丹参酮ⅡA对体外兔血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的观察丹参酮ⅡA对体外兔血管平滑肌细胞（VSMC）增殖和迁移的影响，并初步探讨丹参酮ⅡA的作用机制。方法采用兔胸主动脉，用组织贴块法培养，设立空白对照组，加入不同浓度的丹参酮ⅡA共同孵育24h、48h和72h，采用MTT法观察该药对细胞增殖的影响；划痕法观测细胞迁移情况；采用流式细胞仪分析细胞周期和DNA含量；TRITC-鬼笔环肽标记F-actin，观察该药物对细胞骨架微丝结构的影响。结果①同一时间点，丹参酮ⅡA各浓度组显著抑制体外培养兔VSMC增殖和迁移。细胞的A570值（24h、48h、72h分别为r=-0．762，P=0．000；r=-0．837，P=0．000；r=-0．944，P=0．000）、迁移距离（24h、48h、72h分别为r=-0．966，P=0．000；r=-0．980，P=0．000；r=-0．966，P=0．000）与浓度呈负相关；②作用24h后，处于G0／G1期的VSMC百分比增加，细胞DNA含量减少，凋亡率增加。兔VSMC在G0／G1期所占比例（r=0．962，P=0．000）、凋亡率（r=0．982，P=0．000）和浓度呈正相关；③药物干预组和对照组相比，兔VSMC的细胞骨架结构有所改变，对照组中细胞骨架呈极性分布，定向伸展，可见伪足；药物干预组细胞骨架呈非极性分布，未见伪足。结论丹参酮ⅡA对体外兔VSMC的增殖和迁移有抑制作用，上述作用可能是通过阻滞兔VSMC通过细胞周期的限制点，使其停滞于G0／G1期，诱导细胞凋亡以及影响细胞骨架微丝结构来实现。     

GbE对受Aβ1-40作用的VSMC的保护作用

目的观察GbE对于受β-淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）作用的体外培养的血管平滑肌细胞（VSMC）的影响。方法取大鼠主动脉段,体外进行培养得到VSMC,分别加入不同浓度Aβ1-40和GbE,利用MTT法观察细胞增殖及细胞活力、流式细胞技术检测观察细胞凋亡情况。结果 Aβ1-40抑制体外培养的VSMC的增殖,此作用具有时间（24～72 h）及浓度（0～4 mg/L）依赖性;GbE可对抗Aβ1-40（2 mg/L）对VSMC增殖的抑制作用,此作用具有时间依赖性（24～72 h）,当GbE浓度〈25 mg/L时具有浓度依赖性;GbE亦可对抗Aβ1-40对VSMC的促凋亡作用。结论 GbE对于Aβ1-40所致的VSMC损伤有保护作用。     

丹参酮ⅡA抑制体外培养兔血管平滑肌细胞迁移及机制

目的观察丹参酮ⅡA对体外培养兔血管平滑肌细胞的影响；初步探讨丹参酮ⅡA影响体外兔血管平滑肌细胞迁移的可能机制。方法利用组织贴块法培养兔胸主动脉的中膜平滑肌细胞，经传代后分组培养。用划痕法在相差显微镜下观测丹参酮ⅡA对细胞迁移的影响；并采用TRITC-鬼笔环肽标记平滑肌细胞F—actin，观察该药物对细胞骨架微丝结构的影响。结果丹参酮ⅡA以时间和浓度依赖方式抑制体外培养兔血管平滑肌细胞迁移；同时，丹参酮ⅡA对兔血管平滑肌细胞的细胞骨架微丝结构具有显著影响。结论丹参酮ⅡA对体外培养兔血管平滑肌细胞的迁移有抑制作用，上述作用可能与影响细胞骨架微丝结构有关。     

miRNA-126对非小细胞肺癌细胞功能的影响及相关机制研究

目的观察miRNA-126对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡侵袭以及迁移能力的影响及相关机制。方法 2015年3-5月在辽宁省葫芦岛市中心医院实验室进行实验。将非小细胞肺癌A549细胞转染,建立稳定转染的miRNA-126组和空白对照组。采用RT-PCR检测miRNA-126基因的表达,MTT比色法检测细胞增殖能力,倒置显微镜观察细胞侵袭能力、细胞迁移能力,Western Blot检测表皮生长因了-受体(EGFR)、AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达。结果 miRNA-126转染组24 h、48 h、72 h时miRNA-126水平均高于空白对照组(t/P=15.112/0.000、8.714/0.012、7.537/0.013),而空白对照组各时间段miRNA-126的相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05);miRNA-126转染组72 h miRNA-126的相对表达量显著高于48 h和24 h(F/P=4.575/0.043)。miRNA-126转染组细胞24 h、48 h、72 h增殖率均低于空白对照组(t/P=6.280/0.000,6.804/0.000,6.401/0.000),凋亡率均高于空白对照组(t/P=19.726/0.000,22. 052/0. 000,5.170/0. 000);空白对照组各时间段的细胞增殖率和凋亡率差异无统计学意义(P> 0.05)。miRNA-126转染组72 h的细胞增殖率显著低于48 h和24 h (F/P=5.738/0.001),miRNA-126转染组72 h的细胞凋亡率显著高于48 h和24 h(F/P=2. 681/0. 045); miRNA-126转染组划痕宽度宽于空白对照组(t/P=8. 318/0.000),侵袭细胞数显著低于空白对照组(t/P=24. 394/0. 000)。miRNA-126转染组EGFR、AKT、mTOR蛋白表达量均低于空白对照组(t/P=4.093/0.000、6.325/0.000、3.061/0.000)。结论转染的miRNA-126通过调控EGFR、AKT、mTOR表达,抑制非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡、侵袭以及迁移能力。     

丹参酮ⅡA对血管平滑肌细胞CyclinD1和CDK4的表达的影响

目的探讨丹参酮ⅡA对血管平滑肌细胞CyclinD1和CDK4的表达的影响。方法建立同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔VSMC增殖模型,加入丹参酮ⅡA共同培养48 h,用流式细胞仪分析血管平滑肌细胞(VSMC)细胞周期变化及细胞周期调控因子CyclinD1和CDK4的表达。结果丹参酮ⅡA组和空白对照组各期细胞数比较无统计学意义(P0.05);丹参酮ⅡA组G0/G1期细胞数明显高于HCY组,S期、G2/M期细胞数明显少于HCY组(t=6.700~12.063,P0.05);丹参酮ⅡA组细胞CyclinD1、CDK4表达均显著低于HCY组(t=7.922、3.936,P0.05)。结论丹参酮ⅡA具有拮抗VSMC增殖的作用,有利于降低血管平滑肌细胞CyclinD1及CDK4的表达。     

β-细辛醚对3种肿瘤细胞增殖的抑制作用

【目的】观察β-细辛醚对A549、PC3、PC9-R 3种肿瘤细胞增殖活力、周期、凋亡及迁移的作用,为β-细辛醚应用于肿瘤治疗提供实验依据。【方法】将不同浓度的β-细辛醚分别作用于A549、PC3、PC9-R肿瘤细胞24 h、48 h及72 h后,采用CCK-8法检测各细胞光密度(D)值,计算细胞增殖活力,采用流式细胞术测定各细胞DNA周期及细胞凋亡率,采用Transwell小室检测细胞迁移。【结果】不同浓度β-细辛醚作用A549、PC3、PC9-R肿瘤细胞24 h、48 h及72 h后,与正常对照组比较,3种细胞生长均有下降趋势,呈浓度依赖性和时间依赖性,细胞周期均表现为G0/G1期细胞比例显著上升,S期细胞比例和增殖指数显著降低,细胞凋亡率显著增高,细胞迁移显著减少(均P0.05或P0.01)。【结论】β-细辛醚可抑制A549、PC3、PC9-R肿瘤细胞的生长,阻滞细胞从G0/G1期进入S期,抑制DNA的合成,促进细胞凋亡,抑制细胞迁移。     

同型半胱氨酸诱导人血管平滑肌细胞增殖与凋亡

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响.方法:采用组织贴块法体外培养人VSMC,MTT法检测人VSMC增殖,流式细胞术检测人VSMC凋亡.结果:体外培养的人VSMC在终浓度为100,200,500和1000 μmol/L Hcy的培养液中孵育24 h后的A值均高于对照组(P<0.05),表明Hcy可诱导人VSMC增殖,而且呈浓度依赖性诱导人VSMC增殖(r=0.94,P<0.01).终浓度为200,500和1000 μmol/L Hcy时细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),表明较高浓度的Hcy可以诱导人VSMC凋亡,而且这一效应呈浓度依赖性(r=0.85,P<0.05).结论:Hcy可以诱导VSMC增殖和凋亡.     

三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：研究三油酸甘油酯对大鼠主动脉血管平滑肌细胞（rat aortic smooth muscle cells,RASMC）增殖的影响。方法：采用体外细胞培养、油红染色观察细胞形态的变化;MTT法、流式细胞术检测三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响。结果：油红染色结果显示三油酸甘油酯使RASMC失去原来长梭形外观,胞体变大;三油酸甘油酯浓度越高变化越明显,2 000 mg/dl已无正常细胞存在。三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响与作用时间及三油酸甘油酯的浓度密切相关。在24 h≤125 mg/dl,表现为抑制增殖作用;24 h≥250 mg/dl及48~72 h≤500 mg/dl,表现为促进增殖作用,其中24 h,1 000 mg/dl时增殖率最大约为115.9%,与对照组相比差异有统计学意义（t=-3.74,P=0.002）;48~72 h>500 mg/dl及96~144 h,62.5~2 000 mg/dl表现为抑制增殖作用,其中,48、72 h这2个时间点在2 000 mg/dl的增殖率分别较对照组下降42.7%（t=13.08,P=0.000）和65%（t=129.53,P=0.000）,与对照组相比差异有统计学意义。流式周期结果表明,三油酸甘油酯组G0/G1期的百分比较对照组降低,而S期百分比增高。流式凋亡结果为,除了24 h和144 h外,其余各时间点的凋亡率较对照组降低,其中72 h及120 h的凋亡率分别为1.1%（F=14.39,P=0.019）,0.7%（F=9.96,P=0.034）,与对照组相比差异有统计学意义。另外,细胞增殖与凋亡的变化方向一致。结论：三油酸甘油酯对RASMC增殖的影响是双向的,即在低浓度短时间及高浓度长时间的抑制增殖作用,在中间合适的浓度及时间表现为促进增殖作用;细胞增殖周期试验结果也支持三油酸甘油酯具有一定的促进或抑制大鼠主动脉血管平滑肌细胞增殖作用;高浓度脂质对细胞的直接毒性作用、诱导细胞的增殖或凋亡作用,可能共同参与调控血管平滑肌细胞的数目及功能。     

肉桂氨茴酸对血管平滑肌细胞生长及周期蛋白P21和P53表达的影响

目的探讨肉桂氨茴酸对血管平滑肌细胞(VSMC)生长及周期蛋白P21和P53表达的影响。方法以培养的兔主动脉VSMC株为模型,应用活细胞计数进行细胞增殖和迁移检测,计算半数抑制浓度(IC50)。采用流式细胞仪分析肉桂氨菌酸作用24h后VSMC周期的变化和细胞凋亡率,以western印迹法检测细胞周期蛋白P21和P53的表达。结果20%的胎牛血清条件下,肉桂氨茴酸显著抑制VSMC的增殖和迁移,在9．6～305．8/μmol/L范围内,随剂量增加其抑制率增加。IC-(50)为75．6/μmol/L。IC-(50)的肉桂氨茴酸作用VSMC 24h后,G1期细胞数占24%,显著低于作用前的51%(P＜0．01),形成明显的亚二倍体峰,细胞凋亡率为36．7%。经IC_(50)的肉桂氨茴酸作用VSMC 24h后出现明显的P21和P53条带,而空白对照组无表达。结论肉桂氨茴酸浓度依赖性抑制VSMC的生长,其抑制作用主要通过细胞凋亡的方式。肉桂氨茴酸抑制VSMC增殖与细胞周期蛋白P21和P53的表达有关。     

PEDF对人肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨不同浓度色素上皮衍生因子( PEDF)作用不同时间对体外培养的人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度(0、80、160、320、640 nmol/L)的重组人PEDF蛋白对体外培养的人肺腺癌细胞株A549进行干预,在处理24、48、72 h后,分别用MTT法检测PEDF对A549细胞增殖的抑制率并比较;在作用48 h后,以流式细胞仪检测技术计算、分析 A549细胞凋亡率。结果不同浓度PEDF(0、80、160、320、640 nmol/ L)干预A549细胞相同作用时间(24、48、72 h)情况下,随着PEDF 浓度的增加,PEDF 对 A549细胞的增殖抑制率递增(P <0.05);相同PEDF 浓度(80、160、320、640 nmol/ L)情况下,除了80、160 nmol/ L PEDF 作用24 h 和48 h 的细胞增殖抑制率间差异无统计学意义外,随着PEDF 作用时间的延长,PEDF 对A549细胞的增殖抑制率也基本呈递增趋势(P <0.05)。上述不同浓度的PEDF 处理A549细胞48 h,细胞凋亡率随着PEDF 浓度的升高呈递增趋势(P <0.05)。结论摇PEDF 在体外能抑制人肺腺癌细胞株A549的增殖并诱导其凋亡。PEDF 抑制细胞增殖作用可能和PEDF 浓度及作用时间有关,PEDF 诱导细胞凋亡作用的强弱也与PEDF 浓度有一定关系。     

塞来昔布对高表达Her-2/neu的人乳腺癌SKBr3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨环氧合酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对人乳腺癌细胞SKB r3的抑制增殖及诱导凋亡作用。方法4种不同浓度的塞来昔布处理乳腺癌细胞系SKB r3细胞24、48 h,MTT法测定24、48 h后SKB r3细胞的增殖活性,流式细胞仪（FCM）检测48 h后各浓度塞来昔布诱导细胞凋亡情况及对细胞周期的影响。结果与对照组相比,塞来昔布以时间、剂量依赖性方式抑制SKB r3细胞增殖（P〈0.05）。作用48 h后,塞来昔布诱导SKB r3细胞凋亡并阻断了细胞周期进展,凋亡率随塞来昔布浓度的增加而增加（P〈0.05）,且随着药物浓度的增加,G0/G1期细胞比例逐渐增加、S期及G2/M期细胞比例逐渐下降（P（0.05）。结论塞来昔布抑制高表达Her-2/neu的SKB r3细胞的增殖,诱导其凋亡。     

去甲斑蝥素体外抑制NCI-H446细胞迁移、增殖及促进凋亡

目的 研究去甲斑蝥素(Norcantharidin,NCTD)体外抑制人小细胞肺癌H446细胞迁移、增殖和诱导其凋亡作用.方法 以不同浓度NCTD处理H446细胞24h后,采用细胞划痕试验检测NCTD对H446细胞侧向迁移能力的影响;采用细胞计数检测对体外培养的H446细胞的抑制增殖作用;选用不同浓度的NCTD作用H446细胞48 h后,以Hoechst33258染色观察H446细胞形态的变化,研究NCTD对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的诱导作用.结果 经较高浓度的NCTD干预24h后,H446细胞的侧向迁移速度明显减慢(P＜0.01).细胞计数结果显示NCTD作用于H446细胞后其细胞群体倍增时间延长.NCTD作用H446细胞48 h后,部分凋亡细胞出现染色质凝集、核固缩、核碎裂等形态学改变,细胞凋亡率增加(P＜0.01).结论 NCTD能明显影响人小细胞肺癌H446细胞迁移、抑制其增殖并诱导其发生凋亡.     

丹参酮Ⅰ对HepG2细胞抑制作用的体外实验研究

目的　通过丹参酮Ⅰ (TanshinoneⅠ )对人肝癌细胞 (HepG2 )的体外实验 ,研究丹参酮Ⅰ抗肿瘤作用及作用机制。方法　HepG2细胞培养液中加入不同浓度的丹参酮Ⅰ ,培养 72h ,观察HepG2细胞的增殖率 ;倒置显微镜观察HepG2细胞的形态变化 ;流动血细胞计数 (FCM)检测HepG2细胞周期及凋亡率 ;免疫细胞化学检测HepG2细胞的增殖凋亡调控相关基因bax、bcl 2的蛋白表达。结果　丹参酮Ⅰ抑制HepG2细胞生长 ,阻滞HepG2细胞周期于G0 G1 期并诱导细胞凋亡 ;丹参酮Ⅰ通过下调bcl 2基因表达 (P <0 .0 1)、上调bax基因表达 (P <0 .0 1)诱导HepG2细胞凋亡。结论　丹参酮Ⅰ具有抗肿瘤活性 ,其作用机制之一是诱导细胞凋亡。     

PDTC对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1表达的影响

目的:观察NF-κB特异性抑制剂PDTC对人肺腺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1(AEG-1)表达的影响。方法:用不同浓度(25、50、100、200μmol/L)的PDTC分别处理A549细胞,对照组不给PDTC。应用MTT法检测处理24、48、72h后细胞增殖抑制率,流式细胞术检测处理24h后细胞周期的变化,Ho-echst33342荧光染色检测处理24h后细胞的凋亡情况,RT-PCR和Westernblot检测处理24h后细胞AEG-1mRNA和蛋白的表达。结果:经PDTC处理的A549细胞增殖明显受抑,呈时间和浓度依赖性(F时间=531.981,F浓度=388.475,P<0.05);与对照组相比,PDTC处理24h后A549细胞G0/G1期细胞比例上升(P<0.05),细胞形态出现明显凋亡改变;随着PDTC浓度的增加,癌细胞内AEG-1mRNA和蛋白的表达水平降低(F=275.162、59.473,P<0.05)。结论:PDTC可抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与PDTC抑制NF-κB、AEG-1的表达有关。     

环孢素A对人胃癌BGC823细胞增殖与凋亡的影响

目的 研究环孢素A(CsA)对人胃癌BGC823细胞的生长增殖以及凋亡的影响.方法 MTT法检测不同浓度CsA处理24、48、72 h后对BGC823细胞增殖抑制率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期、活性氧(ROS)含量及细胞线粒体膜电位(△Ψm)改变;Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率.结果 CsA在5～20 μmol/L浓度范围内和24 ～ 72 h时间范围对BGC823细胞增殖有显著抑制作用,与药物剂量、作用时间呈现量效和时效的依赖性;FCM结果显示CsA浓度依耐性使细胞周期阻滞于G0/G1期,与对照组相比差异有统计学意义(F=33.45,P＜0.05,P＜0.01);细胞凋亡率随CsA作用浓度增加而增加;5～ 20μmol/L CsA浓度范围细胞内ROS含量显著增加(F =46.17,P＜0.01),细胞线粒体膜电位明显降低.结论 CsA对BGC823细胞有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与阻滞细胞生长周期、细胞内ROS含量增加以及线粒体膜电位下降相关.     

PI3Kp110β抑制剂对人舌鳞状细胞癌CAL27细胞增殖与凋亡的影响

目的观察不同浓度的选择性PI3Kp110β抑制剂KIN-193对人舌鳞状细胞癌增殖及凋亡的影响。方法 2018年1-7月于武汉大学人民医院中心实验室进行实验。用不同浓度KIN-193作用于CAL27细胞,倒置显微镜观察KIN-193干预后细胞形态变化;TUNEL法检测不同浓度KIN-193作用48h后CAL27细胞的凋亡情况;CCK-8法检测不同时间药物干预后CAL27细胞的存活变化;克隆形成实验检测不同浓度下CAL27细胞的克隆形成能力;EdU法检测不同浓度KIN-193作用48h后CAL27细胞的增殖能力;Western Blot检测不同药物浓度KIN-193作用72 h后CAL27细胞PI3Kp110β蛋白的表达变化情况。结果与对照组(KIN-193为0μmol/L)比较,在倒置显微镜下CAL27细胞形态明显改变,细胞数量明显减少,细胞边界模糊不清,漂浮死亡细胞增多;TUNEL法、CCK-8法、克隆形成实验及EdU实验结果分别表明,CAL27细胞的凋亡呈浓度依赖性增高(F=7. 428,P=0. 000),细胞活力被显著抑制(24 h、48 h、72 h的F/P=6.682/0.001、14.428/0.000、38.549/0.000),CAL-27细胞的克隆形成数量减少(F=75. 141,P=0. 000)及CAL27细胞增殖能力减弱(F=6. 885,=0.000); Western Blot显示PI3Kp110β蛋白表达明显减少(F=4.312,P=0.04)。结论选择性PI3Kp110β抑制剂KIN-193对CAL27细胞具有显著的增殖抑制效果,同时能够促进细胞凋亡。其原理主要与通过抑制PI3K分子的p110β亚型的表达有关。     

尼米舒利对人肺腺癌A549细胞株COX-2表达及细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨尼米舒利(NIM)对人肺腺癌A549细胞株环氧化酶-2(COX-2)表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法:RT-PCR法、Western blot法及流式细胞术分别检测对照组和NIM干预组(NIM 25 μmol/L、50 μmol/L、100μmol/L、200 μmol/L干预48 h)A549细胞COX-2 mRNA表达、蛋白表达、细胞周期及凋亡率的变化;MTT法检测各组干预24 h、48 h、72 h后A549细胞增殖的抑制率。结果:NIM呈浓度依赖性抑制A549细胞COX-2 mRNA及蛋白表达(r分别为-0.934、-0.923,P均<0.01);NIM可引起细胞周期变化,随着干预浓度的增大,G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,G2/M期细胞变化不明显;NIM可促进A549细胞凋亡,其凋亡率呈浓度依赖性(r=0.994,P<0.01);NIM对A549细胞的增殖有抑制作用,随着干预浓度的增大和时间延长,抑制率增加。结论:NIM对A549细胞COX-2表达的抑制可能是细胞增殖受抑、凋亡增加的重要原因。     

苦参碱诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡作用

目的:研究不同浓度的苦参碱(Mat)对宫颈癌Hela细胞株的体外增殖抑制作用。方法:采用体外细胞培养技术,以不同浓度的Mat作用于宫颈癌Hela细胞,相同条件下培养24h、48h、72h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定Mat对Hela细胞的增殖抑制率;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率。结果:不同浓度Mat在体外均能不同程度抑制宫颈癌Hela细胞增殖,并且作用呈现时间-剂量依赖性;苦参碱诱导Hela细胞凋亡率增加。结论:Mat有抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,诱导其凋亡作用。     

丹参酮ⅡA对白血病 K562 细胞的体外诱导凋亡作用研究

目的研究丹参酮ⅡA对人急性白血病 K562 细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法以不同浓度的丹参酮ⅡA (10～50 μmol/L) 作用于体外培养的 K562 细胞 24、48、72 h,应用 MTT 法检测细胞生长抑制率,流式细胞术 (FCM) 检测细胞凋亡率,并对 50 μmol/L 的药物作用不同时间后亚 G1 期细胞进行检测。应用免疫印迹法 (Western blotting) 检测 Caspase-3 及其裂解底物多聚 ADP-核糖聚合酶 (PARP) 的表达水平,并对凋亡调节蛋白 Fas、Bax、Bcl-2、Bak、Bid 的表达水平进行检测。结果20 μmol/L 以上的丹参酮ⅡA可显著抑制 K562 细胞的生长、诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系;FCM 检测结果表明 50 μmol/L 丹参酮ⅡA 作用不同时间后,亚 G1 期细胞 (凋亡细胞) 逐渐增多。20 μmol/L 以上的丹参酮ⅡA 作用 48 h 后 Caspase-3 逐渐被活化出现 17 000 的亚单位,Caspase-3 的作用底物 PARP 被活化裂解出现 89 000 的亚单位片段,而且 Caspase-3 的激活以及 PARP 的裂解可被 Caspase-3 的特异性抑制剂 z-DEVD-FMK 所阻断,促凋亡蛋白 Fas 以及 Bax 的表达水平明显升高,而凋亡抑制蛋白 Bcl-2 及其他促凋亡蛋白 Bak 和 Bid 的表达水平则无明显变化。结论丹参酮ⅡA可以通过诱导白血病 K562 细胞凋亡而发挥体外抗白血病作用,上调促凋亡蛋白 Fas 和 Bax 的表达水平及激活 Caspase-3 可能是丹参酮ⅡA诱导白血病 K562 细胞发生凋亡的重要作用机制之一。     

环孢素对体外培养人系膜细胞增殖、凋亡及细胞周期影响的研究

目的 观察环孢素A对系膜细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 对体外培养的人肾小球系膜细胞分别加入0.01,0.1,1,2,5 μmol/L的环孢素A,药物作用24 h,48 h,72 h后用MTT法检测细胞增殖,药物作用48 h后采用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡,同时每种方法均设立对照组(不加药物干预组).结果 ①环孢素A能时间、剂量依赖性地抑制系膜细胞增殖,以72 h抑制作用最为明显;不同药物浓度在作用24 h,48 h,72 h后,系膜细胞增殖与对照相比差异均具有统计学意义(P<0.05);②环孢素A可阻滞细胞周期,使G0/G1期细胞增多,S期细胞减少,且随着药物浓度的增加,G0/G1期所占百分比逐渐增高,S期所占百分比逐渐降低,且其差异与对照相比具有统计学意义(P<0.05);③高浓度环孢素A可促进系膜细胞的凋亡.结论 环孢素A可显著抑制系膜细胞增殖,使系膜细胞阻滞于G0/G1期;并且环孢素A有诱导系膜细胞凋亡的作用.