内皮抑素抑制卵巢癌细胞生长的初步研究

目的：内皮抑素是一种特异性血管内皮生长抑制因子,本研究目的在于探讨人内皮抑素对卵巢癌SKOV3细胞生长的抑制作用及其机制。方法：MTT法观测内皮抑素对SKOV3细胞的生长抑制作用;透射电镜观察内皮抑素处理SKOV3细胞后细胞的凋亡情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期;RT-PCR法检测内皮抑素处理SKOV3细胞后凋亡调控基因bcl-2和baxmRNA的表达。结果：内皮抑素具有体外抑制SK-OV3细胞增殖的作用,15μg/ml内皮抑素组的A490值（0.454）明显低于PBS对照组（0.686）（P〈0.01）;内皮抑素能诱导SKOV3细胞凋亡;内皮抑素对SKOV3细胞中bcl-2和bax的表达无明显改变;结论：人内皮抑素具有抑制SKOV3细胞生长的作用,其机制可能与诱发细胞凋亡相关。     

内皮抑素抑制SKOV3细胞生长及其在裸鼠皮下移植瘤中的作用机制

目的:探讨内皮抑素对卵巢癌SKOV3细胞及其荷瘤鼠卵巢癌组织的生长作用及机制。方法:MTT法观测内皮抑素对体外SKOV3细胞的抑制作用,透射电镜观察细胞凋亡、免疫细胞化学检测SKOV3;细胞中bcl-2和bax蛋白表达;将SKOV3细胞移植至裸鼠皮下,观察内皮抑素对皮下移植瘤生长的影响;TUNEL和电镜法观察肿瘤细胞的凋亡,免疫组织化学和RT-PCR法检测瘤组织中bcl-2和bax的表达。结果:内皮抑素具有体外抑制SKOV3细胞增殖的作用(P<0．01);能诱导SKOV3细胞凋亡,但对bcl-2和bax的表达无明显影响。内皮以抑素能抑制裸鼠皮下移植瘤的生长(P<0．05);其中bcl-2的表达低于对照组,而bax表达无明显改变。结论:内皮抑素具有抑制SKOV3细胞及皮下移植瘤生长的作用,其机制可能与诱发细胞凋亡和调节bcl-2／bax表达相关。     

内皮抑素对宫颈癌细胞生长抑制作用的初步研究

目的:探讨内皮抑素对人宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法:用MTT法检测细胞生长;用透射电镜观察细胞凋亡;用免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot法检测细胞中bcl-2和bax蛋白及mRNA的表达。结果:内皮抑素抑制Hela细胞增殖;能诱导Hela细胞凋亡;而对细胞中bcl-2和bax蛋白及mRNA的表达无明显影响。结论:人内皮抑素具有抑制宫颈癌Hela细胞生长的作用,其作用机制可能与诱发细胞凋亡相关。     

Endostatin体外抑制SKOV3细胞生长作用机制的初步研究

背景与目的：肿瘤的侵袭和转移与血管新生密切相关。体内外实验证实，原发性恶性肿瘤细胞中存在多种促进和抑制血管形成因子，抑制血管形成可能成为治疗人类恶性肿瘤最有价值的战略之一。Endostatin是一种特异性血管内皮生长抑制因子，尽管目前研究仍处于实验阶段，但应用前景十分广阔。动物实验已证实Endostatin具有高效抑制肿瘤血管生成，进而抑制肿瘤生长、侵袭和转移的作用，且治疗后不易复发、反复应用不产生耐药性、毒副作用极低、对各期肿瘤均有效等优点。作为治疗用药，Endostatin有希望用于任何病态的血管生成，最近有报道显示Endostatin配合外科手术、化疗、放疗和免疫治疗等传统方法，可显著提高其抗肿瘤效果。本实验研究目的在于探讨人Endostatin对卵巢癌SKOV、细胞生长的抑制作用及其机制。方法：①MTT法检测Endostatin对SKOV3细胞的生长抑制作用；②透射电镜观察Endostatin处理SKOV3细胞后的凋亡情况，流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期；③免疫细胞化学法、RT—PCR法及Western blot法检测Endostatin处理SKOV3细胞后凋亡调控基因bcl-2和bax mRNA和蛋白的表达。结果：Endostatin具有体外抑制SKOV3细胞增殖的作用15μg／ml 72h0．454（A值）明显低于对照组1．369（P〈0．01）；能诱导SKOV3细胞凋亡；Endostatin对SKOV3细胞中bcl-2和bax的表达无明显改变。结论：人Endostatin具有抑制SKOV3细胞生长的作用，其机制可能与诱发细胞凋亡相关。     

四硫化四砷抑制人胃癌SGC7901细胞增殖及其作用机制

目的：探讨四硫化四砷（As4S4）对人胃癌细胞系SGC7901增殖抑制作用及其作用机制.方法：MTT法检测四硫化四砷对体外培养SGC7901细胞的抑制作用,透射电镜观察细胞形态学改变,流式细胞仪检测细胞周期的变化,RT-PCR法检测bcl-2和bax mRNA的表达,Western blot法检测bcl-2和bax蛋白的表达.结果：四硫化四砷具有体外抑制SGC7901细胞增殖的作用,能诱导细胞凋亡,细胞中bcl-2的表达降低,bax 的表达增强.结论：四硫化四砷具有抑制胃癌细胞系SGC7901细胞生长的作用,其机制可能与诱导细胞凋亡和调节bcl-2与bax表达有关.     

白藜芦醇对胃癌细胞系SGC-7901细胞增殖和凋亡作用的实验研究

目的:研究白藜芦醇(resveratrol, Res)影响人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的机制.方法:使用不同浓度Res处理SGC-7901细胞不同时间后,采用MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;FCM和TUNEL法检测分析细胞周期和细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测细胞中bcl-2、bax、caspase-3和Fas蛋白的表达;RT-PCR检测Fas、bcl-2、bax、caspase-3 mRNA的表达.结果:Res对胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用随着Res作用时间的延长和浓度的增加而明显增强(P<0.01,P<0.05),同时能诱导其发生凋亡(P<0.01);Res(150 μmol/L)能明显上调SGC-7901细胞中bax、caspase-3、Fas mRNA及其蛋白的表达,下调bcl-2 mRNA及其蛋白的表达.结论:Res抑制SGC-7901细胞的增殖、诱导细胞凋亡呈浓度、时间依赖性;这可能与Res上调肿瘤细胞Fas、bax和caspase-3的表达及下调bcl-2的表达有关.     

腺病毒介导的IL-24对人大细胞肺癌NCI-H460细胞的体外抑制效应

目的研究腺病毒介导的IL-24基因表达对NCI-H460肺癌细胞抑癌增效作用及分子机制。方法将Ad-IL-24重组腺病毒感染NCI-H460细胞。以Western blot法鉴定IL-24基因在NCI-H460细胞中的表达;MTT法检测重组腺病毒对NCI-H460细胞的生长抑制作用;经Annexin-V-PE/7-AAD染色后流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率变化;RT-PCR检测NCI-H460细胞中bax、caspase-3、bcl-2、survivin等因子的表达。结果腺病毒介导的IL-24基因在NCI-H460细胞中能够有效表达;Ad-IL-24组对NCI-H460细胞的生长具有明显的抑制作用, Ad-IL-24能够上调bax、caspase-3等因子的表达,下调bcl-2、survivin等因子的表达,诱导细胞凋亡。结论腺病毒介导的IL-24 基因在体外可明显抑制人肺癌细胞NCI-H460的生长,诱导其凋亡,其分子机制可能与上调bax、caspase-3等促凋亡因子的表达,下调bcl-2、survivin等凋亡抑制因子的表达有关。     

重组人内皮抑素对肺鳞癌细胞抑制作用的体外实验

 目的 探讨重组人内皮抑素（恩度）对肺鳞状细胞癌细胞系H-520细胞生长的影响及其机制。 方法 应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测恩度不同浓度和作用时间对H-520细胞的生长抑制作用;Hoechst33258染色观察恩度处理后 细胞凋亡形态并通过流式细胞术对凋亡细胞进行定量及检测细胞周期分布。采用划痕修复实验检测内皮抑素处理后H-520细胞的 迁移能力。 结果 恩度可以抑制H-520细胞的生长,且呈时间-剂量依赖性;恩度可以促进H-520细胞的凋亡,随时间延长,凋亡率显著增加,与 对照组相比,差异具有统计学意义（P<0.01）;恩度可以引起H-520细胞周期分布变化,细胞发生G₀/G₁ 期阻滞。划痕实验表明,恩度可以使H-520细胞体外迁移能力显著下降,与对照组相比,24h划痕修复率差异具有显著意义。 结论 恩度对H-520细胞增殖具有明显抑制作用;其主要机制为促进细胞凋亡,调整细胞周期分布和减弱细胞迁移能力。     

内皮抑素联合放射治疗对A549细胞生长及HIF-1表达的影响

背景与目的 已有研究表明,放射治疗会诱导肿瘤细胞高表达HIF-1.本研究通过联合使用放射治疗和endostatin联合处理肿瘤细胞,研究这两种治疗方法在体外对人肺腺癌细胞A549周期及HIF-1的影响和机制.方法 流式细胞仪分析内皮抑素对A549细胞增殖周期的影响.联合内皮抑素(ES)和放射治疗(RT)处理肺腺癌细胞A549,四唑氮蓝法(MTT)检测处理前后细胞生长抑制率的变化,酶联免疫吸附法(Elisa)检测处理前后细胞中HIF-1的表达情况.结果 内皮抑素对A549细胞具有细胞周期阻滞作用,可将其阻滞于G2/M期和S期.各种处理方法对肺腺癌细胞A549的生长抑制作用随时间的增加而加强,其中联合应用放射治疗与内皮抑素治疗对肺腺癌细胞A549的生长抑制作用更为明显.联合放射治疗和内皮抑素处理肺腺癌A549细胞,可以使该细胞系HIF-1的含量较单用放射治疗少.结论 内皮抑素联合放射治疗对抑制人肺腺癌A549细胞的生长具有协同作用,这种协同作用可能来源于:内皮抑素可以使A549细胞阻滞于G2/M期及S期,从而抑制A549细胞的增殖;内皮抑素可以抑制肿瘤细胞本身具有的以及放射后诱导的HIF-1的产生,HIF-1是肿瘤细胞耐受放化疗的因素之一,因此提高放射治疗的疗效.     

溶血磷脂酸抑制顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡

目的：探讨溶血磷脂酸（lysophosphatidic acid,LPA）对顺铂诱导的卵巢癌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法：体外培养卵巢癌细胞株SKOV3,采用MTT法检测LPA对顺铂（cisplatin,DDP）作用后卵巢癌细胞株SKOV3增殖活性的影响,Hoechst33258荧光染色观察凋亡细胞,用FCM法分析细胞周期变化和细胞凋亡率,DNA片段凝胶电泳观察凋亡细胞的DNA“梯状”条带,免疫细胞化学法及RT-PCR法分别检测细胞凋亡相关蛋白及其mRNA的表达。结果：LPA能降低DDP对SKOV3细胞生长的抑制作用,同时增加G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例和凋亡率。Hoechst33258染色检测示LPA作用后凋亡小体明显减少。DNA片段凝胶电泳示LPA作用后不产生明显的凋亡片段。10μmol/L的LPA作用SKOV3细胞48h后,bcl-2基因及其蛋白表达水平升高,而bax基因及其蛋白表达水平降低（P〈0.01）。结论：LPA可通过上调bcl-2基因及蛋白表达,下调bax基因及蛋白表达,抑制DDP诱导的卵巢癌细胞凋亡。因此,针对LPA的治疗有望提高DDP疗效,改善卵巢癌患者的预后。     

米非司酮对子宫内膜癌HHUA细胞裸小鼠移植瘤生长作用的研究

目的探讨米非司酮(RU486)对人子宫内膜癌HHUA细胞裸小鼠移植瘤生长的抑制作用。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸小鼠皮下接种HHUA细胞建立裸小鼠移植瘤动物模型,将荷瘤裸小鼠随机分为两组,分别应用米非司酮、精制花生油治疗4周。治疗期间观察各组裸小鼠生长情况、移植瘤体积、增殖率和形态,治疗结束后应用流式细胞术(FCM)检测各组裸小鼠移植瘤组织细胞周期时相的变化和细胞凋亡率;应用免疫组化技术检测基因Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果米非司酮组裸小鼠移植瘤体积第3周明显减小,肿瘤增殖率明显降低(P<0.01)。4周治疗结束后米非司酮组裸小鼠移植瘤细胞G0/G1期比例升高(38.17±3.02)%,S期细胞比例(SPF)降低(43.87±4.29)%,与对照组比较差异均有显著性(P<0.05),移植瘤细胞凋亡率为(15.03±2.19)%,明显高于对照组(3.06±1.13)%(P<0.01);治疗组移植瘤细胞Bcl-2蛋白表达明显降低(1.9±0.61),而Bax呈现过度表达(4.0±1.28)(P<0.05)。结论抗孕激素米非司酮(RU486)能显著抑制人子宫内膜癌HHUA细胞裸小鼠移植瘤的生长,其抗肿瘤作用与调控细胞周期时相和诱导细胞凋亡相关。     

miRNA在肝癌发生与转移中的研究进展

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤。转移、扩散是其预后不良的主要原因。因此,探索肿瘤发生、发展和侵袭转移的分子机制,寻求新的治疗靶点,对于提高肝癌的疗效具有重要意义。microRNA简称为miRNA,通常长度为19-25个核苷酸,广泛存在于真核生物中,是一类高度保守的非编码的小分子单链RNA。miRNA通过与靶mRNA3’-UTR区完全或部分互补结合,导致靶区降解或转录后翻译抑制,从而调控靶基因的表达。miRNA具有癌基因和抑癌基因的作用,直接或间接参与肝癌发生和发展。     

CXCL12对宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验研究

目的 探讨趋化因子12（CXCL12）在调控宫颈癌放疗敏感性中的作用。方法 采用阳离子脂质体法将CXCL12 siRNA转染至宫颈癌HeLa细胞（siRNA转染组）,另设置空白对照组和阴性对照组。采用不同剂量（4、8 Gy）照射上述各组HeLa细胞, CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法和实时荧光定量PCR（QPCR）检测CXCL12表达变化,流式细胞仪检测CD44表达。结果 接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的细胞存活率分别为62.0％和44.0％,低于阴性对照组的79.0％和59.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）;接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的细胞凋亡率分别为28.0％和51.0％,高于阴性对照组的21.0％和39.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）。接受4 、8 Gy照射后siRNA转染组的CD44蛋白表达量为1.33±0.02和1.40±0.01,低于阴性对照组的1.55±0.02和1.85±0.02,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 沉默CXCL12可通过抑制细胞增殖、促进细胞凋亡来增加宫颈癌细胞的放射敏感性,CXCL12可能为宫颈癌放疗提供新的增敏靶点。     

抗肿瘤药物对肾上腺机制影响的研究进展

多种抗肿瘤药物如激素类、化疗、靶向药物和免疫检查点抑制剂在发挥抗癌作用的同时对内分泌腺具有毒性作用,其中对肾上腺的影响逐渐受到临床重视。药物治疗相关的肾上腺功能不全若无法及时诊治,可导致肾上腺危象的发生甚至危及生命。本文将就抗肿瘤药物对肾上腺机制影响进行综述,为临床防治肿瘤患者的肾上腺功能异常提供指导。