白细胞靶向超声造影显像无创评价犬心肌缺血再灌注损伤

目的 用白细胞靶向超声造影剂无创评价犬心肌缺血再灌注（ischemia-reperfusion，I-R）损伤的范围及严重程度。 方法 将自制“表活显”（self-made surfactant fluorocarbon-filled microbubbles，SFCMB）与磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine，PS）结合，制备成白细胞靶向超声造影剂（SFCMB-PS），在实时心脏超声造影（myocardial contrast echocardiography，MCE）条件下，用SFCMB-PS对9只犬心肌I-R模型进行延迟心肌显像。实验结束后，在心肌I-R损伤处取组织块立即进行髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性测定。 结果 延迟心肌显像可见缺血心肌部位有明显充盈缺损，而再灌注后心肌的造影剂回声明显增强。定量分析结果表明I-R损伤心肌部位声像图的灰阶强度与MPO活性有明显的相关关系（r=0．776，P〈0．05）。 结论 用白细胞靶向超声造影剂评价心肌I-R损伤有明显的临床价值。     

超声组织定征视频法监控兔缺血再灌注肾靶向声学造影实验研究

目的定量评价自制靶向超声造影剂对兔缺血再灌注肾显像的靶向增强效果。方法将磷脂酰丝氨酸(phos-phatidylserine,PS)加在自制表面活性剂类超声造影剂微泡壁上,用有和无PS造影剂分别对6只肾缺血再灌注损伤兔进行声学造影,谐波显像观察肾实质回声的变化,用国产“DFY-2型超声图像定量分析诊断仪”对兔肾实质灰阶(GS)值进行动态定量分析。结果造影后,有和无PS组GS峰值分别高于造影前(P<0.001和P<0.05);有PS组GS峰值高于无PS组(P<0.001)。结论超声组织定征视频法可定量评价兔缺血再灌注肾靶向声学造影的增强效果。     

携抗P-selectin靶向超声造影剂犬体内超声分子成像

目的 制备携抗P-selectin靶向超声造影剂,探讨其评价心肌缺血再灌注损伤的超声分子成像效果。方法 采用“生物素-亲和素”桥接法制备携抗P-selectin靶向超声造影剂,建立犬心肌缺血再灌注模型,分别注入携抗P-selectin靶向超声造影剂（MBp）和空白超声造影剂（MBc）,行心肌声学造影检查,采图、存盘。应用DFY型超声图像定量分析诊断仪中的彩色编码技术对存储的图像进行脱机处理,观察MBp体内超声分子成像效果。结果 成功制备携抗P-selectin靶向超声造影剂及建立犬心肌缺血再灌注模型。彩色编码图像示MBp行心肌声学造影可见缺血再灌注区心肌显著增强;MBc于缺血再灌注区心肌造影无明显增强。结论 应用携抗P-selectin靶向超声造影剂行心肌声学造影检查能准确检测再灌注治疗后犬心肌缺血再灌注损伤。     

犬缺血再灌注心肌靶向超声造影图像的组织定征量化研究

目的用超声组织定征量化分析白细胞靶向超声造影剂对犬心肌缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I-R)损伤声像图。方法将自制超声微泡造影剂"表活显"(self-madesurfactantfluorocarbon-filledmicrobubbles,SFCMB)与磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine,PS)结合,制备成白细胞靶向超声微泡造影剂(SFCMB-PS),在实时心脏超声造影条件下,用SFCMB-PS对9只犬心肌I-R模型进行延迟心肌显像。实验结束后,在心肌I-R损伤处取组织块立即进行髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性测定。超声组织定征定量分析缺血再灌注损伤心肌。结果I-R损伤心肌声像图的回声强度[(22.56±4.62)GS]明显增高,与正常心肌[(16.57±3.82)GS]和缺血心肌[(5.00±2.58)GS]比较,差异均有统计学意义(P<0.01),而且其与MPO活性有良好的相关关系(r=0.776,P<0.05)。结论超声组织定征定量分析缺血再灌注心肌靶向超声显像能够较准确、客观地反映再灌注损伤的严重程度。     

牛磺酸对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的影响

目的：睾丸扭转复位后的损伤是一种缺血再灌注损伤。本研究旨在探讨牛磺酸对睾丸缺血再灌注损伤的影响。方法60只成年雄性SD大鼠随机分为三组，对照组作左侧睾丸假手术；缺血再灌注组作左侧睾丸扭转，2h后复位；治疗组与缺血再灌注组用一样的外科手术，治疗组术后给予牛磺酸静脉注射，复位后4h或3个月行睾丸切除术，分析睾丸髓过氧化物酶活性（反映中性粒细胞数目的指标）、丙二醛水平（活性氧标志）和睾丸生精功能。结果单侧睾丸扭转复位引起该侧睾丸髓过氧化物酶活性、丙二醛水平明显升高，睾丸生精功能显著降低，牛磺酸治疗后睾丸髓过氧化物酶活性和丙二醛水平得到降低，睾丸生精功能得到显著提高。结论牛磺酸对睾丸缺血再灌注损伤具有明显的保护效应，该效应可能与减少睾丸内中性粒细胞数目和活性氧产生有关。     

携Sialyl Lewis^X超声微泡靶向探查缺血心肌的炎症分子“印记”

目的探讨应用靶向超声分子成像探查心肌缺血再灌注损伤炎症“印记”的可行性。方法采用“亲和素-生物素”桥接法构建携唾液酸化路易斯（Sibyl Lewis^X）靶向超声微泡（MBsLex）和同型对照微泡（MBc）。10只心肌缺血再灌注小鼠随机先后注入MBsLex和MBc（间隔30min）,分别于注入5min后行心肌对比超声检查,测量心肌缺血区和非缺血区的声强度（Ⅵ）。结果对比超声图像显示MBsLex组缺血区心肌造影见显著增强,Ⅵ值高达23．52±1．08,而在MBc组缺血区心肌造影仅见轻度增强,Ⅵ缸为9．81±0．41,两者之间差异有统计学意义（P〈0．05）。但无论MBsLex组还是MBc组,缺血区心肌Ⅵ值均明显高于非缺血区心肌Ⅵ值（P〈0．05）。两组非缺血区心肌之间Ⅵ值未见明显差异。结论应用携sLex超声微泡行对比超声能够靶向探查心肌缺血再灌注损伤的炎症“印记”。     

超声造影对兔肾缺血再灌注损伤的实验研究

目的 评价灰阶超声造影及其量化分析技术在兔肾缺血再灌注损伤皮质显像中的诊断价值.方法 建立兔肾缺血再灌注模型,15只家兔被分为术前对照I_0组,术后不同缺血时间组(I_1-I_3),用超声造影观察各组肾灌注模式并分析灌注峰值时间 (TP)、灌注峰值强度(A)、曲线上升斜率(β)、曲线下面积(AUC).结果 随着缺血时间增加,超声造影显示肾皮质灌注回声逐渐变弱.灌注参数值中TP呈增加趋势,β逐渐降低,AUC先升后降,A无明显变化;与对照组比较,TP、 AUC、β、A均具有显著差异.结论 超声造影及其量化分析技术可以无创地判断肾缺血再灌注损伤程度.     

超声造影彩色显像评估肾血流灌注的实验研究

目的评价超声造影彩色显像评估肾实质血流灌注的价值。方法20只兔~＇t-N静脉注射超声造影剂。造影前后用二维、彩色多普勒能量显像和彩色多普勒血流显像连续采集肾增强图像。定量分析测定二维及彩色增强显像的视频密度和彩色面积。得到二维显像和彩色谐波能量显像的时间一强度曲线。结果造影后彩色谐波能量图的视频密度为199．27±12．38，彩色增强面积为（82．38±9．92）％，均高于其他组（P〈0．05）。彩色能量谐波造影较二维谐波造影增强的时间长且强度大。结论造影增强彩色显像可有效地观察肾脏血流灌注特征。     

脊髓再灌注损伤后细胞间黏附分子1及白细胞介素1β表达的变化

背景：目前国外有探讨细胞因子和黏附分子在缺血再灌注损伤时的表达，但均未涉及内源性细胞因子和微血管内皮细胞表面黏附分子在损伤后相关性的研究，对内源性白细胞介素1在损伤中的表达也仅限于mRNA水平。 目的：探讨细胞间黏附分子1及其调节因子白细胞介素1β的表达在脊髓缺血再灌注损伤中作用机制。 设计：随机分组设计、动物实验。 单位：吉林大学体育学院运动医学系。 材料：实验于2003—03／2004—01在吉林大学中日联谊医院中心实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠77只，随机数字表法分为正常对照组7只，单纯缺血组14只和缺血再灌注组56只。单纯缺血组：阻断血流30min7只，阻断血流60min7只；缺血再灌注组：根据脊髓缺血30min后再灌注30，60min，2，4，6，9，12，24h又分为8个时相点，每个时相点7只。 方法：采用Zivin法复制脊髓缺血再灌注损伤动物模型。采用反转录-聚合酶链反应、免疫组织化学及免疫荧光激光共聚焦扫描显微镜技术检测脊髓缺血再灌注损伤后血管内皮细胞间黏附分子1 mRNA和白细胞介素1 BmRNA表达量。 主要观察指标：白细胞介素1βmRNA表达、白细胞介素1多肽活性、细胞间黏附分子1mRNA和蛋白的表达、髓过氧化物酶活性。 结果：纳入动物77只，均进入结果分析。①缺血再灌注组白细胞介素1βmRNA（A值）表达量明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著（分别为1．07&;#177;0．33，0．60&;#177;0．22，0．57&;#177;0．12，t=3．7517，11．8526，P〈0．01）。②缺血再灌注组白细胞介素1多肽活性（A值）明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（33．7&;#177;3．2），（23．8&;#177;4．5），（23．1&;#177;2．1），t=2．7988，9．9627，P〈0．01]。③缺血再灌注组细胞间黏附分子1mRNA（A值）明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为0．94&;#177;0．12，0．52&;#177;0．11，0．51&;#177;0．10，t=0．3270，6．1274，P〈0．01]。④缺血再灌注4，6，12h各组细胞间黏附分子1蛋白的表达明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（316．90&;#177;26．00），（361．40&;#177;18．00），（406．00&;#177;23．00），（164．21&;#177;2．00），（180．00&;#177;32．00）μg／L，t=1．4103，9．1193，P〈0．01]。⑤缺血再灌注12h组髓过氧化物酶活性明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（15．00&;#177;2．00），（750&;#177;1．67），（6．67&;#177;1．00）nkat／g,t=3，0122,P〈0．01]。 结论：再灌注损伤后脊髓内炎症反应是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础，在继发性脊髓损伤过程中起到重要作用。     

心肌超声造影结合计算机灰阶分析技术对兔心肌灌注的研究

目的探讨心肌超声造影（MCE）联合计算机灰阶分析技术定量评价心肌灌注的应用价值。方法30只兔根据阻断和再灌注冠状动脉左室支时间不同分为两组：阻断30 min再灌注60 min（Ⅰ组）和阻断120 min再灌注60 min（Ⅱ组）。于阻断时和再灌注后行MCE,造影图像经自制计算机辅助灰阶分析软件处理后,自动得出每个节段心肌的标化灰阶造影剂密度（CI）,并对心肌灌注进行彩色编码。根据心肌灌注缺损（MPD）和异常的彩色编码区分别计算出危险心肌和梗死心肌面积,分别与荧光微球染色和氯化三苯基四氮唑染色（TTC）结果对照分析。结果再灌注后,Ⅱ组危险节段的标化CI值比非危险节段明显减低（P〈0.01）,而Ⅰ组危险节段的标化CI值与非危险节段间无明显差异。以标化灰阶CI为-70 pix为截断值,识别梗死节段的敏感性为95%,特异性87%。阻断时,MPD和异常彩色编码测量的危险心肌面积与荧光染色呈正相关（r=0.84,P=0.003和r=0.91,P〈0.001）;再灌注时,MPD和异常彩色编码测量的梗死心肌面积与TTC结果呈正相关（r=0.75,P〈0.001和r=0.89,P〈0.001）。结论心肌超声造影联合计算机灰阶分析技术可以定量评估心肌灌注,识别危险和梗死心肌区域。     

造影多普勒超声显像检测兔肝VX2肿瘤血液供给与肿瘤血管生成相关性的实验研究

目的探讨造影多普勒超声检测兔肝VX2肿瘤血流及其与肿瘤血管生成的关系。方法选用肝VX2肿瘤模型兔8只,注射自制声学造影剂后,应用彩色及能量多普勒观察肿瘤病灶周边和内部血流信号的变化、分布和特征;采用免疫组化技术检测肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)表达,并进行半定量分级。结果造影后肿瘤内部血流的显示率明显增加,尤以能量多普勒成像(PDI)变化最为明显;免疫组化显示血管内膜生长因子(VEGF)弥漫性表达于癌巢中,表达阳性率52%～85%。统计结果表明,造影能量多普勒显像检测的血管阳性反应面积百分率分级与VEGF表达程度显著相关(r=0.764,P<0.05)。结论应用多普勒超声造影显像技术,有助于评估肿瘤血管生成。     

声学造影定量评价急性肾功能衰竭 肾皮质血流灌注的实验研究

目的　探讨应用自制白蛋白氟碳声学造影剂和声学密度定量技术定量评价急性肾功能衰竭 (ARF)肾皮质血流灌注的可行性。方法　兔后腿肌注 5 0 %甘油 (12～ 15ml/kg) ,建立ARF动物模型。分别于注射甘油前和注射甘油后第三天应用声学造影剂和声学密度定量 (AD)技术检查肾脏 ,观察造影增强效果 ,测定肾皮质造影前后峰值密度 (PI)、曲线下面积 (AUC)和平均通过时间 (MTT)。结果　正常肾脏造影增强效果明显好于ARF肾 ,二者视觉判断差异显著 ;正常肾和ARF肾造影后肾皮质PI、AUC均比造影前明显增加 ,但ARF肾皮质造影后PI、AUC却低于正常肾皮质造影后PI、AUC(P<0 .0 1) ,MTT则变化不大。结论　急性肾小管坏死性肾衰竭时 ,由于肾皮质血流灌注减少 ,引起造影后PI、AUC等有关反映血流灌注的参数也随之下降 ,与正常肾脏差异显著。因此 ,采用经静脉声学造影和声学密度定量技术 ,能够对ARF时肾皮质血流灌注作出定量评价。     

彩色与能量多普勒评价超声造影在兔实验性肾肿瘤中的诊断价值

目的　探讨自制超声微泡造影剂在兔实验性肾肿瘤灰阶对比以及血流显像中的作用。方法　新西兰兔14只,手术植入法建立VX2 肿瘤肾荷瘤模型。常规条件与造影条件下分别行二维超声、SonoCT、CDFI和PDI检测肾肿瘤。经耳缘静脉注射自制声学造影剂,随即以1ml生理盐水冲洗。以磁光盘记录声学造影前后的声像图变化,视频密度定量分析肾脏肿瘤结节中心、边缘与临近正常肾皮质的灰阶差值。观察造影前后肿瘤病灶的血流灌注、血管形态及半定量方法计数血管的数目。结果　超声造影后肾皮质灰阶信号显著增强,病灶呈低于肾皮质的负显影,轮廓清晰,形态较规则,内部回声不均质,病灶检出率由89.5 % (17/19)提高到10 0 % (19/19)。造影后CDFI主要是2级血流显示率增高达78.9% (15 /19) ,但总的血流显示率仍为89.4% (17/19) ;PDI则主要是3级血流改变巨大,由无升到5 7.9% (11/19) ,总的血流显示率则由89.4% (17/19)上升到10 0 % (19/19)。此种变化表现为血管由点显示变化为短棒状显示,可见多达11个病灶出现短暂的贯穿性血流。而造影前不能观察到血流的两个病灶也发现有点状的血流信号。结论　使用超声造影剂有助于提高肾脏微小病灶的检出率,深入了解病灶周边与内部的血流供应情况。造影PDI成像比CDFI成像具有更高的敏感性。     

超声造影与增强CT对兔肾VX2肿瘤时间-强度曲线的对比研究

目的通过对比声学造影与增强CT的时间-强度曲线,初步探讨本科室自制的脂质体超声造影剂的显像机理。方法采用低机械指数,常规超声频率,对14只左肾种植有VX2肿瘤的家兔进行观察,造影前显示肿瘤的最大切面,注射超声造影剂后固定探头切面10min,得到声学造影的灰阶时间-强度曲线,在48h内做CT增强的时间-密度曲线。结果肾肿瘤和肾实质声学造影和增强CT的时间曲线达峰值时间无统计学差异(P>0.05),曲线下降斜率有显著性差异(P<0.05)。结论CT和超声造影剂在肾脏内药物代谢动力学不同,通过肾脏后的CT造影剂经肾小球毛细血管滤过由肾脏排泄,而本实验室自制的超声造影剂可在体内多次循环灌注肾脏,是血池显像剂。     

自制脂质体造影剂对正常兔肝脏增强显影的早期实验研究

目的：探讨自制的脂质体造影剂对肝实的增强显像作用。方法：10只健康家兔经耳缘静脉团注0．01ml/kg的自制脂质体造影剂，测量造影前后肝实质及下腔静脉二维超声图像的灰阶值，并描记出肝实质显像的时间一强度曲线。结果：自制的脂质体造影剂能使肝实质显像明显增强，且增强时间长，高峰持续时间长达50分钟。结论：自制的脂质体造影剂能长时间显著增强肝脏的实质显像，其机理值得进一步研究。     

自制脂膜氟碳声学造影剂增强兔颅内肿瘤彩色血流显像的实验研究

目的 观察自制脂膜氟碳声学造影“脂氟显”对家兔颅内肿瘤彩色血流信号显像的增强作用。方法 5只颅内种植VX2肿瘤的家兔经耳缘静脉团注0．01ml/kg“脂氟显”，动态观察颅内肿瘤彩色血流显像的增强效果。结果“脂氟显”对家兔颅内肿瘤彩色血流显像有明显增强效果，且持续时间长。结论 “脂氟显”能明显、长时间地增强家兔颅内肿瘤的彩色血流显像，有助于了解颅内占位情况。     

正常兔腹主动脉、肾动脉声学造影的实验研究

目的 探讨动脉声学造影的价值和可行性。为声学造影剂在大、中血管中的临床应用提供理论依据。方法 正常大白兔5只，耳缘静脉注射自制脂膜氟烷超声造影剂“脂氟显”观测腹主动脉、肾动脉二维形态及彩色多普勒血流显像，对照分析造影前、后检查结果。结果 “脂氟显”造影剂在腹主动脉、肾动脉中平均显影时间为60min；造影前腹主动脉内膜显示不清，造影后回声增强，内膜线明亮清晰；造影后肾动脉彩色血流信号明显增多，多普勒视频密度与造影前相比有显著差异。结论 造影剂可显著改善大、中动脉二维、彩色血流显像，动脉声学造影切实可行。     

预先静脉注射维生素C对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨预先静脉注射维生素C注射液对免脊髓缺血再灌注损伤的作用,并为其临床应用提供依据。方法：30只成年雄性家兔随机分成假手术组（A组）、缺血对照组（B组）、维生素c组（c组）各10只。A组仅松套腹主动脉;B组阻断左肾动脉下腹主动脉40min后再灌注4d,建立脊髓缺血再灌注损伤模型;C组于阻断腹主动脉前15min一次性静脉注射维生素c注射液0．5g／kg,其余操作同B组。于缺血即刻,再灌注即刻、2h、4h、8h、16h测定血清丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;于再灌注24h、48h和96h采用Tarlov评分评定后肢神经功能;于再灌注96h观察脊髓组织病理学改变。结果：缺血再灌注各时点,家兔血清MDA含量：A组〈C组〈B组;SOD活性：A组〉c组〉B组;B组和c组间差异有统计学意义（P％0．05）。于各评定时间点,A组家兔无瘫痪,B组10只均完全性瘫痪,C组仅3只完全性瘫痪,B组和C组间差异有统计学意义（P〈0．05）。于再灌注96h与B组比较,C组家兔脊髓前角正常神经细胞数较多,凋亡神经元较少（P〈0．05）。结论：预先静脉注射维生素C对免脊髓缺血再灌注损伤有较好的保护作用。