脂多糖增强芬太尼诱导离体兔肺动脉舒张反应

目的 探讨阿片受体激动剂芬太尼对正常及内毒素休克时肺动脉血管反应性的影响,从而指导临床用药.方法 应用血管环张力检测技术,观察芬太尼对正常及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)孵育的肺动脉血管环反应性的影响.结果 在正常肺动脉组,芬太尼终浓度(0.1、1、10、100 μmol/L)使去氧肾上腺素(Phenylephedrine,PE)预收缩的肺动脉舒张(EC50=1.699);在LPS孵育的肺动脉组,芬太尼终浓度(1、10、100 μmol/L)使PE预收缩的肺动脉舒张(EC50=2.496),芬太尼终浓度(0.1 μmol/L)对肺动脉并没有影响;LPS组与正常组对照比较,LPS组芬太尼使肺动脉舒张反应Emax增加,在小剂量芬太尼终浓度(0.1、1 μmol/L)时肺动脉的敏感度下降,在大剂量浓度(10、100 μmol/L)时却使其敏感度增加.结论 LPS可以增强芬太尼对肺动脉的最大舒张反应;并且LPS可使小剂量的芬太尼对肺动脉的敏感度下降,大剂量的芬太尼敏感度增加;LPS还可使芬太尼对肺动脉舒张反应的EC50增大.     

益气养阴活血法对2型糖尿病大鼠肝脏组织HO-1mRNA表达的影响

目的:观察具有益气养阴活血功效的丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病大鼠肝脏血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA表达的干预作用。方法:观察治疗前后各组大鼠一般情况,检测FPG、2hPG、FINS,计算胰岛素敏感指数(ISI);取肝脏组织用于基因检测,采用RT-PCR方法检测HO-1mRNA的表达水平。结果:模型组、盐酸吡格列酮组及丹蛭降糖胶囊组大鼠造模后空腹血糖水平较空白组增加(P0.01);丹蛭降糖胶囊组大鼠HO-1mRNA表达高于盐酸吡格列酮组及模型组(P0.01)。结论:丹蛭降糖胶囊能显著改善2型糖尿病血管内皮损伤,提示其机制可能与改善胰岛素抵抗和上调HO-1mRNA表达等有关。     

参麦注射液对大鼠离体胸主动脉血管收缩反应的影响

目的了解参麦注射液对离体大鼠胸主动脉血管环收缩反应的影响及作用机制.方法采用离体血管灌流方法,观察参麦注射液对血管环的直接作用;对苯肾上腺素(PE)或氯化钾(KCL)所引发收缩作用的影响;对内钙释放和外钙内流所引发收缩作用的影响.结果参麦注射液对血管环无明显的直接作用;对PE和KCL引发的收缩均有明显的抑制(与对照组比较P均＜0.05-0.01);对内钙释放和外钙内流所引发收缩作用均有明显的抑制(与对照组比较P均＜0.01).结论参麦注射液能抑制PE和KCL对血管环所引起的收缩作用,其作用机制是通过抑制细胞外钙流入细胞内和抑制细胞内钙的释放而抑制血管的收缩.     

多巴胺对内毒素孵育兔肺体动脉血管环张力的影响

目的 比较不同浓度多巴胺对大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)孵育的离体兔肺动脉、体动脉血管张力的影响.方法 选择6只雄性大耳白兔,制备离体肺动脉环和体动脉环各36个.把36个肺动脉环随机分为6组,测试不同浓度多巴胺(4×10-5、8×10-5、16×10-5 μmol/L)对正常肺动脉张力的影响(分别为PN-DOPA4、PN-DOPA8、PN-DOPA16组)及对LPS孵育后肺动脉张力的影响(分别为PL-DOPA4、PL-DOPA8、PL-DOPA16组).体动脉分组与肺动脉分组方法相同,包括正常组(SN-DOPA4、SN-DOPA8、SN-DOPA16)及内毒素组(SL-DOPA4、SL-DOPA8、SL-DOPA16).结果 ①多巴胺对PN-DOPA4及SN-DOPA4组中的血管环均有一定的舒张作用;对PN-DOPA8、PN-DOPA16、SN-DOPA8和SN-DOPA16组的血管环均有收缩作用,随着浓度的加大而升高.②LPS孵育后,多巴胺对PL-DOPA4和SL-DOPA4组血管环舒张作用消失,变为收缩[(22.60±6.68)%比-(2.25±0.58)%,(3.80±0.52)%比-(3.65±0.75)%,P<0.05和P<0.01],对PL-DOPA8组收缩幅度较PN-DOPA8组减少(14.52±0.59)%(P<0.05);对SL-DOPA8组收缩幅度较SN-DOPA8组增高(25.90±1.75)%(P<0.05);对PL-DOPA16组和SL-DOPA16组的张力无显著影响.③LPS孵育后,DOPA4组的肺动脉张力变化(PL/PN)较体动脉张力变化(SL/SN)明显(-10.90±5.06比-1.00±0.24,P<0.05);在DOPA8组SL/SN较明显(1.80±0.35比0.48±0.17,P<0.01).结论 低浓度的多巴胺对正常肺动脉及体动脉血管环有舒张作用;在LPS孵育后,低浓度的多巴胺对肺动脉及体动脉环的作用由舒张变为收缩,且对肺动脉环的张力变化影响最大;不同浓度的多巴胺对LPS孵育后的肺动脉及体动脉血管环均有收缩作用.     

正铁血红素改善链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肝损伤

目的 探讨血红素加氧酶1(HO-1)诱导剂正铁血红素和抑制剂锌原卟啉对糖尿病大鼠肝功能的影响及相关机制.方法 以链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病SD大鼠模型,大鼠分为对照组、糖尿病组、正铁血红素组和锌原卟啉组.应用试剂盒检测各组大鼠血清游离脂肪酸(FFA)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,肝组织匀浆总抗氧化能力(TAOC)和丙二醛(MDA);逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝脏组织白细胞介素1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平.结果 与对照组比较,糖尿病组大鼠血清AST、ALT、肝组织MDA、IL-1、TNF-α mRNA水平均明显增高(P＜0.01或＜0.05),分别是(91.59±12.38) U/L vs (50.19±12.65)U/L、(45.64±9.68) U/L vs (15.55±7.79) U/L,(0.81±0.22) nmol/mg vs (0.50±0.08) nmol/mg、12.32±3.51vs 7.02±1.99、22.24±4.48 vs 10.54±2.36;TAOC下降(P＜0.05);与糖尿病组大鼠比较,正铁血红素组大鼠ALT、TNF-α表达水平明显下降,TAOC增高(P＜0.05或＜0.01);锌原卟啉组大鼠较糖尿病组大鼠FFA、ALT、AST、MDA均有明显上升(P＜0.05或＜0.01),而TAOC下降(P＜0.05).结论 HO-1诱导剂正铁血红素可改善糖尿病大鼠肝损伤,而其抑制剂则加重肝脏损伤.     

硫代硫酸钠对高磷诱导的残肾大鼠血管钙化早期干预作用的观察

目的 探讨硫代硫酸钠对高磷诱导的残肾大鼠血管钙化的早期干预作用.方法 5/6肾切除大鼠,术后给予高磷或正常磷饮食16周,以高磷饮食制作血管钙化模型.分为5组:假手术+正常磷组(SNP,n=7),假手术+高磷组(SHP,n=7),残肾+正常磷组(NNP,n=7),残肾+高磷组(NHP,n=7),残肾+高磷+硫代硫酸钠治疗组(THP,n=7),治疗组以硫代硫酸钠腹腔注射16周.收集尿量检测24h尿蛋白,取血检测血清钙、磷、肌酐、尿素氮.取胸主动脉,HE和yon kossa染色检测血管钙化,免疫组化分析大鼠胸主动脉Ⅲ型钠磷转运体亚型(Pit-1)、核心结合因子(Cbf α 1)的表达.结果 各组大鼠尿蛋白、尿素氮、肌酐、尿酸和血磷浓度均有明显差别(F值分别为19.057、43.527、26.688、40.324和7.676,P值均＜0.01),NHP组较其他各组明显增高(P＜0.05).HE和von kossa染色显示,NHP组大鼠呈现明显钙化,SNP和SHP组未见明显变化,MP和THP组见散在的钙化点.免疫组化显示,主动脉Pit-1和Cbf α1表达各组有明显差异(F值为8.259和5.91,P＜0.01),其中NHP组表达明显增高(P＜0.01),Pit-1和Cbf α 1阳性面积比与血磷相关性分析显示分别为:r=0.344,P＜0.05和r=0.376,P＜0.05,Pit-1、Cbfα1表达与血磷呈正相关.THP组血清肌酐、尿素氮、尿酸、血磷和尿蛋白均较NHP组明显下降(P＜0.01或＜0.05),其主动脉Pit-1和Cbfα1表达明显减少(P＜0.05),主动脉钙化部分减轻. 结论 高磷饮食喂食残肾大鼠,可成功制作血管钙化模型,硫代硫酸钠早期干预,可明显改善其肾功能,降低血磷,下调动脉Pit-1和Cbf α1表达,减轻血管钙化.     

高尿酸血症大鼠血清尿酸与C反应蛋白关系研究

目的 探讨高尿酸血症大鼠血清尿酸和C反应蛋白的关系.方法 采用氧嗪酸钾联合酵母膏建立高尿酸血症大鼠模型,24只大鼠随机分为对照组与模型组各12只,分别于第0,2,4,6周检测2组大鼠血清尿酸及C反应蛋白水平,于6周末处死大鼠,观察2组大鼠主动脉内皮组织病理形态学与免疫组织化学染色情况.结果 模型组血清C反应蛋白和尿酸水平明显高于对照组(P＜0.01);血清尿酸与C反应蛋白呈明显正相关(r=0.830 4,P＜0.01);模型组主动脉内皮明显肿胀,主动脉C反应蛋白表达较对照组增强(P＜0.01).结论 高尿酸血症大鼠存在炎症反应,可损伤主动脉内皮细胞功能,血尿酸与C反应蛋白表达呈正相关.     

重组人血管内皮抑制素注射液对低O2高CO2肺动脉高压大鼠IL-6、eNOS、VEGF的影响

目的:探讨重组人血管内皮抑制素注射液(恩度)对低O2高CO2肺动脉高压大鼠IL-6、eNOS、VEGF的影响.方法:用慢性低O2高CO2肺动脉高压大鼠模型,18只SD大鼠随机分为常氧正常组(NC组)、低O2高CO24周组(4WH组)和低O2高CO24周+恩度干预组(End组).实时RT-PCR检测各组大鼠左下肺VEGF mRNA和eNOS mRNA表达,ELISA双抗体夹心法测定各组大鼠左下肺组织匀浆VEGF和IL-6含量.结果:4WH组大鼠平均肺动脉压力、右心肥厚指数(RV/LV+S)高于NC、End组(P＜0.01);光镜下4WH组肺细小动脉血管壁平滑肌层增生明显,电镜下内皮细胞向管腔突起,胶原纤维增多,平滑肌细胞增生,End组血管壁改变明显减轻.4WH组大鼠肺动脉VEGFmRNA表达高于End组(P＜0.01),而eNOSmRNA表达则相反(P＜0.01);End组肺组织匀浆VEGF和血清IL-6含量低于4WH组(P＜0.05).结论:恩度能降低慢性低O2高CO2大鼠肺动脉压力,其机制与降低肺组织VEGF mRNA表达、上调eNOS mRNA蛋白表达以及降低IL-6等多种途径相关.     

乙酰半胱氨酸对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注后低氧诱导因子-1α和血红素加氧酶-1基因表达的影响

目的:观察乙酰半胱氨酸(NAC)对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)后低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA表达变化的影响.方法:用链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病大鼠模型,动物分为正常假手术组(Cs组)、正常I/R组(CI/R组)、正常I/R+NAC组(CN组)、糖尿病假手术组(Ds组)、糖尿病I/R组(DI/R组)、糖尿病I/R+NAC组(DN组),每组12只,共72只.检测各组心肌梗死范围(IS/AAR)、HI-1α和HO-1 mRNA表达.结果:Cs组检测不到HIF-1α和HO-1 mRNA表达,Ds组检测到少量HIF-1α和HO-1 mRNA表达;DI/R组HIF-1α和HO-1 mRNA表达低于CI/R组(P＜0.05),IS/AAR大于CI/R组(P＜0.05);DN组HIF-1α和HO-1 mRNA表达高于DI/R组,但低于CN组(P＜0.05);IS/AAR小于DI/RR组,但大于CN组(P＜0.05).结论:NAC可部分恢复糖尿病大鼠心肌I/R后HIF-1α和HO-1 mRNA表达,减小心梗面积,有一定的治疗效果.     

外源性过氧亚硝酸盐对大鼠血管收缩功能的影响的研究

目的观察外源性过氧亚硝酸盐（ONOO-）对SD大鼠胸主动脉血管收缩功能的影响。方法雄性SD大鼠40只,随机分为4组：对照组：等量KH溶液孵育;ONOO-孵育组：ONOO-（5斗moL／L,5min）孵育;分解的ONOO-孵育组：分解的ONOO-（5μmoL／L,5min）孵育;ONOO-＋ONOO-清除剂-尿酸盐孵育组：ONOO-（5μmoL／L,5min）孵育5min后,再加入尿酸盐（100μL／ml,30min）孵育。以去除内皮的大鼠胸主动脉作为实验标本。分别检测各组血管收缩功能、Rho蛋白A／Rho激酶（RhoA／ROCK）表达水平和硝基酪氨酸表达水平的差异。结果与其他三组相比,ONOO-孵育组血管的收缩反应显著增强;与对照组相比,从10-5moL／L苯肾上腺素（PE）浓度开始,分解的ON00-孵育组血管的收缩反应显著增强;与对照组相比,ONOO-＋尿酸盐孵育组血管的收缩反应无显著差异;与ONOO-＋尿酸盐孵育组相比,分解的ONOO-孵育组血管的收缩反应显著增强。同时,ONOO-孵育组血管ROCK蛋白表达水平显著高于其他三组。ONOO-孵育组血管中硝基酪氨酸的表达水平显著高于其他三组。结论氧化应激参与大鼠大动脉血管收缩反应的调节;同时,血管ROCK蛋白表达水平增加。     

内毒素性急性肺损伤大鼠肺HO-1的表达及其意义

目的观察内毒素(LPS)性急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)的表达,探讨其意义。方法18只SD大鼠随机均分为ALI、锌原卟啉(ZnPP)预处理和正常对照3组,尾静脉注射给药。ALI组注入LPS 5 mg/kg,对照组注入生理盐水,ZnPP预处理组注入ZnPP 10μmol/kg 10 min后再注入LPS 5 mg/kg,各组注入液体总量相同。3 h后腹主动脉放血处死大鼠,生理盐水肺灌洗,取左肺制作组织匀浆,TRIZOL法提取总RNA后,用半定量逆转录聚合酶链反应(SqRT-PCR)测定HO-1 mRNA;另取右下肺制作病理切片,光镜观察并盲法评分比较肺组织学变化。结果静脉注入LPS后大鼠肺组织HO-1 mRNA的表达明显上调(P<0.05),肺损伤严重,评分显著增加;ZnPP预处理组ALI大鼠肺组织HO-1 mRNA的表达明显受抑,肺损伤更严重,评分更高(P<0.05);直线相关分析显示,HO-1 mRNA的受抑程度与损伤评分呈显著负相关(P<0.05)。结论内毒素性ALI肺组织表达上调的HO-1对肺损伤有一定的保护作用。     

血红素氧合酶-1在百草枯中毒鼠肺组织中的表达及三七总皂甙的保护作用

目的探讨急性百草枯(PQ)中毒鼠肺组织病理损伤和肺组织血红素氧合酶-1(HO-1)的表达及三七总皂甙(PNS)的保护作用。方法 150只SD雄性鼠分为正常对照组(C组)30只、PQ中毒组(PQ组)60只及PNS组60只。PQ组和PNS组一次性灌胃PQ 25 mg/kg染毒,C组给予等体积生理盐水灌胃。其中PNS组于染毒前15 min以PNS 50 mg/kg阴茎静脉注射保护,以后1次/d给药直至处死前;PQ组、C组分别在同时间点给予等体积生理盐水。观察各组大鼠在中毒后6、12 h,1、3、5、7 d肺组织病理改变,采用蛋白质印迹法分析肺组织HO-1蛋白表达和反转录-聚合酶链反应方法测定鼠肺组织HO-1 mRNA的表达。结果 C组HO-1蛋白和HO-1 mRNA绝大多数标本有弱表达,个别标本不表达;与C组相比PQ组及PNS组HO-1蛋白和HO-1 mRNA表达增强,差异有统计学意义(P<0.05);PQ组HO-1蛋白和HO-1 mRNA的表达在1 d达高峰之后下降,第3天基本恢复到C组水平;PNS组与PQ组相似,但在6 h、12 h、1 d及3 d高于PQ组,差异有统计学意义(P<0.05),至第5天和第7天二者相比差异无统计学意义(P<0.05)。PQ组肺组织病理损伤评分在6、12 h,1、3、5、7 d各亚组均高于PNS相应组,差异有统计学意义(P<0.05),C组肺组织病理大致正常,与PQ组及PNS组相比,差异有统计学意义(P<0.001)。结论 HO-1参与PQ中毒所致急性肺损伤,PNS对PQ中毒所致急性肺损伤有保护作用。     

失血性休克大鼠肺细胞HO-1mRNA表达和凋亡的相关性研究

目的检测和分析失血性休克大鼠肺细胞HO-1 mRNA表达及凋亡的发生情况,从而探讨其临床意义。方法本研究将14只SD大鼠制成重度失血性休克模型,使用SYBR Green I实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术和流式细胞仪FITC-Annexin V/PI荧光染色法,定量检测各组大鼠肺细胞HO-1 mRNA表达及细胞凋亡的发生情况,并加以比较和分析。结果经过失血性休克和急救后,大鼠的肺细胞均存在较高的细胞凋亡率,达（4.0±1.4）%,也存在一定程度的HO-1 mRNA表达,具体表达强度为：（中位数：3.7 869,4分位数间距：0.1 379-5.7 169）表达指数。大鼠肺细胞的HO-1 mRNA表达和凋亡之间存在着显著的负相关性（r=-0.653,P=0.011）。结论在该重度失血性休克大鼠模型,肺细胞HO-1 mRNA高表达可能有助于减少失血性休克/急救后的肺细胞凋亡的发生率,从而减少肺损伤。     

纳洛酮对肺再灌注损伤诱导细胞凋亡的影响

目的 研究纳洛酮对大鼠肺缺血-再灌注(ischemia/reperfusion injury,I/R)损伤中细胞凋亡及血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响.方法 实验于南京医科大学附属南京第一医院动物实验中心进行,雄性SD大鼠42只,随机(随机数字法)均分为对照组(Sh组)、缺血-再灌注组(IR组)、纳洛酮组(Na组).I/R组钳夹肺门远心端,阻断肺门(以肺无舒缩为阻断标准),建立在体肺I/R损伤模型.Na组在该基础上予纳洛酮1 mg·kg-1腹腔注射,各组分别于3,6 h点取标本,用Annex-in-V-PI双染法检测肺组织凋亡细胞并计算凋亡率,测算肺湿于比(W/D),应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HO-1的mRNA表达,电镜观察肺超微结构改变.采用Stata 9.0统计软件行统计学分析.结果 IR组与Sh组相比,3,6 h点肺组织凋亡率明显增加,W/D显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01);IR组3,6 h点,HO-1的mRNA表达与肺组织凋亡率、W/D呈显著负相关(P<0.01).与IR组相比,Na组3,6 h点肺组织凋亡率明显减少,W/D显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01).肺组织HO-1表达显著增加(P<0.01),肺组织超微结构损害明显减轻.结论 在肺1/R损伤早期,纳洛酮可以诱导HO-1的mRNA表达大量表达从而抑制细胞凋亡的发生,起到保护作用.     

辛伐他汀对动脉粥样硬化大鼠主动脉血红素氧合酶-1表达的影响

目的探讨辛伐他汀对动脉粥样硬化（AS）大鼠主动脉血红素氧合酶1（HO-1）表达的影响。方法取健康SD大鼠24只，随机分为3组；对照组、AS模型组和治疗组，每组8只。AS模型组和治疗组在实验开始时，一次性腹腔注射维生素D3 60万U／kg，以后喂食高脂饮食；对照组喂食普通饲料。4周后治疗组灌胃给予辛伐他汀10mg／（kg·d）治疗。干预治疗4周后处死大鼠，取主动脉观察形态及病理学变化，同时采用免疫组织化学方法检测大鼠主动脉HO-1的表达情况，并应用人工计数分析法对免疫组化结果进行定量分析。结果（1）AS模型组主动脉出现典型AS斑块，其主动脉HO-1的表达水平显著高于对照组（P〈0.001）。（2）治疗组的主动脉粥样硬化程度与AS模型组比较明显减轻，但其HO-1的表达水平显著高于AS模型组（P〈0.001）。结论（1）辛伐他汀能够上调HO-1在AS大鼠主动脉的表达水平。（2）辛伐他汀可能通过上调HO-1的表达而发挥抗AS作用。     

缺氧诱导因子-1α对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其信号转导

目的 观察缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(IRI)的保护作用及蛋白激酶C(PKC)信号转导作用.方法 采用结扎冠状动脉左前降支30 min、再灌注180 min的方法建立IRI动物模型.将32只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假手术组、IRI组、缺血预处理(IPC)组、IPC加PKC抑制剂组(IPC+Ⅰ组,IPC前静脉注射PKC抑制剂白屈菜季铵碱5 mg/kg),每组8只.再灌注180 min后取出心脏,测定HIF-1α、血红素氧合酶1(HO-1)的mRNA和蛋白以及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达;心内取血测定白细胞介素-8(IL-8)和髓过氧化物酶(MPO)水平.结果 与假手术组比较,IRI组心肌HIF-1α、HO-1的mRNA和蛋白及caspase-3蛋白表达均明显增多(HIF-1α mRNA:0.849±0.032比0.356±0.022,HIF-1α蛋白:0.762±0.042比0.324±0.016,HO-1 mRNA:0.862±0.045比0.332±0.012,HO-1蛋白:0.792±0.044比0.335±0.031,caspase-3蛋白:0.371±0.015比0.061±0.012,均P＜0.01),血IL-8、MPO显著升高[IL-8:(812±26)ng/L比(72±13)ng/L,MPO:(78.7±2.9)kU/L比(13.3±1.5)kU/L,均P＜0.01].与IRI组比较,IPC组HIF-1α、HO-1的mRNA和蛋白表达(HIF-1α mRNA,1.412±0.039,HIF-1α蛋白:1.362±0.045,HO-1 mRNA:1.523±0.038,HO-1蛋白:1.420±0.041)明显增多,caspase-3蛋白表达(0.129±0.019)明显降低(均P＜0.01),血IL-8[(432±59)ng/L]和MPO水平[(43.2±5.9)kU/L)明显降低(均P＜0.01).IPC+Ⅰ组各指标与IRI组无明显差异.结论 HIF-1α对心肌IRI具有重要保护作用,HIF-1α的表达是依赖PKC激活的,PKC是HIF-1α表达的重要信号转导通路.     

诱导型一氧化氮合酶和血红素氧合酶-1在百草枯中毒大鼠肾脏中的表达

目的 观察百草枯中毒大鼠肾组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和血红素氧合酶-1(HO-1)的表达,探讨其可能的病理生理机制.方法 SD大鼠84只随机分为空白对照组(A组)42只和染毒组(B组)42只.B组百草枯(25 mg/kg)、A组等量盐水腹腔注射.观察2组肾组织病理学变化及iNOS、HO-1表达,并检测HO-1 mRNA.结果 ①A组组织结构清晰.未见充血、水肿及空泡变性等病理变化;B组组织结构清晰度下降,染毒3 h即可见充血、水肿及空泡变性等病理变化,1 d达顶峰,其后缓解趋势不明显.②iNOS:A组多不表达;B组染毒后3 h在皮质部肾小管上皮细胞及肾小球内皮细胞的胞质中出现表达,随时间延长明显增强,1 d达高峰,其后维持较强表达.③HO-1与HO-1 mRNA:A组多不表达;B组染毒3 h在皮质部肾d、管上皮细胞的胞膜及胞质HO-1呈阳性表达,免疫组织化学评分(IHS)升高,HO-1 mRNA的表达增强,与A组相比差异有统计学意义(P<0.05),1 d达顶峰,之后减弱,5 d仍有阳性表达,但与A组相比,IHS差异无统计学意义(P>0.05).结论 iNOS和HO-1参与百草枯中毒肾损伤的发病过程,但其作用方式、调节途径等尚需进一步研究.     

血红素氧合酶-1修饰骨髓间充质干细胞对大鼠梗死心肌炎症细胞因子及心室重构的影响

目的 探讨移植血红素氧合酶-1(Heme Oxygenase,HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(mes-enchymal stem cells,MSCs)对大鼠梗死心肌炎症细胞因子及心室重构的影响.方法 取大鼠骨髓,扩增培养MSCs;HO-1或GFP腺病毒转染、DAPI标记MSCs.结扎大鼠左前降支制造心肌梗死模型1 h后,分别将HO-1-MSCe、GFP-MSCs、PBS注射到大鼠心脏梗死区边缘,移植后第4天,Western Blot检测HO-1蛋白在梗死区边缘的表达,ELISA检测VEGF、bFGF、HGF的表达,RT-PCR检测炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA的表达.超声心动图检测大鼠心功能变化.移植4周后,梗死区心肌HE,Masson染色检测左室重构.结果 HO-1-MSCs移植组与GFP-MSCs、PBS移植组相比,HO-1蛋白在梗死区边缘稳定高效表达;细胞因子VEGF、bFGF、HGF表达增加(P<0.05);炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达减少(P<0.05),而IL-10 mRNA表达增加(P<0.05);左室舒张末期和收缩末期内径缩短,左室前壁增厚,心室腔减小,梗死区血管密度上调,胶原形成明显减少.结论 HO-1-MSCS分泌多种生物活性细胞因子,协同HO-1蛋白改善炎症微环境,促进血管生成,减少胶原形成,从而延缓梗死区心窒重构,有效改善心功能.