人载脂蛋白E基因限制性片段长度多态性

载脂蛋白的基因变异与血脂代谢、动脉粥样硬化密切相关，测定这些变异对其研究具有重要意义．载脂蛋白E是参与血脂转运和代谢的重要截脂蛋白．载脂蛋白E基因编码第112位和第158位氨基酸的密码子存在着变异，分别构成了E2、E3和E4等位基因．以基因的限制性片段长度多态性来测定载脂蛋白E的基因变异，具有准确、简便等优点，已越来越多地被用来研究载脂蛋白E不同等位基因的生物活性以及与异常脂蛋白血症和动脉粥样硬化的关系．本文就此作一综述.     

载脂蛋白E及其基因敲除小鼠的研究进展

载脂蛋白E是血浆脂蛋白的重要组成成分,在脂质代谢中发挥着重要的作用。它的缺失或者变异都会引起体内的代谢异常或者组织器官的功能障碍,从而导致一系列的疾病和并发症。载脂蛋白E基因敲除小鼠问世以来,它给研究载脂蛋白E的功能及其在各种相关疾病当中的作用提供了广阔的平台。近年来,载脂蛋白E基因小鼠已成为动脉粥样硬化相关研究中最受欢迎的动物模型之一。     

载脂蛋白E基因多态性与血脂水平的关系

目的研究载脂蛋白E基因多态性与血脂水平的关系.方法应用等位基因特异性多重聚合酶链反应对113例高脂血症患者和108例健康对照者进行载脂蛋白E基因型进行分析,并对其血脂水平进行检测.结果高脂血症患者总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇水平明显高于健康对照组(P＜0.05),而高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白AⅠ水平明显低于正常对照组(P＜0.05);在载脂蛋白E的3种基因型中以载脂蛋白E3/3型多见,高脂血症患者中载脂蛋白Eε4等位基因频率明显高于健康对照组(P＜0.05).结论载脂蛋白E基因多态性可能是高脂血症患者的遗传因素.     

载脂蛋白E基因多态性对血脂及高血压病的影响

为探讨载脂蛋白E基因多态性对血脂及高血压病的影响，采用聚合酶链式反应－限制性片段多态性方法测定112例原发性高血压病人及118例非高血压病对照的载脂蛋白E基因型。结果发现高血压病患者ε4等位基因频率及载脂蛋白E ε4携带者显著高于对照组（P＜0．05）。载脂蛋白E ε4携带者的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平显著高于载脂蛋白E ε2携带者（P＜0．05），载脂蛋白E ε3／ε3携带者的低密度脂蛋白胆固醇水平也显著高于载脂蛋白E ε2携带者（P＜0．05）。载脂蛋白E ε4携带是高血压病的独立危险因素（P＜0．05）。研究表明载脂蛋白E基因多态性影响个体的血脂和脂蛋白水平，载脂蛋白E ε4为高血压病的一种重要遗传标志。     

载脂蛋白基因多态性对调脂疗效的影响

研究发现不同调脂方案的疗效存在明显的个体化差异，可能是多种参与脂质代谢相关蛋白基因突变和环境因素相互作用的结果。由于载脂蛋白对脂质代谢起到重要作用，因此载脂蛋白的基因突变已成为研究的热点之一。本文简述载脂蛋白A、B、C、E基因多态性对饮食和药物调脂疗效的影响。     

不同类型冠心病与脂蛋白及载脂蛋白异常

对三种不同类型冠心病患者作血清脂蛋白、载脂蛋白的测定，以了解不同类型冠心病患者脂质异常情况及异常类型。急性心肌梗死组21例；不稳定型心绞痛组27例；稳定型心绞痛组35例；正常对照组50例。总胆固醇和甘油三酯测定采用酶法；高密度脂蛋白胆固醇及其亚组分以聚乙二醇沉淀后用酶法测定；载脂蛋白A1、载脂蛋白B100以免疫火箭电泳法测定：脂蛋白（a）、载脂蛋白E采用酶联免疫法测定；低密度脂蛋白胆固醇含量由Friedwald公式推算。结果发现三组的脂蛋白（a）、载脂蛋白B100和载脂蛋白E含量均高于正常对照组；高密度脂蛋白胆固醇及其亚组分和载脂蛋白A1含量均低于正常对照组。低密度脂蛋白／高密度脂蛋白胆固醇的比值在急性心肌梗死组高于稳定型心绞痛组。三组冠心病患者的血清脂质异常检出率，以载脂蛋白B100、载脂蛋白E含量增高者最多见，次之为高密度脂蛋白胆固醇含量降低者；在三组的脂质异常类型方面，以脂蛋白（a）含量增高者为最多见。以上结果提示：应重视血清脂蛋白（a）、载脂蛋白B100、载脂蛋白E含量的增高以及高密度脂蛋白胆固醇含量的下降在冠心病患者血清脂质异常中的重要性；低密度脂蛋白胆固醇／高密度脂蛋白胆固醇比值增高是冠心病的一个预告指标。     

载脂蛋白E基因敲除小鼠不同周龄动脉粥样硬化的病理变化

目的研究载脂蛋白E基因敲除小鼠不同时间段的动脉粥样硬化的病理进展，探讨不同饮食对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展的影响。方法采用6周龄40只载脂蛋白E基因敲除小鼠，20只给予高脂膳食饲料，20只给予普通饮食，分别于15周龄、19周龄、24周龄、28周龄、36周龄5个时间段各取4只麻醉处死做病理检测。结果随着时间进展，载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化程度逐渐加重，经历了从脂质条纹到粥样斑块形成典型的动脉粥样硬化病理过程；高脂饮食组比普通饮食组的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病理改变严重。结论载脂蛋白E基因敲除小鼠是研究动脉粥样硬化的可靠模型，高脂饮食可以加速载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的病理进程。     

慢性心力衰竭时载脂蛋白E基因多态性

目的 探讨载脂蛋白E基因多态性对慢性心力衰竭的影响.方法 有高血压和冠心病的患者247例,根据临床症状、左心室舒张末期内径指数、左心室射血分数及左心室内径缩短率分为心功能正常组140例和慢性收缩性心力衰竭组107例,用聚合酶链反应限制片长多态性方法测定所有患者的载脂蛋白E基因型.结果 慢性收缩性心力衰竭患者ε4等位基因频率及载脂蛋白E ε4携带者显著高于心功能正常组(P<0.05).载脂蛋白E ε4携带是高血压和冠心病患者发生慢性心功能不全的独立危险因素(P<0.01).结论 载脂蛋白E ε4等位基因可能是高血压和冠心病患者发生慢性心力衰竭的一个重要遗传危险因素.     

载脂蛋白Eε4等位基因是迟发性Alzheimer病的危险因子

目的 研究载脂蛋白E等位基因型和迟发性Alzheimer病的关系。方法 在上海地区选取一般健康汉族老年人200人作为正常对照,迟发性Alzheimer病(LOAD)病人51人作为观察对象,研究载脂蛋白Eε4等位基因频率和LOAD的关系。结果 在LOAD病人组和正常对照组中．载脂蛋白Eε4等位基因频率分别为18．6％和7．7％,P=0．0046。结论 研究证明载脂蛋白Eε4等位基因是上海地区汉族人LOAD的危险因子。     

人周围血单核细胞载脂蛋白E基因表达的竞争性逆转录-聚合酶链反应定量分析

为建立人周围血单核细胞载脂蛋白E基因表达检测方法,研究载脂蛋白E基因与儿童健康的关系,我们抽取26例健康儿童外周静脉血,分离血单核细胞,抽提RNA,采用逆转录-聚合酶链式反应检测载脂蛋白E基因表达,并以正常人cDNA作定量标准物,待测样品与定量标准物共扩增,计算出待测样本的个体的mRNA量.研究发现载脂蛋白E基因能在健康儿童周围血单核细胞表达,健康儿童载脂蛋白E基因表达量为0.37±0.15 mol/mol mRNA.表明采用竞争性逆转录-聚合酶链反应方法来检测人周围血单核细胞载脂蛋白E基因表达的分析方法快速、简便、灵敏、实用、可靠,且能准确定量,值得推广应用.     

早发冠心病患者颈总动脉内膜—中层厚度与载脂蛋白E基因型的关系

探讨早发冠心病患者颈总动脉内膜-中层厚度与载脂蛋白E基因型关系.用超声检测85例早发冠心病患者颈总动脉内膜-中层厚度,同时运用聚合酶链反应及限制性片段长度多肽性方法分析其载脂蛋白 E基因型及等位基因频率分布.结果发现,病例组载脂蛋白 E基因型共有5种,主要基因型按频率高低为载脂蛋白E3/3>E3/4>E2/3,载脂蛋白E2/4和E4/4为少见基因型;载脂蛋白 E等位基因频率为ε3>ε4>ε2.载脂蛋白E3/4基因型组总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇高于载脂蛋白E2/3组, 高密度脂蛋白胆固醇低于载脂蛋白E2/3组(P均<0.05);载脂蛋白E3/4基因型组内膜-中层厚度高于载脂蛋白E2/3组(P<0.05).内膜-中层厚度与总胆固醇(r=0.401,P<0.01)和低密度脂蛋白胆固醇(r=0.376,P<0.01)呈正相关.以上提示,早发冠心病患者颈总动脉内膜-中层厚度与载脂蛋白E基因型密切相关,载脂蛋白E基因型通过调节脂质代谢影响内膜-中层厚度.     

中国人Ⅱa型高脂蛋白血症载脂蛋白E基因多态性的研究

为探讨中国人Ⅱa型高脂蛋白血症患者载脂蛋白E基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系,采用聚合酶链反应－限制片长多态性法,分别对87例Ⅱa型高脂蛋白血症患者及230例血脂正常者的载脂蛋白E基因型、空腹血脂及载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ和E进行了全面分析。结果发现,Ⅱa型高脂蛋白血症患者的血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、非高密度脂蛋白胆固醇,以及载脂蛋白B100、CⅡ、CⅢ和E水平较对照组显著升高（P＜0．01）;;血清载脂蛋白E／CⅢ比值显著降低（P＜0．05）;Ⅱa型高脂蛋白血症组与对照组载脂蛋白E基因型及等位基因频率分布均以E3／3和ε3最高,Ⅱa型高脂蛋白血症组的ε4等位基因有增高的趋势,而ε2等位基因有降低的趋势（P＞0．05）。携带ε2等位基因组血清载脂蛋白E水平较E3／3基因型组显著升高,而携带ε4等位基因组血清载脂蛋白E水平较E3／3基因型及携带ε2乘位降低基因组显著（P＜0．001）。此结果提示,ε2及ε4等位基因与Ⅱa型高脂蛋白血症患者的血清载脂蛋白E水平有关。     

卒中和ApoE4对痴呆风险的共同影响

虽然卒中和载脂蛋白E（apolipoprotein E，Apo E）4是痴呆的独立危险因素，但它们的联合作用仍不确定。加拿大伦敦健康科学中心和西安大略大学临床神经科学系的Jin等对它们对痴呆风险的共同影响进行了研究。     

载脂蛋白E多态性分析方法的研究进展

本文就载脂蛋白E多态性分析方法方面的有关文献进行综述。通过以等电聚焦电泳为基础的蛋白水平检测和以多聚酶链反应为工具的分子生物学水平的分型分析．提出了多态性检测的发展趋势，并简述了载脂蛋白E与动脉粥样硬化之间的关系。     

胰高血糖素和双丁酰环腺苷酸对HepG2细胞分泌载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅢ及E的影响

为了解胰高血糖素和双丁酰环腺苷酸在肝脏载脂蛋白代谢中的作用,以培养的人肝癌细胞系HepG2细胞为研究对象,采用"冻干浓缩培养液载脂蛋白测定法",观察了胰高血糖素和双丁酰环腺苷酸对HepG2细胞分泌载脂蛋白AⅠ、AⅡ、CⅢ、B100及E的影响.结果表明,胰高血糖素浓度为4×10-7mol/L时,载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100及E的分泌分别减少47.7%、 54.1%、 32.7%和33.2%(P<0.01),载脂蛋白CⅢ的分泌增加89.1%(P<0.01);双丁酰环腺苷酸的浓度为1×10-3mol/L时,载脂蛋白AⅠ、B100和E的分泌分别减少12.3%、 24.9%和16.1%(P<0.01),载脂蛋白AⅡ和CⅢ的分泌分别增加66.1%和142.6%(P<0.01).胰高血糖素和双丁酰环腺苷酸对HepG2细胞载脂蛋白分泌的影响基本一致.     

黑米皮抗载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化形成及机制

为研究黑米皮对载脂蛋白E基因缺陷小鼠血清抗氧化型低密度脂蛋白抗体水平的影响 ,探讨黑米皮抗动脉粥样硬化作用的机制。选用载脂蛋白E基因缺陷小鼠进行实验 ,通过在载脂蛋白E基因缺陷小鼠普通饲料AIN 93中添加 5 %黑米皮 ,检测载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉窦动脉粥样斑块面积和血清抗氧化型低密度脂蛋白抗体的水平。结果发现 ,黑米皮可降低载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉窦动脉粥样斑块面积以及血清中抗氧化型低密度脂蛋白抗体的水平 ,且二者之间呈显著性相关 (r=0 .6 38,P <0 .0 1)。这表明黑米皮的抗动脉粥样硬化作用可能与其降低抗氧化型低密度脂蛋白抗体水平有关。     

载脂蛋白E与动脉粥样硬化

载脂蛋白E是血浆脂蛋白的重要组成成份 ,主要介导血浆脂蛋白特别是乳糜微粒和低密度脂蛋白的代谢与清除 ,在脂蛋白代谢中发挥重要作用。转基因小鼠和基因敲除的小鼠证实了载脂蛋白E在动脉粥样硬化发生发展中的作用。载脂蛋白E通过不同机制对动脉粥样硬化起到一定的抑制作用。     

载脂蛋白E基因多态性与冠心病的关系

为研究载脂蛋白E基因多态性与冠心病及其严重程度的相关性,选择已经冠状动脉造影证实的冠心病病人（60例）和冠状动脉造影阴性的对照组病人（50例）,自外周抗凝血抽提基因且DNA后多聚酶链反应扩增特异性载脂蛋白E片段,经HhaI限制性内切酶消化后电泳识别基因型,多因素Logistic回归分析载脂蛋白E基因多态性与冠心病相关性。结果显示,E2／3、E3／3、E3／4、E2／4、E4／4和E2／2基因型在冠心病组分别占11．7％、68．4％、10．7％、1．7％、1．7％和0,ε2、ε3和ε4等位基因在冠心病且分别占7％、82．2％和10．8％;对照组分别占6％、76％、16％、2％、0、0和4％、87％、9％,多因素Logistic回归分析显示载脂蛋白E基因多态性分布在冠心病组和对照组间无显著差异（P＞0．05）。提示载脂蛋白E基因多态性分布与冠心病无明显相关性,与冠心病严重程度也无明显相关性。     

载脂蛋白E基因与老年抑郁症

老年抑郁症是阿尔茨海默病的重要风险因子,而阿尔茨海默病与载脂蛋白E基因关系密切,所以近年对老年抑郁症与载脂蛋白E基因的关系也作了许多探讨。本文对有关的研究作一综述。     

载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块中血小板因子4和Toll样受体2的表达

目的观察高脂饲养的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块表达Toll样受体2和血小板因子4的情况,探讨血小板因子4对内皮细胞Toll样受体2表达的影响。方法高脂饲料喂养载脂蛋白E基因敲除小鼠12周,建立动脉粥样硬化模型。安乐死处死动物,原位灌流固定,取主动脉于10%中性缓冲福尔马林中固定,石蜡包埋连续切片,HE染色观察动脉粥样硬化斑块形态,免疫组织化学检测斑块中Toll样受体2和血小板因子4的表达。结果载脂蛋白E基因敲除小鼠血脂水平明显增高,主动脉HE染色可见态动脉粥样硬化病变。在载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉富含脂质斑块中Toll样受体2表达上调,其中血管内皮细胞、巨噬细胞表达Toll样受体2明显增多。载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉斑块中也发现有血小板因子4表达,主要在内皮细胞和动脉粥样硬化斑块肩部。结论1.载脂蛋白E基因敲除小鼠粥样斑块中Toll样受体2表达上调,并且Toll样受体2主要表达在粥样斑块的内皮细胞和巨噬细胞上。2.载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块中可见血小板因子4表达。