耐多药结核及泛耐药结核诊治的新认识

耐多药结核(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)的定义为,经体外试验证实结核分枝杆菌至少同时对异烟肼和利福平耐药。泛耐药结核(extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB)则定义为,经体外试验证实结核分枝杆菌除同时对异烟肼、利福平及全部氟喹诺酮类药物耐药外,还对至少1种二线抗结核静脉制剂(卷曲霉素、卡那霉     

116例耐多药肺结核患者二线抗结核药物耐药情况分析

目的 分析宁波地区耐多药结核分枝杆菌对二线抗结核药物的耐药现况,为耐多药结核病的有效防控提供科学依据。方法 从宁波市疾病预防控制中心共收集116例耐多药结核分枝杆菌临床分离株,对其进行8种二线抗结核药物左氧氟沙星、氧氟沙星、莫西沙星、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素、丙硫异烟胺和对氨基水杨酸的敏感性进行检测,分析不同药物耐药率及交叉耐药情况。结果 二线抗结核药物中耐药率分别为左氧氟沙星（31.0%）、氧氟沙星（29.3%）、莫西沙星（9.4%）、卡那霉素（8.6%）、阿米卡星（7.8%）、卷曲霉素（3.4%）、丙硫异烟胺（6.0%）和对氨基水杨酸（19.8%）。初治患者对卷曲霉素的耐药率显著高于复治患者（2=4.925, P0.05）,此外卡那霉素和阿米卡星之间,氧氟沙星和左氧氟沙星之间存在完全交叉耐药。结论 耐多药肺结核患者对二线抗结核药物耐药率较高,且存在广泛耐药结核病例,应开展二线抗结核药物敏感性检测,以便给予合理治疗。     

宁波市耐多药肺结核二线抗结核药物耐药状况及耐药基因突变特征研究

  目的  分析宁波地区耐多药肺结核（MDR-TB）二线抗结核药物耐药状况及耐药基因突变特征。  方法  研究纳入本地区2018 — 2019 年结核病耐药监测收集的1597株结核分枝杆菌痰培养阳性菌株中的133株MDR-TB作为研究对象（老年组31例,中青年组102例）,应用RD105缺失基因检测法对133株MDR-TB菌株进行北京基因型鉴定,同时采用1%比例法对其进行卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星5种二线抗结核药物的耐药检测。通过PCR DNA直接测序法检测6个二线抗结核药物耐药相关基因（rrs、tlyA、eis、gidB、gyrA、gyrB ）的突变特征。  结果  本地区结核分枝杆菌总的耐多药率为8.33%（133/1597）,133例MDR-TB的卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素、氧氟沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为7.52%（10/133）、6.01%（8/133）、3.01%（4/133）、30.08%,（40/133）、29.32%（39/133）。 133例MDR-TB 的准广泛耐药率（Pre-XDR）为28.57%（38/133）、广泛耐药率（XDR-TB）为6.01%,（8/133）。 133例MDR-TB rrs突变率为6.77%（9/133）、tlyA为7.52%（10/133）、eis为1.50%（2/133）、gidB为3.76%（5/133）、gyrA为34.59%（46/133）、gyrB为3.01%（4/133）。 6个基因的突变类型（rrs 2种、tlyA 1种、eis 2种、gidB 2种,gyrA 5种、gyrB 4种）均以点突变为主。  结论  宁波地区MDR-TB二线抗结核药物耐药形势较为严峻,尤其是氟喹诺酮类药物耐药率较高,需进一步加强耐二线抗结核药物MDR-TB的防控工作。     

浙江省宁波地区耐多药结核分枝杆菌北京基因型的流行及与喹诺酮耐药关系的研究

目的 初步探讨北京基因型耐多药结核分枝杆菌在宁波地区的流行现况及与喹诺酮类药物耐药相关性,为本地区耐多药结核病的有效防控及分子流行病学研究提供科学依据。方法 应用RD105缺失基因检测法对宁波市疾病预防控制中心收集的106例耐多药结核分枝杆菌临床分离株（MDR-TB）进行北京基因型鉴定,并采用1%比例法对106例MDR-TB菌株进行3种喹诺酮类药物左氧氟沙星（LFX）、氧氟沙星（OFX）、莫西沙星（MXF）耐药性检测。结果 106株MDR-TB菌株中,北京基因型83株（78.3%,83/106）,非北京基因型23株（21.7%,23/106）。北京基因型耐喹诺酮类药物28株（33.7%,28/83）,非北京基因型耐喹诺酮类药物6株（26.1%,6/23）,差异无统计学意义（2=0.483,P0.05）。结论 宁波地区MDR-TB流行以北京基因型为主,MDR-TB对喹诺酮类药物的耐药与北京基因型无关。     

淮安地区350株痰结核分枝杆菌药敏结果及初复治耐药结果分析

目的分析淮安地区住院及门诊随访患者痰标本中分离出的结核分枝杆菌对4种常用抗结核药物的耐药情况,比较初治及复治患者对4种结核药物的敏感度差异,为临床治疗提供用药参考,减少经验用药加强规范合理用药减少结核分枝杆菌耐多药率的发生。方法采用比例法 对350株结核分枝杆菌进行两种一线抗结核药（异烟肼,利福平）两种抗结核药（氧氟沙星,卡那霉素）敏感性测定。结果350株结核分枝杆菌总体耐药率为37.7%（131/350）,而初治耐药率为30.4%（71/233）,复治耐药率为51.3%（60/117）。另外350株结核分枝杆菌的总体耐多药率为15.4%（54/350）,而初治耐多药率为11.2%（26/233）,复制耐多药率为23.9%（28/117）。与全国第五次结核病流行病学调查比较耐药率及耐多药率均有提高。结论复治肺结核患者分离出的结核分枝杆菌耐药率及耐多药率均较初治患者高。加强患者管理,规范治疗对初治患者尤为重要。     

174株耐多药结核分枝杆菌对二线抗结核药耐药情况分析

目的：分析该院耐多药结核分枝杆菌对二线抗结核药的耐药情况,为耐多药结核病的治疗提供参考。方法采用回顾性分析法分析2011年5月至2013年5月结核病患者痰标本培养及药敏结果资料,对比分析耐多药分枝结核杆菌对5种二线药物耐药比率。结果初治耐多药结核分枝杆菌对二线耐药情况如下：耐药顺次由高到低依次为左氧氟沙星、对氨基水杨酸、丙硫异烟胺、阿米卡星及卷曲霉素的耐药比率分别为17．7％、14．5％、12．9％、8．1％及3．2％,耐两种的比率为4．8％,耐3种及3种以上的比率均为3．2％;复治情况的耐药顺次同初治顺次,但耐药比率不同,分别为50．0％、33．9％、25．9％、21．4％和16．1％,耐2种的比率为16．1％,耐3种为13．4％,耐3种以上的为12．5％。初治与复治的各种情形耐药比率比较,差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论该院耐多药结核杆菌耐药比率低于国内平均水平,复治病例耐药比率高于初治。     

结核分枝杆菌临床分离株对三种氟喹诺酮类药物的敏感性分析研究

目的对结核分枝杆菌（MTB）临床分离株对氧氟沙星（OFX）、左氧氟沙星（LFX）和莫西沙星（MFX）三种临床常用的氟喹诺酮类药物的敏感性进行分析研究,为临床用药提供依据。方法本研究采用液体培养基联合MTT技术进行抗结核药物的最低抑菌浓度（MIC）检测。对来自我院不同结核病患者的163株MTB临床分离株进行0FX、LFX、MFX三种药物的MIC检测和BactecMGIT960药敏检测。结果163株中OFX耐药株占35．6％;耐多药（MDR）结核菌株中,OFX耐药率为73．5％,MDR菌株中LFX耐药率超过一半以上;所有MTB菌株MFX的MIC值均≤1μg／ml。结论目前在MTB临床分离株中,OFX和LFX已出现较高的耐药率,值得引起临床医生的重视,MFX在MDR结核和广泛耐药（XDR）结核中显示出良好的抗菌效果,给MDR结核病的治疗带来希望。     

2013－2017年湖南省耒阳市结核分枝杆菌耐药性特征的动态研究

目的分析2013 — 2017年湖南省耒阳市结核分枝杆菌的耐药性动态变化趋势，了解该地区流行结核分枝杆菌耐药谱特征，为结核病的化疗方案制定和防控提供科学参考依据。方法回顾性分析2013 — 2017年耒阳市收集的国家耐药监测菌株，经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）鉴定为结核分枝杆菌的菌株采用微孔板法测定8种常用一线二线抗结核药的最小抑菌浓度，采用统计描述和趋势χ2检验分析其耐药特征变化。结果本研究共纳入568株结核分枝杆菌临床分离株，其中105（18.49%）株来自复治结核病患者，463（81.51%）株来自初治结核病患者。 总耐药率为22.13%（120/568），总耐多药率为6.34%（36/568），广泛耐药结核率为0.35%（2/568）。 耐药趋势分析结果显示，仅对氟喹诺酮类药物的耐药率呈逐年升高趋势（趋势χ2＝8.585，P＝0.003），对其他药物的耐药率、总耐药率、耐多药率等变化不大，差异无统计学意义。结论湖南省耒阳市结核病耐药情况较严重，氟喹诺酮类耐药率在5年间呈逐年上升趋势，提示需要提高警觉，加强氟喹诺酮类药物的规范化使用；在耐药结核病患者治疗中需充分考虑其交叉耐药情况，同时加强该地区耐多药结核病患者的管理以减少原发性耐药结核病的产生。     

浙江省宁波市耐多药结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药特征及与二线抗结核药物耐药关系

目的研究结核分枝杆菌(MTB)对吡嗪酰胺耐药特征及其与二线抗结核药物耐药相关性。方法以2015-2017年浙江省宁波地区结核病耐药监测收集的110例耐多药结核病(MDR-TB)病例作为研究对象,采用1%比例法对其进行5种二线抗结核药物(氧氟沙星、左氧氟沙星、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素)的耐药检测。同时应用BACTEC MGIT 960系统检测所有MDR-MTB的吡嗪酰胺耐药性,采用PCR DNA直接测序法检测MDR-MTB的pncA基因突变特征。结果110株MDRMTB中吡嗪酰胺耐药率为59.09%(65/110),pncA基因突变率为50.91%(56/110)。吡嗪酰胺耐药株中的基因突变率83.08%(54/65)与吡嗪酰胺敏感株中的基因突变率4.44%(2/45)比较,差异有统计学意义(χ^2=65.787,P<0.001)。pncA基因突变类型为42种,以点突变类型为主92.86%(39/42)。耐链霉素、耐乙胺丁醇、耐氧氟沙星、耐左氧氟沙星及准广泛耐药(PreXDR)与MDR-MTB耐吡嗪酰胺相关。结论本地区MDR-MTB耐吡嗪酰胺形势较为严峻,MDR-MTB耐吡嗪酰胺与二线抗结核药物氧氟沙星、左氧氟沙星及Pre-XDR的耐药相关。     

结核分枝杆菌rrs和rpsl基因突变与二线氨基糖苷类耐药关系分析

目的：了解耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌临床分离株rrs与rpsl基因突变特征及其与耐药的关系。方法对136株活动性肺结核患者痰标本分离的结核分枝杆菌进行菌型鉴定及结核分枝杆菌药敏试验,提取耐二线氨基糖苷类结核分枝杆菌DNA,应用PCR扩增rrs和rpsl目的片段,并进行测序、比对验证。结果从136株临床结核分枝杆菌中筛选出耐二线氨基糖苷类菌株25株（18.3%,25/136）,其中耐卷曲霉素13株（9.56%,13/136）、耐卡那霉素9株（6.62%,9/136）、耐卷曲霉素和卡那霉素2株（1.47%,2/136）、耐卷曲霉素、卡那霉素、阿米卡星1株（0.73%,1/136）。经测序分析,25株均存在rrs和（或） rpsl基因突变（100%,25/25）,其中双基因联合突变3株,共计两种类型：rrs A1401G和rpsl AAG43AGG、AAA121AAG （2株）;rrs A1401G和rpsl AAG88AGG、AAA121AAG（1株）;rpsl单基因双突变3株,共计两种类型：rpsl AAG43AGG、AAA121AAG（2株）;rpsl GGT11GTT、AAA121AAG（1株）,rpsl 基因的GGT11GTT突变尚未见相关文献报道,为新的突变位点;余19株为单基因单突变rpsl AAA121AAG。结论结核分枝杆菌对二线氨基糖苷类耐药与rrs和rpsl基因突变有关,rrs A1401G与rpsl基因GGT11GTT突变为进一步研究耐药机制以及耐药结核病的快速检测提供了依据。     

Limited fluoroquinolone resistance among Mycobacterium tuberculosis isolates from Rwanda: results of a national survey

OBJECTIVES: There is an increasing interest in the possible role of fluoroquinolone antibiotics for the treatment of tuberculosis (TB), but widespread use of these antibiotics for the treatment of other bacterial infections may select for fluoroquinolone-resistant Mycobacterium tuberculosis strains. METHODS: We evaluated fluoroquinolone susceptibility using the proportion method (ofloxacin, critical concentration 2.0 mg/L) in isolates from patients enrolled in a national drug resistance survey in Rwanda from November 2004 to February 2005. RESULTS: Of the 701 M. tuberculosis isolates studied, 617 (88%) were susceptible to all first-line drugs, 32 (4.6%) were multidrug-resistant (MDR) and 52 (7.4%) were resistant to one or more first-line drugs but not MDR. Ofloxacin resistance was found in four (0.6%) of the isolates; three of them being MDR and one susceptible to all first-line drugs. Mutations in the gyrA gene were found in all ofloxacin-resistant strains at codons 80 and 94. CONCLUSIONS: Our finding is not alarming for Rwanda, but highlights the general risk of producing resistance to fluoroquinolones, jeopardizing the potential for these drugs to be used as second-line anti-TB agents in the programmatic management of drug-resistant TB and creating incurable TB strains.     

上海地区肺结核病患者氧氟沙星耐药情况分析

目的 了解上海地区肺结核病患者氧氟沙星耐药的分布情况及可能的危险因素.方法 收集2009-2010年上海市各结核病定点医院的447株对任意一种一线抗结核药物(异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇)耐药的菌株,同期随机选取151株对上述4种一线抗结核药物全敏感菌株,对这598株结核分枝杆菌菌株进行氧氟沙星敏感性检测,分析氧氟沙星耐药的分布情况.收集肺结核患者的年龄、性别、抗结核治疗史和户籍资料,采用多因素分析研究氧氟沙星耐药可能的危险因素.用DNA测序分析氧氟沙星耐药菌株gyrA、gyrB基因耐药突变的特征.结果 447株耐药菌株中,72株(16.1%)对氧氟沙星耐药,MDR(至少同时对异烟肼、利福平耐药)结核分枝杆菌中氧氟沙星耐药44株(39.6%).在151株一线抗结核药物全敏感菌株中,4株(2.6%)耐氧氟沙星.多因素分析结果显示MDR和多耐药(对一种以上抗结核药物耐药,但不对异烟肼和利福平同时耐药)等与氧氟沙星耐药有关(OR分别为19.5、5.6,95% CI 分别为6.4～59.4、1.7～18.1,P均＜0.05).患者为复治病例与氧氟沙星耐药相关(OR=2.3,95%CI:1.2～4.0,P＜0.05).氧氟沙星耐药与年龄偏大有关(OR=1.03,95%CI:1.01～1.05,P＜0.05).76株氧氟沙星耐药菌株的gyrA、gyrB基因序列分析显示62株(81.6%)发生耐药突变.结论 上海地区MDR结核病患者中氧氟沙星耐药率高于对一线抗结核药物全敏感的肺结核病患者.MDR、多耐药、复治、年龄为氧氟沙星耐药可能的危险因素,其中以MDR与氧氟沙星耐药的关联强度最大.     

浙江省温州地区196株分枝杆菌耐药监测情况

目的 了解浙江省温州市分枝杆菌耐药状况,为制定耐药结核病控制策略提供依据。方法 随机抽取温州市3县（市）作为耐药监测点,选取监测点2008年和2013年新发和复治涂阳肺结核患者分枝杆菌分离株196株进行4种一线抗结核药物[异烟肼（H）、利福平（R）、链霉素（S）、乙胺丁醇（E）]的耐药性测定;对耐多药（MDR）菌株进行9种二线抗结核药物[卡那霉素（KM）、阿米卡星（AM）、卷曲霉素（CPM）、对氨基水杨酸（PAS）、丙硫异烟胺（PTO）、环丝安酸（CS）、氧氟沙星（OfX）、左氧氟沙星（LVFX）、莫西沙星（MOX）]的耐药性测定。结果 在196株分枝杆菌中,结核分枝杆菌191株。总耐药率为25.1%（48/191）,其中新涂阳和复治涂阳耐药率分别为21.9%（36/164）和44.4%（12/27）,差异有统计学意义（2=6.23,P0.05）;MDR率为6.8%（13/191）,其中新涂阳和复治涂阳MDR率分别为4.3%（7/164）和22.2%（6/27）,差异有统计学意义（2=9.12,P0.01）;4种一线抗结核药物的耐药率由高到低依次为S（19.9%）、H（14.7%）、R（7.9%）、E（3.1%）;耐1、2、3和4种药物的耐药率分别为14.7%、5.2%、2.6%和2.6%;男性与女性的耐药率和MDR率分别为25.5%（36/141）、6.4%（9/141）和24.0%（12/50）、8.0%（4/50）,差异无统计学意义（2分别为0.05和0.93,均P0.05）;不同年龄组间耐药率差异无统计学意义（2=5.34,P0.05）;MDR菌株二线抗结核药物耐药率达8/13;二线抗结核药物的耐药率由高到低依次为OFX和PAS（均为5/13）、CS（4/13）、LVFX和MOX（均为1/4）、CPM（1/13）。结论 温州市耐多药结核病疫情较严重,而且对二线抗结核药物具有较高的耐药率,建议开展二线抗结核药物敏感性检测,加强耐药结核病患者的发现和治疗管理工作。     

Prevalence and Genetic Characterization of Second-Line Drug-Resistant and Extensively Drug-Resistant Mycobacterium tuberculosis in Rural China

This study aimed to investigate the prevalence of resistance to second-line antituberculosis (anti-TB) drugs and its association with resistance-related mutations in Mycobacterium tuberculosis isolated in China. In the present study, we collected 380 isolates from a population-based study in China and tested the drug susceptibility to first- and selected second-line drugs. These results were compared with polymorphisms in the DNA sequences of genes associated with drug resistance and MIC values of the studied second-line drugs. Of 43 multidrug-resistant M. tuberculosis isolates, 13 showed resistance to fluoroquinolones or injectable second-line drugs (preextensively drug-resistant TB [pre-XDR-TB]), and 4 were resistant to both and thus defined as extensively drug-resistant TB (XDR-TB). Age and previous TB therapy, including use of second-line drugs, were two independent factors associated with increased resistance to both first- and second-line drugs. Molecular analysis identified the most frequent mutations in the resistance-associated genes: D94G in gyrA (29.1%) and A1401G in rrs (30.8%). Meanwhile, all 4 XDR-TB isolates had a mutation in gyrA, and 3 of them carried the A1401G mutation in rrs. Mutations in gyrA and rrs were associated with high-level resistance to fluoroquinolones and the second-line injectable drugs. In addition to the identification of resistance-associated mutations and development of a rapid molecular test to diagnose the second-line drug resistance, it should be a priority to strictly regulate the administration of second-line drugs to maintain their efficacy to treat multidrug-resistant TB.     

徐州市结核分枝杆菌耐药情况调查

目的了解徐州市结核分枝杆菌的耐药情况。方法采用整群抽样的方法连续收集徐州市城区结核防治门诊2008年8月至2010年4月痰菌阳性的肺结核患者的痰标本193例,用比例法做一线药物（异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇）的敏感试验,耐多药的患者做二线药物（左氧氟沙星、阿米卡星、卷曲霉素、丙硫异烟胺）的敏感试验。结果符合条件并纳入调查的细菌有178株;178株结核分枝杆菌总的耐药率为38.8%,初治和复治耐药率分别为21.4%、72.1%,耐多药率为18.0%,初治和复治耐多药率分别为4.3%、44.3%,4种一线药物耐药顺序由高到低分别为耐异烟肼30.3%,耐链霉素29.2%,耐利福平22.5%,耐乙胺丁醇19.1%,复治患者对4种一线药物的耐药率明显高于初治患者;同时耐1种、2种、3种、4种药物的初治和复治耐药率分别为6.8%、8.5%、2.6%、4.3%,9.8%、14.8%、9.8%、29.5%,复治患者同时耐3、4种药物的耐药率明显高于初治者;32例耐多药患者对4种二线药物总耐药率为37.5%,耐药顺序由高到低分别为耐左氧氟沙星28.1%,耐丙硫异烟胺15.6%,耐阿米卡星12.5%,耐卷曲霉素6.3%。结论徐州市结核分枝杆菌整体耐药率仍处于高水平,各部门的结核病防治工作者应采取切实有效的措施,降低耐药结核病的发生。     

耐多药结核分枝杆菌临床株耐药性分析

目的探讨贵阳市肺科医院住院结核病患者中的耐药情况,为临床诊断和治疗耐多药结核病（MDR-TB）提供可靠的科学依据。方法对2004年1月至2009年8月期间住院患者的临床分离株进行菌型鉴定后,进行药物敏感性试验,分析不同类型结核病患者的耐药情况。结果 2 318株结核分枝杆菌总的耐多药率为23.8%,初始耐多药率为12.1%,获得性耐多药率为63.8%。结论贵阳市肺科医院收治的结核病患者耐药率较高,应尽快加强耐药结核病患者的防治工作,减少和避免MDR-TB患者的产生。