介绍一种骨髓组织脱钙新方法

骨髓组织活检标本来之不易 ,在制片过程中若处理不当 ,会给诊断造成极大的困难。如何既快又好地制作高质量的骨髓病理组织切片对正确诊断尤为重要。笔者通过 2年的反复实践 ,摸索出一种骨髓组织脱钙后的常规制片方法(简称“新法”) ,现介绍如下。1　材料与方法1.1　标本　中南大学湘雅医院骨髓穿刺的活检组织 4 0例。1.2　试剂　脱钙液 :2 %硝酸 ,即浓硝酸 2ml加 98ml自来水 ;固定液 :10 %福尔马林液 ;染色液 :Gill苏木精 ,沉淀酸化伊红Y乙醇液。1.3　方法　穿刺活检组织入 10 %福尔马林液中固定 30min ;入 2 %硝酸脱钙液 ,室温下脱钙。在…     

消除组织切片中甲醛色素方法的探讨

在组织切片中 ,常见体内各种生理性和病理性色素以及组织离体后经化学试剂溶液的固定、染色过程中产生的各种色素 ,如甲醛色素、汞、铬和苏木精的沉着物等。在组织切片中这些色素多不溶于水、乙醇和二甲苯中。然而汞、铬等重金属盐的结晶仅见于特定含铬、汞类的固定液浸泡时的标本内 ,而甲醛溶液是病理学、组织学、解剖学常见的固定液 ,尤其是含血丰富或坏死组织的固定中甲醛色素特别多见 ,它将直接或间接地影响日常病理组织切片的观察和诊断工作 ,所以 ,鉴别和消除组织切片中的甲醛色素有其重要意义。1　材料和方法1 1　标本　取新鲜的心脏…     

电镜制片技术在骨组织免疫组化中的应用

骨组织的电镜制片技术对组织固定与脱钙要求均远高于常规染色与免疫组化,其固定液和脱钙液与其他方法相比均有较大差别,本实验引用该方法对骨组织进行常规固定、脱钙处理,并进行骨组织免疫组化染色,取得了较理想的效果,现报道如下。1材料与方法1.1材料健康成年日本大耳白兔60只,体重2.5±0.25kg,由武汉大学动物实验中心提供,♀♂不限,根据实验要求分为实验组与对照组。一抗为鼠抗兔VEGF单克隆抗体(美国Neo Markers公司,Ab-3,JH121);二抗为超敏SP试剂盒(福州迈新公司,Kit-9701,S-P Mouse)。1.2固定液配制2%多聚甲醛-2.5%戊二醛固定液:…     

一种简便快捷的骨及钙化组织脱钙液

脱钙是骨组织制片染色技术的关键步骤.在实践工作中以硝酸、盐酸为主配制的脱钙液,脱钙迅速,但对组织破坏程度大,影响以后染色.螯合剂是一种缓慢的脱钙剂,脱钙后染色分化仍佳,酶也不受破坏,但脱钙需花费2周至几个月时间,不能满足病理科日常工作的需求[1].现介绍一种混合脱钙液,它既对组织损害小,又简便快捷.它可促进脱钙并加快脱钙速度,同时又防止纤维性组织过度膨胀,减少对组织的破坏及对染色的影响.经此脱钙液制成的组织切片薄厚均匀,平坦完整,组织形态和细胞清晰,着色鲜艳.     

骨髓活检组织制片中改良脱钙液的应用及常见问题分析

正在临床病理外检工作中,骨髓组织由于含有大量的钙盐而比较坚硬,需经过脱钙处理后才能进行常规制片,脱钙不全或脱钙过度均影响骨髓HE染色及免疫组化染色效果,降低病理诊断的准确率。作者在长期的骨髓制片工作中,摸索出一种适合骨髓组织的改良EDTA脱钙液,提高了骨髓制片质量和染色效果。本文现就骨髓活检标本固定及取材、脱钙、制片和染色等环节进行总结,供广大同仁分析交流,共同提高骨髓活检组织制片和染色质量。     

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法

石蜡包埋块中钙化组织的脱钙方法梁化印郭瑞峰杜双存刘颖成伟在常规病理切片中，骨组织的制片需在组织充分固定后，于脱水前用适宜的脱钙液脱钙。常规脱钙液品种较多，而脱钙方法并不多，且均耗时较长。特别是当被切制蜡块的软组织中有较大钙化灶时，极易损伤刀刃影响制片...     

解决陈旧标本染色不佳和脱福尔马林色素的方法

解决陈旧标本染色不佳和脱福尔马林色素的方法辛榕，李元平用福尔马林固定并长时间保存的组织标本中，易产生福尔马林色素，尤其是含血丰富的组织，福尔马林色素常成难的出现。长期固定保存的组织更有染色不佳的缺点。我们在尸检病例资料的回顾性研究和对现已少见的特殊或...     

骨髓活检标本石蜡包埋制片方法

塑料包埋技术用于骨髓活检有许多优点，但目前还未能完全满足病理诊断需要。经过聚合后的骨髓组织，虽然能制成较薄的切片，但如需作免疫组织化学染色就相当困难。我们经过用多种脱钙液反复试验比较，最后选用“Formical-4”脱钙液用于骨髓活检标本脱钙，不论HE或免疫组织化学染色均收到良好效果。现将108例骨髓活检标本石蜡包埋制片方法介绍如下。     

四种固定液对肾上腺组织冰冻切片固定效果的比较

目的　以肾上腺组织为例观察比较丙酮、4%多聚甲醛、AAF和95%乙醇四种固定液的固定效果,为临床做出更好的快速冰冻切片,及时、准确的做出病理诊断提供实验基础。 方法　取人正常肾上腺组织,冰冻切片后分别用四种固定液进行固定,然后行HE染色,观察各组的组织结构、细胞核染色、细胞质染色和核质对比度情况。 结果　经冷丙酮固定的肾上腺组织切片,镜下组织结构清晰,高倍镜下观察：细胞核形态清晰完整,核染色和胞质染色清晰对比度好;经4%多聚甲醛固定的切片,镜下组织结构不清,细胞核形态较清晰,核染色和胞质染色对比度差;经AAF液固定的组织切片,镜下组织结构尚清晰,细胞核部分溶解,核染色均一,胞质染色较清晰;经95%乙醇固定的组织,组织结构尚清晰,核溶解普遍,胞质染色不清晰。 结论　四种固定液都可用于固定肾上腺组织及其它细胞成分较多的病理肿瘤组织,但冷丙酮效果最好。     

复合配方脱钙液处理兔股骨髁标本

背景：兔骨缺损修复模型被广泛应用于骨替代材料的研究中,在实验过程中经常需要对兔股骨髁标本进行脱钙制作病理切片,但普遍存在脱钙困难的问题。 目的：尝试应用一种复合脱钙液实现软骨覆盖兔股骨髁有效脱钙。 方法：取兔股骨髁标本12个,分为2组,分别用自制复合脱钙液和普通甲酸脱钙液进行常温条件下的脱钙处理,复合脱钙液的组成比例如下：盐酸8 mL,甲酸10 mL,醋酸5 mL,中性甲醛固定液100 mL。在经过1周的常规脱钙过程之后,进行标准化的脱水、包埋、切片和染色程序。统计切片的完整率,观察苏木精-伊红染色后切片的质量和细微结构,并对两种脱钙液的经济性进行比较。 结果与结论：复合脱钙液组的切片完整率显著高于甲酸组,差异有显著性意义(74% vs18%,P < 0.05)。复合脱钙液组的切片着色优良,背景清亮,微观结构清晰,细微结构保存完整,不同组织染色对比鲜明。该复合脱钙液的应用成本较常用的甲酸脱钙液降低65%。提示自制复合脱钙液可有效解决兔骨缺损修复模型实验中的脱钙困难问题,且复合脱钙液配置简便,成本低。     

5种固定液对淋巴结冷冻切片HE及免疫组化染色效果的影响

正淋巴结组织纤维成分少,淋巴细胞丰富,往往还附有较多的脂肪组织,在制片过程中容易出现裂纹、细胞核皱缩、染色模糊甚至是脱片等,如需改善应严格控制冷冻的温度和时间,挑选渗透力强、固定作用强的固定液。本文通过对固定液配方的探索,着重与病理医师交流制片的方法与经验,以提高淋巴结组织冷冻切片优良率。1 材料与方法1.1 材料选取2019年1～3月我院手术室送检淋巴结组织标本30例,其中乳腺前哨淋巴结12例,中央组淋巴结14例,其它淋巴结     

EDTA在HE染色中的应用

正苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色是病理技术中最基本的染色方法,染色理想状态是在镜下见细胞核与细胞质蓝红相映,对比明显;核膜及核染色质颗粒清晰可见。实际工作中因组织干涸、固定脱水不足、脱钙等原因会造成切片染色困难,细胞核染色淡或出现局部灰染,给临床病理诊断带来困扰。经过大量实验,本科室对处理不好的组织切片染色前用EDTA抗原修复液进行高压修复,使染色质量得     

改良EDTA脱钙液在骨髓活检组织中染色效果观察

正骨髓活检结合免疫组化染色对于血液系统疾病诊断、判断临床预后具有重要意义~([1])。骨髓组织细胞种类多和组织学形态丰富,部分病例需结合免疫组化染色以明确诊断~([2])。骨髓组织质地较硬,需脱钙后才能进行常规制片和免疫组化染色~([3])。其中最常用的酸类脱钙液易造成组织细胞表面抗原破坏或丢失,影响免疫组化染色结果~([4])。EDTA的脱钙作用优于酸性脱钙液~([5]),但脱钙速度慢、脱钙后组织会稍微变硬~([6])。本实验通过比较改良EDTA脱钙液脱钙骨髓与混合酸脱钙液脱钙及不脱钙骨髓的HE染色和免疫组化染色效     

无醛固定液与甲醛固定液对组织形态学保存效果比较

组织固定是组织处理过程中最重要的环节,在病理诊断学中,10%中性缓冲福尔马林以其低成本、易配制和固定后组织保持优异的组织形态学特点而成为具有悠久传统的国际通用组织固定液。近年来,随着人们环保意识的提高,甲醛的危害性逐渐动摇了其作为病理学界固定“金标准”的地位,病理工作人员长期暴露于甲醛严重超标的环境中,对身体健康造成严重危害[1]。国外发达国家已经推广应用环保型固定液取代甲醛固定液。本实验通过配制3种无醛固定液来进行组织固定,通过 HE染色、组织化学染色(特殊染色),并以NBF作为对照来比较不同固定液对组织形态学方面的影响,试图建立新的高质量的组织固定液。     

眼组织的透射电镜制样方法

介绍一种眼组织透射电子显微镜标本制备方法。组织先用４％多聚甲醛－２．５％戊二醛混合固定液预固定,１％四氧化锇固定液后固定,丙酮逐级脱水,延长Ｅｐｏｎ８１２包埋液的浸透时间并包埋,用玻璃刀或钻石刀作超薄切片,醋酸主枸橼酸铅双重染色,Ｈ６００－Ⅳ型透射电子显微镜观察。此方法的优点在于眼组织各层超微结构保存良好,没有损伤及变性,我们对该方法的操作要点作了讨论。     

两种脱钙液对骨髓穿刺组织DNA质量的影响比较

<正>骨髓穿刺组织是病理科常见的标本,随着精准医学的发展和个体化治疗需求的增加,除了进行常规HE染色和免疫组化检测外,还需辅助分子生物学检测。良好的DNA质量是分子生物学检测的前提,脱钙液的选择对DNA质量有重要影响^[1],因此进行分子生物学检测前需要评估脱钙后骨髓穿刺组织DNA质量。混合酸脱钙液和EDTA脱钙液是本科室两种常用的骨髓穿刺组织脱钙液,在常规组织学染色方面已经取得良好的效果,但其对DNA质量的影响尚不清楚。本实验通过提取两种脱钙液脱钙骨髓穿刺组织的DNA,从浓度、纯度、片段长度及RT-PCR检测Ct值比较两种脱钙液对DNA质量的影响,取得较好效果,现报道如下。     

改进石蜡包埋法作大鼠全肺2μm连片一醛品红与Giemsa染法比较探讨

大白鼠肺组织切片易碎,不易制成大片完整的2μm连片。作者经反复实践,在包埋、切片、染色等方面作了一系列的改进,在制成大白鼠全肺2μm连片,用醛品红、光绿对比染色与Giemsa染色比较,并获得较满意的结果。兹将方法介绍如下。 1.将大白鼠全肺固定于10％中性缓冲甲醛液内2天。更换新鲜固定液1次。     

用于皮肤标本固定的改良AAF液

ＬｉｌｉｅＡＡＦ液为乙醇、醋酸和甲醛混合固定液，改良的ＡＡＦ液增加了水杨酸（Ｓａｌｉｃｙｌｉｃａｃｉｄ），称之为ＡＳＡＦ液。该液对于皮肤标本的固定作用优于通用的醛类、丙酮、醇类和其它混合固定液，作用时间短，组织无变硬，易脱水浸蜡，切片组织结构完整，不...     

微波在组织冰冻切片中的应用

微波在组织冰冻切片中的应用杨金镇我们应用微波代替福马林快速固定液（ＦＡＡ液）固定冰冻前的组织，并将冰冻切片在微波辐射下进行ＨＥ染色。一、材料与方法１．虹云牌微波炉：Ｈｙ７００１型，输出功率７００ｗ，十挡功率可调，在３５Ｃ～９５℃范围内，可自动恒温控制...     

不同脱钙方式对骨组织样本不同病理分析的影响

<正>骨与软组织肿瘤生物学特性复杂，在临床病理工作中有时依据形态学较难做出准确的病理诊断，需行免疫组化、FISH、PCR、Sanger测序及NGS等检测^[1]。骨组织质地坚硬，应使用脱钙液将组织软化后制片。目前，临床使用较多的仍为混合酸性脱钙液，其脱钙速度快，但易对组织抗原及DNA造成不可逆的损伤; EDTA性质温和，对组织抗原及核酸保存较好，但缺点是脱钙时间久且效果差。有研究显示改良EDTA常温处理骨髓样本20～24 h,HE染色佳，免疫组化染色强度适中，定位准确^[2]。