高效液相色谱法同时测定人血浆中舍曲林、喹硫平浓度

目的:建立同时测定人血浆中舍曲林、喹硫平浓度的高效液相色谱法。方法:以Diamonsil TM C18反相柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为30 mmol.L-1醋酸铵-乙腈(24∶76);流速1.0mL.min-1;柱温40°C;检测波长210 nm。以醋酸乙酯与二氯甲烷(80∶20)为提取剂。结果:舍曲林在20.0～480.0μg.L-1、喹硫平在25.0～1 000.0μg.L-1范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系;舍曲林、喹硫平的低、中、高3种浓度相对平均回收率大于95%,提取回收率大于70%。日内、日间RSD均低于10%(n=5)。结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC-荧光法同时测定人血浆中3种抗抑郁药的浓度

目的:建立以高效液相色谱-荧光法同时测定人血浆中文拉法辛、氟西汀、舍曲林浓度的方法。方法:以异丙嗪为内标,样品碱化后经液-液萃取,用Phenomenex-C18反相色谱柱进行分离,流动相为乙腈∶磷酸盐缓冲液(50mmol·L-1磷酸二氢钠用磷酸调节pH值至2.5)=35∶65,流速为1.2mL.min-1,柱温为40℃。荧光检测文拉法辛,激发波长为276nm,发射波长为598nm;紫外检测氟西汀和舍曲林,检测波长为200nm。结果:文拉法辛、氟西汀、舍曲林血药浓度分别在5～1000μg·L-1(r=0.9980)、40～1000μg·L-1(r=0.9990)、20～800μg·L-1(r=0.9980)范围内线性关系良好;日内、日间RSD均<10%,提取回收率均>70%,方法回收率均>90%。结论:本法简便、快速、灵敏、准确,可用于文拉法辛、氟西汀、舍曲林的治疗药物监测、中毒分析及药动学研究。     

RP-HPLC法测定全血、血浆和红细胞中氯氮平及2种主要代谢物

目的建立一种测定全血、血浆和红细胞中氯氮平(CZP)、N-去甲基氯氮平(N-CZP)和氯氮平N-氧化物(CZP-NO)浓度的RP-HPLC法.方法标本用乙酸乙酯提取后再经0.1mol·L-1盐酸反提取,以利培酮为内标,流动相为甲醇-乙腈-水(16.0∶36.5∶47.5),色谱柱为Inertsil-ODS-3柱,柱温为40℃,检测波长为254nm,流速为0.9mL*min-1.结果全血、血浆和红细胞中CZP和N-CZP的最低检测浓度均为7μg*L-1;血浆中CZP-NO的最低检测浓度为13μg*L-1,全血和红细胞中为14μg*L-1.全血、血浆和红细胞中CZP和N-CZP的绝对回收率均为85%～95%,血浆中CZP-NO的绝对回收率>82%,全血和红细胞中CZP-NO的绝对回收率约为70%.日内和日间RSD均小于7%.结论本法操作简便,灵敏度高,重复性好,适合于临床检测.     

HPLC法同时测定人血浆中6种抗抑郁药的浓度

目的:建立一种快速、灵敏的同时测定人血浆中6种抗抑郁药浓度的高效液相色谱法。方法:以异丙嗪为内标,样品碱化后液-液萃取,用Phenomenex-C18反相色谱柱进行分离,以乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钠溶液(用磷酸调节pH=2.5)为流动相,采用梯度洗脱;流速为1.2mL.min-1,柱温为40℃;荧光检测文拉法辛,激发波长为276nm,发射波长为598nm;紫外检测多塞平、帕罗西汀、舍曲林、氟西汀和阿米替林,检测波长为200nm。结果:文拉法辛、多塞平、帕罗西汀、舍曲林、氟西汀、阿米替林血药浓度分别在5～1000、4～200、20～800、20～800、40～1000、10～400μg.L-1范围内线性关系良好,r均≥0.990;日内、日间RSD均<15%,提取回收率均>60%,方法回收率均>90%。结论:本方法简便、快速、经济、准确、灵敏,可用于血药浓度的临床监测、中毒药物分析及药动学研究。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中氯氮平、齐拉西酮浓度

目的:建立同时测定人血浆中氯氮平、齐拉西酮浓度的高效液相色谱方法。方法:以DiamonsilTMC18柱(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为30mmol.L-1醋酸铵-甲醇(22∶78),流速0.8mL.min-1,柱温40℃,检测波长254nm。以醋酸乙酯与二氯甲烷(80∶20)为提取剂。结果:氯氮平在25.0~1 000.0μg.L-1、齐拉西酮在20.0~640.0μg.L-1范围内,峰面积与其浓度呈良好线性关系;氯氮平、齐拉西酮的高、中、低3种浓度相对平均回收率分别为96.86%,98.97%,100.35%和97.12%,98.23%,101.29%,提取回收率分别为73.81%,76.39%,78.57%和72.66%,75.31%,79.06%;日内、日间RSD均低于10%(n=5)。氯氮平与齐拉西酮的检测限为10.0μg.L-1;氯氮平曲线方程:Y=51.793X+1.57,r=0.999 3(n=7);齐拉西酮曲线方程:Y=66.871X+1.85,r=0.998 9(n=7)。结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中氯氮平浓度

目的建立测定人血浆中氯氮平浓度的HPLC法.方法血浆经碱化后,用OASIS固相萃取小柱提取血浆中氯氮平,采用反相高效液相色谱法二极管阵列检测器检测.色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),保护柱为WatersNova-Pack C18柱,流动相为0.5%三乙胺溶液(磷酸调pH=3.0)-乙腈(7228,V/V),流速为1 mL·min-1,检测波长(λ)215 nm.结果本方法在0.10～2.00mg·L-1范围内线性良好(r=0.998 8,n=6).高、中、低浓度加样回收率均在92.1%～105.8%之间,日内、日间RSD在4.1%～8.6%之间,最低检测浓度为5μg·L-1.结论本测定方法适用于临床氯氮平血药浓度监测.     

HPLC法测定围手术期患儿血浆中瑞芬太尼浓度

目的:建立高效液相色谱法测定围手术期患儿血浆瑞芬太尼浓度.方法:采用Hypersil CN柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.02 mol·L-1磷酸二氢钾水溶液内含三乙胺0.02%(30:70);流速1.0 ml·min-1;检测波长210nm;进样量为20 μl.结果:标准曲线在1.0～100.0 μg·L-1 内线性关系良好(r=0.999 3).最低检测浓度为1.0μg·L-1.提取回收率(76.51±0.82)%.方法回收率99.66%～102.40%.日内和日间RSD均小于15%.2μg·L-1组靶控浓度与实测浓度基本一致.结论:本方法快速、准确、灵敏、专一性好,适用于临床瑞芬太尼血药浓度检测和药动学研究.     

高效液相色谱法测定人血浆中舍曲林浓度

目的 建立测定人血浆中舍曲林浓度的高效液相色谱法.方法 以Diamonsil(TM)C18反相柱(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相为0.03mol·L-1醋酸铵-甲醇(24:76);流速:0.8mL·min-1;柱温:40℃检测波长:210nm.以乙酸乙酯与氯甲烷(80:20)为提取剂.结果 舍曲林的低...     

HPLC法测定人血浆中奥氮平浓度

目的建立测定人血浆中奥氮平浓度的反相高效液相色谱法。方法以C18反相柱(150mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,流动相0.03m o l.L-1醋酸铵-甲醇(35:65);流速:0.8 m l.m in-1;柱温:40°C;检测波长:275nm。以乙酸乙酯与二氯甲烷(80:20)为提取剂。结果奥氮平320.0,80.0,10.0μg.L-13种浓度平均回收率分别为102.92%,97.11%,98.20%,日内、日间差RSD均低于6%(n=5);最低检测浓度为5.0μg.L-1;线性范围为5.0~320.0μg.L-1。回归方程为:C=264.03F-1.21,r=0.9996(n=9)。结论本法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中盐酸舍曲林的浓度

目的建立LC-MS联用测定人血浆中盐酸舍曲林血药浓度的方法。方法采用Waters AlltimaTMC18柱(100mm×2．1 mm,3．0μm),柱温30℃;流动相:0．1％甲酸溶液-乙腈=40:60(V/V);流速0．2 mL·min-1;进样量2止;气动辅助电喷雾离子化(ESI),正离子检测,SRM,盐酸舍曲林:[M H]离子m/z 306．1,碎片子离子m/z 275．1,碰撞能量18 V;内标:盐酸帕罗西汀[M H]离子m/z 330．1,碎片子离子m/z 192．1,碰撞能量27 V。结果该法专属性好,对盐酸舍曲林的最低检测限为0．673μg·L-1,血浆样品检测的线性、精密度、回收率等指标均符合生物样品分析标准,在应用中取得良好的效果。结论本法可用于血浆中盐酸舍曲林的测定。     

药物流产后孕妇血浆中米非司酮浓度的监测

目的:建立米非司酮血药浓度的测定方法,监测药物流产后孕妇血浆中米非司酮浓度的变化情况。方法:选择停经<49d以内,米非司酮配伍米索前列醇行药物流产的早孕妇女28例,于胎囊排出后24、48、72h时抽肘静脉血。血浆样品中米非司酮以正己烷、二氯甲烷的混合液提取后,采用HypersilODS色谱柱分离,流动相为甲醇-乙腈-水(42:28:30),流速为1.0mL.min-1,紫外检测波长为302nm。结果:米非司酮血药浓度在20～5000μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9983),血浆中米非司酮最低检出限为10.0μg.L-1;相对回收率在95.69%～102.25%之间;日内、日间RSD分别为2.82%～3.39%、3.19%～4.76%。28例孕妇在胎囊排出后24、48、72h时血浆中米非司酮浓度分别为(606.68±123.61)、(243.86±50.16)、(92.70±34.21)μg.L-1。结论:本方法操作简单、灵敏度高、实用性强,适合基层计划生育部门监测妊娠流产后孕妇血浆中米非司酮的浓度情况。     

RP-HPLC法测定人血浆中烟酸的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血浆中烟酸浓度的方法。方法:以咖啡因为内标,血浆样品用10%硫酸锌沉淀后进行分析,色谱柱为DiamonsilTM C18,流动相为乙腈-0.01mol·L-1磷酸二氢钾(内含0.01mol·L-1四丁基溴化铵,pH6.5)=15:85,流速为1.0mL·min-1,检测波长为262nm,柱温为40℃。结果:烟酸血药浓度在0.2～20.0μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999),最低检测浓度为0.1μg·mL-1;低、中、高浓度的回收率在93.27%～102.65%之间,日内、日间RSD均<8%。结论:本方法准确、灵敏、重复性好,且不受他汀类药物的干扰,能为烟酸,尤其临床上与他汀类药物联合应用时的血药浓度监测及人体药动学研究提供检测手段。     

RP-HPLC法测定人血清中舒芬太尼的浓度

目的:建立测定人血清中舒芬太尼浓度的简便方法。方法:血清中舒芬太尼用乙酸乙酯-石油醚(4:1)单步提取后采用反相高效液相色谱法进行测定,其中色谱柱为Symmetry C18,流动相为乙腈-0.02mol.L-1醋酸铵-盐酸(pH4.3)(45:55),检测波长为230nm,柱温为室温,内标为艾司唑仑。结果:舒芬太尼血药浓度在0.025～4.000μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9999);日内、日间RSD分别为3.49%～4.51%、4.67%～5.99%,平均回收率为101.92%～107.04%。结论:本方法提取步骤少,方法简单、快速、专一性强、准确,适合人血清中舒芬太尼的浓度监测。     

HPLC法间接测定肿瘤患者外周血中二氢尿嘧啶脱氢酶的活性

目的:建立间接测定肿瘤患者外周血中二氢尿嘧啶脱氢酶(DPD)活性的方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法测定肿瘤患者血浆中内源性物质二氢尿嘧啶(H2U)和尿嘧啶(U)的比值,间接估算DPD的活性。其中,色谱柱为XterraRPC18,流动相为甲醇-0.02mol·L-1磷酸二氢钠(pH4.0)(5:95),流速为1.0mL·min-1,检测波长分别为204nm(H2U)、260nm(U)。结果:H2U、U检测浓度分别在62.5～2000μg·L-1(r=0.9997)、15.625～500μg·L-1(r=0.9993)范围内线性关系良好,日内RSD分别≤7.7%、8.3%,日间RSD分别≤13.8%、13.4%,方法回收率分别为99.63%～103.02%、98.38%～109.08%。63例肿瘤患者的DPD活性(H2U/U比值)在肿瘤患者中变异较大,范围为1.51～6.67。结论:本方法可用于肿瘤患者外周血DPD活性的常规监测。     

HPLC法测定大鼠离体肝微粒体中氯胺酮和去甲氯胺酮的含量及其性别差异研究

目的:建立同时测定大鼠离体肝微粒体中氯胺酮和去甲氯胺酮含量的方法,比较氯胺酮在雌雄大鼠肝微粒体中代谢的性别差异。方法:采用高效液相色谱法,以非那西丁为内标,色谱柱为WelchromC18,流动相为乙腈-0·015mol·L-1乙酸胺(加醋酸调pH5·85)=40:60,流速为1mL·min-1,检测波长为215nm,柱温为30℃,进样量为20μL。比较5～1000μg·mL-1氯胺酮在雌雄大鼠离体肝微粒体(1·0mg·mL-1)中孵育15min的代谢情况。结果:氯胺酮检测浓度的线性范围为0·1～20·0μg·mL-1(r=0·9999)和20·0～1000·0μg·mL-1(r=0·9994),去甲氯胺酮的线性范围为0·1～20·0μg·mL-1(r=0·9998),最低检测限均为2ng·mL-1;日内RSD均小于10·8%,日间RSD均小于12·7%;方法回收率分别为(89·6±8·5)%～(102·5±6·4)%、(86·5±3·6)%～(101·7±4·8)%,提取回收率分别为(90·6±6·3)%～(92·8±4·2)%、(84·5±7·9)%～(87·7±5·5)%。加药量在5～1000μg·mL-1时,氯胺酮消除速率和去甲氯胺酮生成速率在雄大鼠肝微粒体中均明显高于雌大鼠。结论:本方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微粒体中氯胺酮和去甲氯胺酮的含量测定。氯胺酮在大鼠离体肝微粒体中的代谢存在性别差异。     

HPLC法测定肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度

目的:建立测定肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-水-甲醇(51∶136∶77),流速为1.2 mL·min-1,紫外检测波长为245 nm,柱温为30 ℃,进样量为30 μL。结果:氢化可的松血药浓度在50～300 μg·L-1范围内线性关系良好,最低检测限为8 μg·L-1;日内、日间RSD分别为4.04%～6.81%、4.09%～9.16%,低、中、高3种浓度的方法回收率分别为(103.12±4.53)%、(100.77±4.07)%、(101.61±6.92)%。肾移植患者内源性氢化可的松术后1～3、3～6、6～12、>12个月的浓度分别为(31.89±21.42)、(45.26±29.26)、(49.69±22.00)、(53.56±29.86)μg·L-1。结论:本法操作简便、灵敏度高、快速可靠,适用于肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度的测定。     

HPLC法测定自发性高血压大鼠血浆中去甲肾上腺素的含量

目的:建立高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)法测定自发性高血压大鼠(SHR)血浆中去甲肾上腺素(NA)的含量。方法:色谱柱为C18,流动相为甲醇-0.15mo·lL-1磷酸二氢钾缓冲液(1∶9,V/V,pH6.0),检测波长为280nm,柱温为室温,流速为1.0mL·min-1。结果:NA检测浓度线性范围为0.5～40μg·L-1(r=0.9999),最低检测浓度为0.05μg·L-1,平均回收率为97.49%,RSD小于3.81%。结论:本方法线性、精密度、回收率良好,灵敏度高,操作简便,可用于NA的药动学及相关研究。     

RP-HPLC法测定人血浆中丙泊酚的浓度

目的:建立测定人血浆中丙泊酚浓度的方法。方法:血浆样品经6%高氯酸乙腈溶液沉淀蛋白后采用反相高效液相色谱-二极管阵列检测器法进样测定,色谱柱为Kromasil C184.0),流速1.0 mL·min-1流动相为乙腈-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾水溶液(70∶30,磷酸调pH值至4.0),流速1.0 mL·min-1,检测波长270 nm,柱温为室温,内标为麝香草酚,进样量20μL。结果:丙泊酚血药浓度在0.1～15μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),最低检测限为0.1μg·mL-1;平均提取回收率为88.07%～92.08%,平均方法回收率为99.07%～100.31%;日内、日间RSD分别为5.50%～6.60%、4.12%～10.90%。结论:本方法准确、灵敏、快速,可用于丙泊酚的血药浓度监测及临床药动学研究。     

HPLC法同时测定大鼠血浆中厄贝沙坦和吡格列酮的浓度

目的:建立同时测定大鼠血浆中厄贝沙坦和吡格列酮浓度的高效液相色谱法。方法:采用MERCKPurospherC18色谱柱,0.02mo·lL-1醋酸盐缓冲液(pH=3.6)-乙腈(60∶40)为流动相,检测波长为245nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为35℃,进样量为40μL。结果:厄贝沙坦和吡格列酮检测浓度的线性范围分别为0.1～12μg·mL-1(r=0.9997)、0.1～12μg·mL-1(r=0.9998),萃取回收率大于75%,方法回收率大于90%,日内RSD小于4.4%,日间RSD小于8.1%。结论:该方法准确、灵敏、快速,可用于同时测定大鼠血浆中厄贝沙坦和吡格列酮的浓度。     

RP-HPLC法测定痹痛宁胶囊中士的宁和马钱子碱的含量

采用反相高效液相色谱法测定痹痛宁胶囊中士的宁和马钱子碱的含量。色谱柱CAP-CELL C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:水-乙腈(80∶20)(含三乙胺0.01 mol·L-1,用磷酸调pH至2.6±0.1);检测波长260 nm;流速1.0 mL·min-1;柱温25℃。测得士的宁和马钱子碱的浓度分别为0.2097～3.1455μg(r=0.9996)和0.0952～1.4280μg(r=0.9994),平均回收率(n=9)分别为99.2%、99.3%。