Th1/Th2细胞因子结合甲状腺自身抗体检测在自身免疫性甲状腺疾病中的诊断价值

研究Th1/Th2细胞因子和甲状腺自身抗体在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)中的诊断价值。选择Graves病(GD)28例、甲亢甲炎(GDIII)15例、桥本甲亢(HTL)13例、桥本甲状腺炎(HT)21例、20名正常人,通过酶免法检测血清Th1型细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和Th2型细胞因子白细胞介素-4(IL-4)的含量,与放免法测定的促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)进行相关分析。结果显示,IFN-γ水平HT>HTL>GDIII>GD,IL-4水平GD>GDIII>HTL>HT。GDIII和HTL组IFN-γ和IL-4水平均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),GDIII和HTL组TGAb、TPOAb无统计学意义(P>0.05)。HT组IFN-γ与TGAb、TPOAb正相关(r分别为0.67,0.54,P<0.01),GD组IL-4与TRAb正相关(r=0.71,P<0.01)。Th1/Th2细胞因子失衡反映了AITD的病理改变和免疫功能紊乱,与甲状腺自身抗体检测相结合可成为AITD辅助诊断的指标。     

Th3、Th17及相关细胞因子在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用

目的:研究Th17、Th3细胞及相关细胞因子IL-17、TGF-pI在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发病机制中的作用及意义.方法:收集49例初诊的自身免疫性甲状腺疾病患者,分为Graves’病(GD)(n=30)组和桥本甲状腺炎(HT)(n=19)组,另选年龄、性别匹配的18个正常人作为健康对照.Graves’病组采用甲巯咪唑治疗,桥本甲状腺炎组采用甲状腺素钠治疗,均随访至甲状腺功能正常.采用流式细胞仪技术检测外周血中Th17和Th3细胞比例.采用ELISA方法检测血浆IL-17、TGF-β1水平.结果:GD和HT初诊组患者外周血Th17细胞较正常对照组明显升高(P＜0.05).Th3细胞在HT初诊组中明显升高,而其在GD初诊组中明显下降(P＜0.05).血浆IL-17水平在GD和HT初诊组、缓解组均较正常对照组明显升高(P＜0.05).血浆TGF-β1水平在HT初诊组和缓解组均明显升高(P＜0.05).结论:Th17、Th3细胞和相关细胞因子IL-17、TGF-β1可能参与了自身免疫性甲状腺疾病的发病,TGF-β1可能在HT的发病中起了一个促炎因子的作用.     

自身免疫性甲状腺病患者血清免疫球蛋白及甲状腺自身抗体、ANA、抗ENA抗体变化及临床意义

目的 探讨自身免疫性甲状腺病(AITD)患者血清免疫球蛋白及甲状腺自身抗体、抗核抗体(ANA)、抗可溶性抗原(ENA)抗体水平变化及临床意义.方法 选取2017年1月1日至2020年8月1日我院收治的110例AITD患者作为研究对象,包括桥本甲状腺炎(HT)和毒性弥漫性甲状腺肿(GD),其中HT组共62例,GD组共48例,另外选取同期60例健康体检者作为对照组,采集所有受检者静脉血,应用免疫学方法分别检测其血清免疫球蛋白以及甲状腺自身抗体、ANA、抗ENA抗体水平.结果 3组自身免疫球蛋白IgM、IgG和IgA水平比较差异均具有统计学意义(P＜0.05),其中HT组患者IgM和IgG水平显著高于对照组(P＜0.05),GD组患者IgG和IgA水平显著高于对照组(P＜0.05),且HT组IgM和IgG水平显著高于GD组,IgA水平显著高于GD组(P＜0.05);3组TPOAb和TGAb水平比较差异均具有统计学意义(P＜0.05),其中HT组明显高于GD组和对照组,GD组明显高于对照组(P＜0.05);在AITD患者中ANA和抗双链DNA (ds-DN A)抗体阳性率显著高于对照组(P＜0.05),抗U1-RNP抗体阳性率比较差异无统计学意义(P＞0.05);而在所有受检者中均未检出ENA谱中其他抗体.结论 血清免疫球蛋白和血清甲状腺自身抗体检测对AITD的临床鉴别诊断具有一定积极的指导意义;ANA与抗ENA抗体在AITD中并无特异性,关于其确切病理机制和意义有待进一步深入研究.     

自身免疫性甲状腺疾病胰岛素样生长因子及其结合蛋白的改变

为探讨胰岛素样生长因子 (IGF )、胰岛素样生长因子结合蛋白 (IGFBP )在自身免疫性甲状腺疾病 (AITD )中的变化及其影响 ,本研究检测了 5 6例AITD患者与 2 4例正常对照血清IGF 1、IGFBP 1～ 3及甲状腺功能 ,发现IGF 1在GD、HT与GD控制组明显低于正常对照 (P <0 0 1) ,IGFBP 1、IGFBP 2在GD组明显高于正常对照 (P <0 0 1,0 0 5 ) ,IGFBP 3在HT组明显低于正常对照 (P <0 0 5 ) ;IGF 1与甲状腺激素间无相关 ,IGFBP 1～ 3均与TT4相关 (r =0 34、 0 38、 0 31;P <0 0 5 )。提示机体甲状腺激素、免疫状态均可能影响IGF、IGFBP水平 ,而后者有可能参与调节AITD的进程。     

Graves病和桥本病甲状腺细胞凋亡与Fas表达的研究

为了研究正常、Graves病 (GD )和桥本甲状腺炎 (HT )甲状腺细胞凋亡和凋亡相关蛋白Fas的变化特征及其临床意义 ,采用细胞培养方法和流式细胞术检测正常、GD和HT甲状腺细胞凋亡率和Fas表达量。结果发现 :(1)GD和HT甲状腺细胞凋亡率明显高于正常甲状腺细胞 (P <0 0 1)。其中 ,尤以HT甲状腺细胞凋亡增加最为显著 ;(2 )HT甲状腺细胞Fas表达阳性率明显高于正常和GD甲状腺细胞 (P <0 0 1) ,而GD与正常对照相比无统计学差异。以上结果表明 ,自身免疫性甲状腺疾病 (AITD )患者甲状腺细胞存在细胞凋亡和Fas表达的异常变化 ,尤以HT为显著 ,提示Fas介导的细胞凋亡参与AITD的发病过程 ,可能与HT甲状腺细胞破坏有关。     

子宫球蛋白相关蛋白1与桥本甲状腺炎的相关性

目的 探讨子宫球蛋白相关蛋白1(UGRP1)与桥本甲状腺炎(HT)的相关性。方法 通过免疫组化方法检测正常人、Graves病(GD)和桥本甲状腺炎患者甲状腺组织UGRP1的表达。选取60例自身免疫性甲状腺病(AITD)患者,其中HT患者30例为HT组,GD患者30例为GD组,选取无AITD的健康人28例为对照组,分别比较3组间临床一般资料、甲状腺相关指标、血清UGRP1水平。采用Pearson及Spearman相关性分析血清UGRP1水平与甲状腺相关指标的关系。结果 HT患者甲状腺组织UGRP1表达阳性,正常人、GD患者甲状腺组织UGRP1表达阴性。3组间临床一般资料差异无统计学意义(P>0.05)。3组间TT₃、TT₄、TSH、TPOAb、ATG、甲状腺体积水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HT组血清UGRP1水平为1.39(1.06,1.85)ng/mL,高于GD组0.77(0.43,1.72)ng/mL及对照组0.60(0.29,1.03)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析...     

AITD患者IL-6、TNF-α水平的变化

目的：了解自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者自细胞介素—6(IL—6)、肿瘤坏死因子—α(TNF—α)与其发病、复发的关系。方法：观察一组AITD患者治疗前后及复发患者游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、促甲状腺素(TSH)、抗甲状腺球蛋白抗体(TGA)、抗甲状腺微粒体抗体(TMA)、IL—6、TNF—α水平。结果：AITD中甲状腺功能亢进时TGA，TMA、IL—6、TNF—α水平升高，抗甲状腺药物(ATD)治疗后FT3、FT4水平恢复正常，TGA、TMA下降，IL—6、TNF—α水平下降。ATD停药后7例复发甲亢FT3、FT4水平升高，IL—6、TNF—α水平也升高，再次给予ATD治疗3月后FT3、FT4。水平恢复正常，IL—6、TNF—α水平下降。结论：细胞因子参与AITD的发生和发展过程，与AITD的免疫紊乱和功能状态异常间存在十分重要的内在联系。     

IL-23、 IL-17在桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中的表达

目的:检测桥本甲状腺炎(HT)甲状腺组织中白细胞介素(IL)-23、IL-17的表达,并探讨IL-23/IL-17在HT免疫病理中的作用。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法,检测20例HT患者和15例正常甲状腺组织中IL-23p19、IL-17mRNA和蛋白的表达水平。结果:RT-PCR显示IL-23p19、IL-17mRNA在HT甲状腺组织中的平均表达水平分别为1.0154±0.5749、0.5952±0.2513,正常对照组的表达水平分别为0.0929±0.0242、0.1537±0.0855;两组比较,HT患者甲状腺组织IL-23p19、IL-17mRNA的表达水平显著高于正常对照(P<0.05);且在HT中,IL-23p19和IL-17mRNA的表达存在正相关(P<0.01,r=0.861)。West-ernblot检测显示IL-23p19、IL-17蛋白在HT甲状腺组织中的平均表达水平明显高于正常对照(P<0.05)。结论:IL-23、IL-17在HT患者甲状腺组织中的协同过表达,提示IL-23/IL-17可能参与了HT的免疫病理过程。     

IL-17在桥本甲状腺炎甲状腺组织中的表达研究

目的:检测桥本甲状腺炎(HT)甲状腺组织中白细胞介素(IL)17的表达,并探讨其在HT免疫发病机制中的作用.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法,检测20例HT患者和15例正常甲状腺组织中IL-17 mRNA和蛋白的表达水平.结果:RT-PCR显示IL-17 mRNA在HT甲状腺组织中的平均表达水平为0.595 2±0.251 3,正常对照组的表达水平为0.153 7±0.085 5;Western blot检测显示IL-17蛋白在HT甲状腺组织中的平均表达水平为2.368 7±0.641 9,正常对照组的表达水平为0.126 5±0.097 3;两组比较,HT患者甲状腺组织IL-17 mRNA和蛋白表达水平显著高于正常对照(P值均为＜0.05).结论:IL-17在HT患者甲状腺组织中的过表达,有可能参与了HT的免疫学发病机制.     

PTPN22基因多态性与自身免疫甲状腺病的相关性

目的:检测PTPN22基因的单核苷酸多态性(SNP)及其与中国人自身免疫甲状腺病(AITD)的相关性, 并研究CTLA- 4基因SNP与PTPN22 SNP的相互关系.方法:采用PCR-RFLP技术分析231例AITD患者, 其中Graves'病(GD)149例, 桥本甲状腺炎(HT)82例和131例健康对照者PTPN22基因 1858 C>T及CTLA- 4基因49A>G位点的基因型.采用SASP-PCR技术分析PTPN22基因启动子-1123G>C的基因型.结果:(1)PTPN22基因的 1858C>T位点不存在多态性;(2)PTPN22基因-1123G>C SNP的等位基因和基因型分布频率在GD组与正常对照组间的差异有统计学意义(P值分别为0.040和0.013, OR值分别为1.44和2.33);(3) CTLA- 4基因 49A>G位点的等位基因和基因型分布频率在AITD组与正常组间有明显差异;(4)与携带PTPN22的G等位基因及CTLA- 4的AA基因型者相比, 携带PTPN22CC基因型与CTLA- 4 AG或GG基因型者发生GD的OR值=3.31(95%CI: 2.69-8.89).结论:PTPN22基因启动子-1123G>C SNP与GD的发生相关, 其CC基因型与CTLA- 4基因的G 等位基因对GD的发生起协同作用.     

Graves病小鼠模型IL-10水平与Th17细胞功能的检测和意义

目的 研究Th17细胞及相关细胞因子IL-17 mRNA与IL-10 mRNA在实验性Graves小鼠体内变化.方法 利用TSHR-E(胞外区)的腺病毒免疫小鼠方法建立Graves疾病模型,化学发光法检测血清FT4水平,细胞培养生物学方法检测TSAb活性,流式细胞术(FCM)分析小鼠脾脏细胞中Th17细胞的比例,qRT-PCR检测小鼠脾脏细胞中IL-17和IL-10mRNA水平.结果 小鼠血清FT4及TSAb水平升高,TSAb与FT4水平呈显著正相关(r=0.90,P＜0.01);Graves小鼠脾细胞中Th17细胞的比例为(2.56±0.43)％,明显高于正常对照组小鼠(1.07±0.27％)％(P＜0.05);Graves小鼠脾细胞中IL-17 mRNA的含量明显高于正常对照组(P＜0.05),而IL-10 mRNA的含量明显低于正常对照组(P＜0.05);且IL-17和IL-10水平变化存在明显的负相关(r=-0.564,P＜0.01).结论 TSHR-E(胞外区)的腺病毒免疫建立的GD模型中,IL-17mRNA增加和IL-10 mRNA则明显下降;提示两者可能在GD的发生及发展中发挥免疫调节作用.     

Th17细胞在Graves’病中的变化及意义

目的:探讨Th17细胞在中国人Graves’病(GD)中的变化及意义。方法:应用电化学发光法测定30例初发GD患者及30例健康体检者血清中促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化酶抗体(TPOAb)的水平;采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+IL-17+T(Th17)细胞的数量;用ELISA法测定初发GD患者和健康对照者PBMC产生IL-17的水平;应用实时定量PCR(qRT-PCR)检测PBMC中ROR-γt、IFN-γ、IL-4 mRNA的表达量;采用免疫组化染色检测甲状腺组织中IL-17+细胞的分布和数量。结果:初发GD组外周血中Th17细胞占CD4+T细胞的比例[(20.59±4.63)%]、PBMC分泌的IL-17水平[(83.22±34.28)pg/ml]以及PBMC中ROR-γt mRNA表达(1.67±0.98)均明显高于正常对照组Th17[(11.77±4.18)%](P<0.01)、IL-17[(19.74±5.99)pg/ml](P<0.01)和ROR-γt mRNA(0.92±0.18)(P<0.05)的水平。与正常对照组比较,GD患者PBMC中IFN-γmRNA的表达(0.31±0.07)、IL-4 mRNA的表达(2.53±0.70)均明显降低(P<0.01)。初发GD组患者PBMC中Th17细胞百分率与ROR-γt mRNA表达呈正相关(r=0.5047,P=0.01);与IFN-γmRNA表达量呈负相关(r=-0.5085,P<0.01);与IL-4 mRNA表达量呈负相关(r=-0.5372,P<0.01)。正常对照组甲状腺组织中未发现IL-17+细胞,GD组甲状腺组织滤泡间质内可见散在的IL-17+细胞。结论:初发GD患者PBMC中Th17细胞数量、PBMC分泌IL-17的水平和ROR-γt mRNA表达明显增高。GD患者甲状腺组织中有IL-17+细胞浸润,提示Th17细胞可能参与了中国人GD的发生。     

桥本氏甲状腺炎患者Th17与调节性T细胞免疫失衡的研究

目的 检测桥本氏甲状腺炎(HT)患者甲状腺组织及外周静脉血中Th17细胞和调节性T 细胞(Treg)细胞相关细胞因子的表达水平,分析Th17/Treg免疫平衡在HT发病机制中的作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测10例HT甲功正常组、10例HT甲低组和10例正常甲状腺组织(对照组)中IL-17A...     

SLE患者IFN-γ、IL-4及IL-12水平变化及意义

从Th1/Th2细胞代表性细胞因子IFN γ/IL 4和IL 12水平的变化分析SLE患者Th1/Th2细胞的偏移现象。本实验通过半定量PCR法和ELISA酶联免疫检测法检测上述三种细胞因子含量。实验结果显示 ,SLE患者IL 4/IFN γ基因水平比值为0 32 8,高于对照组 (0 0 7)。ELISA检测显示IL 12在SLE患者血清中为 (38 39± 15 1)pg/ml,低于对照组 (84 97± 13 7)pg/ml(P <0 0 5 )。结论 :SLE患者Th1/Th2细胞因子平衡失调 ,IL 4细胞因子基因水平增高 ,同时血清中IL 12水平降低。     

Adult Still's disease reflects a Th2 rather than a Th1 cytokine profile

Adult Still's disease (ASD) is a chronic multisystemic disease. Extraordinarily high serum levels of IL-18 in ASD patients have been described, whereas the mechanism remains to be clarified. This study aimed to evaluate proinflammatory cytokines and to consider their pathological roles. In patients with rheumatic diseases (n = 151), blood samples were taken at the active phase and the serum levels of IL-18 and other proinflammatory cytokines were measured by ELISA. The extra-high levels of IL-18 were confirmed selectively in ASD patients (n = 10). In the active phase of ASD patients, the levels of IL-6 were elevated accordingly, but IL-1beta and TNF-alpha were undetectable. As to Th1-Th2 cytokines, the levels of IL-4 and IL-13, but not INF-gamma, IL-12, or IL-2, were elevated in all ASD patients examined. Moreover, the serum levels of IL-18 showed a good correlation with those of IL-4, suggesting that ASD reflects a Th2 rather than a Th1 cytokine profile.     

Proinflammatory cytokines (IL-17, IL-6, IL-18 and IL-12) and Th cytokines (IFN-gamma, IL-4, IL-10 and IL-13) in patients with allergic asthma

Allergen-reactive T helper type-2 (Th2) cells and proinflammatory cytokines have been suggested to play an important role in the induction and maintenance of the inflammatory cascade in allergic asthma. We compared the plasma concentrations of novel proinflammatory cytokines IL-17 and IL-18, other proinflammatory cytokines IL-6 and IL-12, Th2 cytokines IL-10 and IL-13, and intracellular interferon-gamma (IFN-gamma) and IL-4 in Th cells of 41 allergic asthmatics and 30 sex- and age-matched health control subjects. Plasma cytokines were measured by enzyme-linked immunosorbent assay. Intracellular cytokines were quantified by flow cytometry. Plasma IL-18, IL-12, IL-10, IL-13 concentrations were significantly higher in allergic asthmatic patients than normal control subjects (IL-18: median 228.35 versus 138.72 pg/ml, P < 0.001; IL-12: 0.00 versus 0.00 pg/ml, P = 0.001; IL-10: 2.51 versus 0.05 pg/ml, P < 0.034; IL-13: 119.38 versus 17.89 pg/ml, P < 0.001). Allergic asthmatic patients showed higher plasma IL-17 and IL-6 concentrations than normal controls (22.40 versus 11.86 pg/ml and 3.42 versus 0.61 pg/ml, respectively), although the differences were not statistically significant (P = 0.077 and 0.053, respectively). The percentage of IFN-gamma-producing Th cells was significantly higher in normal control subjects than asthmatic patients (23.46 versus 5.72%, P < 0.001) but the percentage of IL-4 producing Th cells did not differ (0.72 versus 0.79%, P > 0.05). Consequently, the Th1/Th2 cell ratio was significantly higher in normal subjects than asthmatic patients (29.6 versus 8.38%, P < 0.001). We propose that allergic asthma is characterized by an elevation of both proinflammatory and Th2 cytokines. The significantly lower ratio of Th1/Th2 cells confirms a predominance of Th2 cells response in allergic asthma.     

Graves病患者^131I治疗前后血清IL-8水平的变化及相关研究

通过测定G raves病（GD）患者^131I治疗前后血清IL-8水平及FT3/IL-8和FT4/IL-8比值的变化,并分析比较治疗前后血清IL-8与TRAb及甲状腺功能变化,探求IL-8与GD发生、发展机制的关系及可否将其作为判断GD治疗疗效及预后的指标。共检测138份血样,其中,40名为正常对照,98例为GD患者。采用放射免疫法（R IA）检测血清TT3、TT4、FT3、FT4、TRAb及IL-8含量,采用免疫放射定量分析法（IRMA）对hTSH进行检测。结果显示：①GD初发组治疗前,血清IL-8水平明显高于对照组（P〈0.01）;治疗后3个月、6个月血清IL-8检测值明显降低（P〈0.01）,治疗后18个月,血清IL-8接近正常水平;②GD复发组血清IL-8水平明显高于对照组和缓解组（P〈0.01）;③GD患者血清FT3/IL-8和FT4/IL-8比值较对照组明显增高,治疗后3个月下降至对照组水平;④GD患者血清IL-8水平与TRAb呈正相关。结论：①GD患者的免疫功能恢复滞后于其本身的甲状腺功能;②FT3/IL-8和FT4/IL-8比值较IL-8单一指标更符合甲状腺的功能状况;③IL-8可能在GD的发病中起重要作用,可作为GD患者^131I治疗后观察疗效、判断预后及了解免疫功能恢复状况的有效指标。     

Graves病131I治疗后一年内缓解和早发甲减患者血清IL-18和TRAb的变化分析

探讨131I治疗后一年内GD患者甲减的免疫功能状态的改变.采用CLIA、IRMA和EIA方法,监测41例GD患者131I治疗前后血清白细胞介素-18(IL-18)、促甲状腺素受体抗体(TRAb)、TPOAb的含量和甲状腺重量(TDW)变化.41例GD患者分为甲减组13例和缓解组28例.结果表明治疗前两组GD患者血清IL-18和TRAb水平明显升高,与对照组比较均有显著性差异(P＜0.01,P(0.05),两组间比较,血清FT3、FT4、sTSH、TDW和131I剂量均无显著性差异(P＞0.05).治疗后两组血清IL-18明显下降,甲减组血清sTSH升高明显(P＜0.01),而缓解组TDW明显减少(P＜0.05).两组患者治疗后的TRAb水平仍然较高(P＜0.05).IL-18与FT3、FT4和TDW呈正相关(r=0.372,P＜0.01;r=0.312,P(0.01;r=0.371,P＜0.01),与sTSH呈负相关(r=-0.224,P＜0.01).甲减组TPOAb升高的病例治疗前为4/13,治疗后为6/13;缓解组治疗前为10/28,治疗后为12/28.131I治疗后6～12个月内辐射对患者免疫系统的调控产生的直接影响较小,血IL-18含量变化如结合TRAb、TPOAb指标了解甲状腺Th1/Th2型免疫应答状态,对疗效观察和预后判断有阶段性指导作用.     

男性Graves’病患者血清性激素与Th1/Th2细胞因子相关性研究

目的：观察男性Graves’病（GD）患者治疗前后血清性激素及干扰素γ（IFN-γ）、白介素-4（IL-4）的动态变化,探讨男性GD患者血清性激素与Th1/Th2细胞因子的相关性。方法：选取初发未治的男性Graves’病患者42例为治疗组,经抗甲状腺药物治疗12周后均临床缓解。治疗前后分别应用放免法（RIA）检测血清雌二醇（E2）、睾酮（T）、黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）水平,应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清干扰素γ（IFN-γ）、白介素-4（IL-4）水平。健康男性体检合格者40例作为正常对照组。结果：男性GD患者治疗前血清E2、T、LH、FSH水平均较正常对照组明显升高（P〈0.05）,治疗后均接近正常对照组。治疗前血清IL-4、IFN-γ水平较正常对照组均升高（P〈0.05）,治疗后IL-4水平下降,接近正常对照组,而IFN-γ水平仍较高。经多元逐步回归分析,血清E2水平是影响IL-4水平的独立因素,呈正相关;血清T水平是影响IFN-γ水平的独立因素,呈正相关;IL-4与IFN-γ水平是相互的独立因素,呈负相关。结论：初发未治的男性GD患者存在性激素水平的变化及Th1/Th2细胞因子失衡,性激素在男性Graves’病患者Th1/Th2平衡方面起着一定的作用。