HPLC法同时测定黄芪中4种黄酮类成分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定11个产地黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素4种黄酮类成分含量的方法,从有效成分含量探讨药材道地性内在因素。方法:色谱柱为Zorbax Eclipse XDB-C1(8250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为280nm。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮和芒柄花素的检测浓度分别在0.0051～0.510、0.0050～0.300、0.0049～0.294、0.0046～0.276mg·mL-1范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r均为0.9999)。内蒙古、山西等4个产地的黄芪中毛蕊异黄酮苷和芒柄花苷的含量较高;河北安国、赤城和甘肃定西产黄芪中毛蕊异黄酮和芒柄花素含量较高。结论:本方法简便、快速、准确,试验结果与黄芪本草考证、道地沿革的文献基本相符。     

蒲公英不同萃取部位黄酮含量分析

目的测定蒲公英及花不同萃取部位总黄酮和黄酮单体的含量,为蒲公英的质量评价提供参考。方法采用紫外分光光度法对蒲公英全草和花的不同萃取部位总黄酮含量进行测定,利用高相液相色谱法同时分析其中木犀草素、槲皮素和芹菜素的含量。结果蒲公英及花都是乙酸乙酯萃取部位总黄酮含量最高,且花乙酸乙酯萃取部位中的黄酮含量(96.44%)明显高于全草乙酸乙酯萃取部位(36.26%)。槲皮素、木犀草素及芹菜素在2.5~50.0μg/ml浓度范围内呈良好线性关系,平均回收率分别为99.87%、99.68%和99.34%,相对标准偏差值依次为1.82%、1.71%和1.43%。结论本方法简便、准确可靠,可用于蒲公英中总黄酮及黄酮单体槲皮素、木犀草素和芹菜素的测定。     

不同产地、不同采收期黄芪药材及饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷及芒柄花素含量测定

目的:采用HPLC法测定不同产地、不同采收期黄芪药材及饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷及芒柄花素含量。方法:采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1 mL·min-1,柱温35℃,检测波长260 nm。结果:毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素线性范围分别为0.1272～12.72μg(r=0.9999)和0.003344～2.508μg(r=0.9999),平均回收率(n=6)分别为98.9%(RSD=1.7%)和99.0%(RSD=2.3%)。不同产地黄芪药材及饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素含量差异较大,生长年限6年的黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素含量最高。结论:该方法简单快捷,适合于黄芪中黄酮类化合物的含量测定研究,为寻找更佳黄芪产地及黄芪采收期提供了依据。     

黄蛭益肾胶囊质量标准的提升

摘要：目的:提升黄蛭益肾胶囊的质量标准。方法:采用薄层色谱（TLC）法对黄蛭益肾胶囊中的枸杞子、牛膝和车前子进行定性鉴别;采用HPLC-DAD法同时测定毛蕊异黄酮葡糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量,采用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷的含量。结果:枸杞子、牛膝和车前子的薄层斑点清晰,分离良好,阴性无干扰。毛蕊异黄酮葡萄糖苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷分别在1.03～20.52μg·ml-1,0.89～17.72μg·ml-1,1.51～30.24μg·ml-1,1.03～20.62μg·ml-1,67.62～563.52μg·ml-1（r=0.999 6～1.000 0）浓度范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为93.4%,93.0%,100.7%,91.4%,99.5%,RSD分别1.53%,1.73%,1.46%,1.23%,1.85%（n=6）。结论:建立的TLC法专属性强、灵敏度高,HPLC法简便可行,结果准确、可靠,重复性、稳定性好,可用于黄蛭益肾胶囊的质量控制。     

生血方的鉴别与含量测定

目的：建立生血方的鉴别和含量测定。方法：采用薄层色谱法（TLC）对生血方中黄芪、女贞子和当归进行定性鉴别;采用高效液相色谱法（HPLC-ELSD）对生血方中芒柄花素和黄芪甲苷进行含量测定,流动相为乙腈-水,流速1 mL·min-1;使用蒸发光散射检测器,载气气压0.5 MPa,漂移管温度为100 ℃。结果：在TLC图谱中,斑点清晰,分离度良好,阴性样品无干扰。方中2个成分（芒柄花素和黄芪甲苷）完全分离,峰面积的对数与进样量的对数呈良好的线性关系（r=0.999,0.999 4）。3批样品中黄芪甲苷和芒柄花素的含量分别在0.641 1～0.673 5、0.480 8～0.500 8 mg·g-1。结论：经方法学验证,该方法可用于生血方的质量控制。     

HPLC法测定不同产地黄芪中芒柄花苷的含量

目的:测定十批不同产地黄芪药材中芒柄花苷的含量,用以评价不同产地的黄芪的质量,为实际生产和临床应用黄芪药材的选择提供参考。方法:采用80%甲醇回流提取,反相高效液相色谱法进行测定。Diamonsil钻石C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈:水=25:75等度洗脱;流速:1ml﹒min-1;柱温:30℃;检测波长254nm。结果:内蒙古和山西产的黄芪中芒柄花苷的含量较甘肃与长春高。结论:不同产地的黄芪中芒柄花苷的含量差异较大,同一产地黄芪中的芒柄花苷的含量也存在差异。     

蒙古黄芪中芒柄花素含量的测定及黄酮类成分提取工艺的优化

目的建立芒柄花素的含量测定方法,优选黄芪中黄酮类成分的提取工艺。方法采用高效液相色谱-紫外检测法,建立芒柄花素的含量测定方法,以芒柄花素含量为指标,用正交设计法对影响超声提取的因素如乙醇浓度、乙醇用量、提取次数和超声时间进行考察,优化提取工艺。结果芒柄花素在1～40μg/ml范围内线性关系良好,以峰面积(A)对浓度(C)进行线性回归,方程为A=212096C+3958.7,r2=0.9999。日内、日间相对标准差(RSD)均<5%;平均回收率均在98.0%～102.0%;优化提取条件为加15倍量75%乙醇,连续提取3次,每次20min。结论所建立的含量测定方法可用于蒙古黄芪中芒柄花素的含量测定,优化的提取工艺具有效率高和操作简便等优点。     

HPLC同时测定不同产地密蒙花中4种化合物的含量

目的 采用HPLC同时测定密蒙花中4种化合物（毛蕊花糖苷、蒙花苷、芹菜素、木犀草素）的含量,并对不同产地的密蒙花进行比较。方法 采用Waters Sunfire^TM C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;柱温30℃;检测波长330 nm（毛蕊花糖苷、蒙花苷、芹菜素）和350 nm（木犀草素）。结果 4种化合物在各自的范围内呈现良好的线性关系（r>0.999 0）,平均回收率为97.75%~98.49%,RSD为0.7%~1.5%。测得不同产地毛蕊花糖苷、蒙花苷、芹菜素、木犀草素的含量分别为21.046 3~42.886 3,8.514 4~17.400 8,0.317 3~1.205 3,0.030 4~0.145 6 mg·g^-1。结论 该法稳定可靠,重复性好,可为密蒙花质量评价提供一定依据。     

湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与主要成分相关性研究

目的 探究湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与其中所含当药黄素、当药醇苷、木犀草素的相关性。方法 采用HPLC同时检测湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量;通过DPPH·自由基清除实验和ABTS+自由基清除实验两种体系,评价各提取物的抗氧化活性;采用Pearson相关性分析和灰色关联分析法,研究湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量与抗氧化活性之间的相关性。结果 湿生扁蕾乙酸乙酯提取物中当药黄素含量最高,为68.19 mg·g^-1;95%乙醇提取物中当药醇苷含量最高,为21.03 mg·g^-1;正丁醇提取物中木犀草素含量最高,为19.38 mg·g^-1。95%乙醇提取物对DPPH·自由基清除能力最强,IC50值为0.124 mg·mL^-1;正丁醇提取物对ABTS+自由基清除能力最强,IC₅₀值为0.036 mg·mL^-1。Pearson相关性分析发现,与木犀草素相比,当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS+清除能力相关性较好,相关系数R2分别为0.994、0.823;而木犀草素相关系数分别为0.875、0.746。然而,灰色关联分析结果表明木犀草素含量和当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS+清除能力均有较强的关联度。结论 湿生扁蕾提取物中的当药醇苷和木犀草素与其体外抗氧化性有较好的相关性,当药醇苷含量可作为评价湿生扁蕾提取物体外抗氧化性的主要指标性成分。     

Box-Behnken效应面法优化亳菊中4种黄酮类成分提取工艺

摘要：目的:采用Box-Behnken效应面法,优选亳菊中黄酮类成分提取工艺条件。方法:在单因素试验的基础上,采用三因素三水平Box-Behnken试验设计对亳菊中黄酮类成分提取工艺参数进行优选。以乙醇浓度、料液比、提取时间为自变量,以金合欢素、木犀草素、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷及木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量为因变量,采用Hassan方法计算总评"归一值",建立总评归一值与自变量之间的数学关系,经效应面法预测最佳工艺条件。结果:最佳提取工艺为乙醇浓度72%、料液比1:26、提取时间152min,提取三次;金合欢素、木犀草素、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷及木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量分别为1.819 0,0.155 0,0.532 0,0.624 0mg·g-1。结论:实测值与预测值接近,表明采用Box-Behnken响应面法优化后得到的综合提取工艺参数可用于亳菊中黄酮类成分金合欢素、木犀草素、金合欢素-7-O-β-D-葡萄糖苷及木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的提取。     

秦巴山区不同产地娑罗子中七叶皂苷的含量比较

目的:对秦巴山区10个不同产地娑罗子药材中的七叶皂苷成分进行分析比较。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil ODSC18(100mm×4.6mm,5μm),检测波长为220nm,流动相为乙腈-0.02%磷酸溶液(35:65,V/V),流速为1mL·min-1,柱温为20℃。结果:10个不同产地样品中七叶皂苷A的含量均高于七叶皂苷B,且均符合2010年版《中国药典》标准(七叶皂苷A>0.7%)。产自略阳的样品中七叶皂苷A和七叶皂苷B的含量最高,分别为28.46和19.77mg·g-1(生药);其次为康县、留坝的样品,宁强、勉县、宁陕、镇坪的样品含量居中,而平利、西乡、洋县的样品含量则相对较低。10个产地样品中七叶皂苷A含量在1.16%～2.85%之间,七叶皂苷B含量在0.89%～1.98%之间,平均值分别为1.92%和1.43%,其中七叶皂苷A与七叶皂苷B的含量比在1.14～1.45之间。结论:秦巴山区不同产地娑罗子中七叶皂苷含量和组成存在明显差异,种源、生态环境等因素对娑罗子药材有效成分的积累过程影响较大,控制药材产地来源对保障娑罗子药材质量的稳定性有着重要意义。     

甜茶质量标准研究

目的:建立甜茶的质量标准。方法:采用聚酰胺薄层色谱(TLC)法对甜茶药材进行定性鉴别;采用紫外分光光度法测定甜茶中总黄酮的含量;采用高效液相色谱(HPLC)法测定甜茶中根皮苷的含量。结果:聚酰胺TLC分离效果良好,斑点清晰。根皮苷最大吸收波长为284nm,6批药材的总黄酮含量(以根皮苷计)在103.12～183.54mg·g-1之间。根皮苷的进样量在0.0998～1.1976μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997);平均回收率为97.23%,RSD=1.57%(n=6)。结论:所建标准有利于对甜茶的质量控制。     

HPLC-CAD一测多评法同时测定黄芪中6种成分含量

建立高效液相串联电雾式检测器(HPLC-CAD)同时测定黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷的一测多评方法。采用Agilent SB-C18(150 mm×4.6 mm,3.5μm)色谱柱,0.05%甲酸水-0.05%甲酸乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,进样量为20μL;CAD雾化室温度50℃。建立内参物黄芪皂苷Ⅱ与其他成分的相对校正因子,并通过相对校正因子计算其含量。同时采用外标法验证所建立的一测多评法的合理性、可行性和重复性。结果表明:各色谱峰分离度较高,黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷分别在0.1132.250、0.0120.240、0.0040.080、0.0651.300、0.0050.100和0.0070.150 mg·mL^-1内线性关系良好;20批黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷的含量分别为0.3060.922、0.0530.183、0.0150.092、0.0690.823、00.098和0.0200.107 mg·g-1;内参物黄芪皂苷Ⅱ与黄芪皂苷Ⅰ、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和7,2’-二羟基-3’,4’-二甲氧基异黄烷的相对校正因子分别为0.561、0.835、0.299、0.796和0.799;一测多评法含量测定结果与外标法测定结果无显著性差异。建立的HPLC-CAD一测多评法简便、准确,可用于黄芪中6种化学成分的含量测定,研究结果为黄芪药材的质量评价提供了科学依据。     

基于色差原理分析不同产地桑白皮有效成分含量与颜色的相关 性

目的:研究桑白皮药材有效成分含量与颜色的相关性,并对不同产地样品进行指纹图谱和聚类分析,为该药材质量控制及品质评价提供依据.方法:分别采用高效液相色谱法(HPLC)和盐酸-镁粉反应比色法测定桑白皮中桑根皮素和总黄酮的含量;肉眼观察桑白皮颜色,采用色差仪测定其色度值(L*、a*、b*)并计算总色差值(E*ab);利用SP...     

不同采收月份和不同炮制方法对女贞子中红景天苷和酪醇含量的影响

目的探讨不同月份不同炮制方法对长沙地区女贞子中活性成分红景天苷及其苷元酪醇含量的影响。方法采收长沙岳麓山上8、10、12月份产女贞子,去杂质洗净。一部分直接晾干生制;另一部分晾干后用黄酒蒸制。用HPLC法测定不同月份红景天苷及酪醇的含量。色谱柱：Hydro-RP80A,C18（4.6×250mm,5μm）、流动相为甲醇-水（26∶74,V/V）;流速1mL·min-1;检测波长278nm;柱温20℃;进样量10μL。评价月份及炮制方法对女贞子的影响。结果 8、10、12月份生品与制品中红景天苷的含量分别为3.213±2.235mg·g-1、2.784±0.719mg·g-1、0.941±0.510mg·g-1和4.159±2.042mg·g-1、3.596±1.773mg·g-1、2.164±0.986mg·g-1。酪醇的含量分别为0.457±0.323mg·g-1、0.828±0.549mg·g-1、0.414±0.348mg·g-1和0.505±0.298mg·g-1、1.954±1.218mg·g-1、0.702±0.690mg·g-1。结论月份及炮制方法对女贞子活性成分含量有影响,故在实际应用时应根据不同需要适时采收并加以炮制。     

白英不同生长期不同药用部位绿原酸与咖啡酸及芦丁含量测定

目的探讨白英不同生长期不同药用部位绿原酸、咖啡酸及芦丁含量,为确定其最合适的采收季节提供理论依据。方法于5,6,7,8,9,10,11月采集白英根、茎、叶、果样品,采用高效液相色谱法测定。色谱条件：Angilent Zorbax ODS C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,柱前加保护柱;流动相为乙腈 1%醋酸溶液,梯度洗脱;流速：0.6 mL·min－1;柱温：25 ℃;检测波长327 nm。结果白英根、茎、叶、果实等不同部位绿原酸含量均较高,含量符合以下规律：果实＜下部茎＜根＜上部茎＜叶;不同生长周期根、茎中绿原酸：根部位8月达到最高值（2.583 mg·g－1）,下部茎9月达到最大（2.762 mg·g 1）,上部茎中8月达到最大（1.788 mg·g－1）;叶中绿原酸、咖啡酸、芦丁含量均较高,绿原酸在11月叶中达到峰值（8.169 mg·g－1）,咖啡酸在8月叶中达到峰值（0.397 mg·g 1）,芦丁在11月叶中达到峰值（3.777 mg·g－1）。结论白英不同药用部位不同生长期绿原酸、咖啡酸及芦丁含量随着生长发育进程而发生变化,综合考虑,以8～9月枝叶茂盛时采收,有效成分含量最高。     

比色法测定不同产地通关藤药材中C_(21)甾体总苷含量

目的:建立通关藤中C21甾体总苷含量测定方法,比较28个产地通关藤中C21甾体总苷含量。方法:以Tenacigenoside A为标准品,香草醛-高氯酸显色,在469nm波长处测定C21甾体总苷含量。结果:通关藤中C21甾体总苷含量在34.091～121.049mg·g-1之间,平均为66.591mg·g-1。不同产地通关藤药材中C21甾体总苷含量差异较大,其中以云南金平产通关藤药材中总苷含量最高,广西、贵州和安徽产的药材中总苷含量相对较低。同一产地不同批次的药材,总苷含量也有较大的差异。结论:本方法简便、快速、准确,可用于不同产地通关藤中C21甾体总苷的含量测定。     

HPLC法测定不同来源重楼药材中7种甾体皂苷的含量

目的分析不同来源重楼属植物的主要活性成分,比较7种甾体皂苷的含量,为重楼药材的鉴别和品质评价提供参考依据。方法采用HPLC法测定不同来源重楼属15批药材中重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅴ的含量。色谱条件为Inertsil ODS-3C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-水(50∶50);检测波长为203nm;流速为1.0mL·min~(-1);柱温为35℃;进样量为20.0μL。结果 15批样品中,重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ和重楼皂苷Ⅰ4种皂苷含量之和均在1.849~20.222mg·g~(-1)之间;样品中7种皂苷含量之和在2.351~37.366mg·g~(-1)之间。精密度、稳定性和重复性实验的RSD值均≤3.0%,7种皂苷的平均加样回收率均在95.92%~103.20%之间(RSD≤3.0%,n=5)。结论因产地或种类不同,重楼皂苷的含量存在一定差异。基于15批重楼样品的HPLC图谱,构建了重楼药材的HPLC指纹图谱,实验结果可用于重楼的真伪鉴别和质量评价。     

红花注射液有效成分的确定及不同厂家中量效关系的比较

目的:确定红花注射液的主要活性成分,研究红花注射液主要有效成分和生物活性之间的关系,为其质量标准的提高提供实验数据。方法:采用体内、体外方法对羟基红花黄色素A(HSYA)含量和总黄酮含量不同的红花注射液进行活性测定。结果:当总黄酮含量基本一致时(0.57 mg.mL-1),随着HSYA含量的降低,抗小鼠体内血栓形成的保护率、家兔体外血小板聚集抑制率随之降低;当HSYA含量基本一致时(0.17～0.21 mg.mL-1),随着总黄酮含量的降低,抗血栓形成的保护率和血小板聚集抑制率也随之降低;而当红花注射液中HSYA和总黄酮的含量均低于另一红花注射液中HSYA和总黄酮的含量时,其抗血栓形成保护率和血小板抑制率也随之降低。结论:红花注射液主要活性成分为HSYA和总黄酮,二者在生物活性上具有协同作用,含量与生物活性成正相关。     

比色法测定参芪含片中总皂苷的含量

目的：测定参芪含片中总皂苷的含量以建立质控方法。方法：采用香草醛-硫酸比色法测定总皂苷的含量。结果：以人参皂苷Re为对照品作校正曲线,在0.025～0.175mg·mL-1范围内线性关系良好。加样回收率为98.65%,RSD为3.9%。测得2批参芪含片中总皂苷含量分别为17.25mg·g-1和17.47mg·g-1。结论：该方法简便、准确、灵敏、重复性好,可作为参芪含片中总皂苷的质控方法。