不同鼠龄大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达及与缺氧-再灌注损伤的关系

目的：观察不同鼠龄大鼠心肌组织钙敏感受体（CaSR）的表达规律及与心肌缺氧-再灌注损伤的关系。方法： 采用RT-PCR技术，检测不同情况下心肌组织CaSR的表达差异；Lagendorff离体心脏灌流的方法复制心脏缺氧-再灌注模型；用透射电镜观察心肌超微结构的变化。结果：大鼠出生后，心肌组织中CaSR的表达逐渐升高，1个月时达到高峰，2、3个月保持在出生水平，此后上升并维持在较高水平。大鼠心肌缺氧40 min及再灌注1 h、2 h心肌组织CaSR的mRNA表达升高，再灌注3 h、4 h后降低；同时随再灌注时间延长，心肌超微结构损伤愈严重结论：大鼠心肌组织存在钙敏感受体，其表达与月龄有一定关系，并可能参与心肌缺氧-再灌注损伤的发生。     

再灌注损伤心肌线粒体钙代谢与呼吸功能关系的研究

观察离体缺氧-再灌注兔心肌线粒体钙含量、钙摄取率和不同底物的呼吸耗氧量的变化。结果表明:缺氧组心肌线粒体钙含量轻度增加(3.37±0.25nmol/mg pr,P<0.05),钙摄取率无显著变化,以琥珀酸为底物的呼吸耗氧量代偿性增高(226.0±28.7natoms/min/mg Pr,P<0.05),以谷氨酸加苹果酸为底物时变化不显著;再灌注组心肌线粒体钙含量显著增高(6.10±1.12nmol/mgt pr,P<0.01);钙摄取率和以谷氨酸加苹果酸为底物的呼吸耗氧量显著降低(P<0.01),且与线粒体钙含量呈显著负相关(r=-0.73,P<0.001),提示线粒体钙超载在再灌注损伤线粒体功能损害中起重要作用。     

细胞膜钠钙交换蛋白与心肌缺血/再灌注损伤

20世纪初有研究者注意到降低细胞外钠离子浓度可产生类似于洋地黄类药物的正性肌力作用。60年代，钠钙交换现象和钠钙交换蛋白（sodium-calcium exchanger，NCX）在蛙心肌细胞中首次被描述，随后发现NCX在多个种属、多种脏器普遍存在。1988年实现了该蛋白的部分纯化，1990年由犬心肌细胞首次克隆成功。经过数十年的研究，特别是近年来随着Jiant patch技术的发展，对钠钙交换电流的测量更为精确方便，逐渐认识到此细胞膜交换蛋白与心肌缺血／再灌注损伤密切相关。     

钙敏感受体在黄芪注射液防治心肌损伤中的作用

目的研究黄芪注射液对心肌损伤大鼠钙敏感受体表达的影响及黄芪注射液可能的心肌保护作用机制。方法 40只大鼠随机分为4组:空白组、心肌损伤组、黄芪注射液组(20 mL/kg)、黄芪注射液(20 mL/kg)+钙敏感受体激动剂Cinacalcet(3.0 mg/kg)组。腹腔内注射5 mg/kg异丙肾上腺素,制备大鼠心肌损伤模型。Western blot方法检测各组大鼠心肌组织中钙敏感受体的表达以及Bax、Bcl-2、Caspase-9、Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达;TUNEL染色法评价各组大鼠心肌细胞的凋亡;酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-1β、NF-κB的水平。结果黄芪注射液显著抑制了心肌损伤组大鼠钙敏感受体的表达(P0.01),促进了Bcl-2的表达(P0.01),降低了Bax、Caspase-9和Caspase-3的表达(P0.01),降低了血清TNF-α、IL-1β和NF-κB的水平(P0.01);钙敏感受体激动剂Cinacalcet可以部分消除黄芪注射液对心肌损伤组大鼠的心肌保护作用。结论黄芪注射液对心肌损伤组大鼠的心肌保护作用可能与抑制钙敏感受体的表达、减少炎症反应、降低心肌细胞凋亡有关。     

心肌缺血再灌注损伤时细胞核钙含量与核孔复合体通透性的变化

 目的：探讨心肌缺血再灌注损伤时心肌细胞核钙含量与核孔复合体通透性的变化及其相互关系。 方法： 行大鼠心脏手术结扎左冠状动脉30 min后恢复灌注, 分别于再灌注后15、30、60、120和180 min取出心脏，用蔗糖密度梯度离心法分离纯化心肌细胞核，用原子吸收分光光度法测定细胞核钙含量，用荧光标记的钙调素跨核膜转运法测定核孔复合体通透性。 结果： 心肌缺血30 min后再灌注15、30、60、120和180 min时，核钙含量分别较假手术组高1.31、1.55、1.73、1.94和2.14倍；而核孔复合体通透性在再灌注15 min时与假手术组比无明显差异，再灌注30、60、120和180 min时仅较假手术组高1.31、1.38、1.40和1.48倍。 结论： 心肌缺血再灌注损伤时，细胞核钙含量的增加早于核孔复合体通透性的增加,核孔复合体通透性的增加可能仅对核钙超载产生有限的代偿性调节作用。     

多巴胺受体2减轻离体大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的 观察多巴胺受体2(DR2)对离体大鼠心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其可能机制.方法 将大鼠40只,每组n=10,随机分成对照组(control)、I/R组、10 pmol/L Bromocriptine(DR2激动剂)组(Bro),10 μmol/L Haloper-idol(DR2抑制剂)组(Hal).用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤模型.Powerlab生理记录仪记录心功能;比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性以及MDA含量;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测DR2、Bcl-2、caspase-3和caspase-9蛋白的表达.结果 与对照组比较,I/R组DR2、Bcl-2、caspase-3和cmpase-9蛋白表达、LDH和CK活性、MDA含量和细胞凋亡率均增加(P＜0.01),唯有SOD活性降低,心功能减弱(P＜0.01).与I/R组比较,Bro降低LDH和CK活性、MDA含量、细胞凋亡率、caspase-3和caspase-9的表达,升高SOD活性,改善心功能和进一步增加Bcl-2的表达(P ＜0.01);Hal对上述指标影响不显著.结论 DR2可减轻心肌I/R损伤,其机制与抗氧化、清除自由基、上调Bcl-2表达以及下调caspase-3和caspase-9的表达有关.     

精胺减轻大鼠在体心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制初探

目的: 观察低浓度外源性精胺对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响。方法: Wistar大鼠随机分成假手术（Sham）组、缺血/再灌注损伤（I/R）组、盐水对照（NS）组和精胺干预（Sp）组（n=10）。结扎冠脉复制心肌缺血/再灌注损伤模型。Sp组缓慢静脉推注 0.5 mmol/L 精胺 2 mL/kg。观察指标：心电图，心功能参数，血清SOD、LDH、NO、MDA水平和心肌超微结构等。结果: I/R组心律失常发生率高达90％，心肌超微结构损伤严重，LVSP 和±dp/dtmax明显降低，血清中NO、MDA及LDH升高，SOD活性降低（P<0.05或P<0.01 vs Sham组）。Sp组与I/R组及NS组相比，上述指标均有显著差异（P<0.05或P<0.01）。结论: 低浓度外源性精胺能减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤，其机制可能与抗氧化和减轻氧自由基损伤有关。     

大鼠在体心肌缺血再灌注损伤细胞膜钙转运通道蛋白mRNA的表达变化

目的 探讨大鼠心肌在体缺血再灌注(IR)损伤后细胞膜钙转运通道蛋白的mRNA变化对钙超载的作用。方法 12只SD大鼠按随机数字法分为IR组和对照组。IR组通过结扎（缺血20 min）后松解(再灌注60 min)前降支造成心肌IR,对照组则免除结扎松解前降支。应用生理记录仪连续监测两组大鼠缺血开始前及再灌注60 min后心率、平均动脉压等血流动力学指标。全自动生化仪检测缺血前及再灌注60 min后两组大鼠血钙及肌钙蛋白T(cTnT)的水平。荧光定量PCR检测再灌注60 min后两组大鼠左心室缺血区和右心室心肌细胞膜钙转运通道蛋白即心肌细胞膜钠钙交换器1(NCX1),L型钙通道(LVDCC)α-1C和胞膜钙转运ATP酶1(PMCA1 )mRNA的表达。结果两组大鼠缺血前的心率、平均动脉压均高于再灌注60 min后,而两组间缺血前和再灌注60 min后的心率、平均动脉压差异则无统计学意义。两组血浆Ca2+浓度在缺血前与再灌注60 min后差异无统计学意义,同时间点两组之间的差异也没有统计学意义。缺血前IR组与对照组血浆cTnT浓度水平相近,缺血60 min后IR组血浆cTnT浓度较对照组升高[(4.29±2.22) μg/L比(1.62±0.60)μg/L,P=0.031];两组血浆cTnT浓度在缺血前与再灌注60 min后差异也有统计学意义（均P＜0.05）。NCX1,LVDCCα-1C和PMCA1的mRNA表达在再灌注60 min后同心室两组间和同组内左右心室之间的差异均无统计学意义（NCX1：对照组左心室为50±4,右心室为47±9;IR组左心室为55±6,右心室为53±11;LVDCCα-1C:对照组左心室为33±7,右心室为30±7;IR组左心室为28±3,右心室为37±5;PMCA1,对照组左心室为70±10,右心室为53±11;IR组左心室为66±12,右心室为78±8;均P＞0.05）。结论 大鼠在体心肌缺血20 min再灌注60 min后,NCX1、LVDCCα-1C和PMCA1的mRNA表达水平均无显著改变,提示钙超载并非由细胞膜钙转运通道蛋白数量改变引起。     

大鼠心肌缺血/再灌注损伤及预处理apelin的表达

目的观察大鼠心肌缺血/再灌注损伤及预处理中apelin表达变化,探讨其可能的作用。方法SD大鼠60只随机分成4组:缺血/再灌注组(IR),预处理组(IP),假手术组(SH)和正常对照组(NC)。放免法测定血浆及心肌apelin-36蛋白含量,免疫组化法观察心肌apelin的表达,RT-PCR方法探讨大鼠心肌apelin mRNA表达。结果(1)血浆、心肌组织apelin-36浓度:IR的含量分别比NC低36.1%、45.6%(P<0.01),IP分别比NC低23.8%、24.7%(P<0.01)。SH与NC、IR与IP比无差异(P>0.05)。(2)apelin免疫组化染色吸光度值:IR与IP比NC分别低65.3%和36.8%(P<0.01,P<0.05),IR比IP低45.1%(P<0.05)。SH与NC无差别(P>0.05)。(3)心肌apelin mRNA的水平:IR是NC的40.2%(P<0.01),IP为NC的65.2%(P<0.05),IR是IP组的38.3%(P<0.05),SH与NC无差别(P>0.05)。结论在心肌缺血/再灌注损伤及预处理过程中,大鼠血浆及心肌组织apelin-36蛋白及基因表达下调,提示apelin在该病理生理过程中可能有重要作用。     

体外循环心肌缺血再灌注过程中与机制相关因素的检测

目的：探讨体外循环心肌缺血再灌注损伤的机制。 方法: 成年14例瓣膜置换病人作为研究对象, 分别于术前、开放主动脉、停体外循环、手术结束、术后1 d从颈内静脉取血测肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌钙蛋白（cTnI）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平。 结果: CK-MB、cTnI、MDA值在术中和术后各检测时点均高于术前（P<0.05），术后1 d仍高于正常（P<0.05），而且，手术结束时明显高于主动脉开放时（P<0.05）。相反，SOD的活性在体外循环期间下降，体外循环结束后逐渐回升,术后第1 d仍低于正常（P<0.05）。 结论： 体外循环时有明显的心肌损伤；氧自由基促进脂质过氧化反应，可能是体外循环心肌缺血再灌注损伤的机制。     

CHIP与心肌缺血/再灌注损伤

Carboxyl terminus of the HSP70-interacting protein (CHIP) is a co-chaperone of HSPs as well as an E3 ubiquitin ligase, and it is the connexin between heat shock proteins and ubiquitin-proteasome system. Recent research discovered that CHIP also possesses an intrinsic chaperone activity that enables it to recognize and bind nonnative proteins independently. CHIP regulates the HSPs expression and activity, and facilitates the client proteins ubiquitination and subsequent proteasome-dependent degradation. CHIP also inhibits apoptosis through MAPKs signaling pathways, and affects eNOS specific activity by means of the effects on Akt. Moreover, CHIP plays an important role in mitochondrial oxidative stress protection. With these above points, this paper reviews the function of CHIP in myocardial ischemia/reperfusion injury.     

缺血/再灌注损伤时心肌内源性11, 12-环氧二十碳三烯酸的变化

目的: 测定大鼠心肌缺血/再灌注前后心肌组织中11, 12-环氧二十碳三烯酸(11, 12-EET)含量的变化情况。方法: 实验分为2组: 缺血/再灌注组和假手术组, 测定各组心功能的同时采用气相色谱法测定各组心肌组织中11, 12-EET的含量。结果: 心肌组织中11, 12-EET在缺血/再灌注损伤后明显增加(P<0.01)。结论: 内源性11, 12-EET含量的增加可能是缺血/再灌注损伤的机制之一。     

心肌缺血/再灌注损伤神经酰胺含量变化和凋亡机制的研究

目的：观察发生心肌缺血/再灌注损伤时神经酰胺的变化并探索它与氧化应激及细胞凋亡之间的关系。 方法： 用垂体后叶素（Pit）诱发小鼠在体心肌缺血再灌注损伤，取心肌测定SOD活性及MDA含量，通过DNA ladder和Dapi荧光染色观察心肌细胞凋亡情况，通过高效薄层层析及薄层层析扫描，用随引标准曲线计算心肌组织中神经酰胺的含量。 结果： 模型组心肌细胞有凋亡特有的DNA ladder,凋亡指数和神经酰胺含量及MDA含量均显著高于正常对照组(P<0.01),SOD活性显著低于正常对照组(P<0.01)，模型组神经酰胺含量与凋亡指数和MDA含量均呈明显正相关(r=0.970，P<0.01；r=0.974， P＜0.01)。 结论： 在心肌缺血再灌注过程中伴随着氧化应激和凋亡第二信使－神经酰胺含量的增高，最终发生了心肌细胞的凋亡。     

PTH、细胞内钙和CaSR在心肌损伤中的“三角关系”

正甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)是甲状旁腺细胞分泌的调控机体钙磷代谢的重要激素。近年来,PTH对于心肌的毒性作用开始受到人们关注。钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)是G蛋白偶联家族成员之一,可以感受细胞外钙浓度的细微变化,并通过多种途径调节细胞内钙浓度,进而控制PTH的分泌。CaSR在心肌细胞、     

HOE642对心肌缺血再灌注损伤及细胞凋亡的影响

目的:探讨HOE642对缺血再灌注心肌的保护作用,其作用与给药时间的关系及其对缺血再灌注导致的细胞凋亡的影响。方法:以离体大鼠心脏缺血再灌注为模型,随机分成A、B两组,A组分缺血/复灌(I/R)、缺血前给药(HOE-Pr+I/R)、缺血期间给药(HOE-Is+I/R)、复灌期给药(HOE-Re+I/R)组,测定左室发展压、左室舒张末压、心律失常、心率、冠脉流量和心肌酶。B组分对照、I/R和HOE642+I/R组,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:HOE-Pr+I/R组在缺血复灌期间左室发展压明显高于I/R组,左室舒张末压、各时段心律失常评分低于I/R组,冠脉流出液心肌酶的含量也低于I/R组。HOE-Is+I/R组左室舒张末压、心律失常评分、冠脉流出液心肌酶的水平低于I/R组,左室发展压与I/R组比无明显差异。HOE642+I/R组的TUNEL阳性细胞数量显著低于I/R对照组(11.5±5.7vs51.8±15.2)。结论:HOE642对缺血再灌注心肌有保护作用,保护作用与给药时间有关,缺血前给药能充分发挥其心肌保护作用,抑制心肌细胞凋亡可能是其心肌保护作用机制之一。     

线粒体钙单向转运体复合物与缺血/再灌注损伤

通常情况下,组织缺血后再灌注可使组织、器官功能得到恢复;但是有时缺血后再灌注,不仅不能使组织、器官功能恢复,反而会加重组织、器官的损伤.这种在缺血基础上再灌注后损伤加重的现象称为缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤.     

α-亚麻酸减轻糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤

 目的 研究摄食?-亚麻酸（ALA）对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤的影响。方法 构建高脂饲料-链脲霉素诱导的2型糖尿病大鼠模型（HFD-STZ）,每日灌胃给予正常或HFD-STZ大鼠ALA处理（500 μg/kg）,4周后行心肌缺血（30 min）/再灌注（4或6 h）,并检测心肌梗死范围、血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）活性、细胞凋亡,用Western blot检测PI3K、Akt等。结果 HFD-STZ大鼠MI/R损伤加重,虽摄食ALA 4周对正常动物MI/R损伤无影响,但可将HFD-STZ大鼠的心梗面积减小至37.7% ± 5.4%,显著低于对照组的45.6% ± 8.5%（P < 0.05）,且血清CK、LDH活性及细胞凋亡减少;还可增加HFD-STZ大鼠心肌PI3K表达及Akt磷酸化。结论 长期摄食ALA有效减轻糖尿病大鼠MI/R损伤,可能与激活PI3K-Akt信号有关。     

心肌缺血再灌注损伤中细胞焦亡的研究进展

细胞焦亡是近年来发现并被证实的一种新的细胞程序性死亡方式,它的特征是依赖半胱氨酸天冬氨酸酶1(cysteinyl aspartate specific proteinase 1,caspase-1)并伴随大量炎症因子的释放。细胞焦亡参与了包括感染性疾病在内的多种疾病的病理生理过程。作为一种新的调节性细胞死亡方式,近年来...