丙氨瑞林对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的作用及其对PTEN基因表达的影响

目的观察丙氨瑞林对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用及机制。方法体外培养人子宫内膜癌Hec-1—B细胞。将Hec-1-B细胞接种于左下肢近腹股沟处皮下,建立子宫内膜癌动物模型。将24只荷瘤裸鼠随机分为4组,即低剂量组（13μg／kg）,中剂量组（26μg／kg）,高剂量组（52ug／kg）和空白对照组（0μg／kg）,每组6只,造模3d后开始用丙氨瑞林干预,给药途径为皮下干预,每天1次,持续4周。治疗期间定期测量肿瘤大小,观察裸鼠全身状况,实验结束时,将移植瘤完整取出,称取瘤重,测量肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线、计算抑瘤率,并用反转录一聚合酶链反应（RT—PCR）法检测PtenmRNA的表达。结果①当丙氨瑞林浓度为10μg／kg时,癌细胞即受到抑制,抑瘤率为32.4840％;随着丙氨瑞林浓度的增大,抑制率渐高。到浓度为52ug／kg时抑瘤率上升至35．4494％,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。②浓度从13～52μg／kg的丙氨瑞林作用4N后,Pten的表达有不同程度的上升,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈005）。结论丙氨瑞林对裸鼠移植瘤生长可能有直接的抑制作用,且呈剂量依赖关系。丙氨瑞林抑制作用的分子机制可能与上调Pten蛋白表达有关。     

丙氨瑞林对子宫内膜癌裸鼠移植瘤的作用及机制

目的探讨促性腺激素释放激素（GnRH）类似物丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制及对P16基因表达的影响。方法体外培养人子宫内膜癌Hec-1B细胞,建立子宫内膜癌动物模型。造模成功后分别用不同剂量的丙氨瑞林进行干预,干预过程中严密观察肿瘤生长及裸鼠情况,测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线。6周后处死裸鼠,完整取出移植瘤组织并称取瘤重,计算抑瘤率,免疫组化法（PV）检测瘤组织中P16基因的表达。结果当丙氨瑞林浓度为15μg/kg时,癌细胞即受到抑制,抑瘤率为20.79%;当其浓度为30μg/kg时,抑瘤率为34.34%;浓度为60μg/kg时,抑瘤率为39.23%。与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。不同浓度的丙氨瑞林干预6周后,瘤组织中P16的表达有不同程度的上升,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论丙氨瑞林可抑制裸鼠移植瘤生长,且呈剂量依赖关系,其抑制作用的分子机制可能与P16基因的表达有关。     

醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用及对hTERT表达的影响

目的探讨子宫内膜癌的发生与端粒酶逆转录酶(hTERT)的关系,研究醋酸丙氨瑞林抑制子宫内膜癌可能的作用机制。方法建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤动物模型,予醋酸丙氨瑞林干预,对移植瘤行HE染色,用免疫组织化学法检测移植瘤组织中hTERT的表达情况。结果实验结束后,不同剂量的药物使肿瘤体积较对照组明显缩小,抑瘤率较对照组明显提高,差异有统计学意义。结论醋酸丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤细胞的生长有抑制作用,其抑瘤作用可能和下调hTERT有关。     

丙氨瑞林联合5-Fu对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及其作用机制

目的 探讨促性腺激素释放激素(GnRH)类似物醋酸丙氨瑞林(alarelin)联合5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤的生长和survivin mRNA表达的影响. 方法 建立人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤模型,模型建立后20只实验裸鼠随机分为四组:对照组、丙氨瑞林组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组、丙氨瑞林和5-Fu联合组.测量肿瘤体积,计算抑瘤率,4周后处死裸鼠,切取移植瘤组织称取瘤重,RT-PCR法检测各组肿瘤组织中survivin mRNA的表达. 结果 丙氨瑞林与5-Fu联合用药组抑瘤效果最好,丙氨瑞林组、5-Fu组和联合组抑瘤率依次为16.9%、32.0%、58.3%.RT-PCR法显示丙氨瑞林组、5-Fu组及联合用药组survivin mRNA的表达明显低于对照组,且丙氨瑞林组、5-Fu组及联合用药组两两之间比较表达差异也有统计学意义(P<0.05). 结论 丙氨瑞林可抑制人子宫内膜癌裸鼠移植瘤的生长、survivin mRNA的表达.丙氨瑞林与5-Fu联合应用提高了5-Fu的抗肿瘤效果,抑瘤作用可能是通过抑制survivin mRNA的表达来实现的.     

碳纳米管丙氨瑞林对人子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长及对Smurf2表达的影响

目的:观察碳纳米管丙氨瑞林对人子宫内膜癌裸鼠皮下移植瘤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的泛素化调节因子2(Smurf2)表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法:以人子宫内膜癌Hec-1-B细胞株皮下移植瘤组织作为研究对象,分别给予生理盐水、碳纳米管、丙氨瑞林、碳纳米管丙氨瑞林,四种不同的干预方式,每6天1次,共5次。在干预过程中观察肿瘤生长情况,测量肿瘤体积,干预结束利用免疫组化法(PV)检测各肿瘤组织中Smurf2蛋白的表达。结果:碳纳米管丙氨瑞林组裸鼠精神饮食情况明显优于其他三组,体重明显轻于其他三组。取出移植瘤体后比较,碳纳米管丙氨瑞林组瘤体体积最小,与其他三组比较差异均有统计学意义(P0.05)。碳纳米管丙氨瑞林干预组瘤组织中Smurf2蛋白的表达较其他三组表达增多,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:丙氨瑞林可以抑制子宫内膜癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长,在相同药物剂量条件下,碳纳米管丙氨瑞林作为缓释剂可以更好地增加裸鼠体重和抑制移植瘤组织的生长,有利于减少药物毒副作用,其作用机制可能是通过上调移植瘤组织中Smurf2蛋白来抑制肿瘤生长的。     

丙氨瑞林联合顺铂对子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的 探讨丙氨瑞林(alarelin)联合顺铂(cisplatin)对人子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长的影响及作用机制.方法 建立裸鼠移植瘤模型,将32只荷瘤裸鼠随机分为4组:对照组、丙氨瑞林组、顺铂组、丙氨瑞林+顺铂组.每日观察各组裸鼠移植瘤的生长情况,绘制肿瘤生长曲线、计算肿瘤体积、抑瘤率,并用免疫组化法检测移植瘤中Caspase-3的表达.结果 各药物干预组抑瘤率分别为丙氨瑞林组22.14%,顺铂组32.12%,联合用药组63.32%,联合用药组的抑瘤率明显高于顺铂组和丙氨瑞林组(P<0.05).②各药物干预组Caspase-3的表达高于对照组,且各干预组间差异有统计学意义(P<0.001).结论 丙氨瑞林、顺铂均可抑制裸鼠移植瘤的生长,二者联合应用有协同作用,其作用机制可能与上调Caspase-3蛋白表达有关.     

雷公藤甲素对人子宫内膜癌抑制作用的裸鼠体内研究

目的:探讨雷公藤甲素(triptolide)对人子宫内膜癌细胞株HEC-1B裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及其作用机制.方法:将人子宫内膜癌细胞株HEC-1B细胞接种于裸鼠皮下,建立HEC-1B皮下移植瘤模型,然后随机分为雷公藤甲素高中低剂量组8、4、2μg/(只·天)和顺铂40μg/(只·天)及生理盐水对照组共5组,治疗10～15天,观察治疗前后裸鼠体重及移植瘤体积的变化.SABC免疫组织化学染色法检测移植瘤组织中Bcl-2及内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达.结果:高剂量雷公藤甲素组和顺铂用药组抑制肿瘤作用强,抑瘤率都为50%:高剂量雷公藤甲素组中的Bcl-2及VEGF的表达明显低于生理盐水对照组(P<0.05).结论:雷公藤甲素对裸鼠皮下移植瘤有明显的生长抑制作用,其机制可能与其诱导肿瘤细胞凋亡及抑制肿瘤血管形成有关.     

三氧化二砷对人乳腺癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的探讨三氧化二砷对人雌激素受体阴性乳腺癌细胞系MDA—MB-435s在裸鼠体内生长的影响及其作用机制。方法建立乳腺癌细胞系MDA—MB-435s的裸鼠体内移植瘤模型,将24只荷瘤裸鼠随机分成4组,即生理盐水（Ns）组、顺铂（DDP）组、低剂量三氧化二砷组（1．5mg／kg）、高剂量三氧化二砷组（3．0mg／kg）。比较各组的抑瘤作用及应用免疫组化技术分别检测PCNA、Caspase-3在各组之间表达情况。结果用药后不同剂量三氧化二砷组和顺铂组均能显著抑制人乳腺癌移植瘤在裸鼠体内的生长,移植瘤的大小和重量显著低于生理盐水组（P〈0．05）。免疫组化结果表明：生理盐水组移植瘤组织中PCNA蛋白大量表达,Caspase-3蛋白少量表达。经不同剂量三氧化二砷或顺铂处理后PCNA蛋白的表达下降,而Caspase3蛋白的表达上调,与生理盐水比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷可以通过抑制PCNA的增殖及增加Caspase-3的凋亡作用来抑制肿瘤生长,且呈剂量依赖性。     

醋酸曲谱瑞林对人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B的作用及对PCNA表达的影响

目的研究醋酸曲谱瑞林对人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B的作用及其分子作用机制。方法以不同浓度醋酸曲谱瑞林（0，10^-9，10^-8，10^-7，10^-6，10^-5mol／L）体外作用于中分化人子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B（0mol/L组作为对照组，其余各组作为实验组），用MTT法检测细胞抑制率；免疫细胞化学检测HEC-1-B细胞PCNA蛋白表达，并用病理图像分析软件进行半定量分析。RT—PCR法检测HEC-1-B细胞PCNAmRNA的表达。结果①当醋酸曲谱瑞林浓度为10^-9mol／g时，HEC-1-B细胞即受到抑制，抑制率为36．8％；随着浓度的增大，抑制率渐高，到浓度为10^-5mol／g时抑制率上升至57．4％。与对照组比较，实验组抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）。②浓度从10^-9 - 10^-5mol／L的醋酸曲谱瑞林作用72h后，PC—NA蛋白和PCNAmRNA表达均有不同程度的下降，与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。结论醋酸曲谱瑞林在体外对HEC-1-B细胞可能有直接的抑制作用，且呈剂量依赖关系。醋酸曲谱瑞林抑制HEC-1-B细胞增殖的分子机制可能与下调PCNA蛋白表达有关。     

三氧化二砷对裸鼠人乳腺癌移植瘤的作用及机制

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对乳腺癌移植瘤的作用及其机制。方法建立BALB／C—nu／nu裸鼠ER阴性MDA—MB-435s人乳腺癌移植瘤模型,分别以不同浓度的As2O3、顺铂和生理盐水（NS）腹腔内注射,观察移植瘤的瘤重及抑瘤率。并用免疫组化检测乳腺癌石蜡标本中PTEN和Caspase-7的表达。结果As2O3高剂量组、As2O3低剂量组、顺铂组均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为48．68％、32．80％、66．67％。用药后移植瘤组织中PTEN和Caspase-7蛋白阳性细胞数显著增多（P〈0．05）。结论As2O3能明显抑制乳腺癌移植瘤的生长,其作用机制可能是通过上调PTEN和Caspase-7的表达,促进细胞的凋亡来抑制人乳腺癌细胞的生长。     

姜黄素对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制

目的:探究姜黄素对人肝癌SMMC-7721细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其潜在机制。方法:采用人肝癌SMMC-7721细胞建立肝癌移植瘤模型,将20只荷瘤裸鼠均分为对照组和10、50、100 mg/kg姜黄素组,每组5只,均采用腹腔注射给药,分别给予生理盐水及对应剂量姜黄素,每日1次,每次200μL,连续16 d。自给药当天起,隔天观察和记录各组裸鼠体重和瘤体体积;16 d后麻醉裸鼠,分离瘤组织,记录瘤重并计算抑瘤率;采用蛋白免疫印迹法测定瘤组织中内质网应激通路相关蛋白及凋亡相关蛋白的表达水平;采用免疫组织化学法检测瘤体组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和需肌醇酶(IRE1)阳性表达水平。结果:不同剂量姜黄素组裸鼠体重增长无显著差异(P>0.05),但50和100 mg/kg姜黄素组裸鼠移植瘤体积生长较对照组和10 mg/kg姜黄素组明显减小(P均<0.05)。10、50和100 mg/kg姜黄素组抑瘤率分别为35.3%、45.7%、54.7%。蛋白印迹结果显示,与对照组相比,50、100 mg/kg姜黄素组GRP78、IRE1、C/EBP同源蛋白(CHOP)以及Cle...     

Tibolone对去势裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤生长及转移的影响

目的研究Tibolone对去势裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤生长及转移的影响,探讨Tibolone治疗子宫内膜癌的安全性．方法建立去势裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤模型,比较Tibolone灌胃组和对照组给药前后肿瘤体积变化和转移状况．结果Tibolone灌胃组和安慰剂组裸鼠子宫内膜癌皮下移植瘤体积增加值相同（1．976±1．350）mm^3和（2．217±1．071）mm^3,P=0．879;Tibolone灌胃组（35d）后,没有引起肿瘤转移．结论Tibolone不刺激裸鼠人子宫内膜癌皮下移植瘤生长及转移     

人参皂甙Rg3对荷宫颈癌裸鼠血管生成的抑制作用

目的:探讨人参皂甙Rg3(简称Rg3)对人宫颈癌裸鼠模型中肿瘤的生长及其血管生成的影响。方法:人宫颈癌HeLa细胞株接种于14只雌性裸鼠,随机均分为2组:①对照组:0.5 m l生理盐水灌胃;②人参皂甙Rg3组:0.5 m l浓度为5 mg/kg人参皂甙Rg3灌胃;用药5周,动态监测肿瘤的重量和体积。肿瘤组织免疫组化染色,计数瘤内微血管密度(MVD)。结果:Rg3组裸鼠生存质量好,毒副反应未增加,抑瘤效果持久而稳定,肿瘤生长缓慢;肿瘤组织CD31表达明显下降,MVD明显低于对照组(P<0.01)。结论:Rg3能抑制宫颈癌细胞生长,降低肿瘤MVD,抑制宫颈癌肿瘤血管生成。     

三氧化二砷对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的作用机制

目的:探讨不同剂量As203对人胃癌细胞株SGC-7901裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及作用机制.方法:建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为实验组即As203低(1.0 mg/kg)中(2.5 mg/kg)高(5.0 mg/kg)剂量组、空白对照生理盐水组及阳性对照5-FU组(20 mg/kg),腹腔连续给药10 d,计算抑瘤率,检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规,观察用药前后裸鼠体重改变,实时定量RT-PCR检测移植瘤内caspase-3基因相对表达量.结果:低剂量As203组及5-FU组抑瘤率分别为60.6%和78.2%,与生理盐水组比较有统计学差异(P＜0.05),中高剂量组及5-FU组差异无统计学意义(P＞0.05).用药后低剂量As203组caspase-3的基因表达显著增高,与生理盐水组比较有统计学意义(P＜0.05),中高剂量组在数值上caspase-3表达增高,但无统计学差异(P＞0.05).各剂量组均出现白细胞抑制,但较5-FU组轻,肝肾功能未见异常.结论:低剂量As203表现出抑制肿瘤生长的作用,其机制可能与上调caspase-3基因的表达有关;As203对肝肾无明显毒性.     

Survivin shRNA-APC 双基因对结肠癌细胞中 P21 和FHIT 表达的影响

目的 探究Survivin shRNA-APC 双基因共表达稳转株对HT-29 结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织 细胞中P21 和FHIT 表达的影响。方法 选取35 只雌性裸鼠分为双基因组、Survivin shRNA 组、APC 组、空 载组及阴性对照组，每组7 只。培养构建成功的Survivin shRNA-APC 双基因共表达稳转株、Survivin shRNA 稳 转株、APC 稳转株、空载稳转株及HT-29 结肠癌细胞，在每只裸鼠右腋下接种相应的细胞悬液复制移植瘤模型。 测量每组瘤重、计算瘤重抑制率；采用免疫组织化学法测定P21 和FHIT 蛋白的表达。结果 所有裸鼠腋下产 生肿瘤。APC 组、Survivin shRNA 组、双基因组P21、FHIT 蛋白表达量较阴性对照组、空载组升高（P <0.05）， 双基因组的蛋白表达量较APC 组、Survivin shRNA 组升高（P <0.05）。APC 组、Survivin shRNA 组、双基因 组的平均瘤重较阴性对照组和空载组降低（P <0.05）。双基因组平均瘤重较APC 组、Survivin shRNA 组降低 （P <0.05）。APC 组、Survivin shRNA 组、双基因组的瘤重抑制率较空载组升高（P <0.05）。双基因组瘤重抑制 率较APC 组、Survivin shRNA 组升高（P <0.05）。结论 Survivin shRNA-APC 双基因共表达稳转株可能通过上 调P21 和FHIT 蛋白的表达来调节细胞周期，抑制细胞增殖，进而抑制肿瘤生长。其抑制细胞增殖效果比Survivin shRNA、APC 单基因稳转株更显著。     

乳胞素对胶质瘤C6细胞体内增殖的抑制作用

目的：在体外实验蛋白酶体抑制剂乳胞素(LAC)可以抑制神经胶质瘤C6细胞增殖的基础上,进一步在裸鼠体内观察乳胞素对C6细胞增殖率的影响,探讨乳胞素抑制胶质瘤细胞增殖率的可能机制。方法：体外培养C6细胞,选择处于对数生长期的细胞接种于裸鼠背部皮下,连续7d腹腔注射给予乳胞素,实验分为模型组(Model)、乳胞素0.5 μ...     

血管生成抑制剂NM-3抑制胃癌生长机制研究

目的:研究血管生成抑制剂NM-3对胃癌生长的影响,探讨其抑制胃癌生长可能存在的分子机制。方法:建立人胃癌裸鼠皮下种植模型。将40只荷瘤裸鼠随机分成4组,种植后第2 d开始分别腹腔内注入生理盐水(2 ml/kg,对照组)、NM-3(剂量分别为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg,治疗组),每周2次,共6周。第7周处死动物,测量皮下肿瘤体积、计算抑瘤率;取瘤组织行免疫组化染色测定微血管密度(MVD)、胃癌细胞凋亡指数(AI)。结果:NM-3剂量为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg的皮下肿瘤体积分别为(915.46±39.66)mm3(、871.26±38.84)mm3(、812.27±32.59)mm3,明显低于生理盐水对照组(1 609.55±41.32)mm3(P<0.05),抑瘤率为43.20%、45.87%、49.53%;和生理盐水组比较,NM-3治疗后肿瘤的微血管密度明显减少,胃癌细胞的凋亡指数显著增加(P均<0.05),且与治疗剂量有关。结论:NM-3可通过抑制肿瘤微血管生成,诱导胃癌细胞凋亡,抑制体内人胃癌生长。     

肺金生方抗非小细胞肺癌EGFR-TKIs耐药性的分子机制研究

目的探讨肺金生方抗非小细胞肺癌(NSCLC)酪氨酸磷酸酶抑制剂(TKIs)靶向药物耐药的作用及分子机制。方法选用NSCLC细胞系HCC827,按0.01、0.05、0.10、0.50和1.0μM浓度梯度诱导构建吉非替尼耐药细胞株,采用CCK8法检测耐药株是否构建成功,采用荧光定量PCR(q-PCR)检测耐药株c-MET扩增水平。20只BALB/c裸鼠按随机数字表法分成空白对照组、吉非替尼组、肺金生方组和肺金生方+吉非替尼组,每组5只。按每只4×10~7/200μL将吉非替尼耐药细胞株注射于裸鼠后肢皮下,构建皮下移植瘤模型。四组均腹腔注射生理盐水,吉非替尼组给予吉非替尼50mg/kg灌胃;肺金生方组给予肺金生方剂量53.6g/kg灌胃;肺金生方+吉非替尼组给予吉非替尼50mg/kg+肺金生方剂量53.6g/kg联合灌胃给药。给药频次每2天1次,连续给药4周。CCK8法检测耐药HCC827 GR细胞增殖率,流式细胞技术检测耐药HCC827 GR细胞凋亡率,Western blot检测耐药HCC827 GR细胞p-EGFR、p-MET、p-AKT、p-ERK1/2表达水平。结果与空白对照组比较,吉非替尼组裸鼠皮下移植瘤瘤重无差异[(1.34±0.16)g比(1.41±0.13)g,P>0.05],肺金生方组裸鼠皮下移植瘤瘤重明显减轻[(0.77±0.28)g比(1.41±0.13)g,P<0.01],吉非替尼+肺金生方组裸鼠皮下移植瘤明显小于肺金生方组和吉非替尼组[(0.34±0.16)g比(0.77±0.28)g、(1.34±0.16)g,P均<0.01];肺金生方单用或与吉非替尼联用能够明显抑制耐药HCC827 GR细胞的增殖能力[(43.45±4.47)%、(24.25±5.21)%比(100.00±2.14)%,P均<0.01];肺金生方组、吉非替尼+肺金生方组细胞凋亡率显著高于空白对照组[(7.40±0.56)%、(12.80±0.72)%比(3.05±0.54)%,P均<0.01];肺金生方组、吉非替尼+肺金生方组c-MET和p-c-MET表达水平明显降低,并明显抑制下游AKT/ERK1/2磷酸化水平。结论肺金生方或和吉非替尼联用能有效抑制吉非替尼耐药皮下移植瘤的生长,抑制耐药细胞的增殖并促进凋亡,其作用机制可能与下调c-MET蛋白表达以及下游AKT/ERK1/2磷酸化水平有关。