视网膜母细胞瘤（Rb）分子遗传学研究进展

视网膜母细胞瘤(Rb)是一种常见于婴幼儿的眼部恶性肿瘤,可分为遗传型和非遗传型两类。遗传型特点是在早年发病,且为双侧多发性病灶,按常染色体显性遗传方式传递,外显率为90％;非遗传型发病较迟,通常为单侧性,但仍有约15％的单侧患者是遗传型。近年来,由于分子遗传学和基因工程研究的进步,在Rb基因结构,基因诊断,发病     

视网膜母细胞瘤Rb基因表达

利用抗Ｒｂ基因蛋白产物的多克隆抗体对１５例视网膜母细胞瘤Ｒｂ基因表达水平进行Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析，并采用激光密度分析仪对结果进行进一步精确的定量分析，表明１５例视网膜母细胞瘤中仅有两例的Ｒｂ基因蛋白表达量与正常视网膜相似，其余１３例几乎没有Ｒｂ基因的表达产物。提示在大多数视网膜母细胞瘤中，Ｒｂ基因的蛋白质产物缺乏。     

RB患者及家庭成员Rb基因突变和患病风险的基因诊断及遗传诊断

目的 建立Ｒｂ基因突变的基因诊断方法，正确估计视网膜母细胞瘤（ＲＢ）患者的预后及其家庭成员的患病风险，方法 综合利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交ＳＳＣＰ分析，直接ＤＮＡ序列测定等多种分子生物学技术染色体单体型分析及Ｒｂ基因点突变的直接检测。结果 ７９个有Ｒｂ基因突变的ＲＢ家系中２５例先证者双查出体细胞起源Ｒｂ基因突变，其余５４例存在生殖原Ｒｂ基因突变，其中３６例突变是新生物的，１５例突变由亲代遗传     

Rb基因在肝癌组织及细胞中存在缺失

利用ＰＣＲ技术对４２对肝癌及癌旁正肝细胞，４个肝癌细胞株的Ｒｂ基因的两个数量可变的重复序列（ＶＮＴＲ）区进行了分析，发现８例肝癌组织（１９．０２％）和２株肝癌细胞存在Ｒｂ基因的杂合性丧失（ＬＯＨ），表明Ｒｂ基因的缺失在肝癌的发生发展中起着一定，地ＰＣＲ－ＶＮＴＲ技术在快速检测Ｒｂ基因缺失上的价值进行了讨论。     

视网膜母细胞瘤发病机制的研究进展

视网膜母细胞瘤(RB)是婴幼儿常见的眼内恶性肿瘤,严重影响患儿的视力,甚至可危及生命。随着生物医学技术的发展,关于RB的研究已涉及病因学、分子生物学、表观遗传学、肿瘤干细胞及新药应用等各个方面。本文主要就国内外RB发病机制的研究进展进行系统综述,希望为RB的预防、诊断和治疗提供指导和参考意义。     

Rb基因功能的分子生物学研究进展

Ｒｂ基因功能的分子生物学研究进展邓应平综述罗成仁审校视网膜母细胞瘤（ｒｅｔｉｎｏｂｌａｓｔｏｍａ，ＲＢ是婴幼儿内眼恶性肿瘤中最常见的一种，其发病率在婴幼儿中为１：２８０００～１：１５０００之间［１］．约有３５％～４５％的患者发病与遗传有关，其中１０％...     

星形细胞瘤p16与Rb蛋白的表达及其相关性研究

目的检测ｐ１６与Ｒｂ蛋白在原发性星形细胞瘤中的存在状况，以探讨不同病理类型星形细胞瘤中ｐ１６与Ｒｂ蛋白表达及其相关性。方法使用抗ｐ１６及Ｒｂ蛋白抗体对１０２例星形细胞瘤手术标本进行免疫细胞化学检测。结果低度恶性星形细胞瘤（ＷＨＯⅠ～Ⅱ级）中ｐ１６及Ｒｂ蛋白均为阳性表达，在高度恶性星形细胞瘤（ＷＨＯⅢ～Ⅳ级）中其阳性表达分别为４８．１％（２６／５４）和５７．４％（３１／５４）。在３１例Ｒｂ蛋白阳性标本中，有２４例（７７．４％）显示ｐ１６蛋白表达缺失或低表达，而在２３例Ｒｂ蛋白阴性标本中却有１９例（８２．６％）显示ｐ１６蛋白阳性或强阳性。结论（１）ｐ１６及Ｒｂ蛋白参与星形细胞瘤细胞增殖过程并影响其细胞分化；（２）ｐ１６与Ｒｂ蛋白之间阳性表达的相互抑制，可能是高度恶性星形细胞瘤的标志之一。     

外源性Rb基因对U937细胞泡沫化过程中载脂蛋白B的影响

目的：研究Rb基因在U937细胞泡沫化过程中对细胞内载脂蛋白B含量的影响，初步探讨Rb基因在泡沫细胞形成过程中的作用。 方法： 采用氧化型低密度脂蛋白（Ox-LDL）孵育U937细胞，以及Ox-LDL孵育同时导入外源性Rb基因转染U937细胞，分别于处理0 h、12 h、24 h收集细胞，半定量RT-PCR与流式细胞术检测Rb mRNA和蛋白的表达，流式细胞术检测细胞内载脂蛋白B的含量。平行实验重复3次，进行统计学方差分析。 结果： 氧化型低密度脂蛋白孵育U937细胞泡沫化过程中，12 h、24 h Rb基因的表达显著低于对照组0 h（P<0.05）；细胞内载脂蛋白B含量则显著高于对照组0 h（P<0.05）。而U937细胞在导入外源性Rb基因后，12 h、24 h细胞内的Rb基因的表达显著高于对照组0 h（P<0.05）；细胞内载脂蛋白B含量则显著低于对照组0 h（P<0.05）。 结论： 外源性Rb基因的导入可以下调细胞内载脂蛋白B的含量，表明Rb基因可能与单核细胞源性泡沫细胞形成有关，可能是影响泡沫细胞形成的相关基因的敏感候选基因之一。     

RB患者及家庭成员Rb基因突变和患病风险的基因诊断及遗传咨询

目的建立Ｒｂ基因突变的基因诊断方法，正确估计视网膜母细胞瘤（ＲＢ）患者的预后及其家庭成员的患病风险。方法综合利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交、ＳＳＣＰ分析、直接ＤＮＡ序列测定等多种分子生物学技术作染色体单体型分析及Ｒｂ基因点突变的直接检测。结果７９个有Ｒｂ基因突变的ＲＢ家系中２５例先证者仅查出体细胞起源的Ｒｂ基因突变，其余５４例存在生殖细胞起源的Ｒｂ基因突变，其中３６例突变是新产生的，１５例突变由亲代遗传而来，此外，尚有３例Ｒｂ基因突变嵌合体。结论直接检测Ｒｂ基因点突变可不依赖于患者家庭成员ＲＢ发病情况的遗传背景资料诊断患者是否属于遗传型，正确估计患者的预后；并能在肿瘤发生前甚至产前检出Ｒｂ基因突变携带者，正确估计患病风险     

伴有低外显率的Rb基因点突变及其特征和意义

目的研究视网膜母细胞瘤患者（ＲＢ）低外显率的病因及其分子机理。方法收集ＲＢ先证者及其家庭成员的ＲＢ肿瘤与外周血，通过ＳＳＣＰ分析和ＤＮＡ序列测定检测Ｒｂ基因点突变，结合家系调查分析突变的特征及其与ＲＢ表型变化的关系。结果１５个低外显率的ＲＢ家系中部份家系存在特殊类型的Ｒｂ基因点突变，其中５个家系有Ａｒｇ６６１→Ｔｒｐ６６１突变，２个家系显示ｍＲＮＡ拼接位点异常，１个家系Ｒｂ基因启动子转录调控因子ＡＴＦ结合位点改变。结论ＲＢ低外显率并非完全随机发生的，与Ｒｂ基因突变的位置和性质有密切关系。     

Rb在细胞周期调控中的作用

Rb是细胞周期调控及细胞分化中重要的调控因子。它通过与细胞内的调控元件,细胞蛋白相互作用来控制细胞生长和分化。同时它又受到胞内、外多种面子在多个层次上的调控,使Rb功能与细胞生长、分化状态相适应。     

原位双杂交法研究Rb、p16ink4基因在非小细胞肺癌中的转录

目的 :探讨非小细胞肺癌组织中Rb、p1 6INK4 基因的转录。方法 :分别以Bio标记RbcDNA探针、Dig标记p1 6INK4 cDNA探针 ,进行mRNA原位双杂交。结果 :以Bio 辣根过氧化物酶 AEC系统检测Rb基因转录 ,阳性结果为红色 ,阳性率为 83 9% (2 6/3 1 ) ;以Dig 碱性磷酸酸酶 NBT/BCIP系统检测 p1 6INK4 基因转录 ,阳性结果呈蓝色 ,阳性杂交率为 77 4% (2 4/3 1 )。结论 :mRNA原位双杂交法具直观、适合少量细胞、能排除癌组织中混有间质细胞的影响、过程简便等优点 ,Rb、p1 6INK4 基因在非小细胞肺癌发生中起协同调控作用     

视网膜母细胞瘤基因对人骨肉瘤细胞株OS732的影响

目的 观察外源性N端截短的视网膜母细胞瘤（Rb)基因对骨肉瘤细胞株OS732的生长和细胞间缝隙连接信息通讯能力的影响。方法 构建N端截短的长度为1.65kb Rb基因的真核表达质粒,并用DOTAP将其导入骨肉瘤细胞株OS732。应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）和Northern blot检测Rb基因的表达;用细胞计数,流式细胞仪分析和软琼脂克隆形成试验观察OS732细胞的生成状况;用半定量RT－PCR法和罗氏黄荧光传输法检测细胞间缝隙连接信息通讯的能力。结果 转染N端截短的Rb基因后,OS732细胞内可检测到内源性和外源性Rb基因的mRNA表达。OS732细胞的形态发生改变,其生长速度减慢,软琼脂形成集落能力降低,细胞周期阻滞于G0－G1期;缝隙连接蛋白基因Gonnexin43的表达和细胞信息通讯能力增强。结论 N端截短的Rb基因可抑制骨肉瘤细胞株OS732的恶性生长表型以及增强细胞间信息通讯能力。     

人微小病毒B19分子生物学研究进展

人微小病毒Ｂ１９是微小病毒微小病毒属中目前已知的唯一致人类疾病的病毒，也是动物病毒中体积最小结构最简单的ＤＮＡ病毒。能引起传染性红斑，再生障碍性贫血等多种临床病症。近年来许多学者对ＰＶＢ１９的基因组结构特征，复制，转录方式及其特点，结构蛋白和非结构蛋白的特有功能进行了多方面的研究。本文拟对这方面的研究进展作一综述。     

瘢痕瘤组织中肿瘤抑制基因Rb、p53 PCR-SSCP分析

目的：探讨瘢痕瘤的发生及其侵袭性生长失控的分子生物学基础。方法：以正常皮肤为对照,对增生性瘢痕和瘢痕瘤组织的ＤＮＡ样本分别作Ｒｂ ｅｘｏｎ（１４ ,２７）和ｐ５３ ｅｘｏｎ （５ ～８） ＰＣＲＳＳＣＰ分析。结果：２６－１ ％（６／２３）的瘢痕瘤于Ｒｂ ｅｘｏｎ ２７ 处有异常电泳带,ｐ５３ ｅｘｏｎ （５ ～８）及其它标本均未见异常。结论：瘢痕瘤的发生或其侵袭性生长失控可能与Ｒｂ 肿瘤抑制基因突变或缺失有关。