提高微透析探针回收率方法的研究进展

微透析是将灌流取样和透析技术结合起来的研究物质动态变化的一种新型采样技术,适合于深部组织和重要器官的活体研究。微透析探针的回收率是影响微透析结果准确性的重要因素之一。微透析探针对物质的回收率通常较低,需结合灵敏的检测方法才能实现物质的定量分析,因此限制了微透析技术在科研中的应用及发展。如何提高微透析探针的回收率是亟待解决的问题,本文综述了国内外研究中提高微透析探针对物质回收率的方法,为探针回收率的提高提供一些参考。     

钩藤碱微透析探针回收率测定及影响因素研究

目的:考察体内外微透析探针回收率的稳定性和重现性,为进一步的体内微透析试验提供依据。方法:采用增量法和减量法考察浓度、流速对探针回收率的影响。结果:微透析探针回收率受流速影响较大,基本不受浓度影响,且体内回收率稳定性良好。结论:微透析技术可用于钩藤碱的体内药代动力学研究,反透析法可作为体内研究钩藤碱探针回收率的测定方法。     

微透析技术探针回收率的影响因素研究进展

微透析技术是近年来发展起来的动态生物取样技术,具有"活体、微创、实时、高效"等特点,其与现代分析技术联用,实现了连续取样和动态测定,可进行微量的定性、定量分析。微透析探针回收率的准确校正,是测定生物体中待测组分确切浓度的关键步骤,可提高大分子、难溶性物质的回收率,使微透析的应用更为广泛。本文对微透析探针回收率的影响因素、校正方法以及近年来提高回收率所取得的进展做一综述。     

头孢拉定微透析体外回收率及影响因素的研究

目的 测定头孢拉定微透析体外回收率及影响因素。方法 采用微透析浓度差法（减量法、增量法）和液质联用技术（LC-MS/MS）测定头孢拉定的体外回收率,并考察流速、浓度对回收率的影响,以探讨微透析技术用于头孢拉定体内药动学研究的可行性。结果 所建立的方法在要求范围内线性关系良好,方法灵敏可靠。增、减量法测得的回收率无显著性差异。相同条件下,探针体外回收率随流速增大而减小,不受探针周围药物浓度的影响。结论 微透析技术可用于头孢拉定药动学研究,减量法可用于头孢拉定微透析体内回收率和药动学参数的测定。     

青藤碱微透析体外回收率研究

目的考察浓度、流速对回收率和损失率的影响,为体内青藤碱微透析实验提供参考依据。方法利用增量法和减量法测定回收率,采用超高效液相测定青藤碱含量。结果流速相同时,探针的回收率和损失率与周围药物浓度无关;探针的回收率随着流速的增加呈下降趋势,增量法和减量法测定的回收率与损失率在各流速下相近。结论微透析法可用于青藤碱体内药动学研究,反向透析法可用于青藤碱微透析体内回收率的测定。     

克班宁血液和关节微透析探针体内外回收率研究

目的：考察克班宁血液和关节微透析探针的体内外回收率及其稳定性。方法：采用正微透析法和反微透析法,分别考察克班宁灌流速率、质量浓度对血液和关节探针体外回收率的影响,探讨正、反微透析法的回收率之间的关系;将血液和关节探针分别植入大鼠颈静脉和关节腔,考察探针在大鼠体内10 h反向回收率的稳定性。结果：克班宁血液和关节探针体外正向和反向微透析的回收率随着灌流速率（1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 μL·min^-1）的增大而降低;与克班宁质量浓度（4,8,16,40 μg·mL^-1）无关,正向回收率与反向回收率基本一致,说明可以用反微透析法的回收率代替正微透析法的回收率对药物实际浓度进行校正;克班宁血液和关节探针在大鼠体内10 h反向回收率保持相对稳定,血液和关节探针体内反向回收率分别为（65.57±1.11）%和（32.7±0.94）%。结论：建立的克班宁血液和关节微透析方法可用于克班宁大鼠血液和关节药动学研究。     

黄柏生物碱膝关节微透析探针回收率的测定

目的建立反相高效液相色谱法测定三妙丸中黄柏生物碱微透析探针体内外回收率,考察回收率影响因素及体内稳定性。方法采用增量法和减量法,用RP-HPLC法测定微透析样品中药根碱、巴马汀和小檗碱的质量浓度,考察流速及质量浓度对探针回收率的影响;探针分别植入颈静脉和膝关节,考察生物碱体内回收率稳定性。结果药根碱、巴马汀和小檗碱的质量浓度在0.04¹.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=7),本方法的专属性、精密度、准确度和稳定性等均符合微透析样品的分析要求。膝关节探针以1.0μL·min-1灌流,药根碱、巴马汀和小檗碱的相对回收率(RR)和损失率(RL)分别为(29.38±2.02)%和(31.80±1.88)%、(30.48±1.93)%和(30.93±2.09)%及(28.95±0.94)%和(30.53±1.74)%。在质量浓度为0.201.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 8,n=7),本方法的专属性、精密度、准确度和稳定性等均符合微透析样品的分析要求。膝关节探针以1.0μL·min-1灌流,药根碱、巴马汀和小檗碱的相对回收率(RR)和损失率(RL)分别为(29.38±2.02)%和(31.80±1.88)%、(30.48±1.93)%和(30.93±2.09)%及(28.95±0.94)%和(30.53±1.74)%。在质量浓度为0.20⁰.80 mg·L-1内,RR和RL一致,探针回收率与流速成反比,与质量浓度无关。体内回收率在5 h内保持稳定。结论反透析法校正大鼠血和膝关节的回收率时,所用的微透析方法可用于三妙丸中黄柏生物碱体内药动学研究。     

采用微透析联用HPLC法测定透析液中黄芩苷的浓度

微透析技术是利用物质的扩散性质和半透膜选择透过原理设计的,用于测定组织和细胞外液中游离药物浓度的一种连续、实时、在体的新型生物取样技术,具有自身对照、多部位取样、动态监测等显著优势,可更清楚、更全面地反映药     

葛根素微乳灌胃后大鼠血浆中葛根素的测定

目的建立反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中的葛根素,用于葛根素微乳在大鼠体内的生物利用度研究。方法取血浆样品,用乙腈沉淀蛋白,Phenomenex C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）分离,4-羟基苯甲醛为内标,乙腈-0.1%醋酸溶液（23∶77）为流动相,流速0.8 mL.min-1,紫外检测波长250 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果葛根素的线性范围为0.10～10.00μg·mL-1（r=0.999 6）,定量下限为0.10μg.mL-1,提取回收率〉79%,方法回收率〉92%,日内、日间精密度RSD〈6%。结论本方法灵敏度好、准确性高,可用于大鼠血浆中葛根素浓度的测定以及葛根素微乳在大鼠体内的生物利用度研究。     

反向透析法用于体内经皮吸收微透析探针回收率的测定

目的考察反向透析法用于体内经皮吸收过程中微透析探针回收率校正的可行性.方法在体外试验中用零净流量法测定探针的回收率和传递率,在体内试验中用反向透析法测定探针的回收率;以小猪为试验动物,观察模型药雷公藤内酯醇软膏的体内经皮吸收过程.结果体外试验中,微透析探针的回收率为(64.29±2.34)%,回收率和传递率一致;体内经皮微透析实验中探针的回收率在实验前为(51.47±3.51)%,实验结束后为(51.96±4.97)%.雷公藤内酯醇软膏经皮吸收后,药物在皮内浓度很快达到稳态,去除药物后皮内药物浓度则迅速下降.结论反向透析法测定的探针回收率在实验过程中稳定,可以用于测定体内经皮吸收微透析探针回收率.     

葛根素及葛根提取物在大鼠体内药代动力学研究

目的考察葛根素及葛根提取物在大鼠体内的药代动力学差异。方法大鼠分别灌胃给予葛根素(500mg/kg)或葛根提取物(相当于葛根素500 mg/kg),在不同时间点采血,以对羟基苯甲酸为内标,应用高效液相色谱法测定葛根素血药浓度,采用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果葛根素及葛根提取物在大鼠体内药动学过程均符合二室模型,比较二者主要药动学参数:提取物组较葛根素组的AUC0-t、Cmax显著降低,Tmax、t1/2z、CL/F及Vz/F显著增加。结论葛根素及葛根提取物的主要药动学参数具有显著性差异,葛根提取物中复杂成分的存在能影响其有效成分葛根素的体内药动学行为。     

注射用阿魏酸钠与葛根素的配伍稳定性

目的：考察注射用阿魏酸钠与葛根素配伍的合理性。方法：用高效液相色谱法(HPLC)分析其含量变化，同时观察其外观、pH值、不溶性微粒的变化。结果：两药配伍6h后的各项结果均无明显变化。结论：注射用阿魏酸钠可与葛根素注射液在0．9％氯化钠注射液中配伍应用。     

Pharmacokinetic interaction between puerarin and edaravone,and effect of borneol on the brain distribution kinetics of puerarin in rats

Objectives The aim was to investigate the pharmacokinetic interaction between puerarin and edaravone, and the effect of borneol on the brain distribution kinetics of puerarin in rats. Methods A reversed‐phase high performance liquid chromatography method was developed and validated for the simultaneous determination of puerarin and edaravone in rat plasma. The detection method was successfully applied to compare the pharmacokinetic interaction and brain distribution kinetics of puerarin and edaravone using in‐situ microdialysis sampling in rats after intravenous administration and co‐administration with a single dose. Key findings The method gave good linearity and no endogenous material interfered with the two target compounds and internal standard peaks. The limit of detection of puerarin and edaravone was 0.03 and 0.05 μg/ml, respectively. The average recovery of the two compounds from rat plasma was >94%. The precision of the test was determined to be within 10%. The combination of puerarin and edaravone reduced drug elimination rates, gave a wider distribution, and the disposition of both drugs in rats was optimized. The distribution of puerarin in brain tissues was significantly increased and its elimination was noticeably slower with borneol pretreatment. Conclusions The results provide important information for the improved combined use of puerarin and edaravone with borneol pretreatment in clinical practice.     

HPLC法测定抗感解毒胶囊中葛根素的含量

目的建立抗感解毒胶囊中葛根素的高效液相色谱含量测定方法。方法采用HPLC法,C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(25∶75)为流动相,流速:1.0mL·min-1,检测波长:250nm。结果葛根素浓度在4.008～200.4μg·mL-1的范围内与峰面积呈良好的线性关系,Y=0.0126X+0.0141,r=1.000(n=6),平均回收率为99.95%,RSD=0.19%。结论该方法简便、准确,可作为抗感解毒胶囊的质量控制方法。     

葛根素眼用凝胶的体外释放研究

目的:研制葛根素眼用凝胶剂。方法:建立UV法测定制剂的含量及体外释药量,采用桨法进行处方的体外释药实验,建立HPLC法测定离体角膜渗透量,应用离体角膜进行体外渗透实验。结果:亲水凝胶材料用量越小,葛根素从凝胶基质中释放越快,凝胶体外释放符合Higuchi方程;离体角膜渗透行为符合零级释放规律。结论:葛根素眼用凝胶达到了延迟释放的目的。     

高效液相色谱法测定脑得生片中葛根素的含量

目的采用高效液相色谱法测定脑得生片中葛根素的含量,以控制该制剂的质量。方法柱为Agilent Ec lipseXDB-C18(4.6×250mm,5μm);以水-甲醇-乙腈溶液(76∶20∶4)为流动相;流速1.0mL/m in;检测波长为250nm。结果方法的平均加样回收率为102.0%,RSD=0.62%(n=9)。葛根素在0.032~2.031μg进样量范围内,进样量与吸收面积值呈良好的线性关系R=1.000。结论本方法测定脑得生片中葛根素的含量,结果准确,重复性好。