产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌表型及基因型研究

目的 了解我院临床分离的大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）表型和基因型分布情况.方法 对88株大肠埃希菌进行耐药分析,并用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,对耐药基因进行聚合酶链反应（PCR）扩增分析,选部分产物测序.结果 88株大肠埃希菌中共检出31株产ESBLs（35.2%）菌株.产ESBLs菌株对头孢他啶的敏感率为58.1%,对头孢噻肟和头孢曲松的敏感率均为3.2%.PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M型（90.3%）,其中以CTX-M-14、CTX-M-3型为主;TEM基因均为TEM-1型,SHV基因均为SHV-1型.结论 我院产ESBLs大肠埃希菌检出率为35.2%,其耐药性明显高于非产ESBLs菌株;其基因均为CTX-M型,其中以CTX-M-14和CTX-M-3型为主;TEM-1型广谱酶广泛存在于产ESBLs的大肠埃希菌中,则SHV-1型少见.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌表型及基因型研究

目的了解我院临床分离的大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型分布情况。方法对88株大肠埃希菌进行耐药分析,并用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,对耐药基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增分析,选部分产物测序。结果88株大肠埃希菌中共检出31株产ESBLs(35.2%)菌株。产ESBLs菌株对头孢他啶的敏感率为58.1%,对头孢噻肟和头孢曲松的敏感率均为3.2%。PCR结果显示,产ESBLs大肠埃希菌基因主要是CTX-M型(90.3%),其中以CTX-M-14、CTX-M-3型为主;TEM基因均为TEM-1型,SHV基因均为SHV-1型。结论我院产ESBLs大肠埃希菌检出率为35.2%,其耐药性明显高于非产ESBLs菌株;其基因均为CTX-M型,其中以CTX-M-14和CTX-M-3型为主;TEM-1型广谱酶广泛存在于产ESBLs的大肠埃希菌中,则SHV-1型少见。     

运用多重PCR技术检测CTX-M型耐药基因的研究

目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的阳性率、耐药性以及基因型分布。方法采用K-B琼脂扩散法,检测临床分离的85株大肠埃希菌和41株肺炎克雷伯菌对18种抗生素的耐药性,用双纸片增效试验检测产ES-BLs菌株,用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果检测菌株中,ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%。所有检测菌株对亚胺培南敏感。产ESBLs的菌株对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等的耐药率为100.0%;质粒接合试验证实,CTX-M型ESBLs介导的耐药可以水平转移;ESBLs阳性菌株中有48株扩增到CTX M型耐药基因,其中CTX-M-3型11株,CTX-M-9型7株,CTX-M-14型25株。结论产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,以CTX-M-14型为多。碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs最有效药物。     

中国澳门与沈阳地区大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶基因型的研究

目的 确定中国澳门地区产超广谱B内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌的ESBLs基因型,并与沈阳地区产ESBLs的大肠埃希菌的ESBLs基因型进行比较.方法 分别收集澳门与沈阳地区分离的大肠埃希菌209株、150株.按美国临床和实验室标准协会(CLSI)2006年所定标准确定ESBLs表型,并对ESBLs表型阳性的菌株测试其等电点(pI)值,根据pI值范围设计引物,对其进行PCR扩增,扩增产物测序,测序结果与GenBank比对,确定ESBLs的基因型.结果 (1)澳门与沈阳地区产ESBLs大肠埃希菌阳性检出率分别为30.1%(62/209)、54.O%(81/150).(2)57株(90.5%)澳门产ESBLs的大肠埃希菌基因型为CTX-M,以CTX-M-14为主、占76.2%,并同时发现CTX-M-9、CTX-M-22、CTX-M-27、CTX-M-15、CTX-M-24型,分别占4.8%、3.2%、1.6%、1.6%、3.2%;6株未分型.(3)74株(91.4%)沈阳地区产ESBLs的大肠埃希菌基因型为CTX-M,以CTX-M-14为主、占65.4%,发现CTX-M-3、CTX.M-24、CTX-M-22、CTX-M-15、CTX-M-9、CTX-M-28型,分别占13.6%、4.9%、2.5%、2.5%、1.2%、1.2%;7株未分型.结论 澳门产ESBLs大肠埃希菌基因型为CTX-M型,以CTX-M-14为主,同时存在CTX-M-15、CTX-M-22、CTX-M-24、CTX-M-9、CTX-M-27型,基因型与沈阳地区菌株基本相同,未发现CTX-M-3、CTX-M-28型.沈阳地区菌株未发现CTX-M-27型.     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌儿童分离株的耐药性和基因型检测

目的 研究我院临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型与耐药表型的关系.方法 收集我院2007年1-3月临床分离的92株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用K-B纸片法作药敏试验,酶抑制剂增强法表型确证,应用PCR、产物测序,确定ESBLs基因型.结果 我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率分别为50.6%和57.3%;产ESBLs菌株对亚胺培南100%敏感,产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和环丙沙星的耐药率分别为88.2%、14.7%、5.9%和29.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌则分别为75.6%、35.6%、28.9%和5.2%.92株产ESBLs菌株中,共检出7种β内酰胺酶基因型,TEM型酶的检出率为70.7%,均为TEM-1广谱酶, CTX型、SHV型ESBLs的检出率分别为66.3%和44.6%,其中CTX-M-14阳性率为48.1%;SHV基因型都在肺炎克雷伯菌中检出.结论 我院临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重,且其耐药表型也不尽相同.CTX-M型是我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型.     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌分布与耐药性分析

目的：了解我院产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的分布和耐药性，为临床合理选用抗生素提供依据。方法：根据ESBLs已知基因序列设计CTX-M通用引物，对36株临床分离产ESBLs大肠埃希菌进行PCR扩增。采用琼脂平皿稀释法进行最低抑菌浓度（MIC）测定。结果：31株大肠埃希菌产CTX-M酶，占产ESBLs菌株的86％。CTX-M-1组13株阳性，CTX-M-9组24株阳性。其中6株二者共同阳性；CTX-M-2组、CTX-M-8组和CTX-M-25组均为0株阳性。产CTX-M酶大肠埃希菌对碳青霉烯类和哌拉西林／他唑巴坦普遍敏感，对哌拉西林和喹诺酮类完全耐药，对头孢曲松和头孢噻肟MIC结果显示耐药明显，对其他三代、四代头孢菌素及头孢西丁耐药率介于45．16％～64．52％之间。结论：我院大部分产ESBLs大肠埃希菌产CTX-M酶，产CTX-M酶大肠埃希菌对头孢曲松和头孢噻肟耐药明显。     

产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌耐药特征及基因分型

目的了解山东中医药大学附属医院分离的大肠埃希菌中产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药特征及CTX-M型、TEM型、SHV型基因流行状况。方法采用双纸片法检测ESBLs,聚合酶链反应(PCR)检测CTX-M酶、TEM酶、SHV酶基因型DNA序列分析确认TEM及SHV基因亚型,K-B法进行药敏试验。结果 83株大肠埃希菌中45株ESBLs表型确证试验阳性,检出率为54.2%,PCR扩增结果显示83株大肠埃希菌中CTX-M型基因扩增阳性44株(53.0%),TEM型阳性32株(38.6%),SHV型阳性1株(1.2%),TEM型和SHV型测序结果分别为TEM-1亚型和SHV-1亚型。产ESBLs大肠埃希菌,除对亚胺培南、美罗培南未见耐药外,对阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦和头孢西丁耐药性较低,耐药率分别为13.3%、17.8%和31.1%,产ESBLs大肠埃希菌,除了对头孢菌素、单环β内酰胺类抗生素具有很高耐药性外,对甲氧苄啶-磺胺甲噁唑、左氧氟沙星、环丙沙星和庆大霉素具有较高耐药性,耐药率均高于60%。结论该院产ESBLs大肠埃希菌基因型以CTX-M型为主。产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药趋势。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药机制研究

目的了解贵阳地区医院内检出的大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药性及基因型,为指导临床合理用药提供依据。方法由贵州医科大学附属白云医院ATB系统完成菌株鉴定及药敏试验检测,采用纸片扩散法进行ESBLs表型确证试验,采用碱裂解法提取产ESBLs菌的质粒DNA,采用聚合酶链反应扩增TEM型、SHV型、CTX-M-1组和CTX-M-9组基因。结果产ESBLs大肠埃希菌阳性率为66.7%(279/418);对阿米卡星耐药率为4.3%;对青霉素类,头孢菌素第1、2代药物耐药率均为100.0%;庆大霉素、妥布霉素、喹诺酮类、磺胺类药物耐药率在60.6%~84.9%;对亚胺培南和美罗培南仍保持较高的敏感度。116株产ESBLs大肠埃希菌基因型有113株(97.4%)为CTX-M型,其中CTX-M-9亚型68株(58.6%),CTX-M-1亚型67株(57.8%);TEM型有86株(74.1%);未检出SHV型。结论产ESBLs阳性的大肠埃希菌的耐药率明显高于产ESBLs阴性的大肠埃希菌,且具有多重耐药性。贵州医科大学附属白云医院产ESBLs大肠埃希菌的基因型以CTX-M型为主;碳青霉烯类为最敏感的药物,但本研究中发现亚胺培南耐药菌株,需引起临床重视。     

广州地区产CTX-M型超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的研究

目的 研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征.方法 收集2007-2008年广州地区9家医院临床分离产ESBLs的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌,通过PCR检测ESBLs分子表型;通过接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型ESBLs的基因环境,肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性.结果 67.3%(243/361)的ESBLs产生株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M-9群各占46.9%(114/243)和53.1%(129/243),未发现其他CTX-M亚群.CTX-M-14和CTXM-15是最常见的ESBLs基因型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率分别35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在这两种菌的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55、CTX-M-19和CTX-M-27.采用ERIC-PER分析CTX-M-15产生株的同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型.67.6%(25/37)和32.4%(12/37)bla相似文献   

产CTX-M-14和CTX-M-15大肠埃希菌毒力基因分布差异

目的分析尿培养产CTX-M-14和产CTX-M-15大肠埃希菌毒力基因分布的差异。方法收集南京鼓楼医院2012年临床尿培养分离大肠埃希菌162株,双环协同试验检测超广谱β内酰胺酶(ESBLs);采用PCR和DNA测序对blaCTX-M编码基因及毒力基因iut A、omp T、fyu A、fde C、fim H、tra T、cva C、pap、kps MT、PAIs、usp、aer、hly A、cnf和chu A进行分析;用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析产CTX-M-14和产CTX-M-15大肠埃希菌遗传相关性;将细菌分为产CTX-M-14和产CTX-M-15大肠埃希菌2组,统计学分析毒力基因在这2组之间的分布差异。结果 162株大肠埃希菌中,126株产ESBLs,91株产CTX-M酶,其中bla_(CTX-M-14)和bla_(CTX-M-15)编码基因分别检出49株和36株。PFGE分析显示,产CTX-M酶大肠埃希菌具有遗传多样性。毒力基因iut A、fyu A、fim H、tra T及chu A在2组中的检出率均较高(65%);pap、kps MT、omp T在2组中的检出率约为20%~60%;cva C和PAIs在2组中的检出率较低(20%);毒力基因fed C在产CTX-M-14大肠埃希菌组中分布高于产CTX-M-15大肠埃希菌组(P=0.017);未检出aer、hly A和cnf毒力基因。结论在尿培养大肠埃希菌中,产CTX-M-14菌株fed C毒力基因分布较产CTX-M-15菌株更高。