组织微阵列研究eIF4E在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的　研究eIF4E在鼻咽癌及其癌旁组织和鼻咽上皮组织的表达及其临床意义。方法　应用自行研制的组织微阵列 ,结合免疫组化技术 ,检测eIF4E在鼻咽癌及其癌旁上皮组织和鼻咽上皮组织的表达情况。结果　eIF4E在鼻咽上皮组织、癌旁上皮组织和鼻咽癌组织中阳性表达率分别为 6 1 .0 %(5 8/ 95 )、84 .6 %(77/ 91 )和87.3%(1 99/ 2 2 8) ,鼻咽癌和癌旁上皮组织的阳性表达率均高于鼻咽上皮组织 (P <0 .0 1 ) ,鼻咽癌和癌旁上皮组织两者阳性表达率比较无统计学意义 (P >0 .0 5 )。eIF 4E的表达与鼻咽癌的转移和临床分期无显著相关性(P >0 .0 5 ) ,而与放疗是否耐受有显著相关 (P <0 .0 5 )。结论　eIF4E在鼻咽癌的发生过程中可能起重要作用 ;eIF4E可作为预测鼻咽癌放疗是否耐受的分子指标之一。     

鼻咽癌组织中bcl-2及P53蛋白表达的研究

目的 探讨bcl-2和P^53蛋白在鼻咽癌发生发展中的作用。方法 采用抗bcl-2和P^53蛋白的单克隆抗体，对25例鼻咽癌（Nasopharyngeal carcinoma,NPC)标本和16例正常鼻咽上皮（Nasopharyngeal epithelia,NE)标本进行免疫组化检测。结果 bcl-2和P^53蛋白的阳性表达率在鼻咽癌组织中分别为84．0％（21／25）和76．0％（19／25），与正常鼻咽上皮组相比差异有极显著性意义（P＜0．005）；鼻咽癌中有16例同时表达bcl-2和P^53蛋白。此外，bcl-2蛋白多见于分化差的鼻咽癌，而P^53蛋白则在相对分化较好的鼻咽癌中较多。结论 bcl-2原癌基因和P53抑癌基因在鼻咽癌的发病中可能有不同的意义，二种基因的协同作用可能与鼻咽癌持续生长有关。     

β-连环蛋白表达在鼻咽癌癌变过程中作用的研究

目的研究β-连环蛋白(β-catenin)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)癌变过程中的作用。方法免疫组化结合组织微阵列检测β-catenin蛋白在174例NPC、71例异型增生鼻咽黏膜上皮、48例单纯增生鼻咽黏膜上皮及63例正常鼻咽黏膜上皮组织中的阳性表达及其阳性信号的定位。结果β-catenin在NPC组织细胞浆/细胞核中高表达(71.3%),但其细胞膜呈低阳性表达(19.0%);β-catenin在NPC组织中的细胞浆/细胞核阳性表达率显著高于异型增生鼻咽黏膜上皮、增生鼻咽黏膜上皮和正常鼻咽黏膜上皮(P<0.01)。非角化性鼻咽癌和未分化癌组织的β-catenin蛋白细胞浆/细胞核异常阳性表达率显著高于角化性鼻咽癌(P<0.01)。临床Ⅲ和Ⅳ期NPC组织中β-catenin蛋白的细胞浆/细胞核阳性表达率显著高于临床Ⅰ和Ⅱ期(P<0.01),有淋巴结转移的NPC组织中β-catenin蛋白的细胞浆/细胞核阳性表达率显著高于无淋巴结转移NPC(P<0.01)。结论β-catenin蛋白在癌细胞细胞浆/细胞核中的过表达在NPC发生、发展过程中起重要作用;β-catenin蛋白细胞浆/细胞核阳性可作为预测鼻咽癌临床进展和侵袭、转移的分子标志。     

Survivin蛋白在鼻咽癌组织中的表达及临床意义

Survivin是一种凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein，IAP)，其在肿瘤组织中特异性表达。鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是我国常见的恶性肿瘤，虽然其经放射治疗(简称放疗)后5年生存率可达50％，但仍有一部分患者对放疗不敏感，预后较差。本研究通过检测Survivin蛋白在NPC中的表达情况，从而探讨Survivin的表达对预后的影响。     

鼻咽癌组织中bcl-2基因断裂和bcl-2蛋白表达的检测及意义

为探讨ｂｌｃ－２基因与鼻咽癌发生的关系，采用分子原位杂交和免疫组化技术，检测４１例鼻咽癌组织中ｂｃｌ－２基因的两个断裂热点和蛋白表达。结果：４１例鼻咽癌发生ｂｃｌ－２基因表裂者４例，阳性率为９．８％，３４例出现ｂｃｌ－２蛋白阳性表达，阳性率为８２．９％；鼻咽良性病变阴性。ｂｃｌ－２基因断裂和蛋白表达与鼻咽癌组织学分级间无明显关系；ｂｃｌ－２蛋白表达与ｂｃｌ－２基因断裂间无相对应关系。提示：ｂｃｌ－     

RUNX3基因在脑胶质瘤中的表达和启动子区甲基化的研究

目的研究脑胶质瘤中RUNX3基因的表达以及启动子区CpG岛甲基化情况以及两者的关系。方法用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测35例脑胶质瘤组织和4例正常脑组织中RUNX3基因的mRNA相对表达水平；用甲基化特异性PCR（MSP）方法研究相应标本中的RUNX3基因启动子区CpG岛甲基化状态。结果RUNX3在脑胶质瘤中的表达与肿瘤的级别相关，但与肿瘤的病理类型、患者年龄、性别等因素无关。MSP显示35例脑胶质瘤标本中有15例（42．8％）发生甲基化，发生甲基化的脑胶质瘤中mRNA表达水平较未甲基化的脑胶质瘤明显下降。结论RUNX3在脑胶质瘤中表达与肿瘤的恶性程度相关，并且RUNX3启动子区CpG岛高甲基化与RUNX3表达下调相关。推测RUNX3启动子区CpG岛高甲基化是导致RUNX3基因在脑胶质瘤中表达下调的重要因素。     

鼻咽癌组织中PI3Kp85的异常表达

目的 通过检测PI3Kp85在鼻咽癌组织及鼻咽部慢性炎症组织中的表达情况,探讨它们在鼻咽癌发生、发展过程中的作用。方法 采用免疫组织化学SP法检测PI3Kp85在57例鼻咽癌和20例鼻咽部黏膜慢性炎症组织中的表达情况,应用Image-ProPlus图像分析软件测定免疫组化图像的平均光密度（mean optical density, MOD）,运用SPSS13.0软件进行统计学分析,观察其与鼻咽癌临床病理特征之间的关系。结果 PI3Kp85在鼻咽癌组织的阳性表达率为78.95％,而在鼻咽部慢性炎症组织中的阳性表达率为45.00％,两者差异有统计学意义（P＜0.05）。PI3Kp85表达与临床分期、淋巴结转移、原发病灶大小及患者年龄、性别均无相关性（P＞0.05）。结论 PI3Kp85蛋白表达可能与鼻咽癌的发生有关。     

鼻咽癌组织多药耐药基因的表达及其与化疗敏感性的关系

目的　探讨鼻咽癌组织的多药耐药基因的表达及其与化疗敏感性的关系。方法　应用单克隆抗体多药耐药基因蛋白 (P-glycoprotein,P-gp)、多药耐药相关蛋白 (multidrugresistancerelationprotein,MRP)、肺耐药相关蛋白 (lung resistancerelatedprotein,LRP)、拓朴异构酶 (topoisomeeraseⅡ,TopoⅡ)、胸腺肽合成酶(thymidylatesynthase,TS)、谷胱甘肽转移酶 (glutathione S transferase,GST-π),对 23例鼻咽癌患者的肿瘤组织进行免疫组化检测。其中 20例是治疗前鼻咽部原发灶活检组织,这20例患者用顺氯氨铂(diamminedichloroplatinum,DDP) +5 氟尿嘧啶 (5-fluorouracil, 5-FU)进行 2个疗程化疗; 3例是鼻咽癌治疗后颈部淋巴结复发,进行颈清扫术的标本。结果　除 1例病理类型为透明细胞癌之外,各项多药耐药指标在 22例患者中均有不同程度表达,成组秩和检验,各项的表达程度差异有统计学意义,P<0.05。不同细胞类型(原发鳞状细胞癌、泡状核细胞癌、透明细胞癌 )和临床分期(Ⅱ~Ⅲ期)的多药耐药表达采用成组秩和检验差异无统计学意义 (P值均 >0.05)。LRP和TS表达阳性分别是 10例和 14例,化疗有效率分别为 20% (2 /10)和 28 5% (4 /14);而表达阴性组化疗有效率分别为 70% (7 /10)和 5 /6,二者比较,P值均 <0.05,差异     

喉鳞癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异

目的：研究喉鳞癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异。方法：对2例经病理证实的喉鳞状细胞癌标本和邻近的正常黏膜组织标本与基因表达谱芯片进行杂交,利用激光共聚焦荧光检测系统扫描芯片杂交信号,获得样品中基因序列及表达信息。结果：对比2例喉癌和邻近正常组织的基因表达图谱,发现癌组织和正常组织存在差异表达,2例标本重复出现且差异表达的基因共74个,其中喉癌组织表达上调的基因(R>=5)27个,表达下调的基因(0＜R＜0.2)47个。结论：利用基因表达谱芯片可以在喉鳞状细胞癌组织和邻近的正常组织之间一次比较7000多个基因表达变化,并能找出病理组织中表达异常的基因。     

微管相关蛋白1轻链3在喉癌中的表达及其意义

目的:探讨微管相关蛋白1轻链3(LC3)在喉癌中的表达及其意义.方法:采用免疫组织化学染色方法检测LC3蛋白在50例喉癌组织、45例癌旁组织、10例喉乳头状瘤及16例声带息肉中的表达情况.采用RT-PCR法检测LC3 mRNA和蛋白在41例喉癌组织、41例癌旁组织及11例声带息肉组织中的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果:免疫组织化学结果显示LC3蛋白在喉癌组织、癌旁组织、喉乳头状瘤、声带息肉中的阳性率分别为60.0%、93.3%、90.0%、93.8%.LC3在喉癌组织中的阳性表达率明显低于癌旁及声带息肉组织(χ2=18.135,P＜0.01).RT-PCR检测结果显示LC3 mRNA在喉癌组织中相对表达量为0.57±0.08,与癌旁组织(0.99±0.11)及声带息肉组织(1.07±0.05)中的相对表达量比较差异亦有统计学意义(F=255.872,P＜0.01).LC3在喉癌中的蛋白表达与肿瘤部位、病理学分级有关(P＜0.05),与患者的年龄、T分期、临床分期及淋巴结转移无关(P＞0.05).结论:LC3在喉癌中的表达下调,自噬活性的改变可能与喉癌发生、发展有关.     

喉癌组织中DcR3蛋白的表达及临床意义

目的：探讨诱捕受体3（DcR3）在喉癌组织中的表达及其与各临床病理因素的关系。方法：采用流式细胞术检测41例喉癌组织和41例相应癌旁组织中的DcR3的表达,并以15例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照。结果：①喉癌组织中DcR3蛋白的表达量及阳性表达率均明显高于癌旁组织及正常喉黏膜组织（P〈0．01或P〈0．05）,癌旁组织及正常喉黏膜组织的表达差异无统计学意义（P〉0．05）;②DcR3蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度有相关性（均P〈0．05）;与临床分型、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性（均P〉0．05）。结论：DcR3蛋白的高表达可促进喉癌的发生、发展,其蛋白检测可作为判断喉癌分化、浸润、转移、分期的重要指标。     

表皮型转谷氨酰胺酶在喉癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨表皮型转谷氨酰胺酶(TGM3)在喉癌组织中的表达及其与各临床病理因素的关系。方法:采用流式细胞术检测50例喉癌组织和50例相应癌旁组织中的TGM3的表达,并以20例非喉癌患者喉部正常黏膜组织作对照。结果:①喉癌组织中TGM3蛋白的表达量及阳性表达率均明显低于癌旁组织及正常喉黏膜组织(P<0.05),癌旁组织及正常喉黏膜组织的表达无差别(P>0.05)。②TGM3蛋白的表达与喉癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度有相关性(P<0.05);与临床分型、肿瘤大小、年龄和性别无相关性(P>0.05)。结论:TGM3蛋白的低表达可促进喉癌的发生和发展,其蛋白检测可作为判断喉癌分化、浸润、转移、分期的重要指标。     

3例喉咽癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异分析

目的 研究喉咽癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异,从基因组水平初步探讨喉咽癌易侵袭和转移的机制。方法 3例经病理证实为鳞状细胞癌的喉咽癌标本和邻近的正常黏膜组织标本,提取细胞总RNA,反转录为Cy3标记的癌旁正常喉黏膜cDNA,及Cy5标记的喉咽癌cDNA,与共有人类癌症相关基因886条的基因表达谱芯片Human Cancer CHIP Ver.4.0进行杂交, 杂交芯片用双通道激光扫描仪进行扫描记录,利用ImaGene分析软件将信号强度数值化。基因显著性表达的判定标准为：每个基因的喉咽癌组织和癌旁正常组织的平均灰度比值R（Cy5/Cy3）相差2倍或2倍以上,则认为差异有统计学意义。结果 在3例样本中重复表达且相差2倍以上的基因共51个,喉咽癌组织表达上调者39个,表达下调者12个。本实验发现显著差异的新基因4个,这些基因序列已被测出,但其功能却未知。其中表达差异非常显著（平均相差5倍以上）的主要包括,上调基因：基质金属蛋白酶-1 （MMP-1）,整合素β4（Integrinβ4）,Bcl-2,CXCL13,黑色素瘤特异性抗原(PRAME );下调基因：早期生长反应基因-1 (early growth respons gene-1, Egr-1),MRP1/ CD9。结论 基因芯片技术可以用来筛选在喉咽癌肿瘤细胞增殖、侵袭、转移过程中发挥重要作用的多种基因,为进一步深入研究提供靶点。     

DcR3在喉癌组织中的表达及其与细胞凋亡相关性的研究

、吸烟量、年龄和性别无关(P>0.05).喉癌组织细胞凋亡率与临床分期、淋巴转移有关;与临床分型、病理分级、肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无关.喉癌组织中DcR3蛋白表达水平与喉癌组织细胞凋亡率呈负相关.结论 DcR3蛋白的高表达可促进喉癌的发生、发展,并通过抑制凋亡并促进细胞增殖参与喉癌发展.     

肾上腺髓质素在人喉癌组织中的表达

目的观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)在人喉癌中的表达、分布和随着肿瘤进展其含量的变化。方法运用免疫组化方法观察喉癌组织中AM分布特点,放射免疫分别测定新鲜喉癌组织标本、非癌喉黏膜含量和喉癌患者术前血浆、健康对照血浆中AM浓度。结果选取的21例喉癌石蜡标本免疫组化染色均有AM表达,可以观察到AM表达主要在癌细胞细胞质中,高分化鳞癌癌巢周边癌细胞染色强而中心位置染色弱,中分化和低分化喉癌标本中癌巢AM染色较均一,间质染色较重。喉癌组织中AM含量为(49.67±28.33)pg/ml(x-±s,n=44,以下同),癌旁非癌喉黏膜组织(距离肿瘤1cm喉黏膜组织,组织病理证实无肿瘤浸润)AM含量为(14.71±7.17)pg/ml,肿瘤组织AM含量较癌旁非癌喉黏膜组织高(u=135.00,P<0.01)。T2、T3和T4期喉癌患者癌组织中AM含量依次为(31.52±15.22)pg/ml、(56.63±18.51)pg/ml和(96.12±18.22)pg/ml,差异有统计学意义;N0、N1期患者喉癌组织中AM含量差异无统计学意义(u=30.00,P>0.05),重新分组发现AM含量关系为(N0+N1)M0,差异有统计学意义(u=31.00,P<0.01)。喉癌患者术前血浆AM质量浓度为(10.75±2.49)pg/ml(n=20),健康对照血浆质量浓度为(9.74±2.39)pg/ml(n=20),喉癌患者术前血浆AM浓度和健康对照组间差异无统计学意义(u=153.00,P>0.05)。结论喉癌组织中存在AM高表达,喉癌组织AM含量与TNM分期有关,AM含量增加与肿瘤的进展有关。     

喉癌组织中FHIT基因蛋白表达的研究

目的:以喉鳞状细胞癌为研究对象,探讨FHIT基因蛋白表达在喉癌发生、发展中的作用及临床意义.方法:用免疫组织化学SP法检测52例喉癌组织、23例癌旁组织及10例正常组织中FHIT基因蛋白的表达,分析在不同临床病理指标下FHIT蛋白表达的情况.结果:FHIT蛋白在正常组织中的阳性表达率(90.0%)及癌旁组织中的阳性率(78.3%)均高于癌组织中的阳性率(46.2%),差异有统计学意义(均P＜0.01).癌组织FHIT蛋白阳性表达率与临床分期和颈淋巴结转移有关,与病理分级无关.结论:喉癌的发生、发展与FHIT抑癌基因的失活有密切关系,FHIT基因很可能是喉癌重要的侯选抑癌基因.