Effects of Mitogen-activated Protein Kinase Signal Pathway on Heat Shock Protein 27 Expression in Human Lens Epithelial Cells Exposed to Sodium Salicylate in vitro

d that sodium salicylate can induce the expression of HSP27 in HLECs-B3. The effects are mediated, at least in part, through the activation of P38MAPK and ERK1/2 signaling pathway.     

不同损伤条件下热休克蛋白27在人晶状体上皮细胞中的表达

目的 观察不同损伤条件下热休克蛋白27( HSP27)在人晶状体上皮细胞系SRA01中的表达情况.方法 体外培养人晶状体上皮细胞系SRA01,在添加香烟烟雾凝聚物(CSC,25 mg/mL)或过氧化氢(H202,50 mmol/L)条件下培养30 min后,恢复至正常培养条件.分别于处理0,2,4,6,16,24 h时,采用免疫细胞化学、RT-PCR法检测细胞中HSP27的表达情况.结果 在生理和应激情况下,人晶状体上皮细胞内均有HSP27的表达.应激损伤后4h,HSP27 mRNA和蛋白的表达明显增加,8h达最高峰,24 h仍维持在较高水平.CSC组细胞HSP27的表达较过氧化损伤组弱(P＜0.05).结论 体外培养的人晶状体上皮细胞中存在HSP27的表达.不同损伤应激可诱导HSP27的表达增加,HSP27可能通过对抗应激作用保护晶状体上皮细胞.     

热休克蛋白70在骨肉瘤组织中的表达及其临床意义

目的:观察热休克蛋白70(HSP70)在人骨肉瘤组织中的表达。方法:采用免疫组化SP法检测55例骨肉瘤组织,其中骨母细胞型24例,软骨母细胞型20例,纤维母细胞型11例,以及30例正常骨组织中HSP70的表达情况。结果:HSP70在正常骨组织与骨肉瘤组织中的表达率分别为20%(6/30)及96.4%(53/55),平均阳性细胞率分别为0.53%和95.57%,两者差异具有统计学意义(P<0.01),在骨母细胞型、软骨母细胞型与纤维母细胞型中阳性表达率分别为98.65%,92.37%,90.36%,三者之间差异无统计学意义。HSP70在骨肉瘤中的表达与病理分级有明显相关性(P<0.05),与临床分期无关(P>0.05)。结论:HSP70在人骨肉瘤组织中高表达,可作为判断恶性程度的重要指标以及肿瘤免疫的重要靶位。     

氯通道蛋白-3在透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞中的表达

目的研究透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞氯通道蛋白-3（chloride channel protein 3，CLC-3）的表达。方法随机收集40例老年性白内障手术患者和5例透明晶状体（来自晶状体脱位患者）的晶状体前囊膜，采用免疫组织化学染色和免疫荧光技术检测晶状体上皮细胞CLC-3的表达。结果CLC-3阳性表达于晶状体上皮细胞的细胞膜。老年白内障组40张切片中，CLC-3表达均为阳性。而透明晶状体组5张切片中，4张阴性，1张可疑阳性。计算机图像分析结果，透明晶状体组平均吸光度（A）值明显低于老年白内障组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论老年性白内障患者晶状体上皮细胞CLC-3表达阳性。CLC-3可能参与老年性白内障的形成。     

人晶状体上皮细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA的表达

目的 旨在从基因转录水平确定培养的人太体上皮细胞是否具有表达Ⅰ、Ⅲ型胶原的生物学特性。方法采用人眼晶状体囊膜进行晶状体上皮细胞体外的原代培养;细胞融合后,抽提ＲＮＡ,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术进行探测人昌状体上皮细胞的基因转录产物。结果 人晶 状体上皮细胞的基因转录存在有Ⅰ、Ⅲ型胶胶原ｍＲＮＡ的表达,表达的二型前胶原ｍＲＮＡ均存在有长度为５．８、５．４、４．８ｋｂ的片段,Ⅰ型前胶原ｍＲＮ     

雷公藤甲素对人晶状体上皮细胞生长影响的实验研究

目的 研究雷公藤甲素（Triptolide,Tri）对人晶状体上皮细胞（Human Lens Epithelial Cells,HLEC）增殖抑制作用。方法 原代培养人晶状体上皮细胞,Tri不同浓度、不同作用时间后吖啶橙试剂（AO）染色,荧光显微镜下观察细胞核的形态变化;MTr法测定人晶状体上皮细胞增殖抑制率。结果 雷公藤甲素对细胞的生长有明显的抑制作用,且呈浓度时间依赖性。结论 一定剂量的Tri可抑制体外培养的人晶状体上皮细胞的增殖,为预防后囊混浊提供了新途径。     

大鼠角膜创伤愈合过程中HSP70表达的实验研究

目的 观察大鼠角膜创伤愈合过程中热休克蛋白70（HSP70）的表达规律,探讨其在创伤愈合中的作用.方法 雌性Wistar大鼠42只,随机分为7组,每组6只,其中,正常对照组6只,动物模型组36只.均取右眼制作角膜针刺损伤模型,于损伤后各时间点（6h,1d,3d,5d,7d,14d）取角膜标本,HE染色行组织病理学检查,免疫组化染色观察HSP70在大鼠角膜的表达与分布,用计算机图像系统对结果进行分析.结果 HSP70在大鼠正常角膜各层均有表达,动物模型组大鼠角膜上皮HSP70的表达水平于损伤后第1天显著增高（P〈0.05）,其后逐渐下降,至损伤后第14天时恢复正常.角膜基质层和内皮层HSP70的表达在各时间点未见明显变化.结论 HSP70在大鼠角膜创伤愈合过程中的早期表达水平明显增高,其可能是参与调节角膜创伤愈合的一种重要分子.     

透明晶状体和老年性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白1的表达

目的　探讨透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞水通道蛋白 1(aquaporin 1,AQP1)的表达水平。方法　收集 5例透明晶状体和 4 0例老年性白内障患者的前囊膜。应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对前囊膜下晶状体上皮细胞AQP1进行检测。结果　AQP1阳性表达在透明晶状体和老年性白内障患者前囊膜下晶状体上皮细胞的细胞膜。图像分析透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。老年性白内障患者晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值低于透明晶状体上皮细胞AQP1平均吸光度值。结论　透明晶状体和老年性白内障患者晶状体上皮细胞的细胞膜表达AQP1,AQP1可能在老年性白内障发生发展中起一定作用。     

糖尿病性白内障晶状体上皮细胞水通道蛋白-1表达变化

目的研究大鼠糖尿病性白内障（diabetic cataract，DC）晶状体上皮细胞（lens epithelial cells，LECs）水通道蛋白-1（aquaporin-1，AQP1）表达水平的变化。方法链脲佐菌素（streptozotocin，STZ）60mg／kg体重一次性尾静脉注射制作大鼠糖尿病模型，分别在造模后不同时间点摘取模型组及对照组大鼠的眼球，制作石蜡切片，应用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对晶状体囊膜下上皮细胞AQP1进行检测。结果透明晶状体和DC各期晶状体囊膜下上皮细胞膜均有AQP1阳性表达。图像分析显示：在造模2周糖尿病大鼠晶状体尚透明，LECs的AQP1平均吸光度（A）值即下降，与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.05）；DC各期LECs的AQP1表达均显著低于对照组（均P〈0.01），随着白内障的发展，A值逐渐下降。除DCⅡ期与Ⅲ期之间A值差异无显著性意义外，其余DC各期之间差异均有极显著性意义（均P〈0.01）。结论LECs胞膜AQP1表达量减少先于DC的发生，DC早期AQP1的表达量显著下降，AQP1表达改变可能在DC发生发展中起一定作用。     

热休克蛋白70和P53在人类乳腺癌中的表达及意义

目的　探讨HSP70和P5 3在乳腺癌中所起的作用及其在临床诊断中的应用价值。方法　运用超敏免疫组织化学技术 (SP法 )检测HSP70和抑癌基因P5 3蛋白在 5 2例乳腺癌中的表达情况。结果　HSP70的阳性率为 35 % (18/ 5 2 ) ,其表达与乳腺癌的病理学级别有关 (P <0 .0 5 )。P5 3的过度表达率为 36 .5 % (19/ 5 2 ) ,其表达与乳腺癌的病理学级别有关 (P <0 .0 5 )。在 5 2例乳腺癌中 ,P5 3的过度表达和HSP70的表达具有一定的相关性 (P<0 .0 5 )。结论　HSP70和P5 3在乳腺癌中的相关性提示HSP70可能参与P5 3的代谢 ;HSP70和P5 3表达程度与肿瘤的恶性程度有关。     

卵巢癌组织中HSP70的表达

目的探讨卵巢癌组织HSPTO的表达及HSP70与组织类型 ,组织分级 ,患者年龄之间的关系。方法应用免疫组化SP法分别检测 4 2例卵巢癌组织中HSP70的表达。结果卵巢癌中HSP70阳性率高于正常组织 ,而且HSP70在低分化卵巢癌中的阳性率高于高分化癌。结论说明HSP70的过度表达可能与卵巢癌的发生、发展以及预后有关     

安宫牛黄丸对大鼠缺血性脑损伤后HSP70表达的影响

目的:探讨安宫牛黄丸对大鼠脑缺血后脑组织内热休克蛋白70(HSP70)表达的影响及意义.方法:线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型,将55只SD大鼠随机分为假手术组(5只)、缺血对照组(25只)、安宫牛黄丸治疗组(25只),缺血组和治疗组再各分为12h、24h、3d、7d、14d共5个亚组,每个亚组5只,治疗组大鼠给予安宫牛黄丸0.5g/2mL灌服,1天1次,直到各亚组时间点;对照组及假手术组同时予等量生理盐水灌服.观察各组大鼠脑梗死体积、组织形态学变化,并免疫组化方法检测HSP70蛋白含量.结果:安宫牛黄丸治疗组较缺血组梗死灶体积明显减少(P<0.05),缺血组HSP70阳性细胞逐渐增多,于3天达最高峰,然后逐渐降低.在缺血再灌注3天后开始,安宫牛黄丸治疗组HSP70阳性细胞较缺血对照组明显增多(P<0.05).显微镜下见HSP70细胞主要表达于缺血半暗带区.结论:安宫牛黄丸治疗对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与增加HSP70表达有关.     

榄香烯对HLE-B3内蛋白激酶A及其mRNA表达的影响

探讨中药单体榄香烯(Ele)对人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)内蛋白激酶A(PKA)及mRNA表达的影响. 方法 利用碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导HLE-B3增殖,将80mg/L的Ele作用在处于增殖状态下的HLE-B3 24 h,流式细胞术检测HLE-B3内PKA的表达,RT-PCR法检测HLE-B...     

通络益智散对血管性痴呆大鼠脑组织HSP70表达的影响

目的：通过动物实验探讨通络益智散对VD大鼠脑组织HSP70表达的影响.方法：以13只Wistar大鼠为一组,随机共设5组：空白组、模型组、通络益智散低剂量组、通络益智散高剂量组、尼莫地平组.除空白组外,其余各组采用腹腔注射硝普纳及反复夹闭双侧颈动脉的方法,制造血管性痴呆模型.3周后,在脑组织观察HSP70的表达.结果：模型组及给药各组VD大鼠脑内HSP70的表达均明显高于正常组（P＜0.01）.结论：通络益智散能够增强HSP70的表达,增加脑细胞对缺氧的耐受性,抵抗进一步致死性损伤.     

通络益智散对血管性痴呆大鼠脑组织HSP70表达的影响

目的：通过动物实验探讨通络益智散对 VD 大鼠脑组织 HSP70表达的影响。方法：以13只 Wistar 大 鼠为一组，随机共设5组：空白组、模型组、通络益智散低剂量组、通络益智散高剂量组、尼莫地平组。除空白组外， 其余各组采用腹腔注射硝普纳及反复夹闭双侧颈动脉的方法，制造血管性痴呆模型。3周后，在脑组织观察 HSP70 的表达。结果：模型组及给药各组 VD 大鼠脑内 HSP70的表达均明显高于正常组(P＜0． 01) 。结论：通络益智散 能够增强 HSP70的表达，增加脑细胞对缺氧的耐受性，抵抗进一步致死性损伤。     

细粒棘球蚴热休克蛋白70重组抗原的免疫学特性研究

目的鉴定纯化的重组细粒棘球蚴热休克蛋白70(EgHSP70)的免疫学特性。方法对已构建的阳性表达菌EgHSP70/pGEX-6P-1进行大量诱导表达后纯化,用EgHSP70和HSP70/GST作抗原制剂分别免疫小鼠,制备抗血清,通过ELISA法和Western blot法对重组EgHSP70的免疫学特性进行鉴定。结果ELISA法检测结果表明,原头蚴、囊液等天然抗原均可被免疫小鼠血清识别,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);Western blot显示免疫小鼠血清能够有效识别重组蛋白,同时重组EgHSP70也可被免疫兔血清识别。结论纯化后的重组蛋白EgHSP70具有较好的免疫原性和抗原性,可望作为包虫病疫苗候选分子,值得进一步深入研究。     

热休克蛋白70肿瘤多肽复合物抗胶质瘤免疫效应的研究

目的探讨从小鼠胶质瘤组织中提取的热休克蛋白70肿瘤肽复合物(HSP70-PC)及其抗胶质瘤免疫保护效应.方法自小鼠胶质母细胞瘤G422肿瘤组织提取HSP70-PC,小鼠分别以HSP70-PC(10μg/只)、细胞裂解液(10μg/只)免疫后分别在其颅内和皮下接种肿瘤,比较颅内荷瘤组与未免疫组的成瘤率及生存时间;皮下荷瘤组与未免疫组的成瘤率、肿瘤重量,并应用流式细胞仪技术测定小鼠心腔血中淋巴细胞百分比、CD3 CD8 和CD3 CD4 T淋巴细胞的百分比.结果颅内荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、83.3%,平均生存期为(16.00±0.58)d、(18.70±1.33)d、(25.33±1.86)d;皮下荷瘤组小鼠成瘤率为100%、100%、33.3%,肿瘤重量为(6.00±1.67)g,(2.30±1.23)g,(0.12±0.20)g,流式细胞仪检测小鼠淋巴细胞群为(32.65±9.06)%、(51.30±7.72)%、(67.42±6)%;CD3 CD8 T淋巴细胞为(4.30±1.97)%、(7.06±2.20)%、(11.75±3.57)%;CD3 CD4 T淋巴细胞为(14.28±6.75)%、(17.17±5.04)%、(22.5±5.18)%.结论热休克蛋白70肿瘤肽复合物可诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应,延长小鼠生存期,具有明显的抗胶质瘤免疫保护作用.     

肝区微波照射后肝脏HSP70的表达及机制初探

目的 采用20W、2450MHz微波照射家免肝区，观察照射过程中肝前区温度及肛温的变化，并于24小时后从家兔肝右中方叶前缘取组织用免疫组化方法检测HSP70的表达。方法 健康成年家免13只，对其中4只在微波照射过程中肝前区温度及肛温的变化进行测定，其余9只分为两组，一组（n=4）取肝组织用免疫组化方法观察照射前肝HSP70的表达，另一组（n=5）进行微波预处理，24小时后观察肝脏HSP70的表达。结果 肝区微波照射过程中，家兔肝前区温度升高0．5～2．2℃，肛温升高0．5～0．7℃，24小时后肝细胞核内有HSP70的高表达，而预处理前动物肝细胞内无或仅有低水平HSP70的表达。结论 肝区微波照射过程中肝前区温度及肛温有轻度升高，24小时后肝细胞核内有HSP70的高表达。     

流体切应力作用下乙醇对血管内皮细胞HSP70表达的影响

目的探讨在流体切应力作用下不同浓度的乙醇对血管内皮细胞HSP70表达的影响。方法不同浓度的乙醇分别在静止状态下和1 Pa切应力下作用于培养的EA．Hy926内皮细胞1h、2h、4h、6h,不加乙醇组为对照组,用免疫组化SP法观察内皮细胞HSP70的表达。结果对照组在静止状态下无HSP70的表达,在1 Pa切应力作用4h后可见表达;50mg／dL乙醇组不管在有无切应力作用下表达HSP70与对照组的差异均无统计学意义;150mg／dL和300mg／dL乙醇组在静止状态下作用于内皮细胞4h和2h可见HSP70表达,在1 Pa切应力作用下表达明显增强。绪论中、高浓度的乙醇与流体切应力的联合作用能明显增强内皮细胞HSP70的表达,同时与作用时间也有密切关系。     

人肝癌组织热休克蛋白70的表达

为探讨人肝癌组织热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达及意义 ,采用SABC法检测人肝癌组织HSP70的表达 ,图像分析HSP70在癌组织中的表达特点。结果显示 :2 5例肝癌组织中均存在HSP70的表达 ,不同癌组织存在胞质、胞膜和胞核表达强度及部位的差异。证实人肝癌组织存在HSP70的表达异质性 ,呈现了胞质、胞膜和胞核的表达差异 ,HSP70在人肝癌组织的表达特点为今后肿瘤抗原肽瘤苗的提取和实验研究作了铺垫。