外源性H_2S恢复老龄大鼠心肌缺血后适应对I/R损伤的缓解作用

目的探讨外源性硫化氢(H_2S)恢复缺血后适应(PC)对老龄大鼠心肌的保护作用及相关机制。方法将青年和老龄大鼠随机分别分为对照组、缺血/再灌注(I/R)组和PC组,老龄大鼠另加Na HS干预组。用Langendorff离体灌流装置,复制大鼠心肌I/R损伤和PC模型。比色法测定冠脉流出液LDH、CK活性和心肌组织匀浆SOD活性、MDA含量及H_2S产率;透射电镜检测心肌超微结构;TTC染色测定心肌梗死面积;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;Western blot检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2及胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的表达。结果无论青年还是老龄大鼠,与对照组比较,I/R降低H_2S产率、SOD活性和CSE表达,增加LDH和CK活性、MDA含量、心肌损伤、细胞凋亡、心肌梗死面积、caspase-3、caspase-9及Bcl-2的表达(P0.01);与I/R组比较,青年大鼠的PC减轻I/R损伤及细胞凋亡(P0.01),而老龄大鼠的PC丧失了对心肌的保护作用;外源性H_2S恢复了老龄大鼠的PC对I/R损伤的保护作用。结论外源性H_2S能够恢复老龄大鼠PC对心肌的保护作用,其机制与抗氧化、清除自由基、抑制细胞凋亡有关。     

氢的选择性抗氧化作用研究进展

H2在机体内具有抗氧化作用。当过度氧化应激发生时,如缺血再灌注损伤、缺血缺氧损伤、急性炎性反应等,H2能够减少细胞毒性活性氧自由基,发挥抗氧化、抗损伤和抗凋亡作用。     

硫化氢抑制大鼠急性心肌缺血引起的细胞炎症反应

 目的：探讨硫化氢（H2S）能否抑制大鼠急性心肌缺血引起的细胞炎症反应。方法：结扎大鼠左冠状动脉前降支4 h,引起心肌缺血损伤。健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（sham）、缺血组（ischemia）以及硫氢化钠(NaHS) 5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L组。NaHS组分别于心肌急性缺血2 h时更换为5 μmol/L、10 μmol/L和20 μmol/L NaHS灌流液。缺血后4 h记录心功能变化。实时荧光定量PCR检测离体心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和ICAM-1 mRNA表达;Western blotting检测离体心肌组织中NF-κB的表达。结果：Ischemia组离体心肌功能下降（与sham组相比P<0.01）,NaHS组离体心肌功能比ischemia组明显改善（P<0.05或P<0.01）。Ischemia组离体心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和ICAM-1 mRNA表达显著增强,IL-10 mRNA表达显著降低（与sham组相比P<0.01）;NaHS组离体心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6和ICAM-1 mRNA表达比ischemia组明显降低,NaHS 10 μmol/L,20 μmol/L组离体心肌组织中IL-10 mRNA表达比ischemia组明显升高（P<0.05或P<0.01）。与sham组相比,ischemia组NF-κB表达显著增加（P<0.01）,而NaHS 10 μmol/L和20 μmol/L组NF-κB的表达明显低于ischemia组（P<0.05或P<0.01）。结论：H2S可通过阻断NF-κB相关信号通路的转导,抑制炎症反应,明显改善大鼠急性心肌缺血损伤。     

饱和氢盐水对大鼠心肌缺血再灌注损伤致炎性细胞因子的影响

急性心肌梗死目前主要还是集中在溶栓、介入治疗和冠状动脉旁路移植术方面,但这些治疗面临心肌缺血后再灌注引起的损伤.炎性反应在心肌梗死及缺血再灌注损伤可引起血管内皮损伤、心肌微循环障碍、组织再灌注不良及白细胞浸润心肌等,最终会导致心肌细胞凋亡,心功能损伤.近期研究发现氢气通过抗感染、抗氧化损伤、减轻凋亡等机制对心血管疾病具有治疗作用[1],并可以减轻心肌缺血再灌注诱发的心肌功能障碍及细胞凋亡.本实验探讨炎性因子在饱和氢盐水治疗大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.     

缝隙连接脱耦联剂庚醇对大鼠缺血-再灌注损伤心肌的保护作用

目的：在整体大鼠心脏缺血-再灌注损伤模型上研究庚醇的心肌保护作用，并在离体缺氧心脏模型上观察庚醇对电耦联参数的影响。方法：在体大鼠实验模型，结扎冠状动脉左前降支30 min和复灌2 h，观察不同剂量的庚醇（0.03、0.06、0.30和0.60 mg/kg）的作用；离体大鼠实验模型，全心停灌70 min，应用四电极法观察不同浓度的庚醇（0.05、0.10、0.50和1.00 mmol/L）对缺氧期间心肌整体阻抗和电脱耦联参数的影响。结果：庚醇对在体大鼠缺血-再灌注损伤心肌具有减少心律失常发生和缩小心肌梗死面积的作用；各浓度庚醇（0.05-1.00 mmol/L）均明显延迟心肌缺氧期间电脱耦联时间和平台时间，降低电脱耦联最大速率。结论：适度剂量的庚醇对在体缺血-再灌注损伤心肌有保护作用，其作用可能与其引起的电脱耦联延迟有关。     

肢体缺血预处理在未成熟心脏移植中的应用

背景:有学者提出远隔器官预处理概念,即在心脏以外的器官施行缺血预处理,同样能达到缺血预适应效果。肢体缺血预处理是一项机体自我调节的保护机制,但是对未成熟心肌保护的研究较少,在心脏移植方面的利用价值尚未明确。目的:通过对未成熟幼犬进行肢体缺血预处理,与传统心脏保存方法比较,试图分析肢体缺血预处理在供体心脏保存中的应用价值。方法:纳入未成熟幼犬12只,按随机数字表法分为2组,每组6只,采用有创性方法游离股动脉,肢体缺血预处理组夹闭股动脉10min,开放5min,3个循环后常规开胸,游离心脏,插灌注管,灌注st.Thomas停跳液,离体心脏于保护液中4℃保存(离体前取上腔静脉血3mL)。对照组游离股动脉但不夹闭,余同实验组。在心脏保存时期(3h)内每隔半小时取左心室心肌样本,3h后取心尖部心肌烘干测得干湿比。测量心肌组织丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性及肌钙蛋白Ⅰ含量。结果与结论:离体前心肌组织肌钙蛋白Ⅰ含量无明显变化(P0.05),离体后肢体缺血预处理组的心肌丙二醛含量及干湿比均低于对照组(P0.05),超氧化物歧化酶活性高于对照组(P0.05)。结果提示,肢体缺血预处理对未成熟心脏有明显的保护作用,在未成熟供体心脏离体前进行缺血预处理可以提高供体心脏的保存效果,降低心肌水肿。离体前肌钙蛋白Ⅰ含量无变化说明肢体缺血预处理对心肌没有损伤,是一种安全的保护措施。     

硫化氢对衰老缺血心肌细胞保护作用的研究进展

硫化氢(H_2S)是近年来发现的第三个内源性气体信使分子,广泛分布于机体各个部位。H_2S能减轻衰老缺血心肌细胞的缺血/再灌注(I/R)损伤和细胞凋亡,恢复缺血后适应(PC)对I/R损伤的保护作用。其作用机制主要与减轻氧化损伤、上调自噬和维持蛋白稳态有关。     

丹参滴丸对缺血/再灌注损伤心肌高能磷酸化合物的影响

目的 :进一步探讨丹参滴丸对缺血 /再灌注损伤心肌的保护作用及其机制。方法 :采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ离体心脏灌流技术 ,制备心肌缺血 /再灌注损伤模型 ,利用高效液相色谱仪 (ＨＰＬＣ)测定离体大鼠心肌组织中的高能磷酸化合物的含量变化。本实验共分 6组 :正常对照组 :大鼠心脏离体后 ,接在灌流装置上持续灌流 75ｍｉｎ。单纯缺血再灌组 :先预灌 1 5ｍｉｎ ,然后停止灌流 ,保持心脏温度恒定在 37℃ ,在无氧 ,无灌流液的条件下旷置 40ｍｉｎ ,再恢复灌流 2 0ｍｉｎ。丹参滴丸前保护组 :预灌时加丹参滴丸 ,后处理同单纯缺血再灌组。丹参…     

氟烷和七氟醚对缺血心肌功能和代谢及Ca2+-ATP酶活性的影响

目的: 研究氟烷、七氟醚(1.5MAC)对缺血心肌的影响。方法: 应用离体大鼠心脏Langendorff逆行灌注模型研究氟烷、七氟醚对心肌缺血前心率(HR)、左室舒张末期压力(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室压力升高速率(+dp/dt)、左室压力下降速率(-dp/dt)和冠脉流量(CF)的影响,测定缺血前、缺血10min、缺血25min3个不同时间的心肌ATP含量、Ca²⁺-ATP酶活性,同时记录缺血间期左室内压的变化情况。结果: 七氟醚显著增加正常离体心脏的CF,氟烷、七氟醚均不同程度地抑制心肌收缩功能和Ca²⁺-ATP酶活性,能够增加正常心肌的能量贮备。缺血10min时,二药能够减缓心肌ATP含量及Ca²⁺-ATP酶活性的下降,氟烷的作用比较明显。缺血间期,氟烷明显推迟缺血性挛缩的起始时间,降低挛缩幅度。结论: 氟烷的抗缺血损伤作用优于七氟醚,延缓缺血期心肌ATP含量及Ca²⁺-ATP酶活性的下降可能是氟烷抗缺血损伤作用的重要机制之一。     

皮瓣缺血再灌注损伤治疗研究进展

在皮瓣移植术后常常会发生缺血再灌注损伤,缺血再灌注损伤是引起皮瓣部分或全部坏死的重要原因.目前对皮瓣缺血再灌注损伤的发病机制尚不清楚,大多数学者认为可能与细胞凋亡、炎性反应、组织微循环障碍、细胞氧化损伤等有关.学者们提出用缺血预处理,药物干预,减少炎性反应,移植干细胞或干细胞联合基因疗法,体外冲击波,抗氧化反应和抑制细...     

人类心肌是否存在缺血预适应？

缺血预适应现象是心肌的一种强大的内源性保护机制，该现象已在多种动物模型得到证实。缺血预适应的保护作用表现为延缓心肌细胞坏死、缩小梗塞面积、减轻收缩功能的损伤、减少缺血／再灌注心律失常。人类心肌是否存在缺血预适应为目前研究的热点，研究者对离体心肌、ＰＴＣＡ及心脏手术中的心肌进行了大量研究，多数结果证明人类心肌确实存在预适应现象。这是进一步探讨用合适、安全的方式诱导心肌产生预适应的基础     

缺血—再灌注对大鼠心肌氨基酸的影响及牛磺酸的作用

心肌缺血—再灌注后可出现一系列损伤性变化,其中形态结构变化,各种酶与离子的改变都有深入的研究。本文利用大鼠离体心脏缺血—再灌注损伤模型,观察再灌注损伤后心肌中17种游离氨基酸的变     

胰高血糖素样肽-1及类似物对心血管系统作用的研究进展

胰高血糖素样肽-1(GLP-1)因其有效的降糖作用,为临床治疗2型糖尿病带来了新的契机.心血管病变是糖尿病的常见并发症,研究发现GLP-1及类似物可以通过改善内皮功能,抑制炎性反应,减少心梗面积及缺血/再灌注损伤,抑制心肌细胞凋亡和改善心肌能量代谢等作用来降低心血管疾病风险,这将为临床治疗心血管疾病提供新的途径和方法.     

脂质体携载超氧化物歧化酶对离体大鼠心脏模拟缺血—再灌注损伤的治疗作用

磷脂脂质体作为载体包裹超氧化物歧化酶(SOD)治疗离体大鼠心脏缺血-再灌注损伤,明显抑制脂质过氧化物形成,减轻心肌组织蛋白漏出,减少钙离子在缺血心肌的聚积,其疗效显著优于单用SOD或SOD加空白脂质体治疗。实验结果提示脂质体作为药物载体治疗心肌缺血是有前途的。     

脂质体携载L—精氨酸对离体大鼠心脏缺血—再灌注损伤的保护作用

本工作在离体灌流的大鼠心脏缺血-再灌注(I/R)损伤模型上,观察了脂质体携载L-精氨酸(L-Arg)的保护作用。结果发现,1mol/L L-Arg脂质体灌流心脏,明显抑制缺血心脏再灌注时心肌MDA含量和线粒体Ca~(2+)含量的增加,显著减少心肌细胞内的酶(乳酸脱氢酶、组织强白酶D)和肌红蛋白的漏出及心肌MDA的释放,明显增加冠脉流量。而相同剂量的游离L-Arg则无明显保护效应。我们在离体大鼠灌流的主动脉条上进一步发现,L-Arg脂质体具有显著的血管舒张效应。而游离L-Arg则不具有明显舒张效应。结果表明,脂质体作为药物载体,包裹内源性EDRF释放剂防治心肌I/R损伤是有效的。可能具有临床应用前景。     

心脏缺血再灌注与生物膜损伤

心脏缺血及缺血冉灌注损伤已有几十年的研究历史。大量离体和在体实验模拟缺血再灌注过程,证实了氧自由基形成,细胞内钙超载等是参与造成损伤的因素。然而很难断定它们各自在损伤中所起作用的大     

Apelin-13对离体缺血/再灌注大鼠心脏损伤的影响

目的观察apelin-13对离体大鼠缺血/再灌注心脏损伤的影响,并初步探讨其对apelin受体APJ(putative re-ceptor protein related to the angiotensin receptorAT1)及细胞信号Akt1/2的影响。方法Langendorff装置恒流灌注大鼠离体心脏,采用停灌/复灌方式复制缺血/再灌注模型;观察缺血/再灌注期间心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率( LVdp/dtmax)及舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-LVdp/dtmax);RT-PCR和Western blot测定组织中APJ受体mRNA和Akt1/2蛋白的表达情况。结果Apelin-13可以增加缺血/再灌注损伤心脏的±dp/dtmax(P<0·01);可以明显增强心肌组织中Akt1/2的表达;缺血/再灌注可以引起心肌组织中APJ受体表达上调。结论Apelin-13拮抗缺血/再灌注引起的心脏收缩及舒张功能障碍;可能与组织中APJ受体表达上调引起Akt1/2表达增强有关。     

抗氧化蛋白peroxiredoxinⅡ对小鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用及其机制

目的:我们的前期实验发现,腺病毒中介的peroxiredoxin Ⅱ(Prx Ⅱ)过表达可保护心肌细胞防止氧化应激所致的损伤,尽管这样,Prx Ⅱ在器官和整体动物水平是否具有心肌保护作用,而且这一保护作用是否通过内质网应激发挥作用尚不清楚。方法:应用Langendorff系统构建离体心肌缺血再灌注损伤模型;结扎冠状动脉左前降支,缺血30 min再灌注30 min/3 h/24 h构建体内心肌缺血再灌注损伤模型。结果:离体心肌缺血再灌后,Prx Ⅱ过表达小鼠心肌收缩最大速率(+dp/dtmax)和心肌舒张最大速率(-dp/dtmax)恢复较正常对照组明显得到改善;Prx Ⅱ心肌特异性过表达小鼠与野生型相比,离体和在体心肌缺血再灌后,心肌梗死面积均分别降低了69.13%和60.86%;体内心肌缺血再灌注,与野生型小鼠相比,Prx Ⅱ心肌特异性过表达小鼠心肌细胞凋亡率降低了52.10%±5.32%;与野生型小鼠相比,Prx Ⅱ心肌特异性过表达小鼠中内质网通路伴侣分子Hsp90、GRP94、PDI和p-e IF2α的表达量均明显降低(P0.05),但cleaved ATF6和XBP-1的表达量在2组小鼠中无明显差异。p-Akt(Ser473)和p-Akt(Thr308)水平在野生型小鼠明显降低,在Prx Ⅱ过表达小鼠中仍维持高表达水平(P0.05)。结论:Prx Ⅱ对缺血再灌注损伤心肌具有保护作用,其机制可能与拮抗p-e IF2α表达、增加p-Akt表达、阻断内质网应激启动的凋亡通路有关。     

川芎嗪对缺血再灌注所致大鼠离体心脏损伤的保护作用

目的:观察川芎嗪对缺血再灌注所致大鼠离体心脏损伤的保护作用。方法:心脏缺血再灌注模型:大鼠离心脏Langen-dorff灌流,全心停灌20分钟后复灌40分钟造成缺血--再灌注损伤。将充水乳胶球囊通过左心房插入左心室,Medlab-u/81生物信号采集处理系统记录分析心功能指标LVP,±dp/dtmax,HR和CF,收集再灌5分钟时,冠脉流出液。用分光光度法测定肌酸激酶(CK)活性。结果:缺血再灌注能降低冠脉流量,LVP,±dp/dtmax值,减慢心率、增加CK释放量,两个浓度的川芎嗪(40与80mg·L-1)对离体大鼠心脏缺血再灌注损伤有保护作用,表现为改善心功能,增加冠脉流量,减少心肌细胞内酶CK的释放,川芎嗪与维拉帕米有相似的心肌保护作用。结论:川芎嗪对心脏缺血再灌注心功能损伤具有保护作用。     

041 缺血预处理对缺血/再灌注大鼠心脏有关酶保护作用的研究

目的: 在在体大鼠模型上原位观察比较了经典缺血预处理对缺血/再灌注大鼠心肌有关酶活性的影响, 以期进一步探讨预处理保护作用的机制. 方法: 将24只体重200～250 g的雄性SD大鼠分为4组, 即: Ⅰ组, 假手术组; Ⅱ组, 缺血/再灌注组, 左冠状动脉前降支结扎使心肌缺血30 min后恢复再灌20 min; Ⅲ组, 经典缺血预处理组, 按Murry法进行; Ⅳ组, 去甲肾上腺素预处理组, 在缺血前15 min开始由舌静脉在5 min内缓慢滴入NE 1.6 μg. 再灌结束后原位观察过氧化氢酶、 5'-核苷酸酶及Ca2+-ATP酶活性及琥珀酸脱氢酶损伤性反应. 结果: Ⅲ组心肌琥珀酸脱氢酶损伤性反应较Ⅱ组明显减轻(P<0.05); 过氧化氢酶、 5'-核苷酸酶及Ca2+-ATP酶活性较Ⅱ组(P<0.05)升高. 结论: 经典缺血预处理能保护缺血/再灌注大鼠心脏超微结构, 这种作用可能与经典缺血预处理保护5'-核苷酸酶活性, 使内源性腺苷增多; 保护Ca2+-ATP酶活性, 减轻细胞内钙超载及抗氧自由基损伤有关.