流式细胞仪检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率方法的改进

目的观察经γ射线照射后不同时相点小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的变化,进一步完善微核流式细胞仪自动化检测方法。方法 ICR雄性小鼠给予60Coγ射线一次性全身照射,每组4只,剂量分别为1.0、3.0和6.0 Gy,与照射后0.5、2、6和12 h取材;阴性对照组给予假照射;阳性对照组注射环磷酰胺24 h后取材。结果 1.0 Gyγ射线照射后6 h,骨髓f MNPCE显著升高(P<0.01);而3.0 Gy及6.0 Gy照射后6 h,骨髓f MNPCE显著升高(P<0.01);2种方法检测结果显示均有较好的剂量、时间依赖性,并呈显著正相关性(r=0.962,P<0.05)。结论红细胞微核流式细胞仪自动化检测方法快速、简单、灵敏、客观,完全适用于小鼠骨髓红细胞微核率的检测。     

补肾安胎方对~(60)Co诱发孕鼠骨髓及胎鼠肝血微核抗诱变防畸作用的研究

<正>本实验对怀孕13d小鼠(约相当于人胚8周)经1.0Gy60Coγ射线照射后孕鼠骨髓及胎鼠肝血的嗜多染红细胞微核率(PCEMN)作了探讨,发现经60Coγ射线照射后的实验组的PCEMN明显增高,表明60Coγ射线是一种很强的诱变剂,并对中药补肾安胎方作了研究,发现补肾安胎方可以防畸。     

~(60)Co诱发孕鼠骨髓及胎鼠肝血微核和姐妹染色单体交换的影响

<正>本实验对怀孕13 d小鼠(约相当于人胚8周)经1.0Gy60Co射线照射后孕鼠骨髓及胎鼠肝血的嗜多染红细胞微核率(PCEMN)、姐妹染色单体交换(SCE)的变化进行研究,发现经60Co射线照射后的实验组PCEMN、SCE均明显增高,表明60Coγ射线是一种很强的诱变剂。     

苦豆子总碱对小鼠的抗突变作用

目的探讨苦豆子总碱对亚慢性受照小鼠的抗突变作用。方法昆明种近交系雄性小鼠腹腔注射高、中、低剂量的苦豆子总碱,采用60Coγ射线全身均匀低剂量间断照射小鼠106 d,累计吸收剂量为3.25 Gy,以小鼠睾丸精原细胞染色体畸变率、精子畸形率和骨髓嗜多染红细胞微核率为检测指标,对苦豆子总碱高、中、低3个剂量组进行观察。结果辐射损伤后小鼠染色体畸变率、精子畸形率和骨髓嗜多染红细胞微核率均增加,苦豆子总碱对受照小鼠上述受损指标具有一定的促进恢复作用。结论苦豆子总碱对亚慢性受照小鼠具有保护作用。     

细菌防护液对小鼠辐射前后骨髓嗜多染红细胞微核率的影响

细菌防护液是我们研制的一种预防辐射损伤的药物,它能提高照射小鼠的存活天数。本实验以观察小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率为指标,研究细菌防护液的遗传毒性作用,并观察对辐射后小鼠微核率的影响。以蒸馏水作阴性对照,环磷酰胺作阳性对照,细菌防护液为实验组。给小鼠每天灌胃０５ｍｌ,连续５ｄ。结果显示,细菌防护液未能造成细胞突变,说明它对小鼠骨髓嗜多染红细胞没有遗传毒性作用。给小鼠灌胃一定剂量的细菌防护液,然后用６０Ｃｏγ射线１次性照射小鼠,总剂量为６０Ｇｙ。结果显示,照射可以使骨髓嗜多染红细胞微核率增加,如…     

新疆雪莲组织培养物的抗辐射作用(英文)

目的探讨并比较新疆雪莲培养物(TCSauI)乙醇提取物的抗辐射损伤作用。方法小鼠灌胃给予TCSauI乙醇提取物,剂量8.3、16.6、24.9 mg.kg-1,每天灌胃1次共30 d,于灌胃后第20天将对照组与试验组用60Coγ-ray照射,剂量1.0 Gy,每天1次共10次。观察小鼠体质量、外周白细胞数、SOD活性、骨髓嗜多染红细胞微核率和平均存活时间的变化。结果与空白给药组相比,TC-SauI醇提物能使受照射小鼠的外周白细胞数、SOD活性和平均存活时间显著增加(P<0.01),骨髓嗜多染红细胞微核率显著降低(P<0.01)。结论新疆雪莲培养物乙醇提取物具有抗辐射作用。     

口服胸腺因子D对钴^60γ射线诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的影响

目的：给昆明种小鼠以2．0Gy钴60γ射线一次性照射前后，分别给予口服胸腺因子D（TFD），观察其对钴60γ射线诱发小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的影响。方法：将小鼠随机分成5组：对照组；钴60γ射线A组；TFD预防组；钴60γ射线B组；TFD治疗组。每组16只，雌雄各半。TFD的剂量为0．625mg／kg，每日灌胃1次，连续8d。TFD预防组与射线A组于d9照射，d10处死；TFD治疗组与射线B组于d1照射，d10处死。钴60γ射线剂量为2．0Gy，全身一次照射。小鼠处死后制作骨髓片，常规染色与计数。结果表明：无论是TFD预防组还是治疗组，其微核率均比相应的钴60γ射线组下降，差异极其显著（P＜0．01）。而2个钴60γ射线组之间和2个TFD组之间，差异均不显著（P＞0．05）。结论；TFD可在短期内恢复由于钴60γ射线所造成的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的上升，从遗传毒理学的角度证实了TFD抗辐射损伤的作用。     

不同剂量137Csγ-射线辐射后造血干/祖细胞辐射敏感性差异研究

摘要：目的 探讨不同剂量137Csγ-射线照射后不同时间点C57 BL/6小鼠造血细胞放射敏感性的差异。方法 选取6~8周龄雄性C57BL/6小鼠72只,完全随机法分为对照组和照射组。照射组小鼠分别接受2、4、6 Gy137Csγ射线一次性全身照射,对照组小鼠接受假照射。小鼠分别于受照后14 d、35d和56d断颈处死,取外周血进行血象测定,取骨髓细胞测定有核细胞数目和造血干/祖细胞数目。结果 不同剂量照射后小鼠的外周血常规指标有明显变化,白细胞数目明显下降,其次是血小板数目,且具有剂量效应关系;在照射后14d,2Gy、4Gy和6Gy照射组小鼠骨髓有核细胞数目与对照组比较分别下降21.9%、39.9%和54.4%（t=4.311、6.401、8.007,P<0.05）;照射后35d和56d,6Gy照射组小鼠骨髓有核细胞和造血祖细胞数目显著低于对照组（t=4.185、3.596,P<0.05）。照射后14d、35d和56d,2Gy、4Gy和6Gy照射组小鼠骨髓造血干细胞数目持续低于对照组（t=9.706、3.427~7.465,P<0.05）。结论 不同剂量137Csγ-射线照射对小鼠造血系统造成不同程度的损伤,造血祖细胞较造血干细胞辐射敏感,且辐射对造血干细胞造成的损伤是持久性的。     

Toll样受体5激动剂CBLB502蛋白的辐射防护作用

目的研究CBLB502蛋白辐射防护作用。方法 HCT116细胞经CBLB502刺激后,Western印迹法检测NF-κB入核,碱性磷酸酶报告基因法检测CBLB502对NF-κB报告基因的激活。150只C57BL/6J小鼠接受8.0 Gy60Coγ射线照射前随机分为PBS,WR2721,CBLB502 0.02、0.05和0.2 mg/kg共5组,观察小鼠受照后30 d存活率和平均生存时间。另外40只小鼠接受6.5 Gy60Coγ射线照射前随机分为PBS、WR2721、CBLB502 0.2 mg/kg组和正常对照组,照射前1 d和照后30 d内检测外周血细胞。结果 CBLB502可明显促进HCT116细胞NF-κB入核（P〈0.01）并呈剂量依赖性激活NF-κB报告基因（r=0.998 3）。CBLB502显著提高8.0 Gy60Coγ射线照射后小鼠的存活率,PBS,WR2721,CBLB502 0.02、0.05和0.2 mg/kg组小鼠照后30 d存活率分别为0、83.3%、13.3%、66.7%和100%;照射后小鼠平均存活时间除0.02 mg/kg给药组与PBS对照相比无差异外,其余各给药组较PBS对照组有显著提高。6.5 Gy60Coγ射线照射后小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板急剧下降,CBLB502 0.2 mg/kg组上述指标降低持续时间较照射对照组明显缩短,开始恢复时间提前,各指标最低值亦明显高于照射对照组。结论 CBLB502蛋白具有体外生物学活性并对急性放射病小鼠有明显的辐射防护作用。     

ADP核糖基化因子样6相互作用蛋白1(ARL6IP1)低表达对电离辐射所致小鼠小肠上皮细胞损伤的影响

目的 探讨ADP核糖基化因子样6相互作用蛋白1(ARL6IP1)对电离辐射后小肠上皮细胞损伤的影响.方法 ①动物实验:C57BL/6N小鼠进行60Co源γ射线全腹部单次照射,剂量15 Gy,制备小鼠放射性肠损伤模型,Western印迹法测定正常对照组及照射后1,3,7和14 d小鼠空肠组织ARL6IP1蛋白表达.②细胞...     

大剂量重组人粒细胞集落刺激因子对8.0Gy ^60Co γ射线照射小鼠长期存活率及远后效应的影响

目的探索重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对8.0Gy60Coγ射线照射小鼠长期存活率及远后效应的影响。方法 70只雄性C57BL/6小鼠,随机分为正常对照、照射对照及rhG-CSF大、中、小剂量治疗共5组,除正常对照组外,其他4组均接受8.0Gy60Coγ射线照射。治疗组小鼠于照射后0.5和24h两次分别皮下注射rhG-CSF1000、500和250μg/kg,随时记录各组动物存活率,照射后70、160和300d进行外周血细胞计数分析,300d时检测各组存活小鼠造血和免疫相关指标。结果照射对照组动物照后19d内全部死亡,平均存活时间（12.1±3.0）d;rhG-CSF1000μg/kg治疗组照射后30、100和300d存活率分别为86.7%、86.7%和80.0%,死亡小鼠平均存活时间较照射对照组明显延长（P〈0.01）。照后300d时,rhG-CSF1000μg/kg治疗组的外周血红细胞和血小板计数均与正常对照组没有统计学差异,骨髓混合细胞集落形成单位数量显著低于正常对照组（P〈0.01）;rhG-CSF治疗组的CD4＋/CD8＋比值倒置且250μg/kg剂量组明显低于正常对照组（P〈0.05）;rhG-CSF治疗组造血和免疫器官的组织病理切片结果显示仍然存在不同程度的病变。结论 rhG-CSF1000μg/kg治疗可以显著提高8.0Gy60Coγ射线照射小鼠存活率,但照射后300d造血和免疫系统相关指标尚未完全恢复正常。     

右旋雷贝拉唑钠对动物体内染色体损伤的影响实验研究

目的通过对右旋雷贝拉唑钠小鼠灌胃给药微核试验的研究,预测其遗传毒性,降低临床用药风险。方法健康雄性BALB/c小鼠60只,按体重随机分为低、中、高剂量组、溶媒对照组和阳性对照组,每组6只。分别灌胃给予右旋雷贝拉唑钠125、250、500 mg·kg-1,溶媒对照组灌胃给予灭菌蒸馏水,给药体积40 mL·kg-1;阳性对照组腹腔注射给予环磷酰胺50 mg·kg-1,给药体积为20 mL·kg-1。于给药后24 h和48 h将动物颈椎脱臼处死,取胸骨骨髓常规制片、姬姆萨染色。显微镜双盲法阅片,每只小鼠观察2 000个嗜多染红细胞(PCE),计数出现微核的嗜多染红细胞,计算微核率,并计算嗜多染红细胞与总红细胞比例。结果研究结果显示,小鼠灌胃给药24 h后,低、中、高剂量组的骨髓微核发生率分别为1.92‰、1.58‰、1.83‰,与溶媒对照组(1.75‰)相比无显著性差异,但其与阳性对照组之间(23.92‰)有非常显著性差异(P<0.01)。在灌胃给药48 h后,低、中、高剂量组的骨髓微核发生率分别为1.75‰、1.58‰、1.50‰,与溶媒对照组(1.83‰)相比无显著性差异,但其与阳性对照组(21.83‰)之间具有非常显著性差异(P<0.01)。结论在本试验条件下,右旋雷贝拉唑钠小鼠灌胃给药微核试验结果为阴性。     

SB203580对小鼠造血组织辐射损伤的保护作用

目的观察SB203580对接受γ射线照射的C57BL/6小鼠造血组织损伤的保护作用。方法小鼠随机分为对照(Ctr)组、照射(IR)组及SB203580给药(SB)组,以6.0 Gy 137Csγ射线全身均匀照射SB组和IR组的C57BL/6小鼠。收集并计数外周血红细胞、白细胞和血小板,以及单侧股骨骨髓有核细胞(BMMNC);骨髓细胞半固体培养法检测BMMNC增殖能力。另外收集小鼠BMMNC,同样分组,IR组与SB组细胞进行1 Gy体外照射,照射之后孵育过夜,酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果 SB组外周血白细胞、血小板的数量分别比IR组高111.8%和157.7%(P<0.05);SB组BMMNC较IR组高135.4%,CFU-GM高188.5%(P<0.05);SB组BMMNC内ROS较IR组低56.2%(P<0.05)。结论 SB203580对照射造成的小鼠造血组织损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能与其降低照射后细胞内ROS水平有关。     

多环芳烃对金属硫蛋白缺欠小鼠微核及红细胞的影响

目的：观察两种致癌性多环芳烃化合物二甲基苯蒽（DMBA）和苯并（a）芘（BaP）对小鼠髓多染红细胞微核发生和血液循环中红细胞数量的时相影响以及金属硫蛋白的可能拮抗作用。方法：选用雄性金属硫蛋白（MT）基因敲除的转基因小鼠[MT(-/-)]和野生型小鼠[MT( / )]。在DMBA和BaP各50mg/kg1次腹腔注射染毒后24、48、72和144h，观察动物骨髓多染红细胞中的微核细胞发生率和外周血液循环中红细胞数量的变化。结果：DMBA和BaP均能引起两种小鼠骨髓多染红细胞微核发生增加和外周血液循环中红细胞数量减少。DMBA诱导微核发生的高峰在48h。在同种小鼠内DMBA诱导的微核细胞发生率大于BaP。在DMBA染毒48和72h后MT（－／－）小鼠的微核细胞率明显大于MT（＋／＋）小鼠，而在BaP染毒后两种小鼠之间差异无显著性。在DMBA染毒24h后MT（－／－）小鼠的红细胞数比染毒前明显减少。结论：在该研究 条件下，缺乏MT的小鼠的骨髓多染红细胞微核更易被DMBA诱导和发生红细胞数量减少。提示MT具有一定保护DMBA所致遗传损伤和红细胞系统损伤的功能。     

p38抑制剂对辐射损伤小鼠中免疫细胞的作用

目的:探讨利用p38抑制剂SB203580(SB)抑制p38通路对6Gy受照小鼠免疫细胞辐射损伤的作用。方法:取雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组、照射组和SB组,每组10只。SB组和照射组小鼠接受以6Gy137Csγ射线的全身照射。SB组小鼠照射24h后腹腔注射SB(15mg/kg),每2d1次,共给药5次,其余2组小鼠腹腔注射对照溶液。小鼠受照10d后处死,取外周血计数,流式细胞仪检测CD4、CD8、B220表达,取骨髓细胞测定ROS水平。结果:照射组外周血白细胞(WBC)、CD8、B220细胞比例较对照组明显下降,骨髓ROS水平升高(P<0.01)。SB组外周血CD8比例较照射组上升,骨髓ROS水平下降(P<0.01)。结论:SB对小鼠6Gy照射后造血免疫损伤有一定的缓解作用,其机制可能与其降低照射后骨髓细胞ROS水平有关。     

γ射线照射导致心肌细胞坏死性凋亡和线粒体损伤

目的 探讨γ射线照射引起的心肌细胞死亡方式及其线粒体损伤效应.方法 用60Coγ射线单次照射大鼠H9C2心肌细胞,按照射后时间分为照射后24,48和72 h组,按照射剂量分为细胞对照组及5,10和20 Gy组.用CCK-8试剂盒检测细胞存活率;APC-AnnexinⅤ/7AAD凋亡试剂盒检测细胞凋亡;Western印迹...     

枳壳多糖对辐射损伤小鼠的防护作用研究

目的探讨枳壳多糖(Citrus aurantium L.polysaccharides-B,CALB)对~(60)Coγ-射线诱导小鼠辐射的保护作用。方法将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、辐射模型组、CALB给药组(高、中、低剂量)、阳性对照组(黑木耳多糖,HP),连续灌胃给药30 d,末次给药3 h后,检测空白对照组及经~(60)Coγ-射线一次性全身照射(7 Gy)后,小鼠d 2、14的存活率。另检测空白对照组及经~(60)Coγ-射线一次性全身照射(3 Gy)后小鼠骨髓细胞DNA含量、骨髓细胞微核含量,小鼠脑组织、血清及肝脏中SOD、GSH-Px活性和MDA含量,以及脑组织中TCh E含量、小鼠脾、胸腺指数。结果 CALB各剂量组均能明显提高辐射小鼠的存活率,并提高小鼠骨髓细胞中DNA含量,降低骨髓细胞微核数。此外,CALB还可增加胸腺、脾指数,提高辐射小鼠血清、脑和肝组织中SOD、GSH-Px水平,同时降低MDA含量。结论 CALB对辐射损伤具有一定的保护作用,可用于枳壳的进一步开发与利用。     

氟化物对动、植物染色体毒作用研究

氟化物是常见的工业污染物之一。高浓度氟污染可否造成遗传危害尚无定论。本文应用BALB/C小鼠骨髓嗜染红细胞微核试验及蚕豆根尖微核试验对氟化钠、氟化钙的染色体毒作用进行了研究。结果表明,30mg/kg氟化钠腹腔注射BALB/C小鼠可诱发微核率明显升高(6.2±1.3‰,P<0.01),且有一定剂量及时间-反血关系,氟化钠(10～     

生白饮对钴60照射小鼠造血系统损伤保护作用

目的：研究生白饮对^60Coγ射线照射小鼠造血系统损伤保护作用。方法：连续动态观察生白饮对小鼠经^60Coγ射线照射后7，14，21d外周血白细胞、骨髓有核细胞数、淋巴细胞转化指数、网织红细胞以及细胞肿瘤因子（TNF）、白细胞介素-6（IL6）活性的影响。结果：照射损伤后小鼠外周血白细胞、网织红细胞、骨髓有核细胞数明显减少，淋巴细胞转化指数下降。TNF、IL-6活性降低。生白饮可促进上述各造血指标的恢复及升高（P〈0．05或P〈0．01）。结论：生白饮对照射损伤小鼠造血系统具有保护作用。     

骨髓微核试验程序的探讨

微核试验作为检测遗传损伤的方法,在国内外已广泛用于毒理学研究。检查微核有多种方法:小鼠骨髓嗜多染红细胞微核,淋巴细胞微核,哺乳动物胎肝血细胞微核,哺乳动物组织、器官细胞微核,近来又提出末梢血成红细胞微核。已被公认和经常应用的是小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验,这种方法在国际上已被欧州共同体(EEC)