转氨酶（ALT）、全血血小板（PLT）计数、血清前白蛋白（PA）与肝纤维化的相关性。 方法选取行肝穿病理活检的不同程度肝纤维化患者80例（慢性肝炎60例、肝硬化20例;〈S0期34例、S1～S2期26例、S3～S4期20例）,分别采集静脉血。采用化学发光法检测血清中C—IV、HA、LN、PIIINP的水平,并分别应用全自动血液凝固仪、全自动生化分析仪和全自动全血细胞分析仪测定血清PAPP指数,分析各血清学指标与肝纤维化的相关性。 结果①各血清学指标水平均随肝纤维化程度的不断加深而升高,并均在S3～S4期达到最高水平,其中〈S0期患者血清HA水平与S1-S2期相比差异有统计学意义（t值为3．357,P〈0．05）;〈S0期患者血清C—IV、HA、LN、PIIINP、PAPP指数水平分别与S3～S4期相比差异均有统计学意义（t值分别为5．270、10．484、4．952、5．382、6．343,均P〈0．05）;S1～S2期患者血清C—IV、HA、LN、PⅢNP、PAPP指数水平分别与s3～S4期相比差异均有统计学意义（t值分别为4．322、6．992、4．393、3．838、4．027,均P〈0．05）;②各血清学指标与肝纤维化程度均呈正相关（r值分别为0．600、0．549、0．599、0．529、0．675,均P〈0．001）;③肝纤四项与PAPP指数的灵敏度（Se）、特异性（sp）、阳性预测值（Pv＋）、阴性预测值（Pv-）形成互补;④慢性肝炎患者血清PAPP指数水平与肝硬化患者相比差异有统计学意义（t值为1177．500,P〈0．001）。 结论肝纤四项与PAPP指数的联合检测有助于肝纤维化的临床诊断与分期以及对抗纤维化的疗效监测。     

慢性病毒性肝炎纤维化分期与血清学指标的关系

OBJECTIVE: To assess the correlation between serological fibrosis markers and staging of fibrosis in chronic hepatitis. METHODS: One hundred and fourteen (114) biopsy and 13 autopay liver specimen were reviewed pathohistologically. Serum samples for liver function tests and fibrosis marker assays including serum P-III-P, IV collagen, laminin (LN), hyaluronic acid (HA), h-TIMP-1 were collected simultaneously right before the biopsy or autopsy. HE, sirius red stains as well as staining for reticulum and elastic fiber were done. In besides, IV collagen, laminin, activated stellate cell were assayed by immunohistochemical methods. RESULTS: Among 127 patients, 92 cases of chronic viral hepatitis including early cirrhosis and 18 cases of hepatic cirrhosis were examined pathologically (17 alcoholic liver disease excluded). The overall inflammatory index and fibrotic scoring were noticed to be significantly correlated with each other (r = 0.82, p < 0.01); The markers, such as HA, P-III-P, LN, IV collagen, h-TIMP-1 were positively correlated with the fibrotic staging and scoring (r = 0.610, 0.575, 0.607, 0.641, 0.606 respectively). The higher the marker level, the more serious the fibrotic change. In addition, (18 cases) patients with active cirrhosis (16 cases) showed higher serum marker level than that of the early cirrhosis and the serum markers in the later were higher than that in the non-active cirrhosis. CONCLUSION: Serum fibrosis markers are fairly well correlated with the staging of fibrosis and are considered to be the valuable references for clinical diagnosis. The close correlation between inflammation process and fibrosis suggests that the inflammatory process plays an important role in fibrogenesis.     

HBsAg ELISA试剂盒筛检结果的评估

目的 评估部分国产与进口HBsAg ELISA试剂盒筛查血源的价值.方法 选用部分国产和进口HBsAg ELISA试剂,对中国生物制品检定所120份HBsAg临床科研组合血清样本及随机抽取400份东莞市无偿献血者血清标本为验证样本进行同步平行检测,以中国生物制品检定所组合血清及献血者HBsAg阳性并经中和试验证实者为金标准.结果采用四格表法计算两者对等指标并进行评价.结果 国产HBsAg ELISA试剂和进口HBsAg ELISA试剂的灵敏度分别为85.71%（72/84）和100%（84/84）;特异性分别为100%（436/436）和96.55%（421/436）;尤登指数分别为0.86、0.97;两种试剂重复合格率均为100%.结论 试剂的灵敏度以进口HBsAg ELISA试剂较好,但特异性比国产试剂差,两种试剂的重复性均好,两种试剂联合筛检献血者血样标本可提高临床输血的安全性.     

化学发光免疫分析法检测C肽的分析性能验证

目的验证化学发光免疫分析法检测C肽的分析性能。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,结合科室具体实际,验证深圳新产业MAGLUMI 4000 Plus检测系统检测C肽的基本分析性能。结果C肽低、高浓度批内不精密度、批间不精密度均在可接受范围内;无样本携带污染;C肽原装配套定值标准品检测值与靶值的偏倚小于12.5%,20例临床样本与MAGLUMI 4000检测结果差异无统计学意义(P>0.05),平均相对偏差为3.76%;C肽最大稀释倍数为8倍;功能灵敏度为0.10 ng/mL;C肽浓度范围在0.09~17.25ng/mL线性回归方程为Y=1.008X-0.2891,相关系数r=0.983;20名健康体检者检测C肽的结果为1.042~2.901ng/mL,100%的检测结果在厂家提供的参考区间内。结论深圳新产业MAGLUMI 4000 Plus化学发光免疫分析检测系统检测C肽的基本分析性能与厂家声明或相关文献基本一致,可以替换深圳新产业MAGLUMI 4000,用于临床常规工作的开展。     

血清标志物联合超声指标诊断肝纤维化的临床研究

目的探讨血清肝纤维化标志物和超声结合对肝纤维化的诊断价值。方法检测100例慢性乙型肝炎或肝硬化患者8项超声指标和6项肝纤维化相关血清学指标,并与其病理检查结果进行相关分析。结果经过筛选,血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB) 透明质酸(HA) 肝实质回声(LPEC) 脾长径(SL)诊断S2以上纤维化的Se、Spe最高,为90.7%、85.4%。结论血清学和超声优势指标组合能提高诊断的灵敏度和特异度,优于单项或多项血清学和超声指标,是诊断肝纤维化较好的无创性方法。     

慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA水平与肝纤维化标志物的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者血清HBV复制水平和肝纤维化血清学标志物的关系。方法入选临床确诊为慢性乙型肝炎的157例患者，其中49例为早期肝硬化，采用荧光定量PCR检测血清HBVDNA水平，放射免疫法和酶免疫法检测肝纤维化血清标志物：透明质酸、层黏蛋白、Ⅲ型前胶原N端肽和Ⅳ型胶原，对血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物的关系进行研究分析，并对49例早期肝硬化患者和108例无肝硬化患者的血清HBVDNA及肝纤维化血清标志物水平进行比较。结果慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性（P〉0．05），早期肝硬化患者的血清肝纤维化标志物水平显著高于无肝硬化的患者，而HBVDNA水平却低于无肝硬化的患者（P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎患者的血清HBVDNA水平和肝纤维化标志物水平无显著相关性。     

血清和肝组织TGF-β1与慢性乙型肝炎肝纤维化的关系

目的 探讨血清和肝组织TGF-β1水平与慢性乙肝肝纤维化程度的关系,为肝纤维化诊断提供依据.方法 以肝活检病理诊断区分131例慢性HBV感染者纤维化程度(S0～S4),用ELISA法检测血清TGF-β1水平,免疫组化法检测肝组织TGF-β1表达并半定量.分析血清TGF-β1和肝组织TGF-β1表达与肝纤维化程度的关系.结果 血清和肝组织TGF-β1均与肝纤维化程度具有非常显著性正相关(r分别是0.74和0.89,P＜0.01).血清TGF-β1各组间比较差异有统计学意义(P＜0.01).组问分割比较,S0和S1分别与S4比较差异均有统计学意义(P＜0.005);各组与S0组比较差异均有统计学意义(P＜0.005);S1组和S3组之间比较有统计学意义(P＜0.005).肝组织TGF-β1表达在S3和S4组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05),其余组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).血清TGF-β1和肝组织TGF-β1表达具有非常显著性意义相关(r=0.61,P＜0.01).结论 血清TGF-β1和肝组织TGF-β1水平与慢乙肝肝纤维化程度相关,血清TGF-β1有希望成为临床判断轻度或重度肝纤维化的无创伤性诊断指标.     

化学发光免疫分析法在甲状腺疾病诊断中的应用

目的 探讨化学发光免疫分析法在甲状腺疾病诊断中的应用。方法 选取2017年5月~2018年5月我院接收的甲状腺疾病患者63例作为研究对象,按照疾病类型分为实验1组（甲状腺肿瘤患者）、实验2组（甲状腺功能亢进患者）、实验3组（其他甲状腺疾病患者）,每组21例;另选取同期来我院健康体检人员21名作为对照组。所有研究对象均实施化学发光免疫分析法、放射免疫法评估甲状腺球蛋白水平、假阴性、假阳性及符合率、敏感度、特异度。结果 实验1、2、3组甲状腺球蛋白水平高于对照组,四组放射免疫法检测的甲状腺球蛋白低于化学发光免疫法,差异有统计学意义（P＜0.05）。四组假阴性、假阳性、符合率、敏感度、特异度比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;化学发光免疫法检测结果优于放射免疫法,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 在甲状腺疾病临床检验中,化学发光免疫分析法比放射免疫法更具有优势,其操作简单,且对甲状腺疾病有极高的敏感度、特异度。     

大鼠肝纤维化过程中肝组织及血清中粗纤维调节素的动态变化研究

目的：观察粗纤维调节素（Un）在大鼠肝纤维化肝组织及血清中的动态变化，探讨其在正常和纤维化大鼠肝组织中的表达及其血清学检测的价值。方法：以CCl₄诱发大鼠肝纤维化模型，采用ABC免疫组化方法检测肝组织中Un分布，用ELISA方法检测血清中Un的含量。结果：随着CCl₄造模时间的延长，Un在肝组织中沉积增加，主要在汇管区、中央静脉壁及纤维间隔内分布。血清Un含量也随肝纤维化的加重而升高。结论：Un是肝组织中一种重要的细胞外基质成分，在肝纤维化过程中表达增加；血清Un可以作为反映肝纤维化的一种血清学指标。