DNA定量在乳腺导管非典型增生与原位癌诊断中的应用

目的DNA定量鉴别乳腺导管非典型增生与原位癌、原位癌及浸润癌。方法对乳腺导管非典型增生（7例）、原位癌（15例）及浸润癌（18例）共计40例进行细胞涂片,Feulgen染色,全自动图像分析仪进行细胞核定量检测。结果乳腺导管非典型增生及原位癌均未见DNA异倍体,未出现五倍体（5c）细胞,两组间DNA指数及S期细胞比率有统计学差别（P〈0.05）。浸润癌检测到大量DNA异倍体,出现五倍体（5c）细胞,DNA指数及S期细胞比率高于原位癌,但不具有统计学差别（P〉0.05）。结论利用图像分析仪检测DNA含量、S期细胞比率对乳腺导管非典型增生与原位癌的鉴别、原位癌与浸润癌的鉴别具有一定的临床意义。     

化疗对非小细胞肺癌PCNA表达及肿瘤细胞DNA含量的影响

目的研究化疗对非小细胞肺癌PCNNA表达和肿瘤细胞DNA含量的影响,及PCNA阳性指数与DNA含量的关系.方法用免疫组化S-P法检测两配对组各18例非小细胞肺癌PCNA表达,并用图像分析系统进行肿瘤DNA分析、倍体测量.结果化疗后组与对照组肿瘤在PCNA阳性指数(PI)、DNA指数、平均DDNA质量、S期比率及＞5C细胞百分比均有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).且PI与DNA含量之间呈正相关关系.但两组间异倍体肿瘤率无显著差异(P＞0.05).结论联合化疗影响肿瘤细胞PCNA表达及DNA含量,即降低了肿瘤的增殖活性.     

乳腺肿瘤中DNA含量、Ki-67指数、肿瘤微血管密度（MVD）的定量研究

 目的 探讨DNA含量、Ki-67指数、肿瘤微血管密度（MVD）在乳腺肿瘤中意义、相关关系及计算机图象分析技术在肿瘤研究中的应用。方法 运用计算机图像分析系统对60例乳腺癌、28例乳腺癌前病变、25例乳腺良性病变中Ki-67、MVD及DNA含量进行定量检测。结果 Ki-67标记指数、微血管密度、细胞DNA相对倍体均值（U值）按乳腺良性病变、乳腺癌前病变及乳腺癌的顺序呈递增趋势，且随乳腺癌分级的增高而显著增高。结论 DNA相对倍体均值（U值）和Ki-67标记指数均能较好地反映肿瘤细胞增生活性。肿瘤MVD反映血管生成，是恶性实体性肿瘤生长和增殖的基础，是淋巴结转移的重要因素。计算机图像分析仪能够对肿瘤的组织切片进行多种参数的自动测量分析，为乳腺癌的自动化诊断及淋巴结转移判断提供方便。它将逐步应用到临床病理诊断工作中。     

乳腺癌DNA含量测定的临床意义

目的探讨乳腺癌DNA含量与病理组织学参数、激素受体之间的相关性，进一步分析其临床病理学意义。方法在病理组织学观察的基础上，运用流式细胞术检测65例乳腺癌、15例乳腺良性病变的DNA含量；同时用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中雌、孕激素受体（ER、PR）的表达。结果DNA含量在乳腺癌与乳腺良性病变中明显不同，存在显著性差异；S期指数（S phase fraction，SPF）与肿瘤大小、组织学分级均存在显著相关性。结论肿瘤DNA非整倍体的出现，可能可以作为判断良、恶性肿瘤的参考指标；与临床病理学参数比较，增殖指数SPF在判断肿瘤的生物学行为方面更敏感，更有价值。     

乳腺肿瘤DNA含量及雌激素受体的测定

应用流式细胞分析仪检测乳腺癌（４２例）、乳腺纤维腺瘤（１０例）、乳腺囊性增生病（１０例）及正常乳腺组织（１０例）的细胞ＤＮＡ含量。４２例乳腺癌标本中，２６例（６２％）为异倍体ＤＮＡ；乳腺囊性增生病和正常乳腺组织均为二倍体ＤＮＡ。乳腺癌标本均行雌激素受体（ＥＲ）测定，１１例（２６％）为阴性。同时对所有乳腺癌进行有关临床资料和病理分析，发现乳腺癌ＤＮＡ含量与病人年龄及ＥＲ状态差异均有显著性意义（Ｐ＜０．０５）。乳腺肿瘤细胞周期分析发现异倍体癌Ｓ期细胞比率最高。通过乳腺癌细胞ＤＮＡ含量及ＥＲ测定，计算细胞增殖周期中各期细胞比率，可以判断乳腺癌生物学特性，为患者预后的评估提供客观、定量和可重复性参数，弥补形态学检查的不足，并对术后辅助治疗有指导意义。     

乳腺癌和癌前病变的核仁组成区嗜银蛋白含量研究

乳腺癌和癌前病变的核仁组成区嗜银蛋白含量研究桂开林，张哉根核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）与细胞增生和恶性程度有关。作者应用银染色方法研究核仁的结构和功能变化，探索细胞增生和分化的基因调控，并就乳腺良、恶性病变的ＡｇＮＯＲ含量和形态与生物学行为及预后...     

乳腺癌细胞的DNA含量、AgNOR计数及与预后的关系

 本文采用流式细胞术检测了54例乳腺肿瘤细胞的DI、PI和S期细胞比例等项参数，其中34例乳腺癌进行了A_gNOR计数和5年～14年随访。经分析表明：DI、PI和S期细胞比例可区分肿瘤的良恶性，A_gNOR计数、DI、PI和S期细胞比例与乳腺癌的预后有关。     

星形胶质细胞瘤的流式细胞和AgNORs计数分析

本文应用流式细胞计和胶银染色法分析星形胶质细胞瘤50例的瘤细胞DNA含量、S期百分率和核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs)。我们将肿瘤分为两类,即高分化性(相当于Ⅰ、Ⅱ级,HDG)24例;低分化性(相当于Ⅰ、Ⅳ级,PDG)26例。结果HDG的DNA含量、非整倍体率、S期百分率和AgNORs计数均低于PDG。经统计学处理两者有显著差异。患者术后放疗的总5年存活率为31.3％。本文提示星形胶质细胞瘤瘤细胞的DNA含量和AgNORs计数分析可作为传统病理诊断的辅助指标。     

星形胶质细胞瘤的流式细胞和AgNORs计数分析

 本文应用流式细胞计和胶银染色法分析星形胶质细胞瘤50例的瘤细胞DNA含量、S期百分率和核仁组成区相关嗜银蛋白（AgNORs）。我们将肿瘤分为两类，即高分化性（相当于Ⅰ、Ⅱ级，HDG）24例；低分化性（相当于Ⅰ、Ⅳ级，PDG）26例。结果HDG的DNA含量、非整倍体率、S期百分率和AgNORs计数均低于PDG。经统计学处理两者有显著差异。患者术后放疗的总5年存活率为31.3%。本文提示星形胶质细胞瘤瘤细胞的DNA含量和AgNORs计数分析可作为传统病理诊断的辅助指标。     

良恶性乳腺疾病的DNA倍性及细胞周期分析

 本文用流式细胞仪检测了111份乳腺肿块和95份肿块周围组织的DNA含量和细胞周期，对良恶性乳腺疾病的DNA倍性及细胞增殖活性进行比较，以探讨其在肿瘤诊断上的价值。结果表明，乳腺癌的异倍体率高达78％，且以多倍体为主，占89．74％；18例乳腺增生症中有2例异倍体（11．11％），43例乳腺纤维腺瘤中有11例异倍体（25．58％），但乳腺良性疾病和其周围组织以及癌周组织中均未见多倍体。细胞周期分析发现，乳腺癌及其癌周组织的增殖活性（S期百分比或增殖指数PI）明显高于乳腺良性疾病及其周围组织。结果提示，多倍体或高增殖活性在乳腺良恶性肿瘤的鉴别诊断中具有很重要的意义。     

食管鳞状细胞癌DNA含量和倍体分析的临床意义

目的:研究食管鳞状细胞癌DNA含量的分布及倍体类型与其生物学行为的关系。方法:采用流式细胞技术对手术切除的106例食管鳞癌患者新鲜标本进行DNA分析,分析DNA含量、S期细胞分数、增殖指数及倍体类型与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移、病理分级及分期等生物学行为的关系。结果:食管鳞癌患者异倍体出现率为82.08%。DNA含量、S期细胞分数、增殖指数随TNM分期增加呈现逐渐增高的趋势,但与肿瘤浸润深度(T分期),病理分级不相关。有淋巴结转移组食管鳞癌S期细胞分数和增殖指数均高于无淋巴结转移组,DNA含量两组间差异并无统计学意义。异倍体食管鳞癌DNA含量、S期细胞分数、增殖指数及淋巴结转移均明显高于二倍体食管鳞癌。结论:食管鳞癌DNA含量的分布及倍体类型与其生物学行为相关,DNA分析是评估食管鳞癌预后、制定术后治疗方案的一个有价值的参数。     

乳腺癌组织中bcl一2蛋白表达及其与DNA倍体的关系

目的:探讨乳腺癌中bcl-2蛋白表达及DNA倍性与患者临床病理因素的关系.方法:采用流式细胞光度术(FCM)定量分析63例原发性乳腺癌癌组织、相应癌旁组织和22例乳腺良性肿瘤中bcl-2蛋白表达及DNA倍性.结果:乳腺癌组织中bcl-2蛋白表达水平及DNA指数(DI)、S期比例(SPF)和增殖指数(PI)显著高于相应癌旁组织和乳腺良性肿瘤(P＜0.05),而后两者在上述指标上未见显著性差异(P＞0.05).浸润性非特殊类型癌患者DI、SPF和PI明显高于早期浸润癌患者和浸润性特殊类型癌患者(P＜0.05);有淋巴结转移组患者DI和SPF显著高于无淋巴结转移组患者(P＜0.05).bcl一2蛋白表达与患者年龄、病理组织学类型、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期均无关(P＞0.05).癌组织bcl一2蛋白表达水平与SPF和PI呈负相关(P＜0.05).结论:bcl-2蛋白表达与乳腺癌发生、发展有关;DI和SPF与淋巴结转移有关;DNA含量可作为判断乳腺癌预后的重要指标.     

胃癌及非癌细胞DNA流式细胞光度分析

用流式细胞光度术对127例胃组织样品进行DNA含量分析.光镜下分为正常粘膜,浅表性胃炎,慢性萎缩性胃炎,轻、中、重度不典型增生和胃癌共7组.以DNA指数表示细胞核相对DNA含量.结果:重度不典型增生及胃癌组均与前5组有极显著差异,对其中64例的细胞周期分析表明:正常组与浅表性胃炎组之间S期细胞比率、细胞增殖指数无显著差异,但与其他组有显著差异,胃癌组细胞增殖指数与除重度不典型增生之外的其他组有显著差异.因此,DNA含量异常,S期细胞比率及细胞增殖指数明显增高,为胃粘膜潜在恶性或恶变的客观指标.     

乳腺癌外周血微转移与远处转移的相关性

背景与目的:乳腺癌是一种全身性疾病,早期就可发生血行转移.本研究采用流式细胞仪定量检测乳腺疾病患者外周血肿瘤细胞含量,探讨外周血肿瘤细胞含量与远处脏器转移的相关性.方法:以人细胞角蛋白抗体和CD45抗体双色免疫标记,应用多参数流式细胞仪方法检测65例乳腺癌患者术前和10例乳腺良性病变及8例健康献血者外周血标本中肿瘤细胞含量.结果:65例乳腺癌患者中,57例检测出肿瘤细胞,阳性率为87.7%;乳腺良性病变、健康献血者外周血中未检测到肿瘤细胞.外周血肿瘤细胞阳性率与肿瘤T分期及N分期具有相关性(r=0.271,P=0.017;r=0.393,P=0.002).除2例失访外,63例患者经过5年随诊,25例出现远处脏器转移,5年转移率为39.7%.所有远处转移病例均为外周血检测阳性患者,8例术前外周血检测阴性的患者均未发现远处转移,两组比较差异有统计学意义(P=0.014);而远处转移与肿瘤T分期、N分期均无明显相关性.结论:术前外周血肿瘤细胞数量与远处转移具有明显相关性,多参数流式细胞术检测乳腺癌患者外周血肿瘤细胞,对指导乳腺癌的个体化治疗具有潜在的应用价值.     

乳腺癌中AgNOR计数及其意义

 应用AgNOR染色技术，对55例乳腺癌和32例乳腺纤维腺瘤中核仁组成区相关银蛋白（以下称AgNOR）颗粒进行计数研究。结果表明：乳腺癌组织中AgNOR平均颗粒数为10.07±2.94个/核，而乳腺纤维腺瘤中AgNOR平均颗粒数为2.46±0.57个/核，两者结果比较差异非常显著（P<0.001）。另外，AgNOR计数与乳腺癌的组织学类型有关，即分化越低的乳腺癌AgNOR计数越多。文中对AgNOR含量的变化及预后进行了讨论。     

TSG101的下调对乳腺癌细胞的作用

目的:研究肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSGl01)的下调对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞的作用及TSG101在乳腺癌组织中的表达.方法:应用脂质体法将靶向TSG101的小干扰RNA(smallinterfering RNA,siRNA)转染入乳腺癌细胞系MCF-7细胞中.分别使用MTT法、流式细胞仪、transwell小室法检测siRNA干扰后MCF-7细胞增殖能力、细胞周期、细胞凋亡率和细胞迁移能力的变化.使用免疫组织化学方法检测TSG101在54例乳腺浸润性导管癌及癌旁正常乳腺组织中的表达.结果:MTT结果显示,TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞与对照组相比,增殖能力减弱.细胞周期结果显示.TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞周期G0/G1期及S期比例(70.51±0.23;23.65±0.78)与对照组(59.15±0.77,34.96±0.45)、(59.21±0.68.34.89±0.30)相比,G0/G1期比例增多,S期比例减少.细胞凋亡结果显示,TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞(13.71±1.31)与对照组(4.37±0.87)、(6.00±0.08)相比,细胞凋亡率增加.细胞迁移结果显示,TSG101 siRNA转染后的MCF-7细胞(4.60±0.80)与对照组(24.47±1.90)、(23.80±2.20)相比,细胞迁移能力减弱.免疫组化实验结果显示,TSG101蛋白主要定位于乳腺癌细胞质和(或)细胞核内,呈棕黄色颖粒.54例乳腺癌组织中TSG101阳性表达40例(74.07%),TSG101在癌旁正常乳腺组织中不表达或呈微弱的胞质表达,TSG101在乳腺癌组织中的表达高于癌旁正常乳腺组织.结论:TSG101的下调能够抑制乳腺癌细胞系MCF-7细胞的增殖,诱导凋亡,阻滞细胞周期于G1/S期,并且降低其迁移能力.TSG101可能参与乳腺癌的发生、发展过程.     

中晚期宫颈癌血管介入治疗61例应用

[目的]探讨超选择性髂内动脉插管化疗对中晚期宫颈癌的疗效.[方法]经皮股动脉穿刺插管.在数字减影血管造影下(DSA),对61例(81例次)中晚期宫颈癌进行超选择性髂内动脉及肿瘤供血动脉插管化疗,其中20例宫颈癌患者介入前后使用流式细胞仪进行DNA含量(DI)测定和S期细胞比率(SPF)以及细胞凋亡的检测,另30例宫颈癌患者介入前后取宫颈活检组织检测核仁组成区嗜银蛋白(AgNOR)、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.[结果]介入治疗近期有效率为78.7%,症状缓解有效率为88.5%,手术治疗46例,栓塞组术中出血量明显低于未栓塞组(P＜0.05);介入化疗后的DI、SPF均显著低于化疗前(P＜0.05);介入化疗后的AgNOR颗粒数目减少、直径增大(P＜0.05),介入化疗后PCNA的积分减少(P＜0.05).[结论]①中晚期宫颈癌经超选择性血管介入治疗获得根治手术机会明显增加;动脉化疗-栓塞治疗效果优于动脉化疗;提示未经治疗的宫颈癌患者为血管介入化疗最佳适应证.②介入化疗能降低其DNA含量和S期细胞比率,抑制宫颈癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制肿瘤的恶性进展.③超选择性髂内动脉插管化疗为一种微创、可重复进行、安全、有效的治疗措施.     

c-FLIP（L）在乳腺癌中表达的意义及对凋亡的调节*

目的:检测乳腺浸润性导管癌组织中c-FLIP （L）蛋白的表达,探讨c-FLIP （L）在乳腺癌中的临床病理意义,以及对乳腺癌细胞凋亡、增殖的影响。方法:收集116 例乳腺浸润性导管癌标本,应用免疫组化技术分析c-FLIP （L）与乳腺癌临床病理因素的相关性。以TUNEL标记肿瘤细胞凋亡指数,Ki-67标记增殖指数,分析c-FLIP （L）与细胞凋亡、增殖的相关性。结果:c-FLIP（L）蛋白定位于浸润性导管癌癌细胞胞浆中,ER、PR、Ki-67定位于肿瘤细胞胞核,Her-2 定位于肿瘤细胞胞膜,TUNEL染色定位于肿瘤细胞胞核。c-FLIP （L）蛋白高表达与患者低年龄（<35岁）、绝经前、未发生远处转移、较早的pTNM 分期（Ⅰ～Ⅱ期）密切相关;与家族史、手术方式、肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级和肿瘤复发等临床病理因素不存在显著相关性。在总病例中,ER阳性64例（55.17%）,PR阳性43例（37.07%）,Her-2 阳性19例（16.38%）。 c-FLIP （L）高表达与ER、PR之间存在显著相关性（P<0.05）,与Her-2 表达无关。c-FLIP （L）蛋白表达与乳腺癌凋亡指数正相关（r=0.544,P<0.05）,虽然呈现c-FLIP （L）表达越高增殖指数越低的趋势,但二者之间相关系数无统计学意义（r=-0.148,P>0.05）。 结论:在乳腺癌中,c-FLIP （L）阳性表达提示患者较为良好的临床预后,该因子可能直接或间接参与肿瘤细胞凋亡过程,具有进一步研究的价值。      

流式细胞术Ki67/DNA双标记法在实体肿瘤中的应用

目的 探讨流式细胞术双标记法检测恶性实体肿瘤细胞DNA含量、细胞周期和Ki67表达和组织学分级之间的关系.方法 利用流式细胞术Ki67/DNA双标记法同时检测87例新鲜恶性实体肿瘤的DNA含量、细胞周期和增殖核抗原Ki67的表达.结果 异倍体发生率为40.2%,其中高分化肿瘤为11.1%,中分化肿瘤为37.5%,低分化肿瘤为46.3%.Ki67阳性细胞为0.5%～87%(17.36%±16.6%).S期细胞百分比为0～24%(5.28%±4.85%).高分化肿瘤S期细胞百分比及增殖核抗原Ki67的表达明显低于中分化和低分化肿瘤.统计学上有显著性差异(P＜0.01).中分化和低分化肿瘤之间则差异无显著性(P＞0.05).异倍体肿瘤S期细胞百分比高于二倍体肿瘤,差异有显著性(P＜0.01),而Ki67的表达在两者之间无显著性差异.结论 流式细胞术Ki67/DNA双标记法可同时检测实体恶性肿瘤细胞的DNA含量、细胞周期和增殖核抗原Ki67的表达,并能进一步阐明这些参数与组织学分级的关系.方法 简便、快速,有利于对肿瘤生物学特性的了解.     

鼻咽癌 DNA倍体、增殖指数对预后的预测意义

背景与目的：放射治疗是鼻咽癌的基本治疗方法,改变分割次数放疗及化学治疗已成为晚期鼻咽癌综合治疗方案的一部分,但是,已知的预后因素在预测鼻咽癌治疗结果时有较大的偏差,本研究采用流式细胞仪测定鼻咽癌肿瘤细胞DNA含量及增殖指数,确定其能否成为判断预后的参考指标。方法：对1994年至1995年间205例石蜡包埋存档的鼻咽癌活检组织块进行DNA倍体。细胞增殖指标包括S－期细胞分数,G2／M期细胞分数及增殖细胞期分数的测定并与相应病人的临床参数及预后进行相关分析。结果：205例检测的标本中,117例肿瘤活检组织符合DNA流式细胞仪会议指南标准,其中35例（30％）为异倍体肿瘤,82例（70％）为二倍体肿瘤,DNA倍体及各增殖指数与年龄,性别,病理类型,T／N分期及临床分期无显著性相关,异倍体肿瘤的S期细胞分数及增殖期细胞分数显著高于二倍体肿瘤,5年无瘤生存率亦存在显著差异（43％verse 632%p=0.035)。低、中、高S期细胞分数组及增殖期细胞分数组,5年无瘤生存率分别存在显著性差异（81％,verse 61% vese21%;77% verse62%verse 33%,P=0.000及P=0.048),低、中、高G2／M期细胞分数组,5年无瘤生存率无明显差异（35％verse 58% verse 54%,P=0.8617)。结论：DNA倍体,S期细胞分数及增殖细胞分数为鼻咽癌治疗的预后指标,因此,连同临床,病理参数一起,可做为筛选出预后较差的鼻咽癌个体病人的参考标准。