化学发光免疫分析测定血清甲状腺素

建立了以鲁米诺，过氧化氢作为发光底物，辣根过氧化物酶作同标记酶的化学发光免疫分析法，用于血清中甲状腺素水平测定，此法灵敏度为４．６ｎｇ／ｍｌ，不同水平Ｔ４批内变异系数为４．５％～７．８％，批间变异系数为７．０％～７．４％，加入Ｔ４５０ｎｇ／ｍｌ，１００ｎｇ／ｍｌ，２００ｎｇ／ｍｌ回收率分别为１０５％，１０１％，１０４％，与放免法有较好的相关性，ｒ＝０．８３１，Ｐ〈０．００１，关系式为Ｔ４－ＣＬＩＡ     

化学发光免疫分析法测定血清甲状腺素

建立了以鲁米诺、过氧化氢作为发光底物，辣根过氧化物酶作为标记酶的化学发光免疫分析法，用于血清中甲状腺素水平测定，此法灵敏度为４．６ｎｇ／ｍｌ，不同水平Ｔ＿４批内变异系数为４．５％～７．８％，批间变异系数为７．０％～７．４％。加入Ｔ＿４５０ｎｇ／ｍｌ、１００ｎｇ／ｍｌ、２００ｎｇ／ｍｌ，回收率分别为１０５％、１０１％、１０４％，与放免法有较好的相关性，ｒ＝０．８３１，Ｐ＜０．００１，关系式为Ｔ４－ＣＬＩＡ＝０．９１５Ｔ４－ＲＩＡ＋２７．１（ｎｇ／ｍｌ），ｎ＝２６。　此法操作简便，检测速度快，适合于临床应用。     

促甲状腺素吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立一种定量检测人血清促甲状腺素(TSH)的方法.方法 根据双抗体夹心法实验原理,分别用吖啶酯和生物素标记两株不同的单克隆抗体,链霉亲和素包被微粒,通过链霉亲和素-生物素系统分离固相和液相完成检测.结果 本方法的最低检测限为0.01 μIU/mL,线性范围0.3～60μIU/mL,批内变异为1.9％ ～2.3％,总变异为6.4％ ～8.6％,与ROCHE公司的促甲状腺素检测试剂盒(电化学发光法)比对,相关系数r=0.9935.结果 本方法的各项指标均能满足临床检测的要求,可以临床推广应用.     

促甲状腺素受体抗体化学发光免疫分析法与酶联免疫分析法的对比研究

正运用化学发光免疫分析法(CLIA)与酶联免疫分析法(ELISA)分别检测血清促甲状腺素受体抗体(TRAb)含量,分析比较两种方法的差异,探讨CLIA法检测TRAb的可行性和实用性。对象和方法1对象本院内分泌科门诊及住院随机患者血清样本共87例,男23例,平均年龄51±13岁;女64例,平均年龄43±15岁。     

尿游离皮质醇化学发光免疫分析

目的 :应用IMMULITE化学发光系统测定尿游离皮质醇并进行评价。方法 :尿液以二氯甲烷抽提后行化学发光免疫分析。结果 :抽提回收率为 (92 7～ 10 5 33) % ,平均为 97 74 % ;稀释试验O/E比值为 87 9～ 10 7 9,平均为 10 0 76 % ;批内变异系数分别为 9 4 %、3 7%、8 1% ,平均 7 1% ,批间变异系数为 7 7%、5 7%、9 7% ,平均 7 7% ;4 2份样本结果分析本法与RIA相关性好r =0 .90 5 (P <0 .0 1) ;正常人参考范围(17 34～ 116 0 2 ) μg/2 4h。结论 :本法具有良好的准确性、健全性和重复性 ,适用于临床常规测定。     

CA125酶促化学发光免疫分析方法的建立

CA125是细胞表面的一种高分子糖蛋白。对卵巢癌患者血清中CA125浓度进行测量,结果显示80％的上皮癌患者血清中的CA125含量有所升高,而健康女性中CA125升高比例只有不到1％,所以利用CA125浓度值来判断卵巢癌的发生具有重要的临床意义。酶促化学发光免疫分析方法继承了酶联免疫分析的特点,又普遍具有高灵敏度、快速检测等优点,已被医院大量使用。利用双抗体夹心法建立CA125酶促化学发光免疫分析方法具有重要意义。     

糖类抗原CA72-4化学发光定量免疫分析方法的建立

目的 建立糖类抗原CA72-4化学发光定量免疫测定方法.方法 一株抗CA72-4单克隆抗体经微孔板固相包被与另一株酶标单克隆抗体建立双夹心反应体系,检测样品中CA72-4抗原的含量.通过与国外权威试剂盒血样测值的对比,分析该方法临床应用的可行性.结果 该分析方法线性范围为0～ 160 U/mL,灵敏度为0.55U/mL.批内CV值为:5.49％,4.53％;批间CV值为:8.12％,7.81％;回收率为:99.74％ ～ 104.11％;与CEA,CA125,CA19-9无交叉反应;与法国Cisbio analysis公司所生产的CA72-4免放药盒血清测值对比分析后,发现两者相关性较高,并确定了本分析方法的正常范围.结论 该分析方法的测定结果与参比试剂盒结果有较高符合率,可用于临床血清中CA72-4的检测.     

孕酮化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立具有较宽检测范围的孕酮(P)化学发光免疫分析方法.方法 采用竞争一步法原理建立P化学发光免疫分析检测体系,对各种影响因素如免疫试剂的稀释度、免疫试剂的稀释体系及温育时间等进行了考察和优化,最终选定的实验条件分别对该体系的最低检出限、线性、精密度、准确性、特异性进行评估,并与进口全自动化学发光试剂检测结果进行对比.结果 本系统线性范围为0.5~90 ng/mL,最低检出限为0.05ng/mL,批内批间变异变异系数均小于10%,与高浓度孕烯醇酮、雄烯二酮、雌二醇均无交叉反应,添加回收率在96.1%~106.2%.与进口全自动化学发光试剂同时测定175份样本的P浓度,二者测定结果的相关系数r为0.981.结论 成功建立了孕酮化学发光免疫分析法,该方法线性范围宽,灵敏度高,可作为进口化学发光试剂的替代试剂在临床进行推广.     

甘胆酸化学发光定量免疫分析方法的建立

目的 建立甘胆酸（CG）化学发光免疫检测方法.方法 采用竞争法,固相微孔L板包被技术,通过与参比试剂盒临床结果相关性的比较,保证其具有同等的临床诊断价值.结果 本试剂盒的线性范围为0.25～ 40 μg/mL,灵敏度为0.05μg/mL,批内精密度分别为7.1％和7.4％;批间精密度为11.3％和15.74％;样品的回收率在85％～115％之间.与透明质酸、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原氨端肽、层粘连蛋白、胆酸以及鹅脱氧胆酸的交叉反应率在0.010％～1.480％之间,均不会对CG的正常测定构成干扰.通过临床样品正常值的测定确定了正常值范围,与有关文献报道基本一致.同时,与北京北方生物技术研究所的放免药盒临床结果进行科学比较,两组结果的相关系数r为0.947.结论 该试剂盒与参比试剂盒的测定结果具有较高的符合率,应用于临床,可为慢性肝炎复发、轻度肝硬变、肝癌、肝胆胃肠消化系统疾病的研究诊断提供可靠的指标.同时,肝胆酸与血清Ⅳ型胶原、透明质酸和前白蛋白（PA）动态联检对于肝硬化的诊断、疗效及预后判断具有重要的临床意义.     

化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用分析

目的 通过对比,探讨了化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒及核心抗体定性检测中的应用价值.方法 选取2013年5月至2015年5月在我院的疑似乙型肝炎患者80例,抽取空腹血液样本后都分别进行乙肝病毒以及核心抗体的化学发光酶免疫分析法及ELISA法检测,并对其检测结果进行分析.结果 化学发光酶免疫分析法检出乙型肝炎病毒阳性78例,检出率为97.5％;而ELISA检出乙型肝炎病毒阳性76例,检出率为95.0％,两种方法的检出率对比差异无统计学意义(P＞0.05).化学发光酶免疫分析法对于乙肝病毒核心抗体IgM与IgG的检测阳性率分别为80.0％和70.0％,而ELISA法检测两种抗体的阳性率则分别为18.8％和20.0％,化学发光酶免疫分析法对乙肝核心抗体IgM与IgG的检测阳性率明显高于ELISA法(P＜0.05).ELISA法检出HBc-IgM的最低限为0.135 IU/ml,检出HBc-IgM最低限为0.143 IU/ml;化学发光酶免疫分析法检出HBc-IgM最低限为0.032 IU/ml,检出HBc-IgG最低限为0.038 IU/ml.结论 化学发光酶免疫分析法在乙型肝炎检测中具有高的检出率,尤其对乙肝病毒的核心抗体的检测敏感度较高,值得在临床推广应用.     

血清3,5,3'-三碘甲腺原氨酸化学发光定量免疫分析方法的建立

目的 建立血清3,5,3'-三碘甲腺原氨酸(T3)化学发光定量免疫分析方法.方法 采用固相竞争法,96孔微孔板包被T3抗体,辣根过氧化物酶标记T3,鲁米诺为发光底物,建立T3化学发光定量免疫分析方法.结果 本方法的线性范围为0.5 ～8.0ng/mL;分析灵敏度为0.18ng/mL;批内变异系数为4.4％ ～6.6％,批间变异系数为5.5％～10.6％;回收率为90.0％～113.3％;高值T3血清样品经系列倍比稀释后的测定值与稀释度呈线性关系,相关系数为0.9922;与T4、γT3的交叉率分别为0.35％、0.54％;与罗氏电化学发光分析法的测定值具有较好的相关性.结论 本方法具有分析灵敏度高、特异性好和操作简便快速的特点,适用于临床检测和科研应用.     

化学发光免疫分析法检测C肽的分析性能验证

目的验证化学发光免疫分析法检测C肽的分析性能。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和相关文献,结合科室具体实际,验证深圳新产业MAGLUMI 4000 Plus检测系统检测C肽的基本分析性能。结果C肽低、高浓度批内不精密度、批间不精密度均在可接受范围内;无样本携带污染;C肽原装配套定值标准品检测值与靶值的偏倚小于12.5%,20例临床样本与MAGLUMI 4000检测结果差异无统计学意义(P>0.05),平均相对偏差为3.76%;C肽最大稀释倍数为8倍;功能灵敏度为0.10 ng/mL;C肽浓度范围在0.09~17.25ng/mL线性回归方程为Y=1.008X-0.2891,相关系数r=0.983;20名健康体检者检测C肽的结果为1.042~2.901ng/mL,100%的检测结果在厂家提供的参考区间内。结论深圳新产业MAGLUMI 4000 Plus化学发光免疫分析检测系统检测C肽的基本分析性能与厂家声明或相关文献基本一致,可以替换深圳新产业MAGLUMI 4000,用于临床常规工作的开展。     

血清真胰岛素化学发光免疫分析方法学研究

建立一种高灵敏度真胰岛素临床常规检测方法.采用两株特异的抗胰岛素单抗体,分别抗胰岛素肽链上两个不同的抗原决定簇,用一株制备固相抗体,另一株标记碱性磷酸酶C,以金刚烷衍生物为发光底物建立化学发光免疫分析(CLIA)法.结果表明本方法灵敏度为0.06μIU/mL,标准曲线量程为1.0～150μIU/mL,批内和批间CV分别为5.0%、7.8%,平均回收率为94.4%.分别测定了男、女成人空腹血清各100份,男性实测范围0.52～11.23μIU/mL,平均值为3.86μIU/mL,女性实测范围为0.75～10.66μIU/mL,平均值为3.62μIU/mL.真胰岛素CLIA法简便快速,能真实反应血清胰岛素的水平,对临床糖尿病的诊疗和病理生理研究具有实用价值.     

化学发光免疫法检测前列腺特异性抗原的临床应用

目的 利用化学发光免疫法定量检测前列腺特异性抗原(PSA),分析其在临床诊断前列腺癌中的应用情况.方法 将60例前列腺癌患者设为A组,60例良性前列腺增生患者设为B组,60例健康体检者设为C组,对三组受试者血清中总前列腺特异性抗原(tPSA),游离前列腺特异性抗原(fPSA)进行化学发光免疫法检测,并分析其水平差异.结果 经检测,A组和B组的tPSA含量显著高于C组,而且A组tPSA含量显著高于B组,差异显著,存在统计学意义(P＜0.05);另外A组fPSA/tPSA比值低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 对PSA进行化学发光免疫法检测,具有较高的临床诊断价值,可为前列腺癌临床诊断提供可靠的参考依据.     

应用FITC系统建立雌二醇直接竞争化学发光免疫分析方法

目的利用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)系统建立人血清雌二醇(estradiol,E_2)直接竞争化学发光免疫分析方法。方法采用兔抗-FITC抗体、FITC-抗-E_2两步包被制备预包被板,采用直接竞争法原理建立E_2化学发光免疫分析检测体系,并对FITC-anti-E_2包被浓度、酶标抗原稀释比例、缓冲体系、反应时间等各种影响因素进行优化。结果本系统线性范围为30～3000 pg/mL,空白检测限4.8pg/mL,定量检测限30 pg/mL,分析内精密度5.6%,批间精密性8.7%,平均回收率95.9%,与雌三醇、睾酮、孕酮均无明显交叉反应,与贝克曼全自动化学发光试剂同时测定164份样本,二者测定结果的相关系数r为0.979。结论成功建立了雌二醇直接竞争化学发光免疫分析方法 ,该方法性能指标优秀,具有一定的临床应用价值。     

游离三碘甲状腺原氨酸酶免疫分析

将三碘甲状腺原氨酸（T3）与β－D半乳糖昔酶联结，制成T3-酶联结物（T3－E）。用T3－E作为示踪剂建立了游离T3（FT3）酶免疫分析（EIA）。本法灵敏度为0.29pmol／L，批内和批间变异系数分别为7.6％－8.7％和7.8％～14.9％，与二碘甲状腺原氨酸（T2）、反T3（rT3）和甲状腺素（T4）的交叉反应率分别为9.7×10-4、1.1×10-4和3.1×10-5。本法与FT3放射免疫分析（RIA）相关性好（r=0.91，P＜0.01）。用本法测定了36名正常人、16名健康孕妇、15例甲亢患者和15例甲低患者的血清中FT3值，其结果与临床相符。     

人促黄体生成素吖啶酯化学发光免疫分析方法的建立及评价

目的建立基于磁微粒-吖啶酯化学发光系统的人促黄体生成素(LH)全自动定量测定方法。方法根据双抗体夹心法原理,选择一株抗-LH单克隆抗体偶联磁微粒,吖啶酯标记另一株抗-LH单克隆抗体,建立LH化学发光免疫分析方法,并优化了反应体系、反应时间等影响因素,使整个系统达到最佳检测性能。结果本检测方法线性范围为0.25~250IU/L,空白检测限0.01IU/L,不同浓度样本的分析内精密度1.1%~4.4%、分析间精密性1.5%~4.2%,与hCG、FSH、TSH均无明显交叉反应,与贝克曼Access全自动化学发光免疫测定系统回归方程为Y=0.989X+0.214,相关系数r=0.988。结论成功建立了人促黄体生成素的吖啶酯全自动化学发光免疫分析方法,各项指标均满足临床检测的要求,具有一定的临床应用价值。     

化学发光免疫分析法检测乙肝病毒感染性标志物的临床应用

目的 探讨化学发光免疫分析法检测乙肝病毒感染性标志物的临床应用效果.方法 抽取我院2013年1月至2014年1月接收的疑似乙型肝炎病人800例,采用化学发光免疫分析法(CLIA)和酶联免疫吸附试验法(ELISA)分别检测患者的乙肝病毒血清标志物.结果 HBsAg、HBeAg、HBeAb的检出率CLIA高于ELISA(P＜0.01),两种方法HBsAb、HBcAb的检出率无明显差异(P＞0.05);低水平HBsAg检测ELISA敏感性低于CLIA;ELISA检出的最低浓度为0.128IU/mL,CLIA法检出的最低浓度为0.0311U/mL.结论 采用CLIA检测乙肝病毒感染性标志物相比ELISA更准确,可有效应用于乙肝临床诊断和病情动态监测.