基于GEO数据芯片与网络药理学探讨丹葛止痛方治疗冠心病的作用机制

目的 采用GEO芯片数据挖掘与网络药理学的方法,找出冠心病的差异表达基因,探讨丹葛止痛方治疗冠心病的作用机制。方法 基于GEO数据库及GEO2R平台筛选出冠心病的差异表达基因,利用药物靶点数据库分析平台,获取丹葛止痛方的活性成分及其对应的靶点,对比丹葛止痛方与冠心病的差异表达基因,获取共同靶点,基于共同靶点进行蛋白质相互作用（PPI）分析、GO功能与KEGG通路富集分析。结果 获取冠心病差异表达基因2517个,丹葛止痛方靶点222个,两者匹配后获得共同靶点30个,PPI网络中获取核心靶点前5的依次为VEGFA、ESR1、MMP9、MDM2、PTGS2;GO富集分析共筛选出45个条目,KEGG通路富集分析共筛选出43条信号通路。结论 丹葛止痛方可通过多途径、多靶点治疗冠心病,为指导临床治疗及新药研发提供了科学依据。     

基于miRNA差异性探讨化毒三阴方对气虚质三阴乳腺癌PI3K/Akt/NF-κB通路的调控作用

目的 该研究旨在基于miRNA差异性探讨化毒三阴方对气虚质三阴乳腺癌（TNBC）患者磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核转录因子-κB（PI3K/Akt/NF-κB）信号通路的调控作用。方法 基于前期研究成果及利用生信分析方法,预测气虚质与平和质患者差异表达miRNA调控的靶基因,与TNBC靶基因取交集,并将交集靶基因进行京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集和蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络分析,分析其差异表达miRNA调控TNBC关键通路及靶基因。纳入完成西医标准治疗后气虚质TNBC患者,予化毒三阴方干预3年,收集服药前后患者外周血,检测其服药前后关键通路上基因的表达情况。结果 气虚质与平和质差异表达的miRNA共有49个,上调16个,下调33个,调控TNBC共1 445个靶基因,PPI和KEGG通路富集分析显示,关键基因主要有肿瘤蛋白p53（TP53）,蛋白激酶B1（Akt1）,表皮生长因子受体（EGFR）,丝裂原活化蛋白激酶3（MAPK3）,血管内皮生长因子A（VEGFA）,肿瘤坏死因子（TNF）等,关键通路有PI3K/Akt,丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）,RAS信号通路等。共纳入11例气虚质TNBC患者,与服药前相比,服药后患者PI3K/Akt信号通路上NF-κB1,Akt1表达下调,编码PI3K基因（PIK3CA）,B细胞淋巴瘤-xL（Bcl-xL）表达上调。其中治疗前后NF-κB1,Akt1表达差异具有统计学意义。结论 化毒三阴方可调控气虚质TNBC患者的PI3K/Akt/NF-κB信号通路上的基因表达,使NF-κB1,Akt1表达下调,PIK3CA,Bcl-xL表达上调。     

光污染对大鼠卵巢MicroRNA的影响及滋阴补阳方序贯干预作用的研究＊

目的 探讨光污染大鼠、正常光照大鼠与滋阴补阳方序贯法干预后的大鼠卵巢的microRNA测序表达谱的差异情况。方法 将80只SD雌性大鼠随机分为对照组25只和造模组55只，对照组大鼠25只给予12/12h光/暗循环的光照条件，造模组大鼠55只给予24 h持续光照的条件，造模时间定为50天，剔除造模失败者5只，剩余造模大鼠随机分为模型组25只和实验组25只。对照组、模型组予以生理盐水灌胃，实验组予以滋阴补阳方序贯法。取三组大鼠卵巢，采用Illumina HiSeq 2500高通量测序技术进行测序，比较三组的microRNA表达差异。对差异表达的microRNA进行筛选，并进行GO和KEGG功能显著性富集分析。荧光定量RT-PCR对差异表达microRNA进行验证。结果 本研究发现光污染组和正常光照组组间呈显著性差异表达的16个已知的microRNA，其中5个microRNA表达上调，11个microRNA表达下调。光污染组和实验组组间呈显著性差异表达的4个已知的microRNA，其中3个microRNA表达上调，1个microRNA表达下调。GO分析显示差异表达的microRNA在富集的分子功能上多集中于生物调节、生长过程、分子的结合等方面，KEGG通路富集分析示，受microRNA调控的靶基因参与的这些通路中多集中于神经组织受体相互作用、癌症、雌激素、MAPK等相关信号通路。荧光定量RT-PCR结果示差异性 miRNA 的表达趋势与测序结果相一致。结论 差异表达的microRNA可能在光污染环境下对卵巢的生长发育具有重要的作用，滋阴补阳方序贯法可能通过这些相关信号通路作用于卵巢组织起到改善卵巢功能的作用。     

凉血通瘀方对脑出血大鼠氧化应激和炎症反应的影响

目的:研究凉血通瘀方对脑出血大鼠的影响并从抗氧化和抗炎作用探讨其可能机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、凉血通瘀组4组,每组分为用药后1 d、3 d、5 d三个时间点各6只。按自体尾动脉血注入法制备脑出血模型,凉血通瘀方组给予凉血通瘀方治疗。观察行为学评分;硫代巴比妥酸反应法检测脑组织中MDA含量;RT-PCR法测定nNOS、CuZnSOD、TLR-4、IL-1βmRNA的表达。结果:(1)行为学评分:用药3 d和5 d,凉血通瘀组低于模型组(P0.05,P0.01)。(2)氧化应激指标:用药1 d、3 d和5 d,凉血通瘀组CuZnSOD mRNA表达高于模型组(P0.01);用药1 d、3 d和5 d,凉血通瘀组nNOS mRNA含量表达低于模型组(P0.01);用药1 d、3 d和5 d,凉血通瘀组MDA含量表达低于模型组(P0.05)。(3)炎症因子:用药1 d和5 d,凉血通瘀组TLR-4 mRNA表达低于模型组(P0.05);用药1 d,凉血通瘀组IL-1βmRNA含量表达低于模型组(P0.01)。结论:凉血通瘀方能够改善脑出血大鼠神经功能缺损,其机制与发挥抗氧化和抗炎作用有关。     

基于miRNA测序技术探讨补中益气汤治疗自身免疫性甲状腺炎的潜在机制

目的 探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎（AIT）小鼠甲状腺组织miRNA表达的影响。方法 选择NOD.H-2^h4小鼠共30只，随机分为正常组、模型组、补中益气汤组（BG组），每组各10只。根据分组给予小鼠含0.05%碘化钠水8周构建小鼠AIT模型后，灌胃给药8周取材。观察每组小鼠甲状腺组织病理改变情况，并对每组小鼠甲状腺组织差异miRNA进行实验验证及生物信息学分析。结果 与正常组比较，模型组甲状腺组织炎性细胞浸润明显，血清甲状腺球蛋白抗体（TgAb）水平显著升高（P<0.01）；与模型组比较，BG组甲状腺组织炎症程度减轻，血清TgAb水平显著降低（P<0.01）。与正常组比较，模型组小鼠白细胞介素（IL）-6、IL-17表达显著增高（P<0.01），IL-1β表达明显降低（P<0.05）；与模型组比较，BG组IL-1β、IL-6、IL-17表达明显降低（P<0.05）。与正常组比较，模型组得到154个差异表达miRNA；与模型组比较，BG组得到112个差异表达miRNA。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）结果表明miR-326-3p、miR-128-3p、miR-223-5p、miR-141-3p、miR-871-3p、miR-204-3p表达与测序结果趋势一致。基因本体（GO）功能富集于T细胞活化调节、氧化应激、miRNA结合等方面；京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集于磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路、环磷酸腺苷（cAMP）信号通路等途径。差异miRNA预测得到3个关键基因，果蝇母源抗皮肤生长因子蛋白（Smad3）、Janus相关激酶2（JAK2）、信号转导和转录激活因子3（STAT3）。结论 补中益气汤可能通过调节6种miRNA干预自身免疫性甲状腺炎。     

基于蛋白质组学探讨仙连解毒方干预小鼠结直肠癌湿热瘀毒证模型的作用靶点及信号通路研究＊

目的 应用蛋白质组学方法探讨仙连解毒方（Xian-Lian-Jie-Du Decotion，XLJDD）治疗小鼠结直肠癌湿热瘀毒证模型的作用靶点及信号通路。方法 采用偶氮甲烷（AOM）/葡聚糖硫酸钠（DSS）结合高糖高脂饲料喂养的复合方法建立小鼠结直肠癌湿热瘀毒证模型，将小鼠分为空白对照（Control）组、湿热瘀毒证模型（Model）组、仙连解毒方处理（XLJDD）组。XLJDD组于造模同时开始给药（12.9 g·kg^-1），每周6次，共112天，末次给药4 h后，收集各组小鼠结直肠组织，迅速液氮保存。蛋白质质谱检测采用非数据依赖型采集模式（DIA），通过Protein Discovery 2.2软件进行蛋白质搜库鉴定，对蛋白及肽段信息定量分析，筛选各组差异表达蛋白，并对差异蛋白进行GO（Gene Oncology）和KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）富集分析。结果 Model组与Control组相比，共有差异表达蛋白267个，XLJDD组与Model组相比，共有225个差异表达蛋白，GO以及KEGG富集分析发现仙连解毒方干预后，发现这些蛋白主要定位在细胞膜上，能够发挥细胞调节功能等分子功能，参与细胞粘附、Th1/Th2细胞分化、Th17细胞分化和细胞衰老通路等生物学进程相关。结论 通过蛋白质组学研究提示，XLJDD可能通过调节免疫细胞功能，发挥干预小鼠结直肠癌湿热瘀毒证的作用。     

补阳还五汤对急性脑梗死患者血清外泌体lncRNA表达谱的研究＊

目的 分析补阳还五汤对急性脑梗死患者血清外泌体lncRNA表达谱的影响，以期阐明其治疗脑梗死的机理。方法 选取6例符合纳入标准的急性脑梗死患者，随机分为观察组和对照组。其中观察组4例患者给予补阳还五汤联合西医基础治疗，对照组2例患者给予单纯西医基础治疗。在治疗第7天后采集静脉血，离心后分离血清并提取外泌体，运用基因芯片高通量检测lncRNA，筛选差异表达的lncRNA，最后对其cis作用靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。结果 两组间共有20个差异表达的lncRNA，其中19个下调，1个上调；GO富集分析前30的结果涉及生物过程19个，细胞组分7个，分子功能4个；KEGG 通路富集主要为MAPK信号通路、雌激素信号通路等，这些通路与脑缺血后的氧化应激、炎症反应、细胞凋亡及细胞自噬等病理过程密切相关。结论 补阳还五汤会改变急性脑梗死患者的血清外泌体lncRNA表达谱，涉及诸多生物过程和信号通路。本研究可为后续的临床及基础研究提供了新思路。     

凉血通瘀方对脑出血大鼠脑组织t-PA和MMP-9表达的影响

目的:观察中药凉血通瘀方对脑出血大鼠脑组织纤溶酶原激活物(t-PA)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响。方法:采用自体不凝血方法制备大鼠脑出血模型,分为模型组和凉血通瘀组和伪手术组。凉血通瘀组给予凉血通瘀煎剂、模型组和伪手术组给予生理盐水每日灌胃。脑出血后24、48、72、120h观测大鼠血肿含量、血脑屏障通透性,采用Western blot和荧光RT PCR检测血肿周围组织内t-PA和MMP-9蛋白和基因表达水平。结果:凉血通瘀组各时间点血肿含量显著低于模型组(P<0.01),血脑屏障通透性亦低于模型组(P<0.01)。与模型组相比,脑出血后48、72、120h,凉血通瘀组的t-PA蛋白和基因表达水平显著升高,而MMP-9水平显著降低(P<0.01)。结论:凉血通瘀方促进血肿吸收、改善血脑屏障通透性可能和其上调脑出血大鼠脑内t-PA表达、下调脑内MMP-9表达有关。     

基于文献的冠心病血瘀证相关蛋白互作模块及miRNA-mRNA调控网络构建＊

目的 整合发掘更多冠心病血瘀证的标志基因，研究已知冠心病血瘀证差异基因的生物机理，构建关键蛋白互作模块与miRNA-mRNA调控网络，丰富靶点间的相互作用网络，并分析其核心生物过程与通路。方法 利用中国知网、万方、维普、中国生物医学文献、Embase、PubMed六个数据库获取冠心病血瘀证相关基因文献；按照纳排标准筛选符合要求的文献提取数据，运用Metascape数据库针对全部差异mRNA构建蛋白质间互相作用的网络模块，并对上调mRNA和下调mRNA的通路进行富集和功能注释。利用starBase数据库预测冠心病血瘀证相关miRNA的靶基因，并与文献整合的差异mRNA相互映射，运用OmicShare Tools绘制冠心病血瘀证相关miRNA-mRNA调控网络。结合Webgestalt在线工具，针对miRNA-mRNA调控网络中相关mRNA进行KEGG和GO富集分析。结果 研究纳入冠心病血瘀证相关基因文献15篇，获得113个mRNA（66个上调、47个下调），101个miRNA（55个上调、46个下调）。研究通过蛋白互作网络得到2组关键蛋白：①IL6、EGR1、TP53、JUN、FOS；②CTSL、HLA-DRB1、HLA-DQB1、HLA-DRB5。构建得到miRNA-mRNA调控网络的关键节点，包括24个miRNA（10个上调、14个下调）和22个mRNA（10个上调、22个下调），其中10个节点与部分纳入文献的研究结果吻合。结论 冠心病血瘀证涉及多种生物功能、多条信号通路，其miRNA-mRNA调控网络机制可能与炎症和免疫反应、凝血功能、细胞分化与凋亡等较为相关。     

凉血通瘀方对脑出血模型大鼠脑组织、肠组织、血清胆囊收缩素8的影响

目的探讨凉血通瘀方治疗脑出血的可能机制。方法 108只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、凉血通瘀组各36只,除假手术组外其余各组采用自体血注入法制作脑出血大鼠模型。凉血通瘀组于造模成功后按1.3 ml/100 g给予凉血通瘀方水煎剂(浓度1.2 g/ml)灌胃,每日1次,连续5日;假手术组、模型组每日灌胃同等量蒸馏水。各组于灌胃后24 h、72 h、120 h进行大鼠神经学评分,评定肠道动力功能,免疫组化法检测脑组织、肠组织胆囊收缩素8(CCK-8)表达,ELISA法检测脑组织、肠组织及血清CCK-8含量。结果与模型组同时间比较,凉血通瘀组大鼠在72 h、120 h神经学评分降低(P0.05或P0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠6 h黑便粒数减少,黑便百分比降低(P0.05或P0.01),而凉血通瘀组大鼠黑便百分比较模型组升高(P0.01)。与模型组同时间比较,凉血通瘀组大鼠脑组织CCK-8表达在72 h、120 h表达增强,肠组织CCK-8表达在24 h增强(P0.05或P0.01);凉血通瘀组大鼠血清CCK-8含量72 h较假手术组和模型组降低(P0.01)。结论凉血通瘀方可改善脑出血大鼠神经功能缺损,增强胃肠动力,促进排便,可能与增加肠组织、脑组织CCK-8表达,降低血清CCK-8含量有关。     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

病性变化和转化的哲理数学原理

病性的变化和转化以及疾病的传变是中医病理学的2个核心问题。它们可分别从阴阳五行数学的公理1和公理2、3得到圆满的解释。病性变化,其症结在于主导属性明晰度的大小发生变化;病性转化,其症结则在于主导属性明晰度的正负号发生变化。     

丁香苦苷不同给药途径的药物动力学研究

目的:研究并比较丁香苦苷单体两种给药途径在家兔体内的药物动力学过程,考察丁香苦苷单体口服后的绝对生物利用度。方法:家兔静脉注射丁香苦苷注射液和灌胃给予丁香苦苷水溶液,采集血样,固相萃取小柱活化方法处理血浆后高效液相色谱法测定丁香苦苷血浆浓度,采用药动学软件3P97进行数据处理,确定药动学参数。结果:丁香苦苷静脉给药后在体内符合二室模型分布,其主要药动学参数分别如下:T1/2α为2.41min,T1/2β为15.38min。灌胃给药后丁香苦苷的药动学行为符合一级吸收二室模型,Cmax为17.91min,T1/2(α)为9.642min,T1/2(β)31.748min。绝对生物利用度为35.9%。结论:丁香苦苷单体经口服和静脉两种给药途径给药后,吸收和消除均较快。     

腹腔镜诊治不孕症58例分析

目的:探讨腹腔镜诊治不孕症的临床意义和疗效。方法:选取2008年8月—2009年1月入住我院的98名不孕症妇女,将其分为腹腔镜组和经腹手术组,比较两组术后妊娠情况。结果:输卵管粘连Ⅰ～Ⅲ级者,不孕时间要短于输卵管Ⅳ级的患者。腹腔镜组术后妊娠23例,其中临床正常妊娠18例,异位妊娠5例;经腹术组术后妊娠13例,其中临床正常妊娠10例,异位妊娠3例。两组输卵管粘连Ⅰ～Ⅲ级的妊娠率均明显高于Ⅳ级者,差异有统计学意义(P<0.05);两组疗效比较无显著性差异(P>0.05)。结论:腹腔镜诊治不孕症临床疗效确切,值得推广应用。     

肩周炎的经筋病机实质与治疗探讨

[目的]探讨肩周炎的经筋病机实质与治疗方法。[方法]从《黄帝内经》原文及现代相关文献出发,分析经筋与肩关节的生理解剖联系、肩周炎发病机制及治疗方法。[结果]生理上,肩关节与手六经之经筋和足少阳、足太阳经筋相联属;病理上,分为"瘀沫期"、"经筋拘急期"、"筋结病灶形成期",但三病理过程相互杂揉与绞结;治疗上,宜遵循"以痛为俞"、采用粗银质针温针治疗,是解除瘀、沫、筋结病灶的重要手段与方法,临床疗效显著。[结论]认真探讨中医生理、解剖学,有利于中医理论的深入理解及拓展临床治疗思路。     

对中医学科建设与学科带头人培养的思考

通过中医学术发展的历史沿革回顾,提出了中医药学科建设的总体构思,指出要发展一个大的一级学科,首先要有教育,这是发展学科的基础;其次是科研来提高教育水平,并指导临床;再次是临床;三者缺一不可。同时提出了学科带头人应具备的条件及如何培养学科带头人。     

中医方剂学考试改革的探索与实践

传统的闭卷考试不能很好地反映方剂学教学的效果,因此,我们试行了以多种形式相结合的考试改革,考试成绩由笔试、机试、平时3个方面组成。结果大大提高了学生分析问题和解决问题的能力,激发了学生学习的兴趣,提高了教师教学水平,带动了教学改革和教学研究的全面进行。     

针灸治疗椎动脉型颈椎病的取穴规律分析

目的:探寻椎动脉型颈椎病针灸取穴规律。方法:检索CNKI、VIP,建立椎动脉型颈椎病针灸取穴数据库,采用SPSS17.0统计软件统计描述。结果:治疗椎动脉型颈椎病的针灸穴位共计72个,使用频次为1005次;所用腧穴归属为督脉、足少阳胆经、经外奇穴、足太阳膀胱经及足阳明胃经频次最多,其累积频率达82.29%;其中风池穴的频率为19.11%;夹脊穴的频率为17.13%;百会穴的频率为12.3%,三穴累积频率达64.28%。结论:针灸治疗本病,以疏通局部经络,调节阴阳气血,临床选取督脉、足少阳胆经、奇穴以及风池、夹脊、百会三穴治疗最多。     

明代医家脾阴论探讨

脾阴论是明代医家在继承丹溪养阴思想的基础上对东垣的脾胃学说的一次创新,由于后世胃阴学说的兴起,这部分理论逐渐被忽视。文章通过系统整理这部分理论,揭示了其中所蕴含的致中和的治疗理念,以期能被合理地应用到某些疾病证候的治疗当中去,在实践中得到进一步深化。