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相似文献
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1.
目的:探讨创伤后不同时间点脾细胞核因子kappa B(NFκB)的DNA结合蛋白和NFκB p65蛋白亚型表达的动态变化。方法:采用小鼠双后肢闭合性砸伤+骨折模型,于创伤后1、4、7日处死动物,分离、纯化脾细胞,提取脾细胞核蛋白。用电泳迁移率改变试验(EMSA)检测NFκB的DNA结合活性;用免疫蛋白印迹法(Western blot)检测NFκB p65蛋白亚型表达。结果:脾细胞NFκB的DNA结合活性在创伤后1、4、7日表达明显增高。NFκB p65蛋白亚型在创伤后1、4、7日表达明显增加。结论:创伤可明显增强脾细胞NFκB的DNA结合活性和p65蛋白亚型的表达。在创伤后淋巴细胞活化及全身炎症反应综合征(SIRS)发生、发展过程中可能起重要作用。  相似文献   

2.
目的:探讨激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)检测核因子kB(NF-kB)的方法,方法,用肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激PC12细胞NF-kB活化,间接免疫荧光(FITC)标记代表NF-kB的P^65亚基,碘化丙啶(PI)标记细胞DNA指示核区,用CLSM对NF-kB进行定位显示和定量分析,以WesternBlot检测结果作为对照标准。结果:TNF-α刺激后PC12细胞以XLSM显示:核区内出现代表NF-kB的绿荧光,其核区与胞浆区比值(FN/FC)明显大于未经TNF-α刺激的PC12细胞;而 TNF-α刺激的PC12细胞红色的核区内未出现绿色荧光。WesternBlot显示TNF-α刺激后PC12细胞核提取物呈阳性反应,即出现代表NF-kB/P^65蛋白的条带, TNF-α刺激的PC12细胞核提取物呈阴性反应,即核提取物中未出现代表NF-kB/p^65蛋白的条带,CLSM检测NF-kB与Western Blot检测结果一致。结果论:CLSM检测NF-kB即可定位显示,又定定量分析,能显示单个细胞的NF-kB状态,且具有同时显示细胞形态等优点,是研究细胞核因子的有效方法。  相似文献   

3.
一氧化氮对内毒素刺激肺泡巨噬细胞核因子-κB的影响   总被引:2,自引:4,他引:2  
目的:探讨一氧化氮(NO)在内毒素刺激肺泡巨噬细胞(PAM)对核因子-kB(NF-kB)活性的影响。方法:用支气管肺泡灌洗法收集PAM进行培养,分正常对照组、脂多糖(LPS)组和NO+LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测核提取物中NF-kB活性和细胞培养上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果:LPS组NF-kB活性和TNF-α含量在刺激后1小时明显高于正常对照组;NO+LPS组NF-kB活性和TNF-α含量在刺激后1小时均显著低于LPS组。结论:LPS诱导PAM的NF-kB活化,导致TNF-α大量释放;NO可抑制NF-kB活化而减少TNF-α的基因表达。  相似文献   

4.
目的 研究白细胞介素-1β(IL-1β)对A549细胞表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的诱导作用及相关细胞内信号通路的激活和转导机制.方法 以1 μg/L终浓度的IL-1β刺激经SC-514[核转录因子-κB(NF-κB)的IKK-2复合物抑制物]预处理的A549细胞,用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测IL-1β刺激5、10、30、60 min时细胞内磷酸化NF-κB抑制蛋白(pIκBα)和IκBα蛋白表达水平;激光扫描共焦显微镜(LSCM)显像检测NF-κB p65的核转移过程;按试剂盒说明测定NF-κB DNA结合活性;p65抗体染色质免疫沉淀结合聚合酶链反应(ChIP-PCR)技术检测乙酰化组蛋白H4和p65与ICAM-1基因启动子的结合;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测4 h后的ICAM-1 mRNA表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测24 h后细胞表面的ICAM-1蛋白表达.结果 IL-1β刺激后细胞内pIκBα蛋白表达水平明显升高,IκBα蛋白表达水平明显下降;LSCM检测显示激活的p65蛋白从胞质向胞核转移,p65与DNA结合活性明显升高(P<0.01).ChIP-PCR扩增发现,IL-1β促使乙酰化组蛋白H4和p65与ICAM-1基因启动子区域的DNA片断结合.IL-1β刺激4 h后ICAM-1 mRNA表达明显升高,刺激24 h后A549细胞表面ICAM-1蛋白表达亦明显升高(P均<0.01).SC-514阻断了pIκBα蛋白的升高和IκBα蛋白的下降;减少了p65蛋白的核转移和DNA结合活性;降低了ICAM-1的mRNA及蛋白表达水平(P均<0.01).结论 IL-1β通过激活NF-κB 介导了A549细胞表达ICAM-1.  相似文献   

5.
氢醌对体外培养骨髓基质细胞核转录因子表达的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
为了研究氢醌(hydroquinone,HQ)对细胞激活剂佛波酯(PMA)导致的骨髓基质细胞(BMSC)核转录因子表达的影响,并初步探讨其与苯的血液学毒性的关系。用体外培养法获得骨髓基质细胞,观察其形态学变化;分别用NF—κB P65免疫组织化学方法和TransAM P65试剂盒测定了用不同浓度的氢醌加激活剂PMA刺激后的骨髓基质细胞NF—κB蛋白表达和活性的动态变化。结果表明:各组细胞加入HQ后,与对照组相比,P65蛋白由细胞核转回至胞核周围的细胞浆,染色呈弱阳性;不同浓度的HQ作用不同时间后NF—κB活性测定结果与对照组间具有明显差异;各组之间相比,100μmol/L的HQ作用72小时对NF—κB的抑制作用最明显;而0.1μmol/L的HQ几乎无抑制作用。结论:HQ可抑制体外培养骨髓基质细胞核转录因子的激活,并且随HQ浓度和作用时间而增强,推测可能与苯的造血微环境毒性有关。  相似文献   

6.
急性胰腺炎患者并发多器官功能障碍综合征的机制探讨   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:探讨急性胰腺炎患并发多器官功能障碍综合征(MODS)的机制。为临床防治MODS提供新的思路。方法:收集急性胰腺炎(AP)患63例,按APACHE-Ⅲ评分为分3组,并测定外周血内毒素水平及外周血单个核细胞(PBMC)中核因子-kB(NF-kB)的活性,观察与MODS发生的关系,结果:(1)AP患出现了内毒素血症,其发生率为75.64%,而且与病情严重度有关;(2)AP患PBMC的NF-kB活性显增高,且与疾病严重程度明显相关,结论:持续内毒素血症,NF-kB活性增高可能参与AP患MODS的发生。  相似文献   

7.
目的 研究肾细胞癌组织中核转录因子kB(NF-kB)的表达及意义。方法 应用免疫组织化学S-P法检测5例正常肾组织、18例癌旁肾组织和40例肾细胞癌组织中NF-kB的表达,并分析NF-kB表达与肾细胞癌病理类型的关系。结果 5例正常组织和18例癌旁肾组织均有NF-kB的表达,在肾小管上皮细胞的胞质表达较强,肾小球毛细血管球和肾小球囊壁层细胞表达较弱。在40例肾细胞癌组织中,NF-kB主要表达于癌细胞的胞质和部分癌细胞的胞核。结论 正常肾组织和癌旁肾组织中,NF-kB存在于肾小管上皮细胞的胞质,而癌细胞在胞质和/或胞核。肾癌细胞核中表达的NF-kB家族p65/p50成员,它可能在肾细胞癌的发生、发展中起一定作用。  相似文献   

8.
目的 探讨白介素-10对内毒素(LPS)诱导肺泡巨噬细胞核因子-kB(NF-kB)活伦及肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达的调节,为临床运用白介素-10提供理论依据。方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺巨噬细胞(PAM)进行培养,分正常对照组、LPS 、IL-10+LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析(EMSA)法和ELIS法分别检测核提取物中NF-kB活性和细胞培养上清中TNF-α含量。结果 LPS组NF-kB活性和TNF-α含量在刺激后0.5-4h明显高于正常对照组;IL-10+LPS组NF-kB活性和TNF-α含量均显著低于LPS组。结论 LBS诱导PAM的NF-kB活化,导致TNF-α基因表达增强;白介素-10可抑制NF-kB活化而减少TNF-α的释放。  相似文献   

9.
目的探讨放射性心脏损伤初期核因子kB(NF—kB)的变化及氨溴索对放射性心脏损伤的治疗作用。方法雌性SD大鼠60只随机分为正常对照组,照射组和治疗组。照射组和治疗组腹腔内注射戊巴比妥钠40mg/kg给予直线加速器照射,照射剂量单次20Gy/min,照射前7d,照射组给予等量生理盐水腹腔内注射,治疗组给予氨溴索35mg/kg。于照射后1、2、3、4d取心脏组织作病理HE染色,免疫组化法测定NF—KB的表达,免疫组化染色以计算机图像分析系统测定,数据用组间t检验。结果治疗组与对照组大鼠心肌组织无明显变化。。照射组NF—kB的表达在1、4d较正常组增高(P〈0.05),治疗组较照射组4dNF—kB的表达减弱(P〈0.05)。结论放射性心脏损伤初期NF—kB表达增高,氨溴索可抑制NF—kB在放射性心脏损伤中的表达。  相似文献   

10.
目的 研究核因子-kB(nuclear factor kappa B,NF—kB)在重症急性胰腺炎(SAP)模型中的动态改变与肝脏损伤变化的关系。方法 24只健康雌性SD大鼠随机分为SAP组及假手术组。SAP模型经胆胰管内加压注射4%牛磺胆酸钠溶液1mL/kR完成。建模后24h、48h、72h 3个时间点将大鼠处死,留取肝组织苏木精-伊红染色下观察肝脏病理情况,外周血检测ALT水平,应用TransAM NF—kBp65试剂盒检测肝组织NF-kB的表达。结果 48h肝脏病理示3区出现点状坏死,72h呈灶性坏死,均见核皱缩、碎裂,周围散在炎症细胞;SAP组NF—kB活性与ALT水平各时点渐次升高(P<0.05),各时点SAP组NF—kB活性与ALT水平较假手术组明显升高(P〈0.05)。结论 重症急性胰腺炎存在肝损伤,病列出现缺血性肝脏损伤变化,随炎症的持续肝损伤加重,肝脏核因子-kB在肝损伤中发挥重要作用。  相似文献   

11.
《Annals of medicine》2013,45(7):462-468
The cloning of mammals originated with the production of limited numbers of genetically identical offspring by blastomere separation or embryo splitting. In the past few years, remarkable progress has been reported in cloning by nuclear transfer (NT) with donor nuclei recovered from embryonic, fetal or adult cells. Factors that contribute to the successful reprogramming of the transferred nucleus and the normal term development of the newly reconstructed embryo include the cell cycle stage of both the donor nucleus and recipient cytoplast, the timing of fusion and cytoplast activation, and the source of donor nuclei. The possibility of producing live offspring by somatic cell NT carries potential applications in animal husbandry, biotechnology, transgenic and pharmaceutical production, biomedical research, and the preservation of endangered species. However, the low efficiencies of cloning by NT coupled with high embryonic, fetal and neonatal losses may restrict immediate commercial applications in agriculture. These limitations notwithstanding, the greatest benefits and practical implications of this new technology could be in transplantation medicine and therapeutic cloning.  相似文献   

12.
A Soviet nuclear pacemaker is described. It is a large VOO bipolar pacemaker, probably nonprogrammable. It has unique electrode connectors. No isotope leak or excessive radiation hazard was detected. Because we had no knowledge of its end-of-life markers and because of the impossibility of assuming long-term safety, the device was removed.  相似文献   

13.
The recent progress with respect to understanding the signals mediating the transport of proteins in both directions through the NPC, and cellular proteins interacting with these signals to effect the transport process has made possible a number of advances in terms of the use of this information in a clinical setting. In particular, our knowledge of the mechanism of regulation of the process, and of how we may exploit the cellular transport machinery itself in a therapeutic situation, especially where there may be transport pathways specific to particular viruses, has advanced considerably. In this context, this review expounds current understanding of the signals conferring targeting to the nucleus, and their practical and potential use in delivering molecules of interest to the nucleus in a clinical context. It also deals with targeting signals conferring nuclear protein export/shuttling between nuclear and cytoplasmic compartments as well as with those conferring nuclear or cytoplasmic retention, and with the specific mechanisms regulating the activity of these signals, and in particular those regulating signal-dependent nuclear protein import. Detailed understanding of the processes of signal-mediated nuclear protein import/export and its regulation enables the considered application and optimization of approaches to target molecules of interest, such as plasmid DNA or toxic molecules, efficiently to the nucleus according to need in a clinical or research context, and enhance the expression or efficiency of their action, respectively. The use of nuclear targeting signals in this context is reviewed, and future possibilities in terms of the application of our growing understanding of nuclear transport and its regulation are discussed. © 1998 John Wiley & Sons, Inc. Med. Res. Rev., 18, No. 4, 189–223, 1998.  相似文献   

14.
从后疫情时代的视角出发,结合我国地方高校核应急护理教学现状及护生认知特点,将课程思政理念中的核工业精神融入核应急护理教学的必要性以及具体课程改进策略进行综述,并对课程提出相关教学建议,旨在为高校培养一批具有大国情怀及奉献精神的核应急专业护理人才提供思路,也为进一步促进核应急护理教学改革提供参考依据。  相似文献   

15.
Information regarding the proposed measures addressing long‐term care problems during disasters at a municipal level is scarce. Thus, this study reviewed the long‐term care insurance measures taken in the Katsurao Village after the Fukushima nuclear accident and summarized the measures that municipalities can take against such issues in the future.  相似文献   

16.
Systemic juvenile idiopathic arthritis (sJIA, also called Still''s disease) is a rare childhood auto‐inflammatory disease with significant morbidity. This case report illustrates the clinical course and highlights diagnostic challenges. FDG‐PET/CT imaging may be beneficial in the diagnostic process for some cases, in order to achieve rapid diagnosis and early treatment.  相似文献   

17.
目的 :探讨质子磁共振波谱(1HMRS)对放射性脑坏死诊断价值。材料和方法 :对2例有脑部肿瘤放疗史临床及CT和MRI难以判断为肿瘤复发或放射性脑坏死和8例病史明确的放射性脑坏死 ,行 1HMRS病灶实质与健侧对应部位对照研究。结果 :2例经手术证实为放射性脑坏死 ,8例放射性脑坏死因病史明确未行手术。放射性脑坏死表现为 :9例NAA、Cr、Cho下降或消失 ,出现Lipid峰 ,NAA/Cr下降 ;1例NAA、Cho、Cr峰均消失 ,仅表现一较平坦的曲线。结论 :1HMRS对放射性脑坏死诊断有重要价值。  相似文献   

18.
目的 :研究联合应用精氨酸 (Arg)与谷氨酰胺 (Gln)对胃癌病人免疫功能和肿瘤细胞增殖动力学的作用。方法 :胃癌 5 8例 (男 4 2例 ,女 16例 )平均年龄 5 6.3± 11.4岁。术前每天静脉输注Arg 2 5 g、分 3次口服单体Gln粉剂 3 0g ,连续 7d。分别在用药前、后 (手术日晨 )检测细胞免疫指标CD3、CD4、CD8、CD4 CD8、NK细胞活性和体液免疫指标IgG、IgA、IgM、C3、C4 ,并用免疫组化法检测用药前胃镜活检标本和用药后手术切除标本的瘤增殖细胞核抗原 (PCNA)表达及细胞凋亡的变化。结果 :用药后CD3、CD4百分比明显提高 ,CD8百分比明显降低 ,CD4 CD8比值和NK细胞活性均明显提高 (P <0 .0 5 ) ;体液免疫指标无明显变化 (P >0 .0 5 ) ;瘤组织PCNA表达明显降低 ,而细胞凋亡明显增加 (P <0 .0 5 )。结论 :药理剂量精氨酸与谷氨酰胺联合应用能明显改善胃癌病人细胞免疫功能、抑制瘤组织PCNA表达并促进瘤细胞凋亡 ,但对体液免疫指标无显著影响。  相似文献   

19.
骨保护素(OPG)是肿瘤坏死因子超家族成员之一,主要通过与细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)竞争性结合细胞核因子κB受体活化因子(RANK)而调节破骨细胞的分化、成熟。近年来的研究表明OPG/RANKL/RANK系统除在骨代谢方面发挥重要作用,也参与了心血管系统疾病的发生发展。本文将对OPG/RANKL/RANK系统与心血管疾病的关系及作用机制作一综述。  相似文献   

20.
Gates’分析法测定肾小球滤过率的影响因素研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:探讨Gates’分析法测定肾小球滤过率(GFR)过程中的影响因素。方法:针对γ照相机或SPECT测定GFR中常见的影响因素,在规范操作的基础上人为改变某些因素,观察其对GFR值的影响。结果:身高值变化会引起GFR值反向的差异性变化,而体重值变化,GFR值出现同向的变化(P<0.01);注射前后注射器测量条件不一致,可影响结果的准确性:注射器放置的几何学位置会引起GFR值的偏差,尤其是注射后用错注射器进行测量,GFR值会出现明显的误差(P<0.01);注射时显像剂血管外渗漏,导致进入体内净计数的减低,会造成GFR值增高;图像处理时本底感兴趣区(ROI)位置对结果影响较大,其中位于外上方或内下方,所得GFR值明显降低(P<0.01)。结论:在用Gates’分析法测定GFR值的整个过程中,有诸多因素可影响到最终结果,尤其是药物注射的质量和本底ROI的选择,对GFR的测定值有着明显的影响,规范的操作才能获得较为准确可信的GFR值。  相似文献   

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