同型半胱氨酸代谢相关基因与神经管缺陷的研究进展

神经管缺陷(neural tube defects,NTDs)是由于神经管的发生和分化紊乱而出现的人类出生缺陷中最常见和最严重的一组畸形。目前对其发病原因尚不清楚,一般认为是由环境因素和遗传因素共同作用造成的,目前研究的热点是同型半胱氨酸代谢相关因素与神经管缺陷的关系。本文对同型半胱氨酸代谢过程中某些关键酶和因子及其基因多态性与神经管缺陷的关系进行了综述。     

糖尿病视网膜病MTHFR基因多态性及其与血浆同型半胱氨酸水平的关系

目的：研究亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因多态性及血浆同型半胱氨酸水平与2型糖尿病视网膜病的关系。方法：应用聚合酶链反应－限制性内切酶片段长度多态性技术检测208例2型糖尿病患者（其中110例伴视网膜病）及57名正常对照的MTHFR C677T基因型，采用高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸水平。结果：糖尿病视网膜病组MTHFR基因TT纯合基因型、CT杂合基因型及T等位基因频率（分别为28．18％、41．82％、49．09％）均明显高于糖尿病不伴视网膜病组（分别为18．37％、29．59％、33．16％）及正常对照组（分别为17．54％、28．07％、31．58％），基因型和等位基因频率分布差异均有显著性（P＜0．01），而MTHFR基因多态性在糖尿病不伴视网膜病组与正常对照组之间差异无显著性（P＞0．05），T等位基因与糖尿病视网膜病的发生密切相关（OR＝1．94，95％CI；1．31－2．88）。糖尿病视网膜病组、糖尿病不伴视网膜病组及正常对照组中，MTHFR基因有C677T突变者血浆同型半胱氨酸水平均显著高于无基因突变者。结论：MTHFR基因C677T位碱基突变致血浆同型半胱氨酸水平升高可能是糖尿病视网膜病发病的重要遗传因素。     

MTHFR基因多态性与老年冠心病及同型半胱氨酸的相关性研究

目的探讨N5,N10亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因多态性及血浆同型半胱氨酸（Hcy）与老年冠心病的相关性。方法应用高效液相色谱法和多聚酶链反应限制性内切酶片段长度多态性技术检测并比较了120例老年冠心病患者（CHD组）和58例健康老年人（对照组）的血浆Hcy浓度及MTHFR基因型。结果两组MTHFR 677位点基因型分布和各等位基因频率比较均有统计学差异（P均〈0.05）;CHD组T等位基因频率及血浆Hcy浓度高于对照组（P均〈0.05）。结论 MTHFR基因突变可导致血浆Hcy浓度升高,高Hcy浓度及MTHFR基因T型均为老年CHD的高危因素。     

叶酸代谢相关基因多态性及血浆同型半胱氨酸与唐氏综合征关系研究

目的研究叶酸代谢相关的亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTH-FR)基因多态性与唐氏综合征(Down syndrome,DS)发生的关系。方法选择100例生育过DS患儿的汉族母亲及100名相匹配的正常对照组母亲,PCR-限制性片段长度多态性方法检测MTHFR677C/T的基因型,化学发光法检测血浆中同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)的水平。结果病例组MTHFR677T等位基因的频率较对照组增高,差异有统计学意义(P=0.002);杂合基因型CT的比值比为2.12(95%CI:1.14～3.94);而纯合基因型TT的比值比为3.43(95%CI:1.41～8.36)。平均血浆HCY浓度在病例组[(9.04±3.85)μmol/L]较对照组[(6.53±2.06)μmol/L]增高,差异有统计学意义(P<0.01)。MTHFR677位点一个和(或)两个等位基因C→T的变异,不论在病例组还是对照组均可引起HCY水平的显著增加(P<0.01)。同为MTHFR677CC基因型,病例组中的血浆HCY浓度仍较对照组增高(P<0.01),这种增加不依赖于MTHFR的基因型。结论血浆HCY和叶酸代谢相关基因的遗传多态性是汉族妇女生育DS患儿的危险因素。     

血浆同型半胱氨酸水平及其代谢酶基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的 通过探讨同型半胱氨酸(homocysteinemia,Hcy)及其主要代谢酶突变基因与脑梗死的关系,明确遗传因素与脑梗死发病的关联性,为指导临床提供理论依据.方法 选择脑梗死患者与正常健康者各60例分别为脑梗死组、正常对照组.采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)测定血浆Hcy水平,并应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态分析技术(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)测定基因表型.结果 正常对照组与脑梗死组比较,Hcy水平明显偏高(P＜0.01),患者组有无高血压病史、高血脂病史、糖尿病病史,Hcy水平差异无统计学意义(P＞0.01).脑梗死组亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetralydrofolate,MTHFR)基因TT基因型与正常组比较差异有统计学意义(P＜0.01),T等位基因频率明显高于正常对照组(P＜0.01).MTHFR C677T基因型和等位基因频率分布与正常组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).MTHFR基因C677T纯合子基因型Hcy水平显著高于野生型(P＜0.01).丝氨酸在胱硫醚β合成酶(cystathionineβ-synthase,CBS)基因T27796C纯合子基因型血浆Hcy水平与杂合子基因型比较差异有统计学意义(P＜0.01),显著高于野生型(P＜0.01).Logistic回归分析脑梗死血浆Hcy水平和MTHFR C677T纯合子基因型关系密切.结论 Hcy水平与脑梗死的发病有一定关联性,可能是该病发生的一个独立危险因素.MTHFR基因C677T位点纯合子突变、CBS基因T27796C位点纯合子突变均可致血浆Hcy水平增高,可能是脑梗死发生的遗传因素.     

凝血因子基因多态性与缺血性脑卒中

近年研究发现由于凝血因子先天性异常导致血管内血栓形成 ,而这些先天性异常中尤其是由凝血因子相关基因单核苷酸多态性引起的功能变化起决定性作用。本文将就几种重要的凝血因子基因多态性与缺血性脑卒中的关系作一综述     

凝血因子基因多态性与缺血性脑卒中

近年研究发现由于凝血因子先天性异常导致血管内血栓形成，而这些先天性异常中尤其是由凝血因子相关基因单核苷酸多态性引起的功能变化起决定性作用。本文将就几种重要的凝血因子基因多态性与缺血性脑卒中的关系作一综述。     

同型半胱氨酸和MTHFR基因多态性与Alzheimer病的关系

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)和5,10 亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与Alzheimer病的关系.方法运用多聚酶链反应限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR RFLP)和荧光偏振法(FPIA)检测66例阿尔茨海默病及143例正常人MTHFR基因多态性和血浆总Hcy水平.结果 (1)AD病人甲基四氢叶酸还原酶基因中,基因型C/T占56.06%,明显高于对照组的34.97%(P<0.01,RR=0.355),C/C占39.39%,明显低于对照组的62.94%(P<0.01),T/T占4.25%,与对照组2.09%无明显差异(P>0.05). AD病人中甲基四氢叶酸还原酶基因等位基因C的频率为67.43%、相对危险率(RR)为0.594,T的频率为32.57%、与对照组的C为80.42%、T为19.58%有显著性差异(P≤0.05).(2)AD病例组与对照组血浆Hcy分别为14.72±6.2μmol/L和10.9±2.4μmol/L,两者差异有显著差异(P<0.05).AD患者血浆总Hcy水平显著高于正常组.结论 MTHFR基因突变及高同型半胱氨酸血症与Alzheimer病发生有一定关系.     

Hcy、MTHFR基因多态性与急性脑梗死的关系

目的：探讨同型半胱氨酸（Homocysteine,Hcy）及亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因多态性与急性脑梗死的关系。方法：选取98名急性脑梗死患者以及98名健康志愿者进行性别、年龄和体重指数配对,检测并分析比较两组血浆Hcy浓度以及MTHFR677位点基因型。结果：急性脑梗死组和对照组的Hcy浓度分别为（16.83±5.86）μmol/L和（14.20±5.73）μmol/L,经统计学处理,差异具有统计学意义（P〈0.01）。急性脑梗死组的T等位基因频率（58.2%）显著高于对照组（40.8%）（χ2=11.80,P〈0.01）。急性脑梗死组CC、CT和TT基因型相应的Hcy浓度分别为（14.34±5.25）μmol/L、（16.12±5.87）μmol/L和（18.96±5.58）μmol/L,差异具有统计学意义（F=5.36,P〈0.05）,TT型显著高于CC型与CT型（P值分别为0.002;0.031）。结论：MTHFR基因C677T突变可影响Hcy水平,可能是急性脑梗死的重要发病机制之一。     

妊娠高血压综合征与MTHFR A1298C基因及血浆同型半胱氨酸水平的关系

目的探讨妊娠高血压综合征与N5,N10鄄亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFRA1298C)基因及血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的关系。方法运用多聚酶链反应鄄限制性内切酶片段长度多态性技术(PCR鄄RFLP)检测54例妊高征患者,100例正常妊娠妇女(MTHFRA1298C基因多态性,采用荧光偏振免疫法(FPIA)测定血浆总Hcy水平。结果MTHFRA1298C三种基因型频率与对照组相比差异无显著性,与患者不同临床特征无明显关联。妊高征组总Hcy水平明显高于正常妊娠组(P<0.05)。结论MTHFRA1298C基因突变与妊高征发生无关;高同型半胱氨酸血症是妊高征发病的一个新的危险因素。     

血清尿酸水平与急性缺血性中风患者预后的关系

目的探讨血清尿酸(UA)水平与急性缺血性中风(IS)患者预后的关系.方法观察450例IS患者入院(13.5±11.2)h的血清UA水平,同时测定血糖(GLU)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、肌酐(Cr)、红细胞比容(Hct)和血沉(ESR).并根据患者出院时神经功能恢复程度将其分为两组:轻度组(n=287)和中重度组(n=163).结果IS患者入院时血清UA水平轻度组明显高于中重度组(P＜0.01).经多因素Logistic回归分析,OR=1.14,OR 95%CI为1.00～1.26.结论血清UA水平升高可能是急性缺血性中风患者预后良好的独立预示因素之一.提示急性缺血性中风与氧化损害有关.     

血清钙调蛋白水平与急性缺血性脑卒中神经功能缺损程度的关系

目的:观察急性缺血性脑卒中(IS)后48h血清钙调蛋白(CAM)水平变化及与美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的关系。方法:急性IS患者(IS组,n=120),入院时采用NIHSS进行评分,并按NIHSS评分5分(A组,n=51)和NIHSS评分≤5分(B组,n=69)分为两个亚组,于IS后48h测定血清CAM值;另取体检健康人群(对照组,n=100)平行测定血清CAM值。比较IS组与对照组以及不同NIHSS评分IS患者血清CAM水平差异,分析IS组CAM水平与NIHSS评分的相关性。结果:IS组血清CAM值较对照组显著增高(t=15.34,P0.01);A组患者CAM水平明显高于B组(t=10.51,P0.01);急性IS患者血清CAM水平与NIHSS评分呈显著正相关(r=0.308,P0.01)。结论:血清CAM水平可反映IS患者急性期病情程度。     

半乳糖凝集素3与急性缺血性脑卒中的相关性研究

目的 探讨半乳糖凝集素3(galectin-3,gal-3)与急性缺血性脑卒中的关系及临床意义.方法 选择急性缺血性脑卒中患者165例为患者组,同期健康体检中心无脑卒中病史的健康体检者100名为对照组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测gal-3;行头颅核磁共振检查计算脑梗死体积大小,按美国国立卫生研究所中风量表(NIHSS评分)进行神经功能缺损程度评估.结果 对照组血清gal-3水平(5.18±1.56μg/L)与患者组(14.57±3.35 μg/L)差异有统计学意义(t=23.517,P＜0.01);gal-3水平随脑梗死体积增加而呈递增趋势,差异有统计学意义(F=130.86,P＜0.01).Spearman相关分析显示,脑梗死体积与血清gal-3水平正相关(rs =0.927,P＜0.01);gal-3水平随神经缺损程度增加而呈递增趋势,差异有统计学意义(F=126.53,P＜0.01).Spearman相关分析显示,神经缺损程度与血清gal-3水平正相关(rs =0.872,P＜0.01).结论 急性缺血性脑卒中患者gal-3水平显著升高,其升高程度与脑梗死体积、神经功能缺损程度相关.     

MTHFR基因多态性检测试剂盒的性能验证

目的对人亚甲基四氢叶酸还原酶MTHFR基因多态性检测试剂盒通过实时荧光聚合酶链式反应(PCR)检测MTHFR基因多态性的准确性、精密度和检测限进行验证。方法利用实时荧光PCR对20例标本的MTHFR基因多态性进行检测,将结果与测序(金标准)结果进行比较,以验证准确性;采用杂合型DNA标本重复扩增10次,以验证精密度;将杂合型DNA标本稀释至检测限(10ng/μL)下的浓度进行检测,重复3次,以验证检测限。结果20例标本的MTHFR基因多态性检测结果,与其测序结果完全符合,符合率为100%(20/20);重复扩增10次的分型检测结果与实际基因型完全相符,且所有通道的CT值变异系数CV≤5%;稀释到检测限下的三次重复实验均能准确进行分型。结论该人MTHFR基因多态性检测试剂盒通过PCR方法进行的基因分型结果稳定、可靠,适用于医学实验室对MTHFR基因多态性的检测。     

eNOS基因和MTHFR基因多态性与妊娠高血压综合征发病的相关性研究进展

〔摘要〕 妊娠高血压综合征（妊高征）产科常见的并发症，是引起孕产妇和围产儿死亡的主要原因之一，对其发病原因和机理尚不清楚。一般认为是由环境因素和遗传因素共同作用造成的，目前的研究热点是易感基因与妊高征的关系。本文对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性与妊高征发病的相关性进行了综述。     

双联抗血小板治疗对后循环缺血性脑卒中患者的预后结局的影响

目的探讨双联抗血小板治疗对后循环缺血性脑卒中患者预后效果的影响。方法选取我院自2010年10月至2013年10月间收治的200例后循环缺血性脑卒中患者作为研究对象,依据抗血小板治疗方案不同分成两组,对照组患者100例,采用双嘧达莫治疗,观察组患者100例,采用阿司匹林联合双嘧达莫双联抗血小板治疗。两组治疗疗程均为2周。治疗前及治疗后,评估并比较两组患者的阿尔茨海默病评估量表(ADAS-Cog评分)及NIHSS(美国国立卫生研究院卒中量表)评分。检测患血小板(PLT)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)及纤维蛋白原(FIB)水平。随访1年,对比两组患者预后结局及不良反应的差异。结果两组患者治疗前ADAS-Cog、NIHSS评分无显著差异(P>0.05)。两组患者治疗后的ADAS-Cog、NIHSS评分等均明显优于治疗前(P<0.05);治疗后观察组患者ADAS-Cog、NIHSS评分优于对照组患者(P<0.05)。经过2周治疗后,两组患者的四项指标均不同程度的升高,其中观察组患者PLT及MPV与治疗前比较,差异有统计学意义(t=6.75,8.01,P<0.05)。随访1年,观察组的死亡率、致残率及复发率均显著小于对照组(P<0.05),而不良反应发生率无差异(P>0.05)。结论采用双联抗血小板治疗后循环缺血性脑卒中患者,能够有效改善症状及短期预后结局。     

CYP2C19、ALDH2和MTHFR基因多态性与冠心病的相关性研究

目的 探讨细胞色素P450 2C19 (cytochrome P450 2C19,CYP2C19)、乙醛脱氢酶2(acetaldehyde dehydrogenase 2,ALDH2)和亚甲基四氢叶酸还原酶(methylene tetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因多态性与冠心病的相关性.方法 分别采用DNA微阵列芯片技术和PCR-芯片杂交方法,对187例冠心病患者和166名健康体检者的CYP2C19、ALDH2和MTHFR位点进行多态性分析.结果 CYP2C19*2/*2、ALDH2 AA和MTHFR TT基因型及频率在冠心病组分别为8.9％、12.3％和34.9％,在对照组分别为3.6％、1.8％和4.1％,两组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.05);Logistic回归分析发现ALDH2和MTHFR基因多态性是冠心病发生的重要危险因素,ALDH2 GA和AA基因型:OR值=2.09,MTHFR CT和TT基因型:OR值=2.11.结论 ALDH2和MTHFR基因多态性可增加冠心病的发生风险.     

唐氏综合征患儿母亲MTHFR C677T基因多态性及血浆叶酸、同型半胱氨酸水平的研究

目的研究浙南地区汉族妇女叶酸及代谢产物同型半胱氨酸水平、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T位点多态性与唐氏综合征(Down’s Syndrome,DS)发生的关系。方法对84例已生育DS患儿的母亲(观察组)和120例生育过正常儿童的母亲(对照组)采用PCR扩增及DNA测序法检测亚甲基四氢叶酸还原酶基因MTHFR C677T单核苷酸多态性;免疫发光法检测叶酸(Folate)及循环酶法检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平。结果 MTHFR 677 T基因及CT、TT基因型的频率两组无统计学意义(P>0.05)。对观察组与对照组的部分标本行血浆Folate与Hcy水平测定,观察组Folate水平显著高于对照组(t=-5.572,P<0.05);Hcy水平两组平均水平无统计学意义(t=0.152,P>0.05);Fo-late与Hcy水平呈负相关关系(r=-0.217,P<0.05)。观察组与对照组MTHFR 677CT、TT基因型与CC基因型Hcy水平比较均无统计学意义(P>0.05),观察组TT基因型Hcy水平比对照组有显著性升高(t=2.546,P<0.05)。结论本研究MTHFR C677T位点不是浙南地区汉族妇女DS的风险因素;DS母亲Folate水平高于对照组及MTHFR 677 TT基因型Hcy水平高于对照组,可能存在影响叶酸代谢的其他相关基因的多态性或营养的缺乏,有待进一步深入研究。     

脂蛋白相关磷脂酶A2水平与急性缺血性脑卒中的相关性研究

目的：研究急性缺血性脑卒中患者血脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)水平的变化及影响因素。方法将192例符合筛选标准的急性缺血性脑卒中患者设为卒中组、79例健康体检者设为对照组,前者又根据美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评价神经功能缺损程度,分为轻度(<4分)、中度(4~15分)、重度(>15分)3个组;采血检测血浆Lp-PLA2浓度、血常规和血生化。结果①脑卒中组患者Lp-PLA2浓度显著高于对照组,而且重度组高于中度组、中度组高于轻度组,差异均有统计学意义(P<0.05);②脑卒中组血白细胞(WBC)、中性粒细胞(NE)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、脂蛋白Lp(a)、葡萄糖(Glu)水平明显高于对照组;高密度脂蛋白(HDL)低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);③多重线性回归分析显示院Lp-PLA2与年龄、肥胖、NIHSS评分呈正相关。结论在急性缺血性卒中中Lp-PLA2增高,检测Lp-PLA2可为临床的治疗和二级预防提供一定的帮助。