丹参及复方丹参注射液的体抗肿瘤作用

目的：观察单味丹参及复方帱参液的体外抑瘤作用，明确其是否存在直接细胞毒作用，并比较两者的抑瘤活性。方法：以ＭＴＴ法检测各种不同浓度丹参及复方丹参对Ｋ５６２及ＢＣａＰ－３７细胞的体外抑瘤率，并推测其ＩＣ５０值。结果：１０μｌ／ｍｌ的丹参、５０μｌ／ｍｌ的复方丹参３１．０μｌ／ｍｌ，对ＢＣａＰ－３７细胞的ＩＣ５０分别为丹参６．９６μｌ／ｍｌ、复方丹参３４．７８μｌ／ｍｌ。结论：单味丹参及复方丹参注射液     

IL-12联合小剂量IL-2对人外周血单个核细胞增殖及杀瘤活性的影响

目的：探讨ＩＬ－１２与ＩＬ－２ 的最佳剂量配伍,以充分发挥两种细胞因子的抗肿瘤作用,从而减少使用剂量和降低毒副作用。方法：静止的或用小剂量ＩＬ－２ 激活的人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）,以含不同浓度ＩＬ－１２ 和（或）ＩＬ－２ 的培养液培养后,分别用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和ＬＤＨ释放法测定ＰＢＭＣ的增殖作用及杀瘤活性。结果：①５～５０ ＩＵ／ｍ ｌＩＬ－１２ 单独不能诱导ＰＢＭＣ增殖,但能与小剂量（１０ ＩＵ／ｍ ｌ）ＩＬ－２ 协同而促进ＰＢＭＣ的增殖,且能延长增殖作用时间。②经ＩＬ－１２ 作用后,ＰＢＭＣ对ＮＫ敏感的Ｋ５６２细胞及ＮＫ抵抗的Ｒａｊｉ细胞均产生明显的杀伤活性。激活的ＰＢＭＣ经ＩＬ－１２ 和ＩＬ－２ 各１０ ＩＵ／ｍ ｌ联合培养后,对Ｋ５６２ 细胞和Ｒａｊｉ细胞的杀伤率达最大值,分别为７２．０±４．２％ 和６５．４±５．８％ ,显示出明显的协同作用。结论：人ＰＢＭＣ在体外经１０ ＩＵ／ｍ ｌＩＬ－２激活后,再加入ＩＬ－１２ 和ＩＬ－２各１０ ＩＵ／ｍ ｌ共同刺激,能使ＰＢＭＣ发挥强而持久的增殖效应及最大杀瘤活性     

肿瘤患者外周血单个核细胞诱导的CD3AK细胞体外抗肿瘤作用的初 …

采用抗ＣＤ３单抗体（１０μｇ／ｍ）联合ＩＬ－２（５０Ｕ／ｍｌ）诱导肿瘤病人外周血单个核细胞成为ＣＤ３ＡＫ细胞，并观察其体外增殖及抗肿瘤作用，结果显示：肿瘤病人的ＮＫ活性显著低于正常人，但其ＣＤ３ＡＫ细胞体外杀伤Ｋ５６２细胞的细胞毒活性与正常人比较无明显差异（Ｐ〉０．０５）。本研究初步表明：由肿瘤病人外周血单个核细胞诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞，可作为过继免疫治疗的效应细胞进行自身淋巴细胞治疗。     

中药制剂Fw13-te41逆转裸鼠移植瘤多药耐药性的初步研究

为进一步研究体外细胞实验筛选出的多药耐药逆转剂在体内的药效学,将其中Ｆｗ １３ 的ｔｅ４１ 用于人白血病Ｋ５６２／ＡＤＲ裸鼠移植瘤逆转试验。结果显示：对ＢＡＬＢ／ｃ－ｎｕ／ｎｕ 荷瘤鼠按每日、每只腹腔注射ＦＷ１３－ｔｅ４１０．２ｍ ｌ（相当于原生药０．２ｇ）,连续注射１８ 日后,可将硫酸长春新碱（ＶＣＲ）对Ｋ５６２ ／ＡＤＲ的抑瘤率从１９．７９％ 提高到８６．５９％ ,与ＶＣＲ组比较有显著性差异（Ｐ＜ ０．０５）。提示该中药制剂对恶性肿瘤多药耐药具有较强的逆转作用,可望成为安全有效的化疗致敏剂。     

PB230体外抗肿瘤活性的研究

目的：研究ＰＢ２３０对人胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）、人红白血病细胞（Ｋ５６２）和人乳腺癌细胞（ＭＣＦ－７）的生物抑制作用,探讨其抗癌作用机制,方法：采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＰＢ２３０对体外培养的ＭＧＣ８０－３细胞系、Ｋ５６２细胞系和ＭＣＦ－７细胞系的生长抑制作用,结果：ＰＢ２３０明显抑制ＭＧＣ８０－３、Ｋ５６２和ＭＣＦ－３三种细胞系的生长,其ＩＣ５０值分别为２&;#215;１０＾－６－１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ之间,２&;#215;１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ和１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ,结论：ＰＢ２３０能直接抑制肿瘤细胞生长。     

肿瘤患者外周血单个核细胞诱导的CD_3AK细胞体外抗肿瘤作用的初步观察

采用抗ＣＤ３单抗（１０μｇ／ｍｌ）联合ＩＬ－２（５０Ｕ／ｍｌ）诱导肿瘤病人外周血单个核细胞成为ＣＤ３ＡＫ细胞，并观察其体外增殖及抗肿瘤作用，结果显示：肿瘤病人的ＮＫ活性显著低于正常人，但其ＣＤ３ＡＫ细胞体外杀伤Ｋ５６２细胞的细胞毒活性与正常人比较无明显差异（Ｐ＞００５）。本研究初步表明：由肿瘤病人外周血单个核细胞诱导的ＣＤ３ＡＫ细胞，可作为过继免疫治疗的效应细胞进行自身淋巴细胞治疗     

复方苦参增加 ＮＫ 细胞对白血病干细胞杀伤作用的实验研究

目的：研究复方苦参对自然杀伤细胞（ＮＫ 细胞）杀伤白血病干细胞（ＬＳＣ）的影响及机制。方法：检 测 ＮＫ 细胞对 Ｋ ５６２ 细胞、复方苦参干预前后 ＬＳＣ 的杀伤作用,流式细胞术检测细胞凋亡情况。检测 Ｋ ５６２ 细 胞、复方苦参干预前后 ＬＳＣ 细胞表面的 ＮＫＧ２Ｄ 配体人巨细胞病毒 ＵＬ １６ 蛋白的结合蛋白（ＵＬＢＰ１）、ＭＨＣ－Ⅰ类 链相关分析 Ａ 或 Ｂ（ＭＩＣＡ／ Ｂ）水平。结果：复方苦参提高 ＬＳＣ 对 ＮＫ 细胞杀伤作用的敏感性。复方苦参增加 ＮＫ 细胞对 ＬＳＣ 诱导凋亡作用。复方苦参可上调 ＬＳＣ 表面的 ＮＫＧ２Ｄ 配体 ＵＬＢＰ１、ＭＩＣＡ／ Ｂ 水平。结论：复方苦参增 强 ＬＳＣ 对 ＮＫ 细胞杀伤的敏感性和凋亡诱导作用。     

反义BCR/ABL寡核苷酸体外抑制K562细胞的研究

目的：探讨反义ＢＣＲ和ＡＢＬ融合基因（ＢＣＲ／ＡＢＬ融合基因）寡核苷酸体外抑制Ｋ５６２细胞的作用及机制。方法：采用Ｋ５６２细胞培养,观察反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸体外对Ｋ５６２细胞数、台盼蓝拒染率及克隆形成等的影响。结果：经反义ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ３ａ２（ＡＳｂ３ａ２）处理后培养８ｄ的Ｋ５６２克隆抑制率达６０６９％,液体培养中细胞数从２４ｈ开始较对照组减少,细胞存活率从８ｈ开始即较对照组明显下降,ＢＣＲ／ＡＢＬ寡核苷酸ｂ２ａ２（ＡＳｂ２ａ２）及无义寡核苷酸对Ｋ５６２细胞数和存活率无明显影响;３种寡核苷酸对ＨＬ６０细胞数和存活率也无影响。结论：ＡＳｂ３ａ２对Ｋ５６２细胞有序列特异性的抑制作用。ＡＳｂ３ａ２的这种抑制作用可能在于它诱导Ｋ５６２细胞的凋亡。     

洋地黄毒甙体外抗人癌细胞株的作用

目的：探讨洋地黄毒甙体外抗肿瘤作用。方法：以台盼蓝排染法、中性红活染法和克隆形成实验测定洋地黄毒甙（ＤＴ）对多种人癌细胞株的细胞毒作用。结果：０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ在体外能显著杀伤ＨＬ－６０．Ｋ５６２．ＳＭＭＣ－７７２１，ＳＧＣ－７９０１细胞，并呈剂量依赖性，药物作用２４ｈ．ＩＣ５０分别是０．１３２．０．１８２．０．２６５．０．４８９μｇ／ｍｌ。对正常成纤维细胞株ＨＬＦ的ＩＣ（５０）为４．２８８μｇ／ｍｌ．明显高于癌细胞，对癌细胞具有选择毒性作用。克隆形成实验中，０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ处理１２ｈ，对ＨＬ－６０和ＳＧＣ－７９０１细胞集落形成有明显的抑制作用，ＩＣ５０分别是０．０５６．０．ｌ１９μｇ／ｍｌ。结论：应用洋地黄毒甙及其他Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶抑制剂防治肿瘤是一个值得探讨新方向。     

镉对人体外周血淋巴细胞内游离Ca^2＋及钙调素影响的研究

本文采用体外实验方法，观察ＣｄＣｌ２对培养２４ｈ的人外周血淋巴细胞内游离Ｃａ＾２浓度及ＣａＭ活性的影响。结果表明：细胞内游离Ｃａ＾２浓度与镉浓度及染毒时间存在明显的剂量及时相相关，在≤５０μｍｏｌ／ＬＣｄＣｌ２作用下，ＣａＭ活性随染毒剂量增加而升高，５０μｍｏｌ／ＬｄＣｌ２使ＣａＭ活性增至０μｍｏｌ／Ｌ组的１９０．２２％，但１００μｍｏｌ／ＬＣａＣｌ则对ＣａＭ无激活作用，在一定镉浓度（０－５０μｍ     

肝细胞生长因子／扩散因子、转化生长因子-β在结核性胸腔积液中的表达

目的：探讨肝细胞生长因子／扩散因子（ Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ）、转化生长因子β（ Ｔ Ｇ Ｆβ）在结核性胸腔积液（ Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ）中的表达,寻找诊断结核性胸膜炎的特异性标记。方法：用 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 药盒和生物法测定３２ 例胸腔积液中 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ和 Ｔ Ｇ Ｆβ水平,并对 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ组中１０ 例病人同时作血清 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ、 Ｔ Ｇ Ｆβ检测。结果： Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中为７．５±７．３ ｎｇ／ｍ ｌ,高于非 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ的０．９８±０．８８ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．０５）。１０ 例 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ者的胸水和血清 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ含量分别是１０．９±６．６ ｎｇ／ｍ ｌ和１．９±１．７ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．００２）。 Ｔ Ｇ Ｆβ在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中含量为２７．３±１１．１ ｎｇ／ｍ ｌ,高于其在血清中的含量３．９±３．３ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＜ ０．００１）,也高于对照血清的１．８７±１．０５ ｎｇ／ｍ ｌ（ Ｐ＞ ０．０５）。结论：在 Ｔ Ｂ Ｐ Ｅ中存在高水平 Ｈ Ｇ Ｆ／ Ｓ Ｆ、 Ｔ Ｇ Ｆβ。这可能与结核性肉芽肿形成有关,可能在促进胸膜纤维化及组织修复中有重要作用     

雌性老年大鼠部分脑区NGF、BDNF、Trk A和Trk B表达的变化

目的:观察雌性SD大鼠部分脑区神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)及其高亲和力酪氨酸激酶受体TrK A、TrK B表达的增龄性变化。方法:应用免疫组织化学和Westernblot技术,观察NGF、Trk A和BDNF、Trk B在22月龄(老年组)和3月龄(青年组)雌性大鼠脑内的表达。结果:免疫组织化学研究显示,与青年组相比,雌性老年大鼠脑NGF阳性星形胶质细胞面积、红核NGF阳性神经元数目,视上核BDNF阳性神经元面积、红核BDNF阳性神经元数目,红核和丘脑Trk A、Trk B阳性神经元数目均显著减少。Western blot研究显示,与青年组相比,雌性老年大鼠脑内NGF和BDNF的相对表达量减少。结论:NGF、Trk A和BDNF、Trk B在雌性老年大鼠部分脑区表达降低,提示这些脑区NGF、Trk A和BDNF、Trk B的减少与衰老有关。     

胃泌素及丙谷胺对胃癌细胞株MKN45增殖及EGF表达的影响

目的:观察五肽胃泌素(PG)及其受体拮抗剂丙谷胺(PGL)对人胃癌细胞株MKN45增殖及表皮生长因子(EGF)表达的影响。方法:MTT法检测人胃癌细胞株MKN45增殖;放射免疫法(RIA)测定表皮生长因子(EGF)的表达。结果:PG(10-6mol/L)明显促进人胃癌细胞株MKN45增殖,24、48h的促细胞增殖率分别为11.24%、17.63%,丙谷胺(2.0～10.0mmol/L)能阻断这一促增殖作用,并可剂量依赖性地抑制胃癌细胞的生长,且随作用时间延长而增强。同时,在胃癌细胞株MKN45培养液中可检测到EGF,且随培养时间延长EGF含量增加;PG(10-6mol/L)可显著增加MKN45培养液中EGF的含量,丙谷胺(6.0mmol/L)不仅明显阻断PG诱导的EGF增加,并且能够减少胃癌细胞MKN45培养液EGF的含量。结论:五肽胃泌素能促进胃癌细胞株MKN45增殖及EGF表达,而其受体拮抗剂丙谷胺不仅能阻断这一的促进作用,并可抑制胃癌细胞株MKN45增殖及EGF的表达。提示PG的促胃癌细胞增殖作用可能与促进EGF表达有关。     

高糖环境中肾小管上皮细胞c-met的表达及意义

目的研究高糖作用下人近端肾小管上皮细胞c-met的表达，探讨HGF／c-met系统在糖尿病肾病中的作用。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞。细胞分别培养于不同的条件培养基中，采用MTT方法检测细胞增殖，RT-PCR方法分析c-met mRNA水平。结果在不同的条件培养基中人近端肾小管上皮细胞在12h和24h细胞增殖无明显差异（P〉0、05）。而在96h细胞增殖出现明显的变化，在HGF组细胞增殖旺盛（P〈0、05）。此外，12h在不同的条件培养基中c-met mRNA表达无差别（P〉0．05），而在24h和96hHGF组c-met mRNA出现持续高表达（P〈0．01）。结论外源性加入HGF能抑制高糖诱导的细胞凋亡，促进高糖环境中的近端肾小管上皮细胞的增殖，并能诱导其受体c-met表达。说明HGF／c-met系统局部上调在糖尿病肾脏损伤修复过程中有重要作用。     

人脑胶质瘤中hTERT、PDGF的表达与临床意义

目的:探讨hTERT和PDGF在胶质瘤恶性转变中表达的变化与临床意义。方法:收集65例手术切除的胶质瘤标本,用免疫组化SP法检测PDGF表达、用原位杂交技术检测hTERT表达,5例正常脑组织作对照。结果:65例胶质瘤中有34例表达hTERT,39例表达PDGF,阳性率分别为52.3%、60.0%,随着胶质瘤级别的升高,hTERT、PDGF表达增强(P<0.05)。正常脑组织均不表达hTERT、PDGF。hTERT、PDGF蛋白的表达在胶质瘤与正常脑组织中的表达有显著性差异(P<0.05)。hTERT主要表达于肿瘤细胞核,PDGF主要表达于肿瘤细胞浆,两者呈正相关(P<0.01)。结论:hTERT、PDGF的表达与胶质瘤的分级有关,hTERT与PDGF表达有相关性,hTERT、PDGF联合检测可更准确判断肿瘤的恶性程度。     

慢性肾炎中医证型与尿表皮生长因子的关系探讨

为了探讨慢性肾炎中医证型与尿表皮生长因子（ＥＧＦ）的关系,采用放射免疫法测定尿 ＥＧＦ含量,结果显示慢性肾炎各中医证型中尿ＥＧＦ含量差异显著（Ｐ〈０．０１）,肺肾气虚组〉气阴两虚组〉肝肾阴虚组〉脾肾阳虚组〉正常人组。说明尿ＥＧＦ可以做为慢性肾炎中医辨证分型的参考指标。     

肝细胞生长因子在子宫内膜异位症的表达及其与血管内皮生长因子的关系

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)在子宫内膜异位症(内异症)发生发展过程中的作用及HGF与血管内皮生长因子(VEGF)的关系。方法应用免疫组织化学技术检测33例异位子宫内膜组织和10例正常子宫内膜组织中的HGF和VEGF的表达及微血管密度(MVD)。结果异位内膜HGF表达的平均光度值为0.264±0.026,正常内膜HGF表达为0.219±0.017,两者比较有显著性差异(P<0.05);异位内膜中HGF的表达与VEGF表达呈正相关(r=0.408,P<0.05)。结论HGF在异位内膜的血管生成中具有重要作用;HGF和VEGF在子宫内膜异位症的发生发展中发挥协同作用。     

实验性肝纤维化大鼠TGF-β_1、Smad3、Smad7、CTGF的表达及其意义

目的 :研究四氯化碳 ( CCl4 )诱导肝纤维化大鼠肝脏转化生长因子β1( TGF-β1)、Smad3、Smad7和结缔组织生长因子 ( CTGF)的表达及定位。方法 :将 2 4只大鼠随机分为正常对照组与模型组 ,模型组大鼠予以 40 %四氯化碳皮下注射 8周后处死。免疫组化技术检测 TGF-β1、Smad3、Smad7和 CTGF在肝脏的表达及细胞内的定位 ,放射免疫方法检测透明质酸 ,并进行肝组织病理检查。结果 :与正常组大鼠比较 ,模型组大鼠肝内 TGF-β1、Smad3、CTGF表达增加 ,而 Smad7的表达降低。 TGF-β1、Smad3及 CTGF的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7主要在肝细胞浆表达 ;模型组大鼠血清 HA及肝组织Van Giseon染色、HE染色和电镜检查均支持肝纤维化改变。结论 :肝内 TGF- β1、Smad3和CTGF表达增强、Smad7表达减弱 ,提示 TGF- β1轴、CTGF参与了肝纤维的发生发展 ,可能作为防治肝纤维化发生发展的新途径之一     

瘢痕组织中转化生长因子β的免疫组化定位

目的：比较转化生长因子（ＴＧＦ）β１、β２、β３在瘢痕增生病理过程中的地位以及了解它们在瘢痕中的组织学定位。方法：利用免疫组化技术，分别比较３型ＴＧＦβ在增生期和成熟期瘢痕组织中的表达。结果：ＴＧＦβ１在增生期瘢痕大量的成纤维细胞、慢性炎症细胞、血管内皮细胞中持续高水平表达，远远高于在成熟期瘢痕中的表达水平；另外，ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３在瘢痕组织中的表达水平远远不如ＴＧＦβ１。结论：增生期瘢痕组织中大量的成纤维细胞、慢性炎症细胞、血管内皮细胞持续高水平表达的ＴＧＦβ１可能是引起瘢痕持续增生的重要因素；ＴＧＦβ２、ＴＧＦβ３的作用则远逊于ＴＧＦβ     

重组肝细胞生长因子质粒的构建及其在成骨细胞中的表达

目的 构建人肝细胞生长因子(hHGF)真核表达质粒,探讨重组质粒对体外培养胎兔成骨细胞增殖分化的影响,为转基因治疗骨科疾病提供实验基础.方法 RT-PCR扩增人肝脏中hHGF全长cDNA片段,克隆入pcDNA3.1( )真核表达载体中,用脂质体法将pcDNA3.1( )-hHGF质粒转染成骨细胞,通过G418筛选获得阳性克隆,用免疫荧光染色检测hHGF基因在成骨细胞内的表达;MTT法和FCM检测pcDNA3.1( )-hHGF转染后对细胞增殖和细胞周期的影响;采用RT-PCR和ELISA方法检测hHGF在成骨细胞中的表达.NPP法检测碱性磷酸酶合成情况.结果 成功构建hHGF真核表达质粒,免疫组化和RT-PCR检测显示转染成骨细胞后细胞内hHGF mRNA呈现高水平表达;MTT法和FCM检测显示重组质粒转染后能促进成骨细胞的增殖,S期细胞比例增多;ELISA法检测到hHGF在细胞中有分泌性表达.转染重组质粒的成骨细胞合成碱性磷酸酶能力显著提高.结论 成骨细胞经基因转染后可以表达hHGF,外源性hHGF基因能够刺激成骨细胞增殖、分化及成骨活性.