小鼠腹水型肝癌与正常肝的核内非组蛋白双向凝胶电泳比较

本文以小鼠腹水型肝癌为肿瘤模型。用等电聚焦——SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法对小鼠正常肝和小鼠腹水型肝癌细胞的核非组蛋白(简称NHP)进行了比较。发现二者之间存在一些明显差异。 在上述电泳结果的基础上,又分析了二者NHP的氨基酸组成。发现二者的氨基酸组成相似,并且都是酸性氨基酸含量高于碱性氨基酸。     

小鼠肝细胞核磷酸化蛋白质组的提取和双向电泳分离

目的提取小鼠肝细胞核磷酸化蛋白并利用双向凝胶电泳分离小鼠肝细胞核磷酸化蛋白。方法提取小鼠肝细胞核蛋白并利用金属磷酸盐亲和层析树脂纯化出磷酸化蛋白后,进行一维等电聚焦分离和二维聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,并挑选其中一个蛋白斑点进行质谱分析。结果成功提取了肝细胞核磷酸化蛋白,通过双向凝胶电泳分离技术成功建立了小鼠肝细胞核磷酸化蛋白质组图谱。质谱鉴定结果证实被挑选蛋白斑点是小鼠核磷酸化蛋白。结论磷酸化蛋白纯化技术结合二维凝胶电泳分离技术是研究肝细胞核磷酸化蛋白质组的有效方法,为进一步全面研究和鉴定小鼠肝细胞核磷酸化蛋白的功能打下了基础。     

小鼠肝癌H22细胞与正常肝细胞低密度脂蛋白受体的分析研究

为观察小鼠肝癌Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的结合，并对这两种细胞内移及降解人ＬＤＬ的功能进行分析比较，用＾１２５Ｉ标记ＬＤＬ，对上述细胞ＬＤＬＲ进行受体饱和分析和单点分析。结果表明：（１）Ｈ２２细胞及正常肝细胞可通过其ＬＤＬＲ结合、内移、降解人ＬＤＬ；（２）Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的亲和性和特异性相同，但Ｈ２２细胞Ｂｍａｘ明显增多；（３）两种细胞对人ＬＤＬ的非特异性结合     

正常小鼠肝和HepA腹水肝癌中K型丙酮酸激酶同工酶的比较研究(摘要)

我们曾发现,小鼠HepA腹水肝癌(简称HepA)细胞中丙酮酸激酶(PyK)同工酶谱明显不同于正常小鼠肝;表现为分化型(L型)同工酶的降低和胎儿型(K型)同工酶的明显升高。且HepA中PyK总活性的升高和同工酶谱的改变,与HepA的Crabtree效应相关(本刊1981,8(6)∶428)。本文进一步研究HepA中增多的K型PyK和正常小鼠肝中活性甚低的K型PyK,在性质上有无不同。 比较正常小鼠肝和HepA都已纯化了的K型PyK。发现该种不同来源的K型PyK对下列各项指标均极为接近或完全相同:①在磷酸纤维素柱上均可被相近浓度的KCl洗脱下来;②聚丙烯酰胺凝胶电泳迁移率两者完全一致,两者混合样品在不同的电泳条件下均不能被分开;③两种酶在50℃保温下的半失活时间均为11.5分;④两种酶的pH活性曲线几乎完全重合,其最适pH均为7.4;⑤六种氨基酸分别对两种酶的抑制百分率都十分接近。Mg~( )或丝氨酸对两种酶的激活也基本一样;⑥两种     

两株转移能力不同的小鼠腹水型肝癌细胞免疫原性的比较研究

CFW系小鼠经β-榄香烯和丝裂霉素C处理的H_(22)/F_(23)瘤细胞腹腔免疫三次,末次免疫后两周分剐用H_(22)/F_0和H_(22)/F_(23)交叉进行攻击。实验结果表明:β-榄香烯及MMC瘤苗均能诱导不同程度的免疫保护效应,并以MMC瘤苗效果更佳。两种方法处理的H_(22)/F_(23)瘤苗免疫对H_(22)/F_(23)攻击的保护效应显著低于对H_(22)/F_0的保护效应,提示高淋巴道转移株H_(22)/F_(23)细胞的免疫原性较低。初步讨论了H_(22)/F_(23)免疫原性的改变与其转移能力增高的可能关系。     

小鼠腹水型子宫颈癌U_(14)的染色体的研究

小鼠腹水型子宫颈癌U_(14)(以下简称U_(14))是中国医学科学院实验医学研究所病理系于1968年用甲基胆蒽熏线穿进幼鼠宫颈获得的子宫颈癌,最初是经过皮下移植传代的,后转化为腹水型。由于这株细胞的生长速度较慢,已被广泛地用作实验材料,它对抗癌中草药的筛选特别敏感,如掌叶半夏对U_(14)的抑瘤率达61.7～84.5％。U_(14)已在我国     

小鼠肝癌H_(22)细胞与正常肝细胞低密度脂蛋白受体的分析研究

为观察小鼠肝癌Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的结合，并对这两种细胞内移及降解人ＬＤＬ的功能进行分析比较，用１２５Ｉ标记ＬＤＬ，对上述细胞ＬＤＬＲ进行受体饱和分析和单点分析。结果表明：（１）Ｈ２２细胞及正常肝细胞可通过其ＬＤＬＲ结合、内移、降解人ＬＤＬ；（２）Ｈ２２细胞及正常肝细胞ＬＤＬＲ对人ＬＤＬ的亲和性和特异性相同，但Ｈ２２细胞Ｂｍａｘ明显增多；（３）两种细胞对人ＬＤＬ的非特异性结合差异不明显，内移及降解人ＬＤＬ的能力亦相同。提示小鼠肝癌Ｈ２２细胞ＬＤＬＲ数目增多，亲和性及特异性未变，对ＬＤＬ的内移和降解功能亦未改变。     

小鼠腹水型肝癌多药耐药模型的建立

目的：建立小鼠腹水型肝癌（Hca）多药耐药（MDR）模型并探讨其产生的分子机制。方法：荷Hca小鼠分为2组,每组10只。化疗组采用临床化疗FAP方案,以剂量递增的方法诱导耐药模型,对照组仅给予等体积的生理盐水。MTT法检测瘤细胞对7种化疗药物的耐药性;流式细胞术检测瘤细胞对Rh123的蓄积与泵出能力,计算平均荧光强度（MFI）;RT-PCR检测瘤细胞mdr1和mrp1mRNA的表达及停药后化疗组小鼠瘤细胞mdr1和mrp1mR-NA的表达。结果：化疗组小鼠瘤细胞对7种化疗药物均产生耐药性。与对照组相比,化疗组小鼠瘤细胞内Rh123蓄积量减少,泵出率增加（t=6.067和6.811,P均〈0.05）,mdr1和mrp1mRNA的表达水平升高（t=18.807和4.420,P均〈0.05）;mdr1和mrp1mRNA的表达水平在停药4周内稳定（P〉0.05）,停药8周后下降（P〈0.05）。结论：成功建立了小鼠腹水型肝癌MDR模型,MDR的产生与mdr1和mrp1mRNA过度表达从而影响药物蓄积有关。     

大鼠正常肝细胞与肝癌细胞磷脂酰胆碱及脂肪酸组成的比较研究

目的 :探讨肝癌细胞的膜磷脂组分变化。方法 :采用高效薄板层析方法并配合无机磷的测定 ,比较了大鼠正常肝细胞与癌变细胞磷脂的组成及摩尔分数 ,用气相色谱法对其中含量最多的磷脂组分磷脂酰胆碱 (PC)的脂肪酸组成进行了测定。结果与结论 :肝癌细胞的PC含量明显减少 (P <0 .0 5 ) ,PC中长链及不饱和脂肪酸含量显著减少 (P <0 .0 5 )。     

小鼠腹水型肝癌高、低转移克隆稳定性的研究

利用小鼠腹水型肝癌高转移克隆16A_3—F_3和低转移克隆A_2—0在体外传代并进行亚克隆,观察其转移能力、核型和细胞电泳率的变化。当每个克隆在培养中生长少于20次传代后进行亚克隆时,则亚克隆群的转移能力、核型和细胞电泳率等变化不大。在培养中连续传45代,则亚克隆之间有明显差别。结果表明,小鼠腹水型肝癌高转移克隆细胞株有效应用时间是在体外传20代以内。因而,可以采用冻存原代细胞以及体内反复筛选和体外亚克隆的方法保持其稳定性。测定转移率是否发生变化的指标,除动物实验外,还可测定细胞电泳率和核型变化,因为对小鼠腹水型肝癌来说,三项指标基本上是呈正相关的关系。     

单味溪黄草对小鼠移植性腹水型肝癌的防治效果观察

目的　探讨单味溪黄草水煎剂对小鼠移植性腹水型肝癌 (H2 2 )细胞防治效果。方法　将实验小鼠除正常对照组皮下注射生理盐水外 ,其它各组皮下移植H2 2 细胞后 ,预防组小鼠饮用溪黄草水煎剂 ,治疗组小鼠 4d后待有肿物形成时饮服溪黄草水煎剂 ,以观察小鼠生瘤率、死亡率、瘤体重量及淋巴和肺组织转移情况。结果　实验各组除正常对照组外小鼠生瘤率 10 0 .0 % ,预防和治疗组的瘤重和死亡率与模型对照组比较均有增加 ,肺转移明显 ,但未见淋巴转移。结论　单味溪黄草水煎剂不能抑制H2 2 细胞生长 ,对经血循环转移至肺有激发加强作用     

单味溪黄草对小鼠移植性腹水型肝癌的防治效果观察

目的探讨单味溪黄草水煎剂对小鼠移植性腹水型肝癌(H22)细胞防治效果。方法将实验小鼠除正常对照组皮下注射生理盐水外，其它各组皮下移植H22细胞后，预防组小鼠饮用溪黄草水煎剂，治疗组小鼠4d后待有肿物形成时饮服溪黄草水煎剂．以观察小鼠生瘤率、死亡率、瘤体重量及淋巴和肺组织转移情况。结果实验各组除正常对照组外小鼠生瘤率100．0％，预防和治疗组的瘤重和死亡率与模型对照组比较均有增加，肺转移明显，但未见淋巴转移。结论单味溪黄草水煎剂不能抑制H22细胞生长，对经血循环转移至肺有激发加强作用。     

615小鼠移植性肝癌染色质非组蛋白的研究

本研究表明,H615染色质非组蛋白的含量由正常肝的0.70±0.02增加到1.14±0.05,增加了63％。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电聚焦电泳分析及兔疫分析显示H615有一正常肝缺如的非组蛋白构份。     

副流感病毒治疗小鼠腹水型肝癌,小鼠肉瘤S180腹水瘤的实验研究

副流感病毒－Ⅱ型治疗小鼠腹水型肝癌Ｈ２２，小鼠肉瘤Ｓ１８０腹水型荷瘤小鼠，经体内实验观察，将小鼠接种腹水瘤次日，采用腹腔注射副流感病毒－Ⅱ型，连续６天，存活率达１００％。     

小鼠腹水型肝癌肺转移亚株与淋巴结转移亚株若干生物学特性的比较

本实验用小鼠腹水型肝癌(Hca) 分别经腹水→足垫→淋巴结→腹水……,与腹水→尾静脉→肺→腹水……循环传代10次,得到淋巴结筛选型(HcaSL_(10))和肺筛选型(HcaSP_(10))。将两者均分别向足垫和尾静脉注射,观察各自的淋巴结转移率和肺转移率。发现HcaSL_(10)淋巴结转移率明显高于HcaSP_(10);HcaSP_(10)肺转移率明显高于HcaSP_(10)并对两者进行了细胞形态学,细胞电泳率,促血小板聚集能力等方面的比较。其结果提示HcaSL_(10)与HcaSP_(10)细胞性质存在着差异。     

小鼠腹水型肝癌高、低转移细胞系的超微结构定量分析

本文对小鼠腹水型肝癌淋巴道高转移细胞系（Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３）和低转移细胞系（Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－Ａ２）的超微结构进行了比较观察，并应用体视学方法进行了定量分析。结果表明Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３细胞剖面平均直径、核质比较均Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－Ａ２大。Ｈｃａ－Ｆ２５／Ｌ－１６Ａ３细胞的分裂相、核畸形、核仁边集较多见，胞质中粗面内质网、游离核糖体较丰富，细胞表面微绒毛较多。表明不同转移能力的Ｈｃａ瘤细胞在形态上也有差异。     

肝细胞内Ca2+振荡对磷酸化-去磷酸化循环过程的动力学研究

目的:从理论上阐述了Ca^2 振荡对肝细胞中糖原降解的磷酸化-去磷酸化循环过程的调控效应。方法:应用Ca^2 振荡模型观察Ca^2 振荡对肝细胞中糖原降解的磷酸化循环过程的调控。结果:Ca^2 振荡可以增强细胞对激素反应的潜力。肝细胞中的磷酸化-去磷酸化动力学过程，在Ca^2 振荡的调控下，其糖原磷酸化酶的浓度呈现同频、同步振荡。结论:Ca^2 振荡将会提高细胞中信息的传递效率和特异性。     

HBVDNA基因型与肝细胞肝癌的预测性相关研究

将非放射性标记物地高辛甙元用随机引物法由ｐＢＲ３２２－２ＨＢＶ重组质粒／ＥｃｏＲⅠ酶切片段（３．２ｋｂ）制备了乙型肝炎病毒ＤＮＡ探针。用斑点杂交、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、组织原位杂交技术，结合乙肝血清学指标、ｓＩＬ－２Ｒ测定等综合分析了慢性乙型肝炎１７８例及肝细胞肝癌５４例的肝细胞、血清、淋巴细胞、唾液内ＨＢＶＤＮＡ的存在类型、复制表达状态、分布定位特点与病变发展趋势的相关性，探讨了肝癌高危人群肝组织可能发生恶性转化的预测信号及发病机理。