荧光PCR法检测尖锐湿疣表面脱落细胞人乳头瘤病毒表达的应用

在人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)100余种亚型中,HPV6/11型主要引起人泌尿生殖道尖锐湿疣(condylomata acuminata,CA)[1].目前,应用PCR技术检测HPV DNA是诊断该病最敏感的方法,但该法常需活体取材.我们以患者疣体表面脱落细胞为标本,检测HPV6/11 DNA,并与疣体组织检测结果进行比较.     

荧光PCR法检测尖锐湿疣表面脱落细胞人乳头瘤病毒表达的应用

在人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）100余种亚型中，HPV6/11型主要引起人泌尿生殖道尖锐湿疣（eondylomata acuminata，CA）。目前，应用PCR技术检测HPV DNA是诊断该病最敏感的方法，但该法常需活体取材。我们以患者疣体表面脱落细胞为标本。检测HPV6/11 DNA，并与疣体组织检测结果进行比较。     

尖锐湿疣皮损中HPV DNA定量检测及其临床意义

目的研究尖锐湿疣皮损中人类乳头瘤病毒 (HPV)基因含量及其临床意义。方法采用荧光定量PCR技术 (FQ PCR)检测尖锐湿疣皮损中HPV基因。分析皮损治疗次数与HPVDNA拷贝数的关系。结果尖锐湿疣发病高峰在年龄 4 0岁以下性活跃人群。 6 3例尖锐湿疣标本经FQ PCR检测后 5 0例(79.4 % )为HPV 6 / 11型阳性 ,其DNA模板平均拷贝数为 3.7× 10 4 ,HPV 6 / 11型阳性患者高频电平均治疗次数为 2 .17次 ,其拷贝数与治疗次数无明显相关性。结论HPV6 / 11型感染是尖锐湿疣发病的首要原因 ,HPV6 / 11型尖锐湿疣的预后与其皮损HPVDNA含量无明显相关性。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒检测的临床意义

目的探讨尖锐湿疣（CA）患者人乳头瘤病毒（HPV）DNA定量测定及HPV分型。方法用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对133例CA患者疣体组织进行HPV分型和HPV DNA定量检测。结果133例CA患者经二氧化碳激光治疗后有93例治愈,40例复发。HPV亚型分析显示,133例标本中检出HPV DNA阳性131例（98.50%）,110例（82.71%）基因型为HPV6/11,12例（9.02%）为HPV16/18,9例（6.77%）为HPV6/11合并HPV16/18。对131例HPV DNA阳性患者治疗前病毒载量进行分组比较,病毒载量为10^3-10^5拷贝/mL的患者50例,有11例患者复发;病毒载量10^5-10^7拷贝/mL的患者39例,有14例患者复发;病毒载量为〉107拷贝/mL的患者42例,有15例患者复发。HPV6/11有23例复发,HPV16/18有10例复发,HPV6/11合并HPV16/18有7例复发。结论CA检测HPV DNA能区分高危型HPV和低危型HPV感染,可对CA复发及癌变进行预测。     

荧光定量PCR在人乳头状瘤病毒检测中的应用

目的了解我院皮肤性病科生殖器疣患者的人乳头状瘤病毒(Hum an pap illom a viruses,HPV)感染情况。方法用荧光定量PCR法对38例尖锐湿疣(CA)患者和60例亚临床患者进行HPV 6,11,16,18检测。结果(1)男性患者和女性患者的阳性率分别为79.4%(54/68)和76.7%(23/30),两者差异无统计学意义。(2)CA患者疣体组织、亚临床患者的皮损标本检出率分别为94.7%(36/38)和68.3%(41/60),两者差异有统计学意义(P<0.05)。(3)38例HPV阳性病例中感染HPV6、11型占75.3%(58/77),感染HPV16、18型占10.4%(8/77),两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)乳头瘤病毒感染无性别差异;(2)疣体组织的检出率高于其他皮损标本;(3)荧光定量PCR灵敏度高,特异性强,结果准确。     

荧光定量聚合酶链反应检测人类乳头瘤病毒在尖锐湿疣中的应用

目的：对尖锐湿疣(CA)患者进行人类乳头瘤病毒(HPV)DNA定量测定及HPV分型。方法：用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对146例CA患者疣体组织进行HPV6，11型和HPV 16．18型的分型检测及HPV DNA定量测定。结果：146例CA患者标本中检出HPV 6．11和HPV 16．18型感染阳性143例(97．95％)。其中单独HPV 6．11型阳性104例，占71．24％；单独HPV 16.18型阳性16例，占10．96％；HPV 6．11和HPV 16．18型同时阳性23例，占15．75％；HPV 6.11和HPV 16.18型同时阴性3例，占2．05％。定量测定结果显示：HPV 6.11型患者病毒载量最高1．0×10^8拷贝／mL，最低2．8×10^3拷贝／mL，HPV 16.18型患者病毒载量最高1.0×10^8拷贝／mL，最低2．57×10^4拷贝／mL。结论：CA患者应用FQ-PCR检测HPV阳性率高，并可快速区分高危型及低危型HPV感染，对尖锐湿疣复发及癌变作出可能性预测。     

尖锐湿疣患者病损部位高危型人乳头瘤病毒的检测及其临床意义

目的了解尖锐湿疣(CA)患者高危型(16、18型)人乳头瘤病毒(HPV)的感染情况及其临床意义。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对41例CA患者(扁平形16例,乳头形/菜花状25例)病损部位进行HPV16、18型DNA检测,又根据其发病次数分为初发和复发2组,分别有29例和12例,观察高危型HPV的感染率、病毒DNA含量及各组间的差异。结果CA患者高危型HPV的感染率为43.90%,与对照组(3.85%)比较差异有显著性(P<0.01)。扁平形和乳头形/菜花状CA患者高危型HPV的阳性率分别为18.75%和60.00%,2组比较也有明显差异(P<0.01);2组间病毒DNA含量比较差异无显著性(P>0.05)。初发和复发者HPV16、18型感染率及其DNA含量检测结果差异均无显著性(P>0.05)。25例乳头形/菜花状CA患者的疣体组织阳性率为36%,其表面分泌物的阳性率为52%。结论CA患者高危型HPV的感染率显著高于普通人群。乳头形/菜花状CA中高危型HPV感染率较扁平形明显升高。CA的复发与否可能与高危型HPV的感染无必然联系。同时检测疣体组织和分泌物的高危型HPV可提高检出率。     

两种用于人乳头瘤病毒检测方法的比较分析

目的通过对核酸快速导流杂交基因芯片技术与荧光PCR技术检测人乳头瘤病毒的结果进行比较,为临床人乳头瘤病毒的诊断提供恰当的检测方法。方法采用人乳头瘤病毒分型基因芯片检测系统和荧光PCR技术对78例子宫颈癌患者的宫颈脱落细胞进行人乳头瘤病毒检测。结果基因芯片分型检测总阳性率为91.03%(71/78),且均为高危型。单一感染52例,其中HPV16型阳性率为61.54%,HPV18阳性率为11.54%,其他类型感染阳性率26.92%。荧光PCR法检测总阳性率为93.59%(73/78),其中HPV16阳性检出率45.21%,HPV18阳性检出率9.59%。两种检测方法的符合率为97.4%。结论 HPV导流杂交基因芯片技术和荧光PCR技术两者具有良好的符合性,两者都适用于临床检测,荧光PCR技术更适用与宫颈癌的大范围筛查。     

吉林地区女性尖锐湿疣疣体HPV基因型的研究

目的探讨吉林地区女性尖锐湿疣疣体中感染的人乳头瘤病毒基因类型及分布。方法收集女性生殖器肉眼可见的疣体112例,采用免疫组化法和DNA扩增技术检测疣体中感染HPV基因类型。结果在112例标本中,疣体感染HPV6型48.3%(54/112)、HPV11型17.2%(19/112)、HPV16型14.3%(16/112)、HPV18型11.4%(13/112)、HPV42型8.8%(10/112)。3.5%(4/112)为HPV6型和HPV11型混合感染。结论本地区女性尖锐湿疣以低危型HPV6、HPV11型为主,少数为高危型,并且出现了两种型别的混合感染。     

人乳头状瘤病毒与沙眼衣原体在女性生殖道感染中的相关性分析

目的分析人乳头状瘤病毒(HPV)与沙眼衣原体(CT)在女性生殖道感染中的相关性。方法对348例女性宫颈脱落细胞标本进行HPV DNA和CT DNA检测,对检测结果进行统计学分析。结果 HPV DNA检测总阳性率为13.2%(46/348),CT DNA检测总阳性率为9.2%(32/348);HPV DNA阳性及阴性患者CT DNA检测阳性率分别为23.9%(11/46)和7.0%(21/302),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论女性生殖道HPV与CT感染可能存在一定的相关性。     

基于E6/E7基因检测高危型人乳头瘤病毒感染新方法的构建

目的建立一种基于E6/E7基因的高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染检测的新方法,并评价其效应。方法设计中国人群中流行的7种HPV高危型别的E6/E7特异性引物,建立E6/E7多重聚合酶链式反应(PCR)法。对68份宫颈肿瘤标本和150份宫颈脱落细胞标本分别采用不同方法进行HPV检测,评价新建立的方法。结果 68份宫颈肿瘤组织中,E6/E7多重PCR法检测阳性48份(70.59%),流式荧光杂交法检测阳性27份(39.71%),2种检测结果差异有统计学意义(P0.05);150份宫颈脱落细胞中,E6/E7多重PCR法检测阳性115份(76.67%),临床流式荧光杂交法检测阳性125份(83.33%),2种检测结果差异无统计学意义(P0.05)。结论所建立的基于HPV E6/E7基因的多重PCR方法检测高危型HPV感染情况具有特异性和灵敏性,且与目前临床上主流的流式荧光杂交法检测结果存在高度相近性,但价格便宜,操作简便,可推广适用于临床早期筛查。     

尖锐湿疣患者及高危人群HPV DNA分型检测结果分析

目的分析尖锐湿疣（CA）患者及高危人群人乳头瘤病毒（HPV）的DNA分型检测结果。方法应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）对448倒CA患者及高危人群进行HPVDNA分型检测。结果448例检测总阳性率为47．77％,男、女阳性率分别为44．85％和50．00％,其中6／11型181例,16／18型20例,6／11与16／18型13例。126例CA疣体中HPV阳性率为98．41％,其中男、女HPV阳性率分别为98．33％和98．48%。322例高危人群HPV阳性率为27．95％,其中男、女HPV阳性率分别为20．90％和34．57％,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。性伴侣或配偶患CA者、CA治疗后复查者、非CA患者及自检者的HPV阳性率分别为32．76％、36．25％、18．99％和25．71％。结论CA患者及高危人群检测中HPV以6／11型最多。荧光定量PCR可作为CA患者早期诊断的指标。CA高危人群HPV检出率均较高,且女性高于男性,应重视对这些高危人群的HPV常规检测。     

HPV DNA病毒载量检测在亚临床型女性宫颈癌筛查中的应用价值

目的 探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)DNA的病毒载量检测在亚临床型女性宫颈癌筛查中的应用价值.方法 拟设计4条分别针对HPV16,18,33,58与人β-球蛋白的特异性引物与探针,建立一种新型的荧光定量PCR方法,对541例亚临床型女性宫颈组织细胞进行HPV型别和病毒载量检测.结果 541例样本中β-球蛋白结果阳性的标本521例,其中56例HPV DNA阳性.HPV16,HPV18型以及多重感染的阳性检出率分别为46.42%(26/56),23.21%(13/56),30.36%(17/56);感染的最低病毒载量分别为≥103拷贝/"细胞",≥104拷贝/"细胞",≥102拷贝/"细胞";单一型别HPV感染的病毒载量高于多重感染的病毒载量,且二者之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 HPV16,HPV18是亚临床女性感染HPV的主要型别,HPV DNA病毒载量的检测为宫颈癌的常规筛查提供了一个动态监测手段.     

多通道荧光PCR技术检测HPV在宫颈癌筛查中的临床价值

目的探讨多通道荧光聚合酶链反应(PCR)技术检测HPV在宫颈癌筛查中的临床应用价值。方法应用多通道荧光PCR技术对临床1 039例宫颈细胞标本进行18种高危HPV DNA分型及定量检测,并与PCR-反向斑点杂交法(PCR-RDB)的检测结果进行比较,两种方法检测结果不一致的标本采用序列分析方法进行验证。结果在1 039例标本中,多通道实时荧光PCR法阳性检出率为14.24%(148/1 039),PCR-RDB法阳性检出率为18.94%(196/1 039),两种方法检测结果一致率为99.4%(Kappa值为0.976)。结论多通道荧光PCR技术检测HPV可作为宫颈癌的初筛方法,值得临床推广使用。     

血性宫颈脱落细胞标本对人乳头瘤病毒DNA检测结果的影响

目的探讨血红蛋白对人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测结果的影响程度及有效的干预措施,为临床工作提供参考依据。方法收集2019年1月就诊于北京友谊医院妇科门诊的女性患者宫颈脱落细胞标本,其中20例未溶血,且HPV-DNA检测为阳性的标本作为HPV阳性组,20例未溶血,且HPV-DNA检测为阴性的标本作为HPV阴性组,再根据试验需要,制备成含不同水平(0.0、2.5、5.0、10.0、20.0 g/L)的血红蛋白标本。采用荧光定量PCR对HPV-DNA进行定性和定量检测,并进行组间比较。结果定性检测结果显示,HPV阳性组中,血红蛋白水平为2.5和5.0 g/L时,HPV-DNA结果均为阳性,符合率为100%,血红蛋白水平为10.0和20.0 g/L时,HPV-DNA分别有13个和0个阳性结果,符合率分别为65%和0%。定量检测结果显示,HPV阳性组中,血红蛋白水平为2.5和5.0 g/L时,所有标本HPV-DNA扩增循环阈值(Ct值)的偏倚均小于7.5%,血红蛋白水平为10.0和20.0 g/L时,分别有40%和95%标本HPV-DNA扩增Ct值的偏倚超过7.5%。HPV阴性组中,HPV-DNA定性和定量检测结果在不同水平血红蛋白标本中均一致。结论血性宫颈脱落细胞标本在一定程度上会影响HPV-DNA检测结果,严重血性标本应预先处理后再进行检测。     

血性宫颈脱落细胞标本对HPV核酸分型检测结果影响的研究

目的探讨血性宫颈脱落细胞标本对流式荧光杂交法人乳头瘤病毒(HPV)DNA分型检测结果的影响。方法根据血红蛋白(Hb)水平,将宫颈脱落细胞标本分为5组,A组Hb为0g/L(10例),B组为0g/LHb≤30g/L(10例),C组为30g/LHb≤60g/L(20例),D组为60g/LHb≤100g/L(20例),E组为Hb100g/L(20例);每组标本中50%初检结果为阳性,50%初检结果为阴性。每例标本分别取样50、100、200、500、1 000μL进行检测,分析检测结果。结果初检结果为阴性的标本、A组5例初检结果阳性标本、B组5例初检结果阳性标本,不同取样量检测结果一致。C、D、E组各10例初检结果阳性标本中,分别有4例、4例和9例标本,在不同取样量检测时,出现HPV亚型漏检。结论血性宫颈脱落细胞标本有可能导致流式荧光杂交法HPV分型检测假阴性结果;有必要根据标本Hb水平,制定合适的取样量标准,以保证检测结果准确性。     

实时荧光定量PCR检测人乳头瘤病毒应用研究

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测人乳头瘤病毒(HPV)的应用价值。方法随机选择2015年2月至2016年2月于本院就诊的宫颈病变患者203例,采用实时荧光定量PCR和第二代杂交捕获法(HCⅡ)对宫颈组织标本进行HPV DNA检测,对检测结果进行分析。结果 77例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者实时荧光定量PCR和HCⅡ法HPV DNA阳性检出率分别为93.51%和85.71%,二者比较差异无统计学意义(P0.05);和72例慢性宫颈炎及鳞状上皮病变患者实时荧光定量PCR和HCⅡ法HPV DNA阳性检出率分别为59.72%和36.11%,二者比较差异有统计学意义(P0.05)。203例患者实时荧光定量PCR和HCⅡ法HPV DNA阳性检出率分别为71.43%和57.64%,二者比较差异有统计学意义(P0.05)。结论实时荧光定量PCR和HCⅡ都可用于HPV DNA检测,二者对某些类型宫颈疾病的检测阳性率存在差异。实时荧光定量PCR检测对HPV感染具有一定的辅助诊断意义,有利于宫颈类疾病的早期诊治,值得推广应用。     

实时荧光定量PCR检测生殖道HPV(6/11)和高危型HPV实验研究

目的了解该地区生殖道人乳头瘤病毒(HPV)6/11型和高危型HPV(HR-HPV)感染状况。方法采用HPV(6/11)型和HR-HPV型荧光定量PCR诊断试剂盒,对6734例临床表现疑似为尖锐湿疣(CA)患者及1453例女性健康体检者生殖道分泌物进行荧光定量PCR检测。结果 6734例患者中女性HPV感染率明显高于男性(P<0.001);HPV(6/11型)检出率(23.24%)明显高于HR-HPV(14.03%)(P<0.001);对于女性HR-HPV感染,有症状患者检出率(17.38%)明显高于健康体检者(5.64%)(P<0.001)。结论 HPV是生殖道感染患者的重要病原,CA患者以HPV6/11型为主;健康女性对HR-HPV也有一定程度的潜在感染,定期对HPV感染进行筛查,对临床诊治具有重要价值。     

宫颈糜烂患者液基细胞学检查

目的　通过Thinprep液基细胞学检查 ,提高早期宫颈癌及宫颈癌前病变诊断率。方法　对 2 6 5例宫颈糜烂者做宫颈脱落细胞液基标本采集和阴道镜活检 ,用液基标本做薄片细胞学诊断和人乳头瘤病毒 (humanpapillomavirus,HPV)检测。细胞学诊断采用TBS分级系统 ,阳性诊断包括意义不明确的不典型鳞状细胞 (ASCUS)以上病变 ,诊断结果与阴道镜活检和HPVDNA阳性检出率对照。结果　细胞学检出SCC 4例 ,HSIL 6 1例 ,LSIL 2 3例 ,ASCUS 37例。与阴道镜活检阳性符合率分别为SCC 10 0 % (4 /4) ,HSIL 92 .4 % (6 1/6 6 ) ,LSIL 71.9% (2 3/32 )。两者阳性率比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。HPVDNA阳性检出率与细胞学分级密切相关。结论　Thinprep在宫颈癌及宫颈癌早期病变诊断中敏感性较高 ,做细胞学和HPVDNA双重检查 ,可为患者提供较准确、可靠的诊断     

实时荧光定量PCR反应检测宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒16/18型和巨细胞病毒的协同感染

目的探讨宫颈脱落细胞人乳头瘤病毒16/18型和巨细胞病毒协同感染的关系。方法采用实时荧光定量PCR反应(FQ-PCR)同时检测两种病毒的感染率。结果38例宫颈癌中检出HPV16/18型35例(阳性率92.11%),CMV11例(阳性率28.95%)。32例宫颈癌前病变(CIN)中检出HPV16/18型20例(阳性率62.50%),CMV7例(阳性率21.87%)。30例正常宫颈脱落细胞中检出HPV16/18型5例(阳性率16.67%),未检出CMV。结论宫颈脱落细胞HPV16/18型感染率随宫颈病变程度的加重而升高,且差异有显著性(P<0.05),CMV感染率随宫颈病变程度的加重而升高但差异无显著性(P>0.05),CMV仅是协同HPV16/18型感染导致宫颈癌的发生。