雷公藤抑制致敏小鼠T淋巴细胞活化及其白细胞介素-5mRNA表达

通过对致敏小鼠活化Ｔ淋巴细胞 (ＣＤ2 5)与白细胞介素(ＩＬ) 5ｍＲＮＡ表达相关性的观察 ,探讨雷公藤内酯醇对Ｔ淋巴细胞活化和ＩＬ 5ｍＲＮＡ表达的影响 ,同时就雷公藤内酯醇的作用机制与氟美松进行比较。一、材料与方法1.动物模型建立及分组 :4～ 6周健康ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 (第三军医大学动物所提供 ) 2 4只 ,雌雄不限 ,体重 16～ 2 0ｇ。随机分为 4组 ,每组 6只。 (1)Ａ组 :致敏组 ,以卵蛋白 (ＯＶＡ)致敏和激发[1] 建立致敏模型 ;(2 )Ｂ组 :雷公藤内酯醇组 ,每次激发前 1ｈ腹腔注射雷公藤内酯醇 40 μｇ/ｋｇ体重 ;(3)Ｃ组 :氟美松组 ,…     

致敏大鼠肺组织白细胞介素10mRNA表达及一氧化氮对其？…

近年来抗炎细胞因子白细胞介素 10 (ＩＬ 10 )在哮喘中的作用已引起关注 ,我们的实验拟探讨致敏大鼠肺组织ＩＬ 10基因水平表达的变化及与内源性一氧化氮 (ＮＯ)的关系 ,提供ＮＯ对哮喘炎症调控作用的实验依据。材料与方法　 (1)动物模型建立及分组 :雄性ＳＤ大鼠2 0只 ,随机分为 4组 :Ａ组 (6只 )为正常对照组 ;Ｂ组 (6只 )为阳性对照组 ,给予卵蛋白 (ＯＶＡ)致敏和刺激 ,但不用硝基左旋精氨酸甲酯 (Ｌ ＮＡＭＥ)或左旋精氨酸 (Ｌ ａｒｇ)腹腔注射 ,以生理盐水代之 ;Ｌ ａｒｇ组 (Ｃ组 )、Ｌ ＮＡＭＥ(Ｄ组 )各 4只 ,每天于ＯＶＡ雾化吸入…     

黄芪对豚鼠哮喘模型血红素氧合酶-1表达的作用研究

本研究利用豚鼠哮喘模型观察血红素氧合酶 - 1(ＨＯ -1)的表达特点及黄芪对ＨＯ - 1表达的影响。材料和方法　雄性豚鼠 30只 ,体重 2 0 0～ 35 0ｇ ,随机分为 5组 ,每组 6只。腹腔内注射 10 %卵清蛋白 (ＯＶＡ)溶液 1ｍｌ致敏 ,2周后喷入 1%ＯＶＡ溶液激发 30ｓ,对照组则喷入生理盐水 30ｓ。Ａ组 (正常对照组 ) :喷雾生理盐水 ,每日 1次 ,共 2周 ;Ｂ组 (哮喘发作 1周组 ) :每日激发哮喘 1次 ,共 1周 ;Ｃ组 (哮喘发作 2周组 ) :处理同Ｂ组 ,共 2周 ;Ｄ组 (黄芪治疗1周组 ) :每日激发哮喘 1次 ,每次于激发哮喘后 30ｍｉｎ腹腔注射黄芪注射液 5…     

小鼠哮喘模型中白细胞介素5等对嗜酸细胞凋亡的调控作用

先前我们已证实在小鼠哮喘模型中白细胞介素 5 (ＩＬ 5 )和ＩＬ 10分别上行和下行调节气道炎症 ,二者的动态平衡是决定嗜酸细胞 (ＥＯＳ)浸润与消散的重要因素[1] 。我们的研究进一步动态观察哮喘动物模型气道炎症全过程的变化 ,旨在探讨炎症促进因子ＩＬ 5和炎症抑制因子ＩＬ 10对ＥＯＳ凋亡的调节作用。对象与方法　哮喘模型制作 :10周龄ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 10只 ,雌雄不限 ,体重 (10± 2 )ｇ ,由华西医科大学动物中心提供。所有动物随机分配为对照组 (11只 )、致敏激发 (ＳＣ)组(77只 )。ＳＣ组小鼠腹腔注射 10 %卵白蛋白 (ＯＶＡ) 0 1ｍｌ…     

哮喘大鼠抗原激发后嗜酸细胞迁移的研究

我们应用大鼠哮喘模型研究在抗原激发后不同时刻外周血、气道、支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中嗜酸细胞 (ＥＯＳ)的变化 ,探讨ＥＯＳ在哮喘发病时的迁移过程及与气道反应性的关系 ,并观察糖皮质激素对此的影响。材料与方法　雄性ＳＤ大鼠 72只 (浙江大学医学院实验动物中心提供 ) ,体重 (117± 10 )ｇ ,随机分成 3组 :致敏组 (Ｓ组 ) :各组 2 4只大鼠。以生理盐水 1ｍｌ、鸡卵白蛋白 (ＯＶＡ ,美国Ｓｉｇｍａ公司 ) 1 0ｍｇ、氢氧化铝凝胶Ａｌ(ＯＨ) 3 10 0ｍｇ对大鼠进行皮下、腹腔注射致敏 ,2周后以 1%ＯＶＡ气雾激发 15ｍｉｎ ;地塞米松…     

血清心肌肌钙蛋白 T 对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤诊断价值的研究

采用柯萨奇Ｂ3 病毒 (ＣＶＢ3 )所致的病毒性心肌炎小鼠模型 ,观察血清心肌肌钙蛋白Ｔ (ｃＴｎＴ)水平的变化 ,并与肌酸激酶的同工酶ＭＢ (ＣＫ ＭＢ)作对照 ,以探讨其对心肌炎的诊断价值。1.材料与方法 :6～ 8周龄雄性纯种ＢＡＬＢ/Ｃ小鼠。ＣＶＢ3病毒 (Ｎａｎｃｙ株 ) ,在Ｈｅｌａ细胞上滴定其 5 0 %组织感染率(ＴｃＤ50 )为 10 9 5。实验组 (Ａ组 ) 15 0只 ,按处死时间第 5、7、10、14、2 1天预设 5组 ,每组 30只。于实验开始当日腹腔内注射含 10ＴｃＤ50 的ＣＶＢ3 的缓冲液 0 2ｍｌ。对照组 (Ｂ组 )共2 5只 ,于实验开始当日腹腔注射…     

白细胞介素10对小鼠哮喘模型气道炎症作用的研究

白细胞介素 (ＩＬ) 10是一种具有广泛免疫抑制活性的细胞因子 ,主要由Ｔｈ2细胞分泌。目前ＩＬ 10能否用于支气管哮喘治疗存在较多争议 ,我们的研究旨在探讨ＩＬ 10对呼吸道合胞病毒 (ＲＳＶ)诱导的小鼠哮喘模型气道炎症是否有抑制作用。材料与方法　雌性清洁级Ｂａｌｂ/ｃ小鼠 30只 ,体重 14～17ｇ(第一军医大学实验动物中心 ) ,分为三组 ,每组 10只小鼠。对照组 (Ａ组 ) :致敏和激发均用无病毒的Ｈｅｐ 2细胞株培养上清液。气道炎症组 (Ｂ组 ) :用灭活的ＲＳＶ病毒为抗原 ,致敏后激发 ;ＩＬ 10治疗组 (Ｃ组 ) :同Ｂ组予ＲＳＶ致敏后激发 ,…     

乙酰半胱氨酸对通气机所致肺损伤大鼠的防护作用

通过大潮气量通气造成大鼠通气机所致肺损伤 (ＶＩＬＩ)的动物模型 ,探讨乙酰半胱氨酸 (ＮＡＣ)对ＶＩＬＩ防护作用。材料与方法　健康雄性ＳＤ大鼠 30只 ,体重 30 0～ 350ｇ ,随机分为 3组 ,每组 1 0只。动物麻醉后行气管切开及气管内插管术 ,接动物用通气机机械通气 ,行颈动脉插管及股静脉插管术 ,氯化琥珀酰胆碱 (1ｍｇ/ｋｇ)静脉注射维持肌肉松驰。对照组 (Ａ组 ) :潮气量 (ＶＴ) =8ｍｌ/ｋｇ ,通气频率 (Ｒ)4 0次 /ｍｉｎ,气氧浓度 (ＦｉＯ2 ) 1 0。致伤组 (Ｂ组 ) :ＶＴ=40ｍｌ/ｋｇ ,Ｒ 2 0次 /ｍｉｎ ,ＮＡＣ防护组 (Ｃ组 ) :ＶＴ=…     

氧化苦参碱对小鼠急性肝损伤早期肝细胞凋亡的作用

观察氧化苦参碱 (ＯＭ )对脂多糖 (ＬＰＳ)诱导的Ｄ 氨基半乳糖 (Ｄ Ｇａ1Ｎ)增敏的小鼠急性肝损伤早期肝细胞凋亡的作用 ,并研究其可能的作用机制。腹腔注射 (ｉｐ)ＬＰＳ( 0 .5μｇ/ｋｇ) Ｄ Ｇａ1Ｎ( 90 0ｍｇ/ｋｇ)造成小鼠急性肝损伤 ,设正常组、模型组、ＯＭ预保护组( 50ｍｇ/ｋｇ ,ｉｐ ,2次 /ｄ× 3) ,注射Ｄ Ｇａ1Ｎ/ＬＰＳ 5ｈ后 ,比较 3组小鼠血清肿瘤坏死因子α(ＴＮＦα)、肝细胞凋亡的原位末端标记染色和电镜下的超微结构以及Ｆａｓ及其配体 (ＦａｓＬ)的免疫组织化学染色。结果显示 ,与模型组相比 ,ＯＭ预保护组小鼠血清Ｔ…     

冬虫夏草对慢性阻塞性肺疾病大鼠Th1/Th2类细胞因子平衡的干预作用

迄今为止对慢性阻塞性肺疾病 (ＣＯＰＤ)仍无有效治疗药物供临床使用。我们通过人工培育的冬虫夏草菌粉喂养ＣＯＰＤ大鼠 ,观察组织形态学、动物肺功能 (气道阻力和肺顺应性 )、支气管肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中白细胞介素 2 (ＩＬ 2 )、细胞介素ＩＬ 4含量等指标 ,探讨其防治ＣＯＰＤ的作用及机制。材料与方法　雄性ＳＤ大鼠 (清洁级 ) 3 7只 ,体重 (2 0 0±2 0 )ｇ ,随机分为 3组。 (1)模型组 13只 ,在自制吸烟染毒箱内被动吸烟 2 0支 (上海卷烟厂凤凰牌香烟 ,焦油量 17ｍｇ/支 ,烟气烟碱量 1 4ｍｇ/支 ) ,每天 3次 ,每次间隔 3ｈ ,共 60天 …     

糖尿病大鼠肾小球二酰基甘油-蛋白激酶C通路的变化

本研究旨在利用二酰基甘油 (ＤＡＧ)激酶法和ＡＴＰ底物磷酸化的方法 ,检测糖尿病大鼠肾小球ＤＡＧ水平和蛋白激酶Ｃ(ＰＫＣ)活性变化 ,以探讨肾小球ＤＡＧ ＰＫＣ通路的变化在肾小球血流动力学和肾脏形态学改变中所起的作用。一、材料与方法1.动物模型的制备 :体重 2 2 0～ 2 4 0ｇ雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 5 0只 (山东大学实验动物中心提供 ) ,分为正常对照组和糖尿病组。将链脲佐菌素 (Ｓｉｇｍａ公司 )溶于 0 .1ｍｏｌ/Ｌ枸橼酸钠缓冲液 (ｐＨ 4 .2 )中 ,腹腔内注射 (6 5ｍｇ/ｋｇ) ,2 4ｈ大鼠血糖开始升高 ,以 4 8ｈ后血糖≥ 16 .5ｍｍｏ…     

氯沙坦及苯那普利对糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡的影响

糖尿病肾脏组织中细胞凋亡增多 ,并伴随着凋亡相关基因的改变[1] 。本研究观察了血管紧张素转换酶抑制剂(ＡＣＥＩ)苯那普利和血管紧张素Ⅱ受体 1拮抗剂 (ＡＴ1Ｒａ )氯沙坦对糖尿病大鼠肾功能及肾脏细胞凋亡的影响 ,以观察这两种药物的作用是否为部分通过影响肾脏细胞凋亡而实现的。一、材料与方法1.动物模型及分组 :选取体重 12 0～ 140ｇＳＤ大鼠 96只(河北省实验动物中心提供 ) ,所有动物均用戊巴比妥钠 (4 0ｍｇ/ｋｇ)腹腔注射麻醉 ,行右肾切除术 ,2周后切口完全愈合 ,将大鼠随机分为Ａ组 :右肾切除对照组 ;Ｂ组 :糖尿病 (ＤＭ)组 ;Ｃ…     

阿托伐他汀对血管平滑肌细胞PKB信号转导途径的影响

1　材料与方法主要材料 :阿托伐他汀 (辉瑞制药有限公司 ) ,羟甲戊酸(Ｍｅｖａｌｏｎａｔｅ,ＭＶＡ ,Ｓｉｇｍａ公司 ) ,鼠抗兔ＰＫＢ ＡＫＴ多克隆抗体(ＳａｎｔＣｒｕｚ公司 ) ,蛋白Ａ -琼脂糖 (Ａｍｅｒｓｈａｍ公司 ) ,γ32 ＰＡＴＰ(北京亚辉公司 ) ,组蛋白Ｈ2Ｂ(ＨｉｓｔｏｎＨ2Ｂ ,ＢＭ公司 )。细胞培养与计数 :采用贴块法培养兔主动脉平滑肌细胞。取生长状态良好的第 5～ 6代血管平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ)制成细胞悬液 (4× 10 4 ｍｌ) ,接种于 2 4孔细胞培养板中 ,每孔0 .5ｍｌ,孵育 2 4ｈ ,换无血清培养液继续培养 2 4ｈ后 ,加 10 %…     

雌二醇对大鼠血管内皮素1和平滑肌细胞增殖的影响(摘要)

1　材料与方法8周龄雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为双侧卵巢切除组(ＯＶＸ)、卵巢切除 +苯甲酸雌二醇组 (ＯＶＸ +Ｅ2 )和假手术组(Ｓｈａｍ) ,每组 8只 ,均手术一周后开始用药。ＯＶＸ +Ｅ2 组按 1μｇ/ｇ体重肌注苯甲酸雌二醇 ,每 3天 1次 ,另两组肌注等量玉米油。 2周后处死动物 ,取动脉血和胸主动脉中膜 ,采用煮沸法获取组织上清液 ,血浆和组织ＥＴ - 1测量采用放射免疫法。胸主动脉中膜切成 2～ 3ｍｍ大小的组织块 ,放入无酚红的ＤＭＥＭ中培养 2 4ｈ ,再在含有3Ｈ -ＴｄＲ的同样培养液中培养 48ｈ ,用ＤＭＥＭ冲洗 3次 ,再用ＰＢＳ冲洗…     

四种国产膜肺的临床应用

我院自1997年至1999年9月临床应用国产膜肺四种(西京Ⅰ型膜肺,上海ＦＤＭＯ膜肺,西安ＤＤＭＯ膜肺和康明ＫＭＹ60膜肺)。现将这四种膜肺的使用情况报告如下。临床资料　见表1。　表1　四种膜肺体外循环临床资料西京Ⅰ上海ＦＤＭＯ西安ＤＤＭＯ康明ＫＭＹ60例数123813341男性49371620女性74441721年龄(岁)8～692～6512～5913～65体重(ｋｇ)28～829～8035～83335～80ＡＳＤ121395ＶＳＤ163547ＭＶＲ4411811ＡＶＲ7236ＤＶＲ18366ＣＡＢＧ9213Ｆ4351其他141013　　四种国产膜肺最大血流量达5Ｌ/ｍｉｎ,上海10型膜肺最大血流量可达2.5Ｌ/ｍｉｎ…     

细胞间黏附分子-1在抗原引起气道炎症和高反应性中的应用

我们以前的研究表明 ,过敏性支气管哮喘患者血清可溶性细胞间黏附分子 1(ＩＣＡＭ 1)水平明显增高 ,并与哮喘病情密切相关[1] 。在哮喘发病机制中发挥重要作用的白细胞介素 (ＩＬ) 5 ,经雾化吸入后可刺激气道局部产生大量的可溶性ＩＣＡＭ 1[2 ] 。本研究进一步探讨抗ＩＣＡＭ 1单克隆抗体对抗原引起的气道炎症和气道高反应性的影响。一、材料与方法1.48只 6周龄的雌性ＢＡＬＢ/ｃ小鼠随机分为 4组 ,每组12只。Ａ组为阳性组对照组 ,参照我们以前报道的方法[3 ] 用鸡卵清白蛋白 (ＯＶＡ)致敏和刺激小鼠 ,诱发气道嗜酸粒细胞(Ｅｏｓ)性炎症…     

自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺过氧化物酶抗体测定的临床意义

我们对 176例自身免疫性甲状腺疾病 (ＡＩＴＤ)、5例亚急性甲状腺炎和 5 0例正常人做甲状腺过氧化物酶抗体 (ＴＰＯＡＢ)和甲状腺微粒体抗体 (ＴＭＡＢ)测定 ,并将二者进行比较。对象与方法1.对象 :ＡＩＴＤ患者 176例 ,男性 3 4例 ,女性 14 2例 ,年龄11～ 74岁 ,平均年龄 44 .5岁。 176例ＡＩＴＤ患者分为下列 4组 :(1)初诊Ｇｒａｖｅ’ｓ病组 (Ａ组 ) :3 9例 ,均未经抗甲状腺药物(ＡＴＤ)治疗 ,有高代谢临床表现 ,ＦＴ3 、ＦＴ4增高 ,ｓＴＳＨ减低 ,ＴＳＨ受体抗体 (ＴＲＡＢ)阳性。 (2 )Ｇｒａｖｅ’ｓ病ＡＴＤ治疗后甲亢已控制组 (Ｂ组 …     

致敏大鼠肺内细胞增殖与凋亡的研究

为探讨支气管哮喘时气道重塑的特点及细胞增殖与凋亡机制对气道重塑的调节 ,我们检测了卵蛋白 (ＯＶＡ)致敏不同时间大鼠气道粘膜下细胞增殖及凋亡指数的变化、增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)表达的变化以及气道基底膜Ⅲ型胶原表达的变化 ,并对与细胞增殖、凋亡密切相关的Ｆａｓ/ＦａｓＬ抗原表达进行研究。材料与方法　雄性ＳＤ大鼠 2 4只 ,随机分为 4组 ,每组各 6只。对照 1周组和对照 3周组 :以生理盐水代替抗原进行注射和雾化吸入 ;致敏 1周组和致敏 3周组 :参照文献 [1]方法给予ＯＶＡ致敏和激发。雾化后分别于第 7、2 1ｄ经0 3%戊巴比妥…     

N-单甲基左旋精氨酸对急性肺损伤兔血清白细胞介素8的影响

白细胞介素 8(ＩＬ 8)是急性肺损伤 (ＡＬＩ)发病中重要的炎性介质 ,一氧化氮 (ＮＯ)对脓毒性ＩＬ 8释放具有调节作用 ,但还有争议。我们通过兔内毒素 (ＬＰＳ)ＡＬＩ模型观察Ｎ 单甲基左旋精氨酸 (Ｌ ＮＭＭＡ)对ＡＬＩ兔血清及支气管肺泡灌洗液(ＢＡＬＦ)中ＩＬ 8含量和肺组织病理改变的影响 ,探讨Ｌ ＮＭＭＡ对ＡＬＩ及ＮＯ对ＩＬ 8产生和释放的作用。材料与方法　健康新西兰大白兔 2 4只 ,雌雄不拘 ,体重1 5～ 2 5ｋｇ ,随机分为 3组 ,每组 8只。 (1)对照组 (Ｃ组 ) ,静注生理盐水 15ｍｌ;(2 )ＬＰＳ致伤组 (ＬＰＳ组 ) ,静注大肠杆菌…     

白细胞介素1诱导哮喘豚鼠细胞粘附分子的研究

ＣＤ11ａ分子即淋巴细胞功能相关抗原 1(ＬＦＡ 1) ,系 β2 整合素的主要成员之一 ,可介导广泛粘附依赖性反应。抗ＬＦＡ 1单抗可抑制Ｔ细胞粘附的各种免疫反应。我们以基因重组白细胞介素 1(ｒＩＬ 1)对哮喘豚鼠腹腔注射 ,观察其对ＣＤ11ａ分子表达的影响 ,探讨ＩＬ 1及细胞粘附分子 (ＣＡＭｓ)在哮喘发病中的作用。材料与方法　卵蛋白 (ＯＶＡ)与抗ＣＤ11ａ单克隆抗体为美国Ｓｉｇｍａ公司产品 ,ｒＩＬ 1由北京军事医学科学院邦定公司生产。 30 0～ 35 0ｇ豚鼠 2 8只 ,雌雄不拘 ,由山东医科大学动物实验中心提供。哮喘豚鼠模型的建立及分…