胎盘细胞嗜酸性粒细胞趋化因子和T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子S表达与自然流产的相关性

目的 探讨嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)、T淋巴细胞激活上调性表达分泌因子(RANTES)在正常妊娠免疫耐受及反复性自然流产中的作用.方法 构建正常妊娠小鼠模型CBA/J×BALB/c(正常妊娠组)和反复性自然流产小鼠模型CBA/J×DBA/2J(自然流产组);采用免疫组织化学方法检测胎盘细胞趋化因子Eotaxin、RANTES的表达;采用酶联免疫吸附试验(ELlSA)检测胎盘细胞培养上清液的白细胞介素(IL)-4,干扰素(IFN)-γ水平,分析胎盘细胞趋化因子Eotaxin、RANTES与细胞因子IL-4、IFN-γ水平的相关性.结果 自然流产组的胚胎丢失率为18.3%,显著高于正常妊娠组的3.6%(P<0.05).正常妊娠组的胎盘细胞Eotaxin的表达阳性率为53.6%.显著高于自然流产组的40.8%(P(0.05);而正常妊娠组的胎盘细胞RANTES的表达阳性率为44.3%,显著低于自然流产组的62.3%(P<0.05).正常妊娠组的IL-4水平为(1.33±0.43)ng/L,显著高于自然流产组的(0.78±0.41)ng/L(P=0.002);正常妊娠组的IFN-γ水平为(1.24±0.57)ng/L,显著低于自然流产组的(1.67±0.44)ng/L(P=0.038).自然流产组中,胎盘细胞Eotaxin的表达与IL-4水平呈正相关(r=0.752,P=0.003),RANTES的表达与]FN-γ水平亦呈正相关(r=0.658,P=0.014);正常妊娠组中,RANTES的表达与IFN-γ水平呈正相关(r=0.649,P=0.012),IL-4水平随Eotaxin表达阳性率的上升而显示出增加趋势.结论 Eotaxin、RANTES在妊娠免疫耐受形成和自然流产的发病机制中可能发挥重要作用.     

IL-17、RANTES及其受体在早期自然流产蜕膜组织中的表达及意义

目的检测IL-17、T细胞激活上调性表达分泌因子s（RANTES）及其受体CCR5在正常早孕及早期自然流产患者蜕膜组织中的表达,并探讨其意义。方法30例早期自然流产患者（流产组）和30例正常早孕妇女（对照组）的蜕膜组织,分别应用RT—PCR、ELISA方法检测蜕膜组织中IL-17、RANTES及CCR5的表达并进行线性相关分析,同时应用免疫组织化学方法染色定位其蛋白的表达。结果①早孕蜕膜组织中均有IL—17mRNA、RANTESmRNA、CCR5mRNA的表达,流产组蜕膜组织中IL-17mRNA、RANTESmRNA、CCR5mRNA的表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。②ELISA法定量检测结果与PT—PCR结果趋势一致。③IL-17与RANTES的表达呈正相关。④IL-17定位于蜕膜细胞胞质,RANTES定位于蜕膜细胞胞质及胞膜,CCR5定位于蜕膜细胞胞核。结论早期自然流产患者蜕膜组织中IL-17、RANTES及其受体CCR5的表达水平较正常早孕者高,这种改变可能是导致早期自然流产的重要原因。     

嗜酸性粒细胞趋化因子的表达及影响因素

支气管哮喘是一种以气道嗜酸性粒细胞(Eosinophil,Eos)聚集和气道高反应性为特征的慢性气道炎症,气道Eos性炎症是气道高反应性的基础,Eos是哮喘支气管粘膜的慢性非特异性炎症的关键效应细胞。嗜酸性粒细胞趋化因子(Eo-taxin,Eot)在选择性地诱导Eos在气道粘膜的粘附、募集和脱颗     

哮喘大鼠模型肺组织中嗜酸粒细胞趋化因子及肺组织和骨髓组织中嗜酸粒细胞趋化因子受体的表达

目的:探讨嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)及其受体(CCR3)在支气管哮喘发病机制中的作用.方法:健康雄性SD大鼠24只,随机分为哮喘组和对照组,每组12只.哮喘组采用卵蛋白(OVA)激发哮喘,对照组用生理盐水代替OVA.于末次激发后4～6 h断尾取血,涂片.麻醉动物,制备肺组织标本与骨髓细胞涂片.计数外周血、骨髓细胞涂片及肺组织嗜酸粒细胞(Eos)百分率;免疫组化技术观察肺组织中Eotaxin蛋白表达及肺组织和骨髓组织中CCR3蛋白表达;原位杂交方法观察肺组织中Eotaxin mRNA的表达.结果:与对照组相比,哮喘组大鼠外周血、骨髓、肺组织Eos百分率明显升高(P＜0.01);肺组织中Eotaxin蛋白和mRNA表达明显升高(P＜0.01),且和肺组织中Eos百分率呈正相关(P＜0.05);肺组织及骨髓中CCR3蛋白表达均明显增加(P＜0.01).结论:Eotaxin及其受体CCR3参与了哮喘的发病机制;在Eos从骨髓迁徙到外周血再募集到肺组织这一过程中,Eotaxin与CCR3起重要作用.     

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的 探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系.方法 用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达.结果 自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05).自然流产模型组脾脏CD4+ T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01).高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05).自然流产模型组胸腺CD4+ T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05).但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用.     

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠（CBA／J&#215;DBA／2，n=14）、正常妊娠模型组小鼠（CBA／J&#215;BALB／c，n=13）和正常非孕组小鼠（CBA／J，n=11）外周血、脾脏以及胸腺中CD4^＋T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4^＋T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组（P〈0．01），CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组（P〈0．05，P〈0．01）；但三个指标与正常非孕组相比，差异均无统计学意义（P〉0．05）。自然流产模型组脾脏CD4^＋T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组（P〈0．01），高于正常非孕组（P〈0．05）；而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组（P〈0．05），但与正常非孕组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。自然流产模型组胸腺CD4^＋T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组（P〈0．05），高于正常非孕组（P〈0．01）；而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组（P〈0．05），但与正常非孕组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）；CCR5与其他两组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CD4^＋T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。     

白细胞介素-4对支气管上皮细胞表达嗜酸性粒细胞趋化因子-3的影响

目的:研究嗜酸性粒细胞趋化因子-3(eotaxin-3)在支气管上皮细胞的表达以及Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)对其表达的调节,探讨支气管上皮细胞和IL-4在气道变态反应性炎症中的作用.方法:以BEAS-2B细胞和NHBE细胞为研究对象,用IL-4刺激细胞24 h,RT-PCR法检测eotaxin-3在mRNA水平的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中eotaxin-3蛋白的表达.结果:未经处理的支气管上皮细胞不表达eotaxin-3,用IL-4刺激细胞24 h后,可见mRNA和蛋白水平的eotaxin-3的明显表达,IL-4的这种诱导作用呈浓度依赖性增强.结论:支气管上皮细胞不仅是一种屏障细胞,也是一种效应细胞,在炎症介质IL-4的刺激下能表达eotaxin-3,可能是其参与支气管哮喘嗜酸性粒细胞炎症的机制之一.     

嗜酸性粒细胞趋化因子eotaxin及其受体CCR3与呼吸道变应性炎症

变应性鼻炎（allergic rhinotis-AR）是耳鼻咽喉-头颈外科的常见病之一,虽非重症疾病,却改变了患者的社会生活,严重影响了其生活质量,加重了经济负担,其发病率高,且流行性不断增长,同时也是影响另一种主要呼吸道变应性疾病支气管管哮喘（BA）的重要因素,已成为21世纪严重的全球性健康问题.AR发病机制的研究日益得到重视,随着对呼吸道变应性炎症认识的加深,明确了其主要的病理改变是慢性炎症反应,嗜酸性粒细胞（eosinophil,EOS）及肥大细胞等炎性细胞浸润,特别是EOS的浸润程度与病情呈正相关.呼吸道内EOS聚集机制相当复杂,主要包括骨髓中EOS从祖细胞分化成熟,继而向外周循环释放迁移,通过滚动、粘附、渗出及与内皮细胞相互作用,选择性在气道局部组织中大量聚集并被激活,发挥生物学效应.在此过程中有许多细胞因子参与了对EOS的调控,其中趋化因子选择性趋化嗜酸性粒细胞是主要的环节,也是近几年的研究热点.本文对嗜酸性粒细胞趋化因子eotaxin及其受体CCR3（CC chemokine receptor 3）的基本概况及其在呼吸道变应性炎症研究中的意义综述如下.     

曲安奈德对鼻息肉中T细胞激活分泌调节因子及嗜酸性粒细胞的影响

目的 观察鼻息肉组织中T细胞激活分泌调节因子及嗜酸性粒细胞表达的变化,探讨糖皮质激素治疗鼻息肉的可能机制.方法 对60例鼻息肉患者分别采用曲安奈德1 mg鼻腔雾化治疗,并以30例生理盐水治疗作为对照,通过免疫组化方法测定鼻息肉治疗前后的T细胞激活分泌调节因子表达及嗜酸性粒细胞数量的变化.结果 经曲安奈德治疗后鼻息肉中T细胞激活分泌调节因子的表达较治疗前显著降低(P<0.05),且嗜酸性粒细胞也随之下降,二者有相关性;而对照组治疗前后差异无统计学意义(P>0.05).结论 T细胞激活分泌调节因子是诱导嗜酸性粒细胞在鼻息肉中浸润的重要趋化因子,曲安奈德可能通过下调T细胞激活分泌调节因子的表达,发挥抗EOS炎症的作用.     

孕激素对子宫内膜异位症患者在位内膜T淋巴细胞分泌的受激活调节因子表达的影响

目的探讨正常T淋巴细胞表达和分泌的受激活调节因子（RANTES）与子宫内膜异位症（EM）发病的关系以及孕激素治疗的可行性。方法采集子宫内膜异位症患者术前以及放置左炔诺孕酮宫内节育系统（LNG-IUS）、口服甲羟孕酮（MPA）或注射促性腺激素释放激素类似物（GnRHa）后以及对照组的在位内膜,以半定量RT-PCR方法检测内膜组织中RANTES mRNA的表达。以100U/ml肿瘤坏死因子-α（TNFα）和不同浓度的孕酮（Po）与内膜细胞共孵育24h,观察Po对TNFα刺激RANTES分泌效应的影响。以不同浓度Po预处理细胞48h后,加入TNFα（100U/ml,16h）,观察Po对TNFα刺激细胞分泌RANTES的抑制作用。采用ELISA方法检测细胞培养上清中RANTES的分泌量。结果药物干预前,EM组RANTES mRNA的相对表达量显著高于对照组（28.0±9.0vs.22.0±5.6,P〈0.05）。放置LNG-IUS（24.0±4.2vs.25.9±4.2,P〉0.05）或注射GnRHa（23.0±12.9vs.26.9±5.2,P〉0.05）后,子宫内膜RANTES mRNA的表达差异无显著性;MPA组RANTES mRNA表达较用药前显著升高（42.6±3.1vs.24.3±5.7,P〈0.05）。单纯Po刺激,培养子宫内膜细胞RANTES的分泌量无明显变化;同时以Po和TNFα刺激细胞,RANTES的分泌显著增加;Po预处理48h后,RANTES的分泌对TNFα的反应性显著减弱。结论EM患者在位内膜本身具有高趋化活性,孕激素防治EM有一定可行性。     

Role of RANTES and its receptor in gastric cancer metastasis

This study examined the role of regulated upon activation normal T cell expressed and secreted(RANTES) and its receptor C-C chemokine receptor type 5(CCR5) in gastric cancer metastasis and the associated mechanism.The expression of RANTES and CCR5 was detected by using immunohistochemical staining and Western blotting in the gastric cancer tissues obtained from 60 gastric cancer patients with or without lymph node metastasis(n=30 in each).The results showed that the expression levels of RANTES and CCR5 were higher in gastric cancer with lymph node metastasis than in that without metastasis(P<0.05).The expression levels of RANTES in 30 lymph nodes with cancerous invasion were higher than in 30 normal lymph nodes(P<0.05).Chemotactic test revealed that the number of migrating gastric cancer cells(n=295.0±54.6) induced by the protein of cancer-invading lymph nodes was greater than that by the protein mixture from cancer-invading lymph nodes and RANTES antibody(n=42.5±11.6)(P<0.05).RT-PCR showed that the expression levels of the main Th1 cytokines(IL-2,γ-IFN) were lower in gastric cancer with lymph node metastasis(2.22±0.90,3.26±1.15 respectively) than in that without metastasis(3.07±1.67,4.77±1.52 respectively)(P<0.05),but the expression level of the main Th 2 cytokine(IL-10) was higher in gastric cancer with lymph nodes metastasis(6.06±2.04) than in that without metastasis(4.88±1.87)(P<0.05).It was concluded that RANTES and its receptor CCR5 may contribute to gastric cancer metastasis through influencing the balance of Th1/Th2.RANTES and CCR5 may become a marker of gastric cancer metastasis.     

Relationship between expression of chemokine receptors CCR3, CCR5 and CXCR3 on CD4+ T cells and spontaneous abortion in mice

Background Previous studies have shown that local immune cells in the feto-maternal interface are recruited from peripheral blood, and that chemokines and their receptors play an initial and key role in this recruitment process. In this study, we aimed to determine whether spontaneous abortion is associated with the expression of chemokine receptors CCR3, CCR5, and CXCR3 on CD4^＋ T cells.
Methods Peripheral blood, spleen, and thymus were collected from the spontaneous abortion mouse model CBA/JxDBA/2 （SA group, n=14）, the normal pregnant mouse model CBA/JxBALB/c （NP group, n=13）, and normal non-pregnant CBA/J mice （NNP group, n=11）. The number of chemokine receptors CCR3, CCR5, and CXCR3 expressed on CD4^＋ T cells was measured by double-label flow cytometry （FCM） method.
Results In peripheral blood, the SA group had significantly lower CCR3 expression （P 〈0.01） and higher CCR5 and CXCR3 expression （P 〈0.01） on CD4^＋ T cells than did the NP group. But comparing these chemokines between the SA and NNP groups, there was no significant difference （P 〉0.05）. In spleen, the SA group expressed significantly lower CCR3 expression （P 〈0.01） and higher CCR5 and CXCR3 expression （P 〈0.05） on CD4^＋ T cells than did the NP group. When compared with the NNP group, the SA group had significantly higher CCR3 expression （P 〈0.01）, but was not statistically different with regards to the other two chemokines （P 〉0.05）. In thymus, the SA group had significantly lower CCR3 expression （P 〈0.05） and higher CXCR3 expression （P 〈0.05） on CD4^＋ T cells than the NP group, with no significant difference in CCR5 expression （P 〉0.05）. Compared with the NNP group, the SA group had higher CCR3 expression （P 〈0.01）, but there was no statistical difference in CXCR3 and CCR5 expression （P 〉0.05） between the two groups.
Conclusion The abnormal expression of CCR3, CCR5 and CXCR3 on CD4^＋ T cells may play an important role in the pathogenesis of spontaneous abortion.     

Up-regulated expression of Tim-3/Gal-9 at maternal-fetal interface in pregnant woman with recurrent spontaneous abortion

The relationship between T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein 3（Tim-3）/Galectin（Gal）-9 pathway and recurrent spontaneous abortion（RSA） was studied. Thirty-one pregnant women with RSA and 27 normal early gravidas were investigated to detect the levels of Tim-3 and Gal-9 in villi and deciduas by Western blotting. Meanwhile, the concentration of interleukin（IL）-4 and IL-12 in peripheral blood plasma was determined by ELISA in 25 healthy fertile non-pregnant controls, the normal early gravidas and pregnant women with RSA mentioned above, respectively. It was found that the relative expression levels of Tim-3 and Gal-9 in villi and deciduas were significantly increased in pregnant women with RSA as compared with those in the normal early gravidas. The concentration of IL-4 in peripheral blood plasma of pregnant women with RSA was lower than that of the normal early gravidas（P〈0.05） and healthy fertile non-pregnant controls（P〈0.05）, but that of IL-2 in pregnant women with RSA was significantly higher than that of the normal early gravidas（P〈0.05） and healthy fertile non-pregnant controls（P〈0.05）. It was suggested that the overexpression of Tim-3/Gal-9 pathway may be related to the pathogenesis of RSA.     

AGEs-BSA 对人肾系膜细胞分泌RANTES的影响初探

目的探讨糖基化终产物(AGEs)对人肾系膜细胞(HRMC)分泌正常T细胞表达的调节活化蛋白(RANTES)的影响.方法常规制备糖基化终产物-牛血清白蛋白(AGEs-BSA),干预体外培养的HRMC,用ELISA法检测培养上清RANTES水平.结果AGEs-BSA(640mg*L-1) 干预HRMC后8h,培养液中RANTES水平开始逐步升高,于48h达峰值,对照组BSA则未见升高(P<0.01).结论AGEs呈时间依赖方式增加HRMC对RANTES的分泌.     

RANTES和Eotaxin-3基因单核苷酸多态性与儿童哮喘的关系

目的研究趋化因子激活调节正常T细胞表达和分泌因子（RANTES）基因c-28G（RANTES C-28G）、RANTES A-403G及嗜酸性粒细胞趋化蛋白（Eotaxin-3）基因C＋77T（Eotaxin-3C＋77T）的单核苷酸多态性（SNP）与汉族儿童哮喘的关系。方法采集192例3～12岁汉族哮喘患儿（哮喘组）的口腔颊黏膜拭子,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）方法对RANTES C-28G、RANTES A-403G和Eotaxin-3C＋77T的SNP位点进行检测,以与哮喘组患儿无血缘关系的192名健康志愿者（18～22岁）作为正常对照组。分析两组基因型及等位基因频率分布情况。结果两组间RANTES C-28G和RANTES A-403G两个SNP位点的基因型分布比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。两组间Eotaxin-3 C＋77T基因型分布比较,差异有统计学意义;哮喘组Eotaxin-3C＋77T T／T纯合子基因型频率为32．3％,明显高于正常对照组的12．5％（OR=3．44,P=0．000）。结论Eotaxin-3C＋77T可能是汉族儿童哮喘易感SNP位点,其中Eotaxin-3C＋77TT／T纯合子基因型与哮喘发病密切相关。     

RANTES和Eotaxin-3基因单核苷酸多态性与儿童哮喘的关系

目的 研究趋化因子激活调节正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)基因C-28G(RANTES C-28G)、RANTES A-403G及嗜酸性粒细胞趋化蛋白(Eotaxin-3)基因C+77T(Eotaxin-3 C+77T)的单核苷酸多态性(SNP)与汉族儿童哮喘的关系.方法 采集192例3-12岁汉族哮喘患儿(哮喘组)的口腔颊黏膜拭子,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对RANTES C-28G、RANTES A-403G和Eotaxin-3 C+77T的SNP位点进行检测,以与哮喘组患儿无血缘关系的192名健康志愿者(18～22岁)作为正常对照组.分析两组基因型及等位基因频率分布情况.结果 两组间RANTES C-28G和RANTES A-403G两个SNP位点的基因型分布比较,差异无统计学意义(P>0.05).两组间Eotaxin-3 C+77T基因型分布比较,差异有统计学意义;哮喘组Eotaxin-3 C+77T T/T纯合子基因型频率为32.3%,明显高于正常对照组的12.5%(OR=3.44,P=0.000).结论 Eotaxin-3 C+77T可能是汉族儿童哮喘易感SNP位点,其中Eotaxin-3 C+77T T/T纯合子基因型与哮喘发病密切相关.