黄芪注射液与白细胞介素2增强树突细胞抗肿瘤转移作用的比较研究

目的观察比较黄芪注射液与白细胞介素(IL)-2增强树突细胞(DCs)的抗肿瘤转移作用。方法制备C57BL／6小鼠骨髓来源的DCs,用Lewis肺癌特异性多肽Mutl预激DCs,并联合黄芪注射液或IL-2治疗转移性肺癌小鼠,通过流式细胞仪分析其脾细胞内T淋巴细胞亚群比例的变化,用Elisa法检测荷瘤小鼠血清IL-2、IL-4含量。结果肿瘤抗原多肽致敏的DCs与黄芪注射液或IL-2联合治疗后,肺癌结节减少,小鼠脾脏中T淋巴细胞亚群(CD4^+和CDs^+)升高,血清IL-2／IL-4比值也明显升高。在观察期间,经DCs联用IL-2和DCs联用黄芪注射液免疫小鼠成瘤率均低于单用DCs组。结论黄芪注射液和IL-2均能增强DCs的抗肿瘤转移作用,有效地促进荷瘤宿主的免疫应答,具有显著的体内抑制肺癌转移的效果。对正常动物免疫保护作用更加明显。     

黄芪注射液与白细胞介素2增强树突细胞抗肿瘤转移作用价值比较

目的：比较分析黄芪注射液与白细胞介素2增强树突细胞抗肿瘤转移作用的临床价值。方法：选取7周龄左右的雌性小鼠作为研究对象,制备小鼠骨髓来源的树突细胞,分为对照组、树突细胞疫苗（DC—Mutl）治疗组、黄芪注射液治疗组、白细胞介素治疗组各30只小鼠,分别采用黄芪注射液联合转移性Lewis肺癌特异性多肤Mutl预激树突细胞、白细胞介素2联合转移性Lewis肺癌特异性多肤Mutl预激树突细胞对转移性肺癌小鼠进行治疗,分析小鼠脾细胞内T淋巴细胞比例、白细胞介素2、白细胞介素4等指标的变化情况。结果：研究结果显示,治疗后小鼠的肺癌结节降低,小鼠白细胞介素2与白细胞介素4的比例明显升高（P〈0．05）,小鼠脾细胞内CD4^＋和CDS^＋T细胞含量明显增加（P〈0．05）。研究过程中发现,小鼠经白细胞介素2和树突细胞联合免疫的肿瘤发生率明显低于单用树突细胞免疫组和对照组（P〈0．05）。观察四组小鼠的存活情况发现,黄芪注射液治疗组生存期最长,到治疗后第50天的时候还有16只小鼠存活,而对照组中小鼠最长生存时间为35天,白细胞介素2治疗组白细胞介素2明显高于DC-Mutl治疗组（P〈0．05）,但低于黄芪注射液治疗组。结论：黄芪注射液与白细胞介素2均能显著增强树突细胞抗肿瘤转移作用,提高宿主的免疫力,对肺癌转移发挥良好的促进作用。     

黄芪扶正汤对Lewis肺癌荷瘤小鼠血清IL-2、IFN-γ表达的影响

目的探讨黄芪扶正汤对Lewis肺癌小鼠治疗作用的具体机制。方法建立肺癌荷瘤小鼠动物模型,以MTT法测脾脏T淋巴细胞增殖反应,ELISA法测血清IL-2和IFN-γ含量,评价黄芪扶正汤的抗肿瘤和免疫调节的作用,并初步分析其作用机制。结果黄芪扶正汤可以提高肺癌小鼠的脾脏指数,而对其T淋巴细胞增殖的能力基本影响不大。联合化疗处理组小鼠体内的IL-2、IFN-γ上升。结论黄芪扶正汤可以通过上调血清IL-2、IFN-γ的含量来提高其免疫功能,从而发挥可能的抗肿瘤作用。     

麦粒灸对Lewis荷瘤小鼠Th1/Th2型细胞因子的影响

目的:探讨麦粒灸对Lewis荷瘤小鼠血清Th 1型细胞因子白介素2(IL-2)/血清Th 2型细胞因子IL-10的影响,为麦粒灸在今后肿瘤治疗方案中的运用提供实验依据。方法:30只雄性C 57BL/6J小鼠随机分为麦粒灸组、荷瘤组、空白组,每组10只。采用Lewis肿瘤细胞悬液皮下接种复制Lewis荷瘤小鼠模型。麦粒灸组予麦粒灸治疗"后三里",治疗10次后,观察各组小鼠一般状况,采用MTT法检测刀豆蛋白刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖能力,以双抗体夹心ELISA法测定血清IL-2、IL-10的表达水平。结果:麦粒灸组荷瘤小鼠与荷瘤组小鼠瘤体体积与体质量差异无统计学意义(P0.05);与空白组比较,荷瘤组血清Th 1型细胞因子IL-2表达降低(P0.05),血清Th 2型细胞因子IL-10增加(P0.05);与荷瘤组比较,麦粒灸组荷瘤小鼠T淋巴细胞增殖能力增加(P0.05),血清Th 1型细胞因子IL-2表达增加(P0.05),血清Th 2型细胞因子IL-10表达降低(P0.05)。结论:麦粒灸可有效调节荷瘤小鼠的免疫功能,促进荷瘤小鼠Th 1型细胞因子的产生,有效纠正荷瘤导致Th 1/Th 2的失衡,增强机体的抗肿瘤免疫功能。     

紫龙金联合埃克替尼对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能及肿瘤血管生成的影响

目的：探讨紫龙金联合埃克替尼对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能及肿瘤血管生成的影响。方法：选用无特定病原体（SPF）级C57BL/6雄性小鼠50只,随机取10只用于制备Lewis瘤细胞悬液,余40只于其右前肢腋窝皮下分别接种0.2 mL的Lewis瘤细胞悬液,建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,并将其随机均分为模型组、紫龙金组、埃克替尼组、联合观察组,每组10只。对比各组肿瘤重量、肿瘤生长抑制率;用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测小鼠血管内皮生长因子、小鼠肿瘤组织白细胞介素2（IL-2）、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)水平;流式细胞术检测小鼠脾脏免疫细胞比例。结果：与紫龙金组及埃克替尼组比较,联合观察组小鼠的肿瘤重量和小鼠肿瘤生长抑制率高（均P<0.05）,血管内皮生长因子水平及微血管密度低（均P<0.05）,CD4+T、CD8+T及B淋巴细胞比例高（均P<0.05）,肿瘤组织的IL-2、TNF-α、IFN-γ水平低（均P<0.05）。结论：紫龙金和埃克替尼联合治疗具有协同作用,显著降低了Lewis肺癌荷瘤小鼠模型的肿瘤重量,抑制了血管生成,增强了免疫功能,减轻了炎症反应。     

安体康注射液对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：观察安体康注射液对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：建立荷瘤小鼠模型,分别给予安体康注射液治疗,检测T淋巴细胞转化功能,白介素-2（IL-2）的活性,自然杀伤细胞（NK）活性和巨噬细胞吞噬活性。结果：安体康注射液能促进荷瘤小鼠的T淋巴细胞的分化与繁殖,显著提高淋巴细胞诱生IL-2活性和NK细胞活性;对巨噬细胞的吞噬功能无显著影响。结论：安体康注射液可增强荷瘤小鼠的免疫功能。     

蝎毒多肽提取物促进环磷酰胺抑制Lewis肺癌的作用机制研究

目的探讨蝎毒多肽提取物增强环磷酰胺抗肿瘤的机制。方法建立小鼠Lewis肺癌皮下荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组(模型组)、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组、蝎毒多肽提取物(polypeptideextract from scorpion venom,PESV)组和联合组(CTX+PESV组),每组10只。记录肿瘤生长曲线,并采用逆转录PCR法和免疫组织化学法检测肿瘤微环境中免疫抑制因子血管内皮生长因子-A(VEGF-A)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达变化,采用免疫荧光化学法检测肿瘤组织中树突细胞(dendritic cells,DCs)表型CD80、CD86的表达变化。结果连续治疗21天后,联合组Lewis肺癌移植瘤的生长明显抑制(P<0.05);与模型组相比较,PESV组中CD80、CD86的表达有所增强,而CTX组中CD80、CD86的表达有所下降,联合组与CTX组相比强度和表达量均有所增加;与模型组比较PESV组和CTX组TGF-β1和VEGF-A mRNA表达量均降低(均P<0.05);与PESV组和CTX组比较,联合组TGF-β1和VEGF-A的mRNA表达量均降低(P<0.05)。结论 PESV可抑制Lewis肺癌中VEGF-A和TGF-β1的表达,促进DC的成熟,恢复其抗原摄取提呈功能,逆转CTX对机体的免疫损伤,从而起到诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

理气药对荷瘤小鼠免疫功能的影响

实验中发现理气药有一定的抑制小鼠肿瘤（S180,Lewis肺癌）生长的作用。当小鼠接种S180和Lewis肺癌后,其免疫功能降低,白细胞介素Ⅱ（IL－2）活性低下,T细胞亚群比例失调,Th／TS＜1。经理气药治疗,明显抑制了IL－2活性的降低,与对照组比较,差别有显著意义（P＜0．05）,并能提高T辅助细胞,调整T细胞亚群的比例,使Th／TS＞1。表明理气药能提高荷瘤机体的免疫功能,以达到抗肿瘤效应。     

活血药、益气活血药对肺癌转移过程中Th17/Treg细胞平衡及其机制影响

目的:观察苏木、苏木+黄芪对Lewis荷瘤小鼠肺癌转移过程脾Th17/Treg细胞及其平衡机制影响,为中药逆转肿瘤炎性微环境中免疫逃逸和抑制肿瘤转移机制提供实验依据。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,观察肺转移抑制率;流式细胞术检测各组小鼠脾Th17/Treg细胞百分比动态变化;RT-PCR检测各组小鼠CD4+T淋巴细胞Foxp3、RORγtmRNA动态表达水平。结果:从各组药物抑制肺转移率看出,益气活血药苏木+黄芪优于单纯活血药苏木(P<0.05),与环磷酰胺组相似(P>0.05);除苏木黄芪组外,各荷瘤组小鼠脾Th17与Treg细胞随时间迁移呈现出上升趋势,且苏木黄芪组较其余各组有显著差异(P<0.05),Th17/Treg比值亦随时间迁移呈现出上升趋势,与正常组比较均存在比值的平衡失调;Th17与Treg细胞关键转录分子RORγt、Foxp3呈现出与Th17和Treg细胞相应的动态改变。结论:益气活血药苏木+黄芪组在抑制肿瘤形成过程中的炎性微环境优于单纯活血药苏木组和环磷酰胺组;各组药物对肿瘤转移机制均有一定的抑制作用,但益气活血药优于单纯活血药和化疗药物。     

消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响

目的:探讨消积抑癌方对Lewis肺癌荷瘤小鼠MMP-2的影响。方法:建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为空白组、荷瘤组、消积抑癌方内服组、消积抑癌方外敷组、消积抑癌方内服联合外敷组。观察各组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率,对比各组免疫器官重量及血清基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、干扰素(IFN)-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平。结果:第7天、第14天、第21天及第30天,联合组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率均明显低于荷瘤组、内服组、外敷组; 内服组、外敷组Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤体积、癌重、抑癌率均明显低于荷瘤组,差异具有统计学意义(P<0.05); 空白组、联合组脾脏指数、胸腺指数与荷瘤组、内服组、外敷组比较,差异有统计学意义(P<0.05); 空白组、联合组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平比较,差异有统计学意义(P<0.05); 内服组、外敷组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平与荷瘤组、空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05); 荷瘤组MMP-2、VEGF、HIF-1α、IFN-γ、IL-10、TNF-α、IL-2水平与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:消积抑癌方内服联合外敷能够有效抑制Lewis肺癌荷瘤小鼠体内肿瘤,降低MMP-2水平,调节机体免疫功能。     

三氧化二砷对哮喘小鼠肺内树突状细胞作用的研究

目的:研究哮喘小鼠肺内树突状细胞(DC)分布、募集的特点及三氧化二砷(As_2O_3)对其的影响。方法:将 BALB/c 小鼠30只随机分为3组,即对照组、模型组和 As_2O_3组。采用免疫组织化学染色技术检测小鼠肺、气道 DC;计算机图像分析技术对 DC 进行定量检测。结果:对照组小鼠整个肺组织包括气管、支气管、肺泡和脏层胸膜构成了一个非淋巴样树突状细胞(NLDC)-145~+DC 网络,NLDC-145~+DC 密度从大气道到小气道分别为(500±50)个/mm~2到(60±10)个/mm~2上皮面积(P<0.05);模型组小鼠肺内 NLDC-145~+DC 分布与对照组相似,但密度较对照组显著增加(P<0.01);As_2O_3组小鼠肺内 NLDC-145~+DC 分布与模型组相似,但密度显著下降(P<0.01)。结论:树突状细胞在整个肺组织构成了一个完整的 NLDC-145~+DC网络;下调肺内 DC 密度,而不影响其肺内分布,可能是 As_2O_3治疗哮喘的一个重要机制。     

大剂量黄芪对急性白血病患儿外周血树突状细胞的诱导和抗原呈递功能的影响

目的观察大剂量黄芪对急性白血病患儿外周血单核细胞体外诱导扩增为树突状细胞（DC）及对DC抗原呈递功能的影响。方法44例急性白血病完全缓解期患儿分为黄芪组与对照组,黄芪组20例,对照组24例。黄芪组于常规化疗同时应用大剂量黄芪（90g／d）1个月,对照组仅常规化疗。提取两组外周血单个核细胞（MNC）,贴壁获得单核细胞,加入白细胞介素-4（IL-4）、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）、肿瘤坏死因子（TNF-α）等细胞因子培养7～8天,利用流式细胞仪进行DC的表型鉴定,用混合淋巴细胞反应鉴定DC的抗原呈递能力。结果黄芪组与对照组从外周血单核细胞诱导生成的DC形态学差异无显著性;黄芪组DC的细胞数量平均为4．4×10^6／2．5×10^6MNC,对照组DC的数量平均为2．6×10^6／2．5×10^6MNC,两组比较差异有显著性（P〈0．001）;黄芪组DC可较强地刺激同种异体淋巴细胞增殖,与对照组比较差异有显著性（P〈0．001）。结论大剂量黄芪可提高急性白血病患者外周血单核细胞诱导生成DC的数量并增强DC的抗原呈递功能。     

香菇多糖对荷瘤小鼠TDCs表达的影响

目的 探讨香菇多糖对荷瘤小鼠S100+ 胸腺树突状细胞(TDCs)和CD1a~+ TDCs表达的影响.方法 观察胸腺结构;通过S100和CD1a免疫组化标记,计算S100+细胞在参照物(胸腺)中所占面积百分比;计算TDCs密度;测算胸腺指数,肿瘤指数,抑瘤率等指标.结果 荷瘤香菇多糖组TDCs数量明显增加,特别在胸腺皮质密度很高,位于成簇的淋巴细胞之间,树状突起与淋巴细胞相接触.荷瘤香菇多糖组S100+ TDCs所占面积比和TDCs密度均比其他各组明显增高(P<0.01).结论 香菇多糖能增加TDCs数量及促进其分化成熟.     

复方蛹虫草制剂对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:研究蛹虫草复方制剂(CCM)对C57BL/6荷瘤小鼠免疫功能影响.方法:C57 BL/6雄性小鼠腋下皮下注入Lewis肺癌小鼠移植瘤动物模型,将荷瘤鼠分为模型组、阳性对照组以环磷酰胺ip 20 mg· kg-,复方蛹虫草制剂低、中、高剂量组(1.2,2.5,7.5)g·kg-1ig给药,连续给药14 d,以抑瘤率为指标考察CCM的体内抗肿瘤活性,分别测定其抑瘤率、T淋巴细胞亚群CD4 +/CD8+;荷瘤小鼠血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-12(IL-12)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;抗体生成细胞数以及力竭游泳时间.结果:CCM高剂量组(7.5 g·kg-1对肿瘤生长有明显的抑制作用(P＜0.05),其抑瘤率为40.3％,CCM高剂量组T淋巴细胞亚群CD3+,CD4+,CD4+/CD8+均高于模型对照组;同时中、高剂量组能显著提高荷瘤小鼠血清TNF-α,IL-2,IL-12的水平;抗体生成细胞数和力竭游泳时间也均高于荷瘤对照组(P＜0.05).结论:CCM具有提高荷瘤小鼠免疫功能的作用.     

灵芝多糖联合低剂量顺铂抑瘤作用及对荷瘤鼠免疫功能的影响

目的研究灵芝多糖与顺铂联合用药对荷瘤小鼠的肿瘤生长情况及其免疫功能的影响。方法Balb／c小鼠腋下接种小鼠肺癌细胞株Lewis5×10^6个细胞,待肿瘤至100min^3分组给药。分为对照组、灵芝多糖组（1次／2d,40mg／kg,灌胃）、顺铂组（1次／2d,2mg／kg,腹腔注射）和联合用药组（等剂量的顺铂和灵芝多糖）。每3天测量一次肿瘤的体积,30d后解剖,检测荷瘤小鼠的肿瘤大小、脾脏的变化,脾脏和外周血中免疫细胞的变化以及相关免疫细胞的功能。结果灵芝多糖可有效增加小剂量顺铂的抗肿瘤效果,提高荷瘤小鼠的存活率,使小鼠外周血中Th细胞向Thl转化,增加细胞免疫功能,并增加骨髓来源DC细胞表面CDllc分子的表达（与对照组比较灵芝多糖组从1．06％升至4．59％,与顺铂比较,联合用药组从2．8％升至7．21％）,提高抗原提呈能力。结论灵芝多糖可以提高荷瘤小鼠的免疫功能,与小剂量顺铂联合用药后,具有协同抗肿瘤生长作用,且可提高小鼠存活率。     

黄芪多糖对B16-F10荷瘤鼠髓样抑制细胞免疫活性的影响

目的:观察黄芪多糖对B16-F10荷瘤鼠髓样抑制细胞免疫活性的影响,探讨黄芪多糖在抗肿瘤免疫机制方面所发挥的作用。方法:建立B16-F10荷瘤鼠模型,通过计算抑瘤率观察黄芪多糖的体内抗肿瘤活性;通过流式细胞术检测脾脏中Gr-1+CD11b+髓样抑制细胞比例;采用酶联免疫吸附试验检测血清中IL-10、VEGF水平。结果:与模型组相比,黄芪多糖治疗可以明显抑制荷瘤鼠黑色素瘤的生长,且可以降低荷瘤鼠脾脏Gr-1+CD11b+髓样抑制细胞比例,抑制外周血VEGF、IL-10的分泌,有显著性差异。结论:适当浓度的黄芪多糖可能通过降低髓样抑制细胞的比例,抑制VEGF、IL-10的分泌和肿瘤的生长。     

半边旗提取物5F抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察半边旗提取物5F体外、体内抗肿瘤活性及其毒性。方法:用MTT法观察5F注射液对SPCA-1,K562瘤株的体外抗肿瘤作用;采用荷瘤小鼠瘤重、抑瘤率检测提取物5F对小鼠移植性肿瘤S180抑制作用;观察5F对荷艾氏腹水癌小鼠的生命延长率;胸腺指数、肝脏指数、脾脏指数、白细胞数等指标观察5F对免疫器官的影响。结果:5F注射液对SPCA-1、K562瘤株有显著的体外抗肿瘤作用;对小鼠肉瘤S180也有抗肿瘤活性;对荷艾氏腹水癌的小鼠生命有延长作用;同时对免疫系统有一定抑制作用。结论:半边旗有效成分5F有一定的体内、体外抗肿瘤活性;对荷瘤小鼠功能有抑制作用。     

黄芪水溶性黄酮类对小鼠细胞免疫功能的影响

目的：观察黄芪水溶性黄酮类对小鼠细胞免疫功能的影响。方法：采用“细胞毒”法和“MTT”法，通过观察小鼠T淋巴细胞及其亚群和淋巴细胞的增殖作用，初步研究黄芪水溶性黄酮类（AF）对氢考（HC）致免疫功能低下小鼠和正常小鼠的细胞免疫功能的影响。结果：AF能提高免疫功能低下小鼠T细胞总数及L3T4^ 、Lyt2^ 细胞百分率和L3T4^ /Lyt2^ 细胞比值，并可恢复至正常水平；AF能ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞的增殖，且本身具有丝裂原的作用。结论：AF对细胞免疫功能具有促进作用。     

黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax 及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:研究黄芪注射液对H22荷瘤小鼠瘤组织Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将50只荷瘤小鼠随机分为空白对照组(模型组)、环磷酰胺组(CTX组)、黄芪注射液(高、中、低剂量)组,连续ip给药10 d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,绘制肿瘤生长曲线。10 d后处死小鼠,剥取瘤组织称重,计算抑瘤率;采用流式细胞术测定药物作用后肿瘤细胞凋亡率;免疫组化方法检测肿瘤组织Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果:小鼠移植瘤H22试验结果显示,在128,,4 g.kg-1的剂量下黄芪注射液的抑瘤率分别为52.36%,33.68%,17.28%。流式细胞术及免疫组化结果表明黄芪注射液各剂量组均可明显增加肿瘤细胞凋亡率;增强Bax蛋白表达,降低Bcl-2蛋白表达,且Bax/Bcl-2明显增高(P<0.05)。结论:黄芪注射液通过促进Bax蛋白表达、抑制Bcl-2蛋白表达来诱导H22肿瘤细胞凋亡,进而发挥抑瘤效应。