抗出血性大肠杆菌O157:H7单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备抗出血性大肠杆菌O157：H7(E．coli O157：H7)特异性单克隆抗体(MAbs)。方法福尔马林灭活的E．coli O157：H7免疫BALB／c小鼠，利用细胞融合技术建立分泌抗E．coli O157：H7 MAbs的杂交瘤细胞株，对配对较好的6株MAbs用ELISA法测定其免疫球蛋白类及亚类，用ELISA法、凝集法和Western blot鉴定MAbs的特异性。结果6株MAbs免疫球蛋白均为小鼠IgM。这些MAbs均能与27个E．coli O157：H7菌株发生凝集反应。与部分弗劳地杆菌发生凝集反应，与11株鼠伤寒沙门氏菌、7株伤寒杆菌、2株痢疾杆菌、致病性大肠杆菌、产毒性大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、出血性大肠杆菌O26：H11和O111、肠集聚性大肠杆菌、42株非定血清型大肠杆菌、霍乱弧菌O1群和O139群不发生凝集反应；ELISA结果显示6株MAbs与粪链球菌、变形杆菌、粘质沙雷氏菌、肺炎克雷伯杆菌均无交叉反应；ELISA和Western blot结果显示。3株MAbs针对E．coli O157：H7酚相脂多糖。结论6株MAbs具有较高的特异性，有可能用于制备检测E．coli O157：H7的病原检测试剂。     

5株产硫化氢大肠杆菌O157的分离鉴定

肠出血性大肠杆菌O157：H7是引起人类出血性肠炎的主要菌型，自1982年在美国首次被分离并确认为食物中毒新型致病菌以来，在世界范围内发生过多次暴发，并造成严重危害。尤其是1996年5～8月日本发生了由E．coli O157：H7引起的人类历史上大规模的暴发流行，引起世界普遍关注。我们自1999年开始开展了大肠杆菌O157：H7的监测，     

O157:H7的分子生物学检测与分型研究进展

肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic E．coli．EHEC）O157：H7是一种重要的人兽共患病病原菌．主要通过食物和水源传播，在人类能引起出血性结肠炎（HC）、溶血尿毒综合征（HUS）等严重疾病甚至死亡。自1982年美国首次分离出该菌以来，世界各地不断有散发和暴发的报告，因此快速、敏感、特异的检测与分型方法对于临床诊断和疫情控制是非常必要的。随着分子生物学技术的飞速发展使这种要求成为可能，本文就近年来EHEC O157：H7的分子生物学检测与分型研究进展综述如下。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7疫苗研究进展

肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli．EHEC）是出血性肠炎的主要病原体．其主要血清型是O157：H7。该菌被确认为致病菌的20多年来世界各地包括中国都有不同规模的暴发流行。EHEC O157：H7感染可使人患腹泻、出血性结肠炎（hemorrhagic colitis，HC），还可在5％～10％的病例中引发溶血性尿毒综合征（hemolytic uremic syndrome，HUS）及血栓性血小板减少紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura，TTP）等严重并发症，严重者可导致死亡。     

肠出血性大肠杆菌O157 EspA的研究进展

肠出血性大肠杆菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli，EHEC）O157：H7曾多次在世界各地，特别是发达国家引起广泛的暴发流行。感染主要导致腹泻、出血性结肠炎（hemorrhagic colitis，HC），并经常伴发溶血性尿毒综合征（Hemolytic ruemic syndrome，HUS）、血栓形成的血小板减少性紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura，TTP）并发症，严重威胁着人类的生命健康。人类感染此菌的途径主要是食用或接触污染的牛肉、蔬菜、水果及水源等。目前，对O157：H7感染尚缺乏有效的防治方法，只能给予对症治疗和适当的抗菌治疗，但研究证明抗菌药物可促使O157：H7大肠杆菌释放Vero毒素，从而使患者并发溶血性尿毒综合征（HUS）的危险性增加。     

大肠埃希菌O157：H7

1982年，在Michigan和Oregon因进食污染的汉堡包发生的47名血性腹泻患者粪便中第一次分离出E．coliO157:H7，回顾性研究发现它与1975年一名自限性的急性血性腹泻患者粪便培养的大肠埃希菌为一类，并且1973～1982年间发生的3千多份出血性肠炎E．coli培养中均见O157：H7血清型[1]．它可产生一种与志贺氏毒素（Shigatokin，ST）极相似的毒素，故称之为类志贺氏毒素。又因它对培养的Vero细胞具毒性作用，故又称之为"Vero毒素"。该菌因引起出血性腹泻而得名肠出血性大肠埃希氏苗（enterohemorrhagicE．coli，EHEC）。近年来，更多的研究…     

PCR方法在出血性大肠杆菌O157:H7诊断中的应用

自1982年首次在美国引起出血性肠炎爆发以来,肠出血性大肠杆菌O157:H7(entero-hemorrhagic E.coli O157:H7,EHECO157:H7)已经成为世界性的重要的公共卫生和食品安全问题,曾在日本、美国、加拿大等国造成了暴发流行和大规模食物中毒事件.估计目前在美国每年可造成大约70000人感染.     

濮阳市人畜禽粪便、食品中O157：H7监测报告

EHEC为人畜共患病，自1982年在美国首次报道了肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7大肠杆菌引起的出血性肠炎以来，目前世界上许多发达国家和一部分发展中国家都发生了O157：H7大肠杆菌感染的爆发流行，已成为世界性的公共卫生问题。我国已经从牛、羊、猪、鸡的粪便标本、苍蝇以及牛肉、鸡肉、鱼、腌菜等食品中分离到O157：H7大肠     

上海市浦东新区肠出血性大肠埃希菌O157：H7的监测研究

目的 了解上海浦东新区腹泻病人、宿主动物肠出血性大肠埃希杆菌(E. coli )O157:H7携带情况以及市售食品的污染状况,为疾病防治工作提供决策依据. 方法 于2003～2006年的5～10月,在设置的监测点与超市采集家禽和腹泻病人粪便及禽畜肉制品;应用免疫磁珠富集,山梨醇麦康凯平板和Chromager O157显色平板分离培养E. coli O157:H7,生化和血清学反应进行鉴定. 结果 E. coli O157:H7阳性率分别为:腹泻病人粪便0.24%,鸡粪2.95%,鸭粪3.83%,家畜肉15.05%,家禽肉2.25%.检出的67株E. coli O157:H7中,仅1株来自腹泻病人的E. coli O157:H7具有毒力基因. 结论 浦东新区腹泻病人、宿主动物及其肉类食品中存在E. coli O157:H7感染或污染,存在E. coli O157:H7感染流行的潜在危险.     

肠出血性大肠杆菌生物学特性

肠出血性大肠杆菌（enterohemorrhage E.Coli,EHEC）是大肠杆菌的一个亚型,EHEC分为157、26、111血清型,主要致病菌株为O157∶H7,可引起感染性腹泻,因能引起人类的出血性肠炎而得名。在1982年一次出血性结肠炎流行中被分离出。大肠杆菌是人和动物肠道中的正常菌群,一般对人无害。它有3种抗原结构,即菌体抗原（又叫O抗原）、包膜抗原（又叫K抗原）和鞭毛抗原（又叫H抗原）。     

肠出血性大肠杆菌传播模式

大肠杆菌是寄居在哺乳动物和禽类胃肠道中的正常菌群之一,然而少数具有致病性,可引起机体肠道和肠道外感染。依其毒力特征和所致疾病症状不同,现已报道的肠道感染性大肠杆菌有：产肠毒素性大肠杆菌（enterotoxigenic E．coli,ETEC）;肠致病性大肠杆菌（enteropathogenic E．coli,EPEC）;肠出血性大肠杆菌（enterohaemorrhagic E．coli,EHEC）;肠聚集性大肠杆菌（enteroaggregative E．coli,EAggEC）; （enteroinvasiveE．coli,EIEC）;细     

贵州省首次从腹泻病例中检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7

目的 从贵州省1例腹泻病例的粪便标本中分离鉴定O157肠出血性大肠杆菌并对其进行毒力基因检测。方法 收集腹泻病例的粪便标本,mEC肉汤增菌后,采用O157胶体金进行初筛,阳性者增菌液经免疫磁珠富集后进行肠出血性大肠杆菌的分离,对分离株进行系统生化鉴定,O157、H7诊断血清凝集,应用特异性PCR进行rfbE和fliC基因鉴定,以及stx1、stx2、eaeA和hlyA 4种毒力基因检测。结果 腹泻病例粪便标本经mEC肉汤增菌后,检测O157胶体金阳性;增菌液经免疫磁珠富集后培养出可疑菌落,经系统生化鉴定为大肠杆菌,血清型为O157∶H7;PCR检测O抗原特异性rfbE基因和H7特异性fliC基因均阳性;毒力基因eaeA、stx2和hly均阳性,stx1阴性。结论 分离株确诊为肠出血性大肠杆菌O157∶H7,为贵州省腹泻病例中首株该病原体。     

抗出血性大肠杆菌Ο157∶H7单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备抗出血性大肠杆菌Ο157∶H7(E.coliΟ157∶H7)特异性单克隆抗体(MAbs)。方法福尔马林灭活的E.coliΟ157∶H7免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合技术建立分泌抗E.coliΟ157∶H7MAbs的杂交瘤细胞株,对配对较好的6株MAbs用ELISA法测定其免疫球蛋白类及亚类,用ELISA法、凝集法和Westernblot鉴定MAbs的特异性。结果6株MAbs免疫球蛋白均为小鼠IgM。这些MAbs均能与27个E.coliΟ157∶H7菌株发生凝集反应,与部分弗劳地杆菌发生凝集反应,与11株鼠伤寒沙门氏菌、7株伤寒杆菌、2株痢疾杆菌、致病性大肠杆菌、产毒性大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、出血性大肠杆菌Ο26∶H11和Ο111、肠集聚性大肠杆菌、42株非定血清型大肠杆菌、霍乱弧菌Ο1群和Ο139群不发生凝集反应;ELISA结果显示6株MAbs与粪链球菌、变形杆菌、粘质沙雷氏菌、肺炎克雷伯杆菌均无交叉反应;ELISA和Westernblot结果显示,3株MAbs针对E.coliΟ157∶H77酚相脂多糖。结论6株MAbs具有较高的特异性,有可能用于制备检测E.coliΟ157∶H7的病原检测试剂。     

福建省家畜,家禽O157大肠杆菌初查

本文检查了7种家畜（包括猪肉砧板）、家禽粪便标本784份。首次从中检出17种O157出血性大肠杆菌，平均检出率为2．17％，其中以猪最高达6．61％．其次为鸡3．64％，鸽子1．25％，还在猪内与砧板上检出此菌。根据检出菌株与O157、H7诊断血清凝集反应及其产生动力的情况将它们分为二类即：O157；H7（8株）及O157：NM（9株）。     

冷冻原肠中肠出血性大肠杆菌O157:H7的研究

目的 为了研究进出境冷冻原肠携带肠出血性大肠杆菌O157：H7的情况。方法 本研究对2010-2011年进境或国产的35份冷冻原肠样品进行了检测,其中包括19份冷冻羊原肠和16份冷冻猪原肠。根据细菌的培养特性、生化鉴定和血清学鉴定,同时设立标准菌株作为对照。结果 结果表明2份原肠样品检出肠出血性大肠杆菌O157：H7,检出率为5.71%。结论 进境和国产原肠均有可能携带肠出血性大肠杆菌O157：H7,应该进一步加强监测和研究。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7L型及其意义的研究

目的诱导肠出血性大肠杆菌O157：H7（以下简称O157：H7）L型观察其特性及意义。方法羧苄青霉素和氨苄青霉素纸片法诱导。比技L型,与原菌生化特性、药物敏感性,L型小鼠灌胃,取肝、结肠、直肠组织分离培养,以观察体内L型存留情况。结果经L型鉴定,如电镜超薄切片等证实细胞壁缺损。L型生化反应比原菌大为减弱、O157凝集为阴性,对抗生素敏感性除卡那霉素（P＜0．01）外,其余同原菌无显著性差别（P＞0．05）。小鼠体内肠道可存留L型,其可回复为细菌型。结论两种抗生素均可诱导O157：H7形成L型。给实验室诊断带来极大困难。提示L型有可能造成该菌感染传播及暴发流行的危险。     

肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7志贺毒素研究进展

肠出血性大肠杆菌（EHEC）0157：H7于1975年被首次分离，为革兰氏阴性杆菌，对酸耐受性强，在pH3～5条件下，可长期生存，能产生致死性志贺毒素（Shiga toxin，Stx），1982年被确认为严重致病菌。其感染具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和抗生素治疗可加剧病情的危险性等特点，已经成为全球性的公共卫生问题，对人们的健康构成了巨大威胁。据报道，美国每年感染STEC约有10万例．其中O157：H7感染约有7．3万例。近年来，美国、日本、加拿大、英国等发达国家EHEC O157：H7发病呈上升趋势，许多国家已把它列为法定报告传染病。我国江苏、安徽省曾于1999年暴发流行大肠杆菌O157感染性腹泻，患者超过2万例，死亡177例，流行时间7个月。     

多重PCR方法检测大肠杆菌O157:H7的初步研究

目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157：H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157：H7的O157抗原基因（rfbE基因）、鞭毛H7抗原基因（fliC基因）、粘附素基因（eaeA基因）和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ（SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因）为扩增对象，设计能导至目的片段大小不同的5对引物，通过优化条件，建立了可用于粪便检测的大肠杆菌5重PCR。结果在同一扩增体系中，检测了5株不同来源的大肠杆菌O157：H7及27株非大肠杆菌O157：H7细菌。结果表明，该方法能从2株大肠杆菌O157：H7中扩增出rfbE、fliC、eaeA、SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因，它们的大小分别为582bp、802bp、487bp、368bp和177bp。而另外3株大肠杆菌O157：H7也能扩增出除eaeA、SLT-Ⅱ基因外的其它3个基因片段。表明该方法可用于检测大肠杆菌O157：H7，还可检测细菌是否含有毒素基因。在检测27株非大肠杆菌O157：H7．除O149出现SLT-Ⅱ扩增产物和01：H7出现flic基因扩增产物外，其它非大肠杆菌O157：H7的扩增结果均为阴性，表明该方法有较高的特异性。当粪便样品经增菌培养12h，用该5重PCR体系能检测出最初接种量为5cfu／g粪便的样品。结论本5重PCR方法具有较高的特异性和敏感性，可迅速、有效地将大肠杆菌O157：H7与其它非大肠杆菌O157：H7相区别，同时还能检测O157：H7中的毒力因子。因此，通过进一步研究，本方法有望应用于临床大肠杆菌O157：H7感染的辅助诊断。     

何谓肠出血性大肠杆菌O104：H4及防治

所谓肠出血性大肠杆菌0104：H4（enterohem．orrhagicE．coli,0104：H4）,是由德国分离的一种新菌珠0104：H4型大肠杆菌,含有志贺毒素2（vtx2a）的基因,没有（enterohemorrhagicEscherichiacoli,EHEC）溶血素、志贺毒素1、肠致病性大肠埃希菌（enteropathogenicEscherichiacoli）基因毒力岛基因;但含有肠集聚性粘附大肠杆菌（enteroaggragtiveEscherichiacoli）（第5类致泻性大肠杆菌）毒力质粒上的3个基因：aatA、aggR、aap。显示其为EHEC家族的一个新成员。     

2003年从凉面中检出O157:H-大肠杆菌的鉴定与分析

肠出血性大肠杆菌是引起出血性肠炎、溶血性尿毒综合征的病原菌,其血清型有O157:H7和O157:H-.2003年夏季我们在进行腹泻病原监测时,从市场饭馆的凉面中分离出2株O157:H-大肠杆菌,并对其进行系统鉴定,现将结果报告如下.