达托霉素高产菌株选育及发酵条件优化

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,并对其发酵条件优化,以提高其达托霉素发酵水平,降低生产成本。方法 以玫瑰孢链霉菌(DT-9#F2)为出发菌株,分别采用紫外诱变、微波诱变、LiCl诱变及复合诱变并结合链霉素抗性筛选进行菌株选育,同时,对其发酵培养基中氮源、碳源及生长因子进行优化,以进一步提高其发酵产量。结果 得到一株达托霉素高产突变株DT-37,其摇瓶发酵产量达到12.2mg/L,较出发菌株提高20.79%;优化后的发酵培养基为：酵母粉(YP300)1.65%、FeSO4 0.043%、葡萄糖1.50%、玉米淀粉7.20%、糖蜜0.72%,VB12 1.50μg/mL、硫辛酸5.00μg/mL。其摇瓶发酵产量达到30.56mg/L,较初始培养基提高了297.92%。经100L发酵罐上放大验证,达托霉素的产量达到了2872mg/L,较优化前提高了14.88%。结论     

达托霉素高产菌株选育及发酵条件优化

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,并对其发酵条件优化,以提高其达托霉素发酵水平,降低生产成本。方法 以玫瑰孢链霉菌(DT-9#F2)为出发菌株,分别采用紫外诱变、微波诱变、LiCl诱变及复合诱变并结合链霉素抗性筛选进行菌株选育,同时,对其发酵培养基中氮源、碳源及生长因子进行优化,以进一步提高其发酵产量。结果 得到一株达托霉素高产突变株DT-37,其摇瓶发酵产量达到12.2mg/L,较出发菌株提高20.79%;优化后的发酵培养基为：酵母粉(YP300)1.65%、FeSO4 0.043%、葡萄糖1.50%、玉米淀粉7.20%、糖蜜0.72%,VB12 1.50μg/mL、硫辛酸5.00μg/mL。其摇瓶发酵产量达到30.56mg/L,较初始培养基提高了297.92%。经100L发酵罐上放大验证,达托霉素的产量达到了2872mg/L,较优化前提高了14.88%。结论 紫外、微波及LiCl复合诱变后经抗生素抗性筛选,结合发酵培养基优化,可有效提高菌株的达托霉素发酵产量。     

用均匀设计优化达托霉素发酵培养基

目的:优化达托霉素的发酵培养基,提高达托霉素的发酵单位.方法:通过单因素试验设计考察不同碳源、氮源对达托霉素发酵单位的影响,筛选出适用于达托霉素发酵的碳源和氮源;再采用均匀设计对培养基中碳源、氮源的配比进行优化.结果和结论:在备筛选的碳源中,最适用于达托霉素发酵的是糊精,最佳用量为20g/L;最优的氮源是黄豆粉和蛋白粉合用,用量分别为30 g/L和5 g/L.优化后的发酵培养基可提高达托霉素发酵单位30%以上.     

注射用达托霉素有关物质测定方法优化

摘 要 目的：对注射用达托霉素有关物质测定方法进行优化。 方法: 采用IB-SIL C-8（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱;以0.039 mol·L^-1磷酸二氢铵（用1 mol·L^-1磷酸溶液调节pH至3.25）-乙腈（80∶∶50）为流动相B;柱温:20℃;流速:1.5 ml·min^-1;检测波长:214 nm。结果: 注射用达托霉素在0.39~77.25μg·mL^-1线性范围内浓度与峰面积呈良好线性关系,r=1.000 0,最低检测限为2.4 ng,达托霉素与已知和未知杂质分离度良好。结论:本法可用于注射用达托霉素的有关物质的测定。     

FDA批准达托霉素用于治疗皮肤感染

FDA首次批准Cubicin(daptomycin注射剂 )用于治疗复杂皮肤和皮肤结构感染。这些感染通常发生于住院患者中 ,主要包括脓肿、术后伤口感染及感染性溃疡。Cubicin是糖肽类抗菌剂中 ,第一个被批准的产品 ,与其它类抗生素不同 ,其主要用于治疗由革兰氏阳性菌引起的复杂皮肤感染和皮肤结构感染。革兰氏阳性菌包括金黄色葡萄球菌 (包括耐甲氧西林菌株 )、酿脓链球菌、无乳链球菌、和粪肠球菌 (仅万古霉素敏感菌株 )。Cubicin不用于治疗肺炎。FDA批准Cubicin的决定是基于 1 4 0 0名成年患者临床研究证明该药安全有效。临床试验已证实对于复杂皮…     

新的抗革兰阳性菌药物-达托霉素

达托霉素(Daptomycin)是从一株发酵的链霉菌属玫瑰色孢子中提取的具有独特环状结构的脂肽类抗生素.它由一个十碳烷侧链与一个环状β-氨基酸肽链N-末端的色氨酸连接而成[1].它是一种新型的抗生素,发现于20世纪80年代末,是第一个被发现的脂肽类抗生素[2].     

癸酸缓释颗粒对玫瑰孢链霉菌发酵产达托霉素的影响

以玫瑰孢链霉菌NTF206发酵生产达托霉素(1),考察了癸酸缓释颗粒对其产量的影响.采用正交试验设计优化了癸酸缓释颗粒配方,较优组合为癸酸10％,硬脂酸1.0％,聚乙二醇1.5％,琼脂粉1.2％.在此基础上优化癸酸缓释颗粒补加工艺为:初始补加时间36 h,每次补加浓度为4.8 ml/L,补加周期36 h,最终1效价达121.8 mg/L,比对照组提高了79％,补加次数比对照组减少了50％.     

补加葡萄糖对玫瑰孢链霉菌发酵产达托霉素的影响

以玫瑰孢链霉菌H11生产达托霉素(1)。考察了在摇瓶及2.5 L发酵罐中补加葡萄糖对其产量的影响。摇瓶试验结果表明,初始葡萄糖浓度为40 g/L时最佳,在对数生长期后期补加20 g/L的葡萄糖,1产量约提高40%,并显著促进菌体生长。在对数生长期和稳定期分4次共补加20 g/L的葡萄糖,1产量提高62%。2.5 L发酵罐补料分批发酵结果表明,从发酵12 h开始共流加30 g/L葡萄糖,不仅有效延长抗生素的合成期,而且提高了菌体合成抗生素的能力,1产量较分批发酵工艺提高约1.4倍。     

达托霉素致罕见不良反应及应用注意事项

检索医药文献,对所报道的达托霉素的罕见不良反应进行分析。结果发现达托霉素的罕见的不良反应主要有嗜酸性粒细胞性肺炎、横纹肌溶解症、二重感染等。     

达托霉素制备及结构改造研究进展

达托霉素作为首个进入临床应用的新型环脂肽类抗生素,其制备工艺与结构修饰已成为抗感染治疗用药研发的1个热点。概述了达托霉素的来源,生物合成途径,重点介绍了达托霉素的制备方法,以及通过其结构修饰、组合生物合成等途径研发其衍生物的方法。     

Optimization of fermentation conditions for the production of epothilone B

Epothilone is a macrolide secondary metabolite which has the same anticancer effect as paclitaxel. Based on a series of single‐factor experiments, four factors, temperature, initial pH, rotation speed, and inoculum quantity, which have the greatest influence on yield, were determined. Four factors were designed and orthogonal experiments were carried out to optimize the fermentation conditions. Finally, the best experimental conditions were obtained as follows: 250 ml flapper triangular flask was used. The yield of epothilone B was 39.76 mg/L at 30℃, initial pH = 7.4, rotating speed 200 r/min, inoculation amount 10%, liquid loading amount 50 ml/250 ml, fermentation time 6 days and seed age 60 hr.     

纳塔尔链霉菌产纳他霉素发酵条件的优化

采用Plackett-Burman设计、最陡爬坡试验与响应面设计相结合的方法对纳塔尔链霉菌(Streptomyces natalensis)SIPI-120620产纳他霉素的发酵条件进行了优化.结果表明,培养基中的玉米淀粉、葡萄糖和NaC1是影响纳他霉素产量的关键因子.优化后的培养条件为:玉米淀粉70g/L、葡萄糖10.7g/L、黄豆饼粉15g/L、酵母粉20g/L、NaCll.3g/L、碳酸钙2g/L及初始pH6.5.此试验条件下,纳他霉素产量达到4.09g/L,比原培养条件提高了1.86g/L倍.     

达托霉素产生菌前体物耐受选育及其流加补料发酵

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,以及前体物补料发酵方式提高达托霉素的产量。方法 采用常压室温等离子体(atmospheric and room temperature plasma, ARTP)技术对玫瑰孢链霉菌进行诱变,以癸酸铵和甘氨酸耐受作为选择压力进行菌株筛选,在摇瓶和100L发酵罐上进行癸酸铵流加补料试验确定最佳的发酵工艺。结果 经诱变选育获得1株突变株FIM-D1568摇瓶效价达到380mg/L,发酵单位较出发菌株提高了35.7%;通过优化100L发酵罐流加补料癸酸铵溶液工艺,使达托霉素发酵效价达到2276mg/L。结论 以ARTP为诱变源,甘氨酸及癸酸铵耐受性为选择性压力,可以快速筛选获得达托霉素高产菌;高产突变菌株在流加补料发酵工艺上优良性状得以发挥,发酵效价大幅提高。     

硫酸软骨素裂解酶发酵培养基的获得及发酵条件的优化

目的考察发酵培养基中碳源、氮源及无机盐等因素及各种发酵条件对温和气单孢菌YH311产硫酸软骨素裂解酶的影响,获得硫酸软骨素裂解酶最佳发酵培养基和发酵条件。方法采用单因素实验法、均匀设计法及正交设计法。结果获得的最优培养基配方(g·L-1)为:葡萄糖2 5 ,牛肉膏5 0 0 ,硫酸软骨素10 0 ,尿素0 5 ,MgSO4·7H2 O 9 0 ( pH 7 0 ) ;最适产酶条件为:2 % ( φ)种子液,2 8℃,2 0 0r·min-1,振荡通气培养2 4h。在优化条件下,硫酸软骨素裂解酶的产率可达110 0 0U·L-1。结论通过对发酵培养基及发酵条件的优化可将硫酸软骨素裂解酶的产量提高5倍。     

海洋源枯草芽孢杆菌生产壳聚糖酶的发酵工艺研究

目的 对一株海洋源产非诱导型壳聚糖酶的枯草芽孢杆菌LC1-1的液体发酵产酶条件进行筛选优化,并在中试水平的50 L液体深层通气发酵实验中验证摇瓶实验结果的可行性与可放大性。方法 采用Minnimum-Run Equireplicated Res IV设计和中心复合设计 (Central Composite Design)对培养基成分及发酵条件进行优化。结果 Minnimum-Run Equireplicated Res IV实验设计与统计学分析表明：蔗糖浓度和发酵温度是影响LC1-1产壳聚糖酶的2个显著性因素。以壳聚糖酶活力为响应值,对2个显著性因素进行中心复合设计,并经响应面法优化分析得到影响酶活性的二阶模型,确定了壳聚糖酶的最优产酶条件为：蔗糖浓度22.7 g/L,胰蛋白胨15.0 g/L,K2HPO4 2.0 g/L,KH2PO4 1.0 g/L,NaCl 5.0 g/L,MgSO4·7 H2O 0.7 g/L,酵母粉2.0 g/L,pH 5.5,发酵温度34 ℃,装液量20%,转速180 r/min,接种量 2%,发酵周期 20 h。在该条件下测得壳聚糖酶活为32.23±0.32 U/mL。在50 L发酵罐中对摇瓶的优化结果进行中试水平工程化验证,发酵17 h得到最高酶活为39.9 U/mL,证实了摇瓶优化条件的可重现性及可放大性。结论 通过优化菌株LC1-1的发酵条件,提高了菌株产酶能力,并在50 L发酵罐中对摇瓶优化结果进行中试水平的验证,为进一步工程化生产壳聚糖酶提供了参考依据。     

环孢菌素A产生菌发酵条件的优化研究

利用“单因素多浓度”和“均匀设计法”对环抱菌素生产菌株茄病镰刀菌的发酵条件和发酵培养基组分进行优化．并在5000L发酵罐上对菌株的发酵动力学规律作了初步的探索。实验结果表明。5．5％玉米粉,0．5％葡萄糖,0．5％干酪素．0．05％KCl,0．05％MgSO4,0．015％KH2PO4和0．3％CaCO3为最佳摇瓶发酵培养基组成;5000L发酵罐的发酵动力学规律表明,菌体浓度发酵培养至80h左右达到最大．产素水平在116h左右达到最大。     

东方拟无枝酸菌基因工程菌产新糖肽类化合物的发酵条件优化

目的 对产新糖肽类化合物的基因工程菌东方拟无枝酸菌HCCB10167的发酵条件进行优化.方法 考察了该工程菌的遗传稳定性,对发酵的主要影响因子接种量、初始pH值、温度、摇瓶装量、转速等进行了单因素试验,确定了最佳培养条件,并用均匀设计试验对其发酵培养基进行了优化.结果 该工程菌遗传稳定,优化后的产量较起始条件提高1.8倍.结论 工程菌保持了万古霉素类抗生素的生产能力,具有规模化生产的潜能.     

红缘拟层孔菌液体发酵培养液条件的研究

目的：研究不同培养条件对红缘拟层孔菌菌丝产量和多糖量的影响。方法：通过单因素试验确定液体发酵培养的最佳温度、起始pH值、摇瓶装液量、接种量、摇床转速和发酵天数。结果：最适菌丝体液体发酵的条件是培养温度28℃,发酵液起始pH6.5,250mL摇瓶装40mL培养液,接种量30%,摇床转速175r/min,发酵9d。结论：优选的培养条件有利于提高红缘拟层孔菌菌丝产量和多糖的量。     

产利普斯他汀菌株Streptomyces toxytricini FIM-17-16发酵条件的优化

目的 Streptomyces toxytricini FIM-17-16菌株生物合成利普斯他汀发酵条件的优化。方法采用单因素试验和正交设计实验相结合的方法,优化Streptomyces toxytricini FIM-17-16发酵培养基和发酵参数。结果确定了适宜发酵培养基配方和发酵参数:葵花籽油7%,甘油2%,黄豆粉3.25%,麸皮1%,卵磷脂1%,硫酸锌0.01%,碳酸钙0.08%,初始pH自然,装料系数80mL/500mL,种龄20h,接种量15%,摇床转速230r/min,发酵温度28℃,发酵时间168h,产利普斯他汀的水平达到了9667μg/mL,提高了20.6%,发酵周期缩短24h。结论经过优化发酵条件,S. toxytricini FIM-17-16生物合成利普斯他汀能力大幅提高,为该菌株的工业化生产奠定了基础。