基于HIF-1信号通路研究芪参益气滴丸治疗心肌缺血的分子机制

芪参益气滴丸临床上用于治疗心绞痛、心肌梗死、心力衰竭等多种心肌缺血类疾病,但其治疗的分子机制尚不明确,复方配伍科学内涵也未系统阐释。该研究拟以网络药理学为基础筛选芪参益气滴丸治疗心肌缺血的特征通路,并结合糖氧剥夺细胞模型进行药效验证,揭示芪参益气滴丸基于特征通路的分子机制。首先开展复方活性成分筛选和靶点预测,确定芪参益气滴丸治疗心肌缺血的关键靶点;利用DAVID数据库对关键靶点进行通路富集分析和功能注释,揭示芪参益气滴丸发挥药效的生物作用及其特征通路;最后利用糖氧剥夺模型对高含量活性成分进行cell counting kit-8(CCK-8)、乳酸脱氢酶(LDH)、蛋白免疫印迹(Western blot)药效实验,基于特征通路揭示芪参益气滴丸治疗心肌缺血的分子机制。网络药理学研究表明芪参益气滴丸含有18个活性成分及82个关键靶点,通过TNF信号通路、HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路等,调节机体的一氧化氮生物合成、细胞凋亡、炎症反应、血管生成等多种生物功能,进而达到保护心肌细胞的作用,其中HIF-1信号通路为特征通路。CCK-8与LDH实验结果表明,复方中的黄芪甲苷、丹参素、人参皂苷Rg_1能浓度依赖性增强细胞生存活力、降低细胞上清液中LDH含量(P0.05)。Western blot实验表明黄芪甲苷能显著下调HIF-1信号通路中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt1)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,上调血管内皮因子A(VEGFA)蛋白表达,丹参素能显著下调Akt1上游靶点磷脂酰肌醇3-激酶110-α亚基(PIK3CA)、下游靶点HIF-1α蛋白表达,人参皂苷能显著下调HIF-1α蛋白表达、上调VEGFA蛋白表达。故芪参益气滴丸可多靶点多途径治疗心肌缺血,HIF-1信号通路为特征通路。芪参益气滴丸活性成分能协同调控HIF-1信号通路中的靶点以抑制该信号通路的表达,保护心肌细胞。     

基于网络药理学和分子对接分析芪参益气滴丸治疗急性冠脉综合征的作用机制

[目的] 通过网络药理学和分子对接方法分析芪参益气滴丸（QSYQ）治疗急性冠脉综合征（ACS）的有效成分、作用靶点和通路,探讨其作用机制。[方法] 利用TCMSP、Batman平台,检索QSYQ有效成分及相应作用靶点,通过GeneCards、OMIM、TTD平台筛选疾病相关靶点,并获得QSYQ和急性心肌梗死、不稳定型心绞痛共同靶点,利用STRING平台构建靶点网络图、PPI网络图,利用DAVID平台进行GO功能和KEGG通路富集分析,再根据AutodockTools1.5.6软件进行分子对接。[结果] 共筛选出QSYQ治疗急性心肌梗死、不稳定型心绞痛有效成分130个,潜在作用靶点36个,关键靶点7个,发现一氧化氮生物合成过程的正调控、对缺氧的反应、细胞对脂多糖的反应等生物学功能及肿瘤坏死因子（TNF）信号通路、核因子-κB（NF-κB）信号通路、NOD样受体信号通路、缺氧诱导因子1（HIF-1）信号通路等在QSYQ治疗ACS起到较为关键的作用。[结论] QSYQ主要活性成分有木犀草素、槲皮素、人参皂苷rh2、丹参酮ⅡA,通过多靶点多通路发挥治疗ACS的作用。     

芪参益气滴丸治疗缺血性心力衰竭的系统评价

目的： 系统评价芪参益气滴丸治疗缺血性心力衰竭的有效性和安全性。 方法： 计算机检索CNKI,VIP,WANFANG,PubMed,Cochrane图书馆,检索时间为建库至2013年2月,纳入与芪参益气滴丸治疗缺血性心力衰竭相关的随机对照试验,用Cochrane文献质量评价工具评价纳入研究质量,并采用RevMan 5.0.2软件进行Meta分析。 结果： 共纳入10篇随 机对照试验,共计1 070例患者。Meta分析结果显示：与单纯西药常规治疗相比,芪参益气滴丸联合西药常规治疗可有效提高左室射血分数[WMD=0.07,95%CI（0.05,0.08）,P<0.000 01]并增加6 min步行距离 P<0.000 01],芪参益气滴丸可降低血浆BNP水平。 结论： 芪参益气滴丸可改善缺血性心力衰竭患者心功能,但是由于纳入文献数量有限,质量不高,缺乏足够的证据支持其推广应用。     

基于网络药理学和细胞实验探究天参胶囊的抗炎机制

目的 通过网络药理学预测天参胶囊可能发挥抗炎作用的机制,并进行实验验证。方法 基于TCMSP等数据库查找筛选天参胶囊的活性成分并预测其作用靶点。使用PPI、GO、KEGG分析天参胶囊的“活性成分-靶点-通路”网络,Discovery Studio对关键化合物和核心靶点进行分子对接。通过细胞实验验证关键靶点。结果 天参胶囊有效成分共147种,对应560个靶点。PPI分析显示,天参胶囊主要作用于STAT3、TP53、JUN、Akt1、SRC、MAKP1等靶点。GO分析显示,它们主要作用于DNA结合转录因子、RNA聚合酶Ⅱ特异性DNA结合转录因子、泛素样蛋白连接酶等。KEGG分析表明,它们可能通过PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、Toll受体信号通路、JAK/STAT信号通路等起到抗炎作用。分子对接显示,4种关键成分与核心蛋白均有很好的结合力。体外细胞实验证明,天参胶囊水提物可降低NO、TNF-α、IL-6水平,并抑制JAK2/STAT3信号通路。结论 天参胶囊可能通过调控JAK2/STAT3信号通路发挥抗炎作用,具有多成分-多靶点-多途径的特点。     

基于网络药理学和分子对接的乾坤丹Ⅵ号治疗糖尿病肾脏疾病的机制研究

[目的] 运用网络药理学研究方法探讨乾坤丹Ⅵ号防治糖尿病肾脏疾病（DKD）的作用机制。[方法] 基于TCMSP数据库获取乾坤丹Ⅵ号的化学成分及对应靶点,GeneCards、OMIM数据库检索DKD的疾病靶点;对药物与疾病靶点相映射得到乾坤丹Ⅵ号防治DKD的关键作用靶点,利用String数据库构建关键靶点的蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络,运用Cytoscape软件筛选乾坤丹Ⅵ号防治DKD的核心靶点和功能模块,利用autodock软件对乾坤丹Ⅵ号的化学成分和核心蛋白进行分子对接。对关键靶点进行GO和KEGG通路富集分析,分析乾坤丹Ⅵ号对DKD的潜在作用机制。[结果] 得到乾坤丹Ⅵ号有效成分103种,靶点137个,预测靶点较多的成分有槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇等,共得到关键靶点128个,分子功能模块6个。分子对接结果显示,乾坤丹Ⅵ号化学成分和靶点蛋白对接的平均结合能为-6.43 kcal/mol,其中槲皮素和PSGT2的结合能最高。GO和KEGG通路富集分析结果显示,乾坤丹Ⅵ号防治DKD与糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、Th17细胞分化、IL-17信号通路、钙信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路等信号通路有关。[结论] 乾坤丹Ⅵ号通过多成分、多靶点、多信号通路的协同作用实现对DKD的防治作用,为乾坤丹Ⅵ号的进一步临床和实验研究提供了重要的科学依据。     

基于网络药理学与分子对接技术的石菖蒲治疗癫痫作用机制研究＊

目的 利用网络药理学和分子对接技术研究石菖蒲抗癫痫的有效成分及作用机制。方法 运用中药系统药理数据库及分析平台检索石菖蒲有效成分及主要靶点，通过GeneCards数据库收集癫痫疾病的相关潜在作用靶点，运用Cytoscape.3.7.1和 String绘制石菖蒲-癫痫靶点互作关系图，运用Metascape数据库进行GO和KEGG信号通路富集分析。运用AutoDock Vina 1.1.2软件对石菖蒲主要有效成分与癫痫相关靶标进行分子对接验证；通过构建戊四唑诱导的癫痫模型初步评价石菖蒲提取物及潜在有效成分的抗癫痫作用。结果 由 TCMSP 筛选得到4个有效成分及76个主要靶点。癫痫疾病以“Score”大于1.5分进行筛选得到3685个靶标。GO富集分析得到BP条目10个，细胞CC条目9个，MF条目10个（P<0.01），主要涉及核受体活性、离子通道活性、激素结合、神经递质受体活性、蛋白激酶活性、钙调蛋白结合等。KEGG 富集得到14条通路，主要涉及c型凝集素受体信号通路、雌激素信号通路、Ca²⁺信号通路、逆行内源性大麻素信号通路等。分子对接结果显示，桉脂素、山奈酚和8-异戊烯基山奈酚与癫痫关键靶标GABRA2、PPARG等具有良好的结合活性。动物实验结果表明，石菖蒲水提取物及主要潜在有效成分桉脂素和山奈酚在PTZ致小鼠癫痫模型上显示出较好的抗癫痫活性。结论 本研究通过动物实验验证了石菖蒲提取物和潜在有效成分的抗癫痫活性，并且运用网络药理学和分子对接技术探讨了其抗癫痫作用机制，发现石菖蒲可通过多个成分如桉脂素、山奈酚、8-异戊烯基山奈酚，多靶点如GABA_A、PPARG等，多条通路如雌激素信号通路、钙信号通路对机体产生协调效应从而抑制癫痫的发作。该研究提示石菖蒲治疗癫痫具有多成分、多靶点、多通路特点，为石菖蒲的进一步研究提供数据支撑。     

经方桂枝茯苓丸“异病同治”任脉癥瘕类疾病的网络药理学研究＊

目的 基于网络药理学探讨桂枝茯苓丸对任脉癥瘕类病“异病同治”分子机制研究。方法 基于TCMSP数据库获取桂枝茯苓丸有效成分及作用靶点；通过GenCards、DisGeNET、DrugBank数据库检索子宫腺肌病、甲状腺结节、乳腺结节相关疾病基因；利用韦恩图获取有效成分-疾病共有靶点，上传至STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络并分析其分子生物学机制；其后，借助DAVID数据库对共有靶点进行生物学功能和通路富集分析，进一步获取通路关键靶标，并结合BioGPS、DisGeNET、GenCards网站获取关键靶标的组织定位、蛋白归属、亚细胞分布的相关信息，最后进行分子对接验证。结果 获得桂枝茯苓丸有效成分共85个，其中（+）-儿茶素、豆甾醇分布范围较广，黄芩素、β-谷甾醇度值较高。获得有效成分-疾病共有靶点24个，由GO分析可知，桂枝茯苓丸治疗子宫腺肌病、甲状腺结节、乳腺结节主要集中在凋亡过程的正调控、炎症反应、细胞蛋白代谢过程的正调控、体液免疫反应及平滑肌细胞增殖的正向调节等生物过程中。信号通路主要富集在TNF、雌激素等信号通路，主要与机体免疫炎症反应、雌激素变化等密切相关。通过KEGG分析进一步筛选其关键靶标，发现主要存在于平滑肌、淋巴细胞、甲状腺、子宫等组织器官中。其后，将筛选的10个有效成分，12个靶点蛋白进一步进行分子对接验证，结果显示，（+）-儿茶素、豆甾醇在分子对接中分别与CXCL8、MMP9结合最紧密。结论 本文通过网络药理学初步发掘桂枝茯苓丸药效物质基础，及作用于子宫腺肌病、甲状腺结节、乳腺结节的关键作用靶点和相关分子生物学途径，其共病的机制主要涉及雌激素、肿瘤、炎症、免疫反应等信号通路，并与多个生物过程密切相关，可为深入研究桂枝茯苓丸“异病同治”作用机制提供研究方向。     

三七化学成分分析及其抗炎机制的网络药理学探讨

目的 利用超高效液相色谱与四极杆飞行时间质谱联用（ultra performance liquid chromatography quadrupole-time-of-flight hybrid mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS）分析三七的主要化学成分,运用网络药理学研究三七抗炎的多成分、多靶标、多途径作用机制。方法 通过UPLC-Q-TOF-MS分析三七的主要化学成分,使用DAVID数据库进行基因本体论（Gene Ontology,GO）分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genesand Genomes,KEGG）通路分析,并运用Cytoscape 3.6.1软件绘制网络互作图,Image GP工具绘制GO气泡图。结果 研究得到人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rg₁、月桂酸单甘油酯（monolaurin）等22个关键抗炎作用的活性成分和表皮生长因子受体（EGFR）、信号传导蛋白和转录激活物3（STAT3）、丝裂原活化蛋白激酶-14（MAPK14）等31个关键靶点。GO、KEGG通路富集分析发现,三七可能主要通过人参皂苷Rh₁、人参皂苷Rg₁、月桂酸单甘油酯、β-胡萝卜苷（β-daucosterol）和人参环氧炔醇（panaxydol）等活性成分,作用于EGFR、STAT3、MAPK14、白介素-2（IL-2）等靶点,调节癌症信号通路（Pathways in cancer）、细胞因子受体相互作用（Cytokine-cytokine receptor interaction）、突触细胞黏附分子（CAMs）等信号通路发挥抗炎作用。结论 三七抗炎体现了多成分、多靶点、多途径的特点,为进一步开展三七抗炎作用药效物质基础和作用机制研究提供了新的思路和方法。     

芪参益气滴丸对急性心肌梗死后左心室功能影响的临床观察※※

目的 观察中成药芪参益气滴丸对急性心肌梗死后左心室功能的影响，明确芪参益气滴丸对急性心肌梗死患者的临床疗效。方法 将120例符合标准的急性心肌梗死患者，随机分为治疗组和对照组，各60例，对照组给予常规西药治疗，治疗组在对照组基础上加用芪参益气滴丸，观察两组治疗前后的左心室功能指标［包括左心射血分数（LVEF）、左室舒张末内径（LVEDD）、左室收缩末内径（LVESD）、左室舒张末容积（LVEDV）、左室收缩末容积（LVESV）］、生化指标［包括B型钠尿肽（BNP）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）］、疗效指标（包括临床疗效、六分钟步行距离）以及药物不良反应。结果 治疗后，治疗组临床疗效优于对照组，两组比较差异有统计学意义（P<0.05） ；治疗组的LVEDD、LVESD、LVEF改善程度优于对照组（P<0.05）；两组BNP、hs-CRP较治疗前降低，且治疗组优于对照组（P<0.05）；两组的6分钟步行距离较治疗前明显提高，且治疗组优于对照组（P<0.05）。结论 急性心肌梗死后，常规西药基础上加用中药芪参益气滴丸，可显著改善临床治疗效果，促进相关生化指标恢复，改善临床症状及左心室功能，提高运动耐量，具有一定的抗心室重构作用，同时临床未发现明显不良反应。     

草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响

目的：研究草酸铵对僵蚕抗凝作用的影响。方法：以凝血酶时间(TT)为指标，用添加法比较不同浓度草酸铵对僵蚕提取液和凝胶分离液抗凝作用的影响。结果：添加草酸铵浓度在1．8～21．3mg／ml范围内，对固形物含量15．8～31．6mg／ml的提取液和14．6～29．1mg／ml的凝胶分离液的TT值增加成正相关。结论：草酸铵对僵蚕提取液、凝胶分离样品的抗凝作用均有增强作用，随提取液浓度降低影响增大，而随凝胶分离液浓度增大影响增大。     

蛇床子素抗凝血作用

目的:研究蛇床子素的抗凝血作用。方法:通过测定小鼠凝血时间(CT)、大鼠的凝血酶原时间(PT)和优球蛋白溶解时间(ELT),观测蛇床子素的抗凝作用。结果:蛇床子素能显著处长CT、PT,缩短ELT。结论:蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

《诸病源候论》对皮肤病学的贡献

对《诸病源候论》在皮肤病方面的成就进行了较为系统的整理总结 ,该书着重讨论了皮肤病的命名、分类、病因病机 ,并阐发了《内经》“邪之所凑 ,其气必虚”理论和预防为主的思想。     

苯唑青霉素对丁胺卡那毒素药动学的影响

 采用微量微生物法对丁胺卡那霉素（AMK）单用及AMK与苯唑青霉素（OXA）合用后，兔体内AMK血药浓度进行测定；药时数据用MCPKP软件经IBM计算机处理，并对两组药动学参数进行了统计学处理，结果表明OXA对AMK的药动学有显著的影响。     

蛇床子素抗凝血作用

目的：研究蛇床子素的抗凝血作用。方法：通过测定小鼠凝血时间（CT）、大鼠的凝血酶原时间（PT）和优球蛋白溶解时间（ELT），观测蛇床子素的抗凝作用。结果：蛇床子素能显著处长CT、PT，缩短ELT。结论：蛇床子素具有明确的抗凝血作用。     

基于细胞自噬探讨左归丸对肾虚仔鼠皮肤发育的影响

目的:研究左归丸对先天肾虚仔鼠发育过程中皮肤内细胞自噬的影响及其机制,探索补肾填精法在生长发育异常中的应用价值.方法:36只雌雄比例为2∶1的大鼠进行配对,复合应激法刺激孕鼠构建先天肾虚仔鼠模型,根据将孕鼠处理方式不同,分为正常组,肾虚组,左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg-1).正常组不造模给予生理盐水灌胃,肾虚组...     

缓冲盐对大孔吸附树脂分离阿魏酸脂质体及游离药物的影响

目的：研究缓冲盐对不同型号大孔吸附树脂分离脂质体及其游离药物能力的影响,并对阿魏酸脂质体进行质量评价。方法：采用缓冲盐（Na₂HPO₃-NaH₂PO₃）平衡的大孔吸附树脂分离脂质体与游离药物,用高效液相色谱检测药物含量,计算包封率。结果：该法在0.56~2.8 μg· mL^-1线性关系良好（r=0.999 6）,精密度小于1.1%。缓冲盐平衡后的大孔吸附树脂对脂质体的吸附作用均有所降低,且不影响大孔吸附树脂对阿魏酸的吸附能力。其中HPD450对空白脂质体的回收率在97.2%~100.8%,平均回收率为98.1%。结论：缓冲盐可提高大孔吸附树脂分离脂质体及游离药物的能力。     

脑卒中偏瘫康复针刺干预思考

针刺治疗中风在我国有数千年的历史,今天还广为应用。随着康复医学理论的深入,结合现代康复理论实践思考脑卒中偏瘫康复的针刺如何有效干预,对于脑卒中偏瘫康复的中医针刺治疗理念认识及临床康复疗效的提高均有帮助。     

舒心饮预防动脉粥样硬化的实验研究

目的:通过研究舒心饮对动脉粥样硬化形成过程中相关致炎因子的影响和量效关系,阐明舒心饮干预和延缓动脉粥样硬化形成的可能机制。方法:72只雄性SD大鼠被随机均分为空白组、模型组、舒降之组、舒心饮低、中、高剂量组。观察血脂、光镜下胸主动脉的病理变化、胸主动脉内膜致炎因子MCP-1、P-selectin蛋白的表达。结果:舒心饮能显著降低血清总胆固醇,升高HDL/TC的比值;显著降低动脉内膜厚度、泡沫细胞阳性内膜面积及其占内膜总面积的百分比;舒心饮能显著降低P-selectin、MCP-1在大鼠胸主动脉内膜的表达;中剂量舒心饮也许是抗动脉粥样硬化治疗的最佳剂量。结论:舒心饮能影响动脉粥样硬化形成过程中炎症的启动和致炎因子的激活,延缓动脉粥样硬化的进程,预防和治疗动脉粥样硬化性疾病。     

"软系"疗法的中医探讨

从中医角度探讨“软系”疗法的科学性,探求“软系”疗法疗效显著的原因。