体液microRNA检测与疾病的诊断和预后

MicroRNAs(miRNAs)是一类单链非编码小RNA分子,普遍存在于人类的多种体液中,与肿瘤、自身免疫病等多种疾病的发生发展密切相关.MiRNA分子在体液中高度稳定存在,检测的灵敏度高.体液检测具有样本收集程序简便、一个样本可同时检测多项参数等优点.近年的研究表明血液、唾液、尿液、乳汁及脑脊液等体液miRNA检测可应用于妊娠等生理状态的判断以及口腔鳞状细胞癌、膀胱癌及阿尔海默茨病等疾病的诊断和预后判断.体液特异性miRNA检测的临床意义及应用前景已引起高度关注.     

DNA免疫引起小鼠产生抗丙型炎病毒核区体液应答的初步研究

采用ｐｃＤＮＡ３与ｐＭＴ两种基因表达裁体，构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区（Ｃ区）或全结构基因区（核心区、包膜区）的质粒。经纯化后直接对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠进行骨骼肌或尾部皮内注射，２－６ｗ后采血，用ＥＬＩＳＡ法检测小鼠抗核壳区的体液应答。结果表明：ＤＮＡ免疫可引起小鼠产生抗ＨＣＶ核壳区的体液应答，加强免疫２次后可使特异性抗体平均滴度达到１：８００以上。提示ＤＮＡ免疫可作为丙型肝炎病毒感染的潜在防     

一种普遍提高微量DNA拷贝数的方法

聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）工作中常受标本量的制约。如胚胎移植前基因诊断的单细胞、古标本、血斑、精斑等，标本来源有限，量又少，甚至单个模板ＤＮＡ分子，最多能满足１次ＰＣＲ扩增模板量的需求。类似标本的ＤＮＡ分析中，能够扩增多个靶序列片段进行ＤＮＡ多位点遗传分析，或同一靶序列重复扩增确保结果准确性，是科研和实践中很有价值的课题。针对微量模板ＤＮＡ靶片段量少，扩增产量低的缺陷，采用套式ＰＣＲ技术，可较大地提高扩增效率。但此技术过于敏感，假阳性率高，尤其仅只…     

体液中microRNA检测影响因素和方法比较

microRNA (miRNA)作用于靶基因mRNA的3'非编码区(3'UTR),在转录后水平调节基因的表达.已证实miRNA参与多种疾病的病理过程,因此可以作为一种新的生物标志物,用于疾病的预测、诊断并指导治疗.研究表明miRNA不仅存在于细胞中,体液中也广泛存在.体液作为无侵袭性的检验对象,在临床中开展更安全、更容易被患者接受,但是目前对体液中miRNA的检测方法尚无统一的标准,本文对miRNA检测影响因素和检测方法进行综述.     

无损伤微量体液电导传感器的研制

无损伤微量体液电导传感器，可接触人体，使电导仪能直接测量人体所分泌的微量液体的电导值。本文较全面地分析了影响传感器稳定性的各种因素，在通过对传感器选用不同的电极材料、探头形状、电极间距等所做的对比实验后，提出了具有较高稳定性的实用传感器模型。     

DNA免疫引起小鼠产生抗丙型肝炎病毒核壳区体液应答的初步研究

采用ｐｃＤＮＡ３与ｐＭＴ两种基因表达裁体，构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区（Ｃ区）或全结构基因区（核心区、包膜区）的质粒。经纯化后直接对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠进行骨骼肌或尾部皮内注射，２～６ｗ后采血，用ＥＬＩＳＡ法检测小鼠抗核壳区的体液应答。结果表明：ＤＮＡ免疫可引起小鼠产生抗ＨＣＶ核壳区的体液应答，加强免疫２次后可使特异性抗体平均滴度达到１８００以上。提示ＤＮＡ免疫可作为丙型肝炎病毒感染的潜在防御手段。     

DNA甲基化检测方法

DNA甲基化是真核细胞基因组重要修饰方式之一 ,参与基因的表达调控。目前 ,DNA甲基化检测的方法主要有 :酶切、限制性酶切 - PCR(restriction enzym e PCR)、甲基化特异性 PCR(methylation- specific PCR,MS PCR)、Southern印迹亚硫酸盐测序 (bisulfite DNA sequencing)、变性高效液相色谱 (denature high- perform ance liquid chrom atography,DHPL C)、甲基化敏感的单核苷酸引物延伸 (m ethylation- sensitive single nucleotide prim er extensio,MS- SNu PE)、PCR荧光变性曲线分析(PCR and fluorescence m elting curve analysis)、亚硫酸盐 PCR- SSCP(bisulfite- PCR- SSCP)、COBRA(combined bisulfite re-striction analysis)和 Methy L ight     

DNA加合物检测技术研究进展

DNA加合物是化学毒物经生物系统代谢活化后的亲电活性产物与DNA分子特异位点形成的共价结合物。它能够较为准确地反映人体接受的外来致癌物的剂量,并有助于人们阐明化学致突、致癌机理,具有重要的生物学意义。     

DNA甲基化检测方法

DNA甲基化是真核细胞基因组重要修饰方式之一，参与基因的表达调控。目前，DNA化检测的方法主要有：酶切、限制性酶切－KPCR（restriction enzyme PCR）、甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MS PCR）、Southern印迹亚硫酸盐测序（bisulifite DNA sequencing）、为性高效液相色谱（denature high-performance liquid chromatography,DHPLC）、甲基化敏感的单核苷酸引物延伸（methylation-sensitive single nucleotide primer extensio,MS-SNuPE）、PCR荧光为性曲线分析（PCR and fluorescence melting cureve analysis）、亚硫酸盐PCR－SSCP（bisulfite-PCR-SSCP）、COBRA（combined bisulfite restriction analysis）和MethLight。     

用聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA

我们采用聚合酶链反应(ＰＣＲ)技术检测乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒(ＨＢＶ)ＤＮＡ,并用酶标法检测ＨＢＶＭ,从乙型肝炎临床分型和实验室ＨＢＶＭ分组两个角度时行回顾性比较与分析。1　材料和方法1.1　病例选择　168例乙型肝炎病例均来自嘉兴市第二医院和协作单位住院病人,全部检测过ＨＢＶＤＮＡ和ＨＢＶＭ,男106例,女62例;年龄4～71岁,平均35.4岁。其中急性乙型肝炎26例,慢性乙型肝炎72例,重型肝炎9例,淤胆型肝炎24例,肝炎后肝硬化37例。诊断标准依据1995年北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的病毒性肝炎诊断标准。1.2　试剂和…     

染色体标本DNA再利用于基因检测

染色体标本ＤＮＡ再利用于基因检测余裕炉，张思仲遗传病诊断中，常遇到患者死亡、工作调动等原因而难以重复获取ＤＮＡ样本，导致复查或进一步深入研究较为困难。聚合酶链式反应（ＰＣＲ）及其多种衍生技术，特别是使用２对或多对嵌套式引物对ＤＮＡ样本进行连续２次或多...     

DNA辐射损伤检测技术的研究进展

DNA是一种含有遗传信息的重要生物分子。现代铀矿开采、放射医疗以及核电站等行业环境中存在电离辐射,人体防护不当会引起多种类型的DNA损伤,导致基因组拼接不稳定,引发与癌症和衰老等相关的多种生物学疾病。DNA辐射损伤检测技术的发展有助于研究人员对生物辐射损伤的程度进行评估,对核辐射患者进行疾病诊断和治疗。综述了国内外DN...     

多发性硬化病中3种疱疹病毒DNA的检测

多发性硬化症(ＭＳ)与病毒感染的关系颇受国内外学者重视。ＭＳ患者血中同时检测出Ⅰ型单纯疱疹病毒(ＨＳＶ1),ＥＢ病毒(ＥＢＶ)、人类巨细胞病毒(ＨＣＭＶ)ＤＮＡ,国内目前尚未见报道。我们采用ＰＣＲ方法检测ＭＳ患者血中3种疱疹病毒ＤＮＡ,以探讨ＭＳ的发病与病毒的关系。材料与方法病例与对照:患者19例,均经临床确诊为ＭＳ。男9例,女10例,年龄16～52岁。健康体检者30例为对照组,男15例,女15例,年龄17～55岁。材料:ＰＣＲ检测试剂盒,华美生物工程公司提供。扩增片段ＨＳＶ1453ｂｐ,ＥＢＶ269ｂｐ,ＨＣＭＶ300ｂｐ。碱基序列为:ＨＳＶ1:5…     

甲基化循环肿瘤DNA的检测及应用

癌症目前仍是医学界面临的第一大难题,其早期诊断、预后风险预测及治疗疗效评估有利于提高患者的生存率.目前临床上诊断癌症主要依靠肿瘤组织病理、内窥镜等检查,但都存在侵入性和异质性的问题.而在肿瘤细胞DNA中发生的分子变化如突变、易位和甲基化等,在循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)中也能...