视网膜母细胞瘤中N-myc拷贝的扩增与染色体异常的关系

作者在1975年～1979年调查了596例视网膜母细胞瘤(RB)病人。细胞遗传学分析发现,定位在13ql4的Rb-1基因缺失可引起RB,由于抑制(或控制)这种基因的功能失活而导致癌基因激活。另一方面,癌基因激活常与染色体异常或基因扩增有关。以前曾报道在RB肿瘤细胞系和RB肿瘤组织细胞中出现N-myc癌基因扩增并证明与双微体(DM)及均质染色区(HSR)有密切关系。作者进一步研究了RB肿瘤癌基因激活和染色体异常之间的关系,并考虑到肿瘤类型和家族背景。取正常人的肝、脾及皮肤成纤维细胞的N-myc作为标准。扩增超过     

双微体、均匀染色区和癌基因扩增

双微体(DM)和均匀染色区(HSR)是癌细胞的二种特异性染色体畸变,研究结果已经证明DM和HSR是癌基因扩增的细胞学表现。DM常常存在于瘤组织中而HSR多出现于已建立的细胞系中,在一定条件下二者可相互转化。DM和HSR中扩增基因的拷贝数与其致瘤能力有关。本文还对癌基因扩增的临床意义进行了讨论。     

核型异常的演化和人类结肠癌细胞系c-myc癌基因扩增

肿瘤细胞常常显示出基因扩增双微体(DM)或标记染色体中的均质染色区(HSR)。本文作者探索了这个问题。在培养人类结肠癌细胞系COLO320观察DM和HSR的同时,培养正常妇女皮肤成纤维细胞     

基因扩增机制的研究进展

基因扩增在很多恶性肿瘤发生发展中起重要作用。它是肿瘤细胞获得无限制生长及耐药的主要机制。基因扩增在细胞遗传学上主要表现为双微体(doubleminutes,DMs)和均质染色区(homoge-neouslystainingregions,HSR),了解基因扩增的机制可以为肿瘤治疗提供新的有效的途径。本文综述了基因扩增始动的机制,影响扩增的因素及基因扩增在细胞遗传学上的变化。     

双微体的研究进展

基因扩增在细胞遗传学上常表现为双微体 (DMs)和均质染色区 (HSR)。DMs可见于多种类型的肿瘤细胞 ,是肿瘤病人主要的细胞遗传学标记。在多种不同类型的肿瘤中 ,癌基因的扩增和过表达与演进有很强的相关性 ,在特定的恶性肿瘤中是不良预后的分子标记。此外 ,基因扩增与肿瘤细胞的抗药性有关。本文综述了目前在 DMs的细胞及分子遗传学、DMs介导的抗药性、DMs与肿瘤的相关性等领域中的研究进展。     

浸润性人肝细胞癌中循环素D_1基因的扩增和过量表达

众多研究表明,循环素的变化特别是循环素D_1基因的改变促进细胞循环的进行,并在恶性肿瘤形成和(或)发展中起重要作用。 作者对45例肝细胞癌中循环素D_1的变化进行了分析。45例中,5例发现循环素D_1被扩增,其中4例有INT-2基因被共扩增。另外,循环素D_1基因被扩增的拷贝被包含于染色体11g13区域的一个     

基因扩增机制的研究进展

基因扩增在很多恶性肿瘤发生发展中起重要作用。它是肿瘤细胞获得无限制生长及耐药的主要机制。基因扩增在细胞遗传学上主要表现为双微体（double minutes，DMs）和均质染色区（homogeneously staining regions，HSR），了解基因扩增的机制可以为肿瘤治疗提供新的有效的途径。本文综述了基因扩增始动的机制，影响扩增的因素及基因扩增在细胞遗传学上的变化。     

双微体的研究进展

基因扩增在细胞遗传不寂常表现为双微体（DMs) 和均质染色区（HSR),DMs可见于多种类型的肿瘤细胞,是肿瘤病人主要的细胞遗传学标记,在多种不同类型的肿瘤中,癌基因的扩增和过表达与演进有很强的相关性,在特定的恶性肿瘤中是不良预后的分子标记,此外,基因扩增与肿瘤细胞的抗药性有关,本综述了目前在DMs的细胞及分子遗传学,DMs介导的抗药性,DMs与肿瘤的相关性等领域中的研究进展。     

肺鳞状细胞癌的M6P/IGF2R突变

为了探测肺鳞状细胞癌的甘露糖 - 6-磷酸酶 /类胰岛素生长因子 ( M6P/IGF2 R)有否突变 ,作者通过组织显微镜解剖法收集样本 ,PCR扩增DNA,M6P/IGF2 R测序及免疫组化染色 ,对 2 2例新诊断尚未治疗的肺鳞状细胞癌样本进行了杂合性丢失 ( LOH)筛查。结果表明 ,肺鳞状细胞癌中常见 M6P/IGF2 R突变 ,其正常功能为肺癌抑制基因。 1 9/2 2例( 86% )有 LOH信息 ,其杂合信息为该受体 3′-非翻译区的多聚二核苷酸重复序列和四核苷酸插入或缺失性多态。在 1 1 /1 9例 ( 5 8% ) M6P/IGF2 R基因座有 LOH信息的患者中 6女 1 3男 ,平均年龄 …     

癌基因c-erb B2与胃肠道癌

癌基因异常已知有点突变、基因过度表达、扩增及重排等。属受体型酪氨酸激酶的c-erb B2的过度表达和基因扩增与癌的恶性程度有关,故可作为癌症预后的指标。作者对9例胃癌和30例结肠癌病例进行了c-erb B2癌基因的扩增、重排及点突变分析。对异常部位,基因扩增与蛋白的过度表达、细胞外区异常与跨膜区异常的相关性进行了探讨。 结果与讨论:作者证实了Erb B2蛋白过度表达,其原因可能因基因扩增使5’端启动子结构导演而致表达调控异常。Erb B2蛋白类跨膜型受体型蛋     

免疫球蛋白可变区基因的体外扩增、序列分析及人-鼠嵌合重链抗体的表达

本文用聚合酶链反应法(PCR)扩增了抗人小细胞肺癌单克隆抗体的轻、重链可变区基因(V_k、V_H基因)。逐步克隆将V_H基因与表达质粒重组,最终与载有人恒定区基因的载体拼接,得嵌合质粒的在哺乳类细胞中表达了人-鼠嵌合重链抗体。 1 免疫球蛋白可变区基因的体外扩增用酸性异硫氰酸胍-苯酚-氯仿抽提抗人小细胞肺癌单克隆抗体的细胞,得较高质量的总RNA,用oligo(dT)为引物合成第一链     

膀胱移行细胞癌c-erB-2蛋白的免疫细胞化学定位

已有研究表明,移行细胞癌有c-erB-2基因的扩增和过度表达,但迄今为止,有关c-erB-2的细胞定位尚有争论,为此作者对移行细胞癌进行了South-ern、Northern、免疫印迹,免疫细胞化学的综合分析,以确定c-erB-2的表达情况及细胞定位。 作者选用不同级别移行细胞癌(82例),活检原位癌(4例)及原位癌患者尿细胞(5例)为实验组。对照选用病人外周血(25例),膀胱癌病人的“正常”膀胱上皮组织(39例)无肿瘤病人的膀胱上皮组织(10例),膀胱内病变组织(22例),志愿者外     

一种高效扩增人T细胞受体β链可变区基因的方法建立

目的:建立一种高效扩增人T细胞受体(TCR)β链可变区(Vβ)基因的方法.方法:根据TCR Vβ26个亚家族基因序列特点设计扩增Vβ基因的上游内引物34条、上游外引物37条, 并将内、外上游引物各分为8个简并组.在恒定区(C区)设计下游内、外和测序引物各1条以及扩增Cβ基因的上游引物1条.提取细胞RNA, 用PolyA介导反转录后, 采用巢式PCR扩增正常人CD8 T细胞TCR Vβ26个亚家族基因, 并用Jurkat T淋巴瘤细胞作为对照.用T-easy载体克隆RT-PCR 产物, 对克隆基因进行测序.结果:从正常人的CD8 T细胞中扩增到所有TCR Vβ亚家族基因, 克隆后测序与相应的参考序列同源.从Jurkat细胞扩增出TCR Vβ8基因, 经测序验证与文献报道一致, 且最少可从10个细胞提取的RNA模板中扩增成功.结论:建立的巢式RT-PCR方法可以高效、广谱地扩增人TCR Vβ基因, 为进一步进行抗原特异性细胞毒T淋巴细胞的TCR克隆和功能研究打下了良好基础.     

两个新建乳腺癌细胞系染色体畸变和癌基因改变

人乳腺癌细胞系在乳癌的起因、发展治疗等研究中有重要作用,它为研究乳腺癌雌激素作用、癌基因活性、扩增、异常表达以及抗药性的发展机理提供了有效模型。作者自乳癌扩散淋巴结建成两个细胞系UISO-BC-1及UISO-BC-2)并作了细胞及分子遗传学研究。两细胞系染色体倍性相似,UISO-BC-1为58～59条染色体,UISO-BC-2为59条,而G显带表明二者核型差异明显,前者每一分裂相约有34～36条正常染色体,22～25条标记染色体,其中17条可识别,后者     

少发的乳癌和/或卵巢癌家族中BRCA1和BRCA2基因原发突变的特点

BRCA1与 BRCA2 是新近发现的两个乳癌发生密切相关的基因 ,是导致乳癌和 /或卵巢癌家族性高发的重要原因 ,既往关于 BRCA1和 BRCA2基因的研究多是在多发性乳癌和 /或卵巢癌家族中进行的 ,并发现 BRCA1和 BRCA2 基因的突变约占乳癌和 /或卵巢癌家族中一半患者的发生有关。本实验对 BRCA1和 BRCA2 基因在少发性乳癌和/或卵巢癌家族中突变特点进行研究。选择 1 0 4个乳癌和 /或卵巢癌家族 ,每个家族含有 3～ 9个乳癌和 /或卵巢癌患者不等 ,平均 3.8个。应用蛋白剪切试验及突变特异测定方法 ,对 93个家族中的癌患者和 1 1个家族中…     

食管鳞状细胞癌中HER-2基因扩增和蛋白表达

目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中HER-2基因扩增和蛋白表达状况以及与临床病理指标的关系。方法收集96例ESCC组织,采用免疫组化法检测HER-2蛋白表达,采用FISH法检测HER-2基因扩增,并对患者进行随访。结果免疫组化结果显示3例HER-2呈3+,15例2+,11例1+,67例-,3+的病例中2例HER-2基因扩增,15例2+的病例中1例拷贝数6.0。HER-2蛋白过表达与基因扩增存在显著相关性(P0.000 1)。HER-2基因扩增/蛋白过表达与肿瘤组织无坏死(P=0.012)、低临床分期(P=0.040)存在一定相关性。HER-2基因扩增/蛋白过表达患者呈预后好的趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论 HER-2在ESCC中有一定的基因扩增率和蛋白过表达率,两者具有相关性,且HER-2基因/蛋白过表达是潜在预后好的指标。     

喉癌 STK15基因异常与中心体扩增的研究

目的　研究喉癌中 STK15基因的异常及中心体扩增情况。方法　应用逆转录 -聚合酶链反应方法 ,检测 6 2例喉鳞状细胞癌和人喉鳞状细胞癌细胞系 Hep- 2中 STK15基因 m RNA表达水平 ;应用聚合酶链反应 -单链构象多态性检测上述组织及细胞中 STK15基因第 6、7外显子突变 ;以 Hep- 2细胞系为代表应用免疫荧光方法检测中心体扩增情况。结果　在 39例 ( 6 3% )喉癌及 Hep- 2细胞系中检测到了STK15基因的高表达 ;在上述组织和细胞中均未检测到 STK15基因第 6、7外显子的突变 ;Hep- 2细胞系有明显的中心体扩增 :单个细胞中心体数目变化范围为 1～ 7,有中心体扩增的细胞数为 11%～ 2 3%。结论　在 Hep- 2细胞系中发现了 STK15基因高表达与中心体扩增 ,提示 STK15基因高表达引起中心体扩增 ,可能是导致该细胞系染色体不稳定的重要因素 ;在喉癌组织中观察到了STK15基因高表达 ,提示它可能是导致喉癌发生的多因素之一     

钦州地区2256名新生儿听力筛查结果及相关易感基因联合检测分析

目的对新生儿听力筛查联合耳聋易感基因检测进行研究。方法新生儿听力筛查使用瞬态声诱发耳声发射(transient otoacoustic emission,TEOAE)法进行初筛,初筛阳性者送至有脑干诱发电位反应(auditory brainstem response,ABR)设备的医院进行复核。易感基因检测使用测序法或者溶解曲线法,检测目标包括GJB2、GJB3、SLC26A4和线粒体12S r RNA等相关基因座。结果 2256名新生儿中,TEOAE初筛阳性为126例,ABR复查阳性为6例。易感基因检测中,阳性结果45例。其中,1例ABR复查阳性者同时检测出易感基因阳性。讨论在新生儿听力筛查实施中,常规筛查联合易感基因筛查可相互结合,常规听力筛查机构应加大实验室建设力度,使之兼具基因筛查的能力。     

伴t(6;21;18)的急性非淋巴细胞性白血病的ETS_2癌基因扩增

t(8;21)是一种与非淋巴细胞性白血病(ANLL)有关的非随机性易位,其断裂点位于21q22带,这一区含人类ETS2癌基因,通过t(8;21),它可易位到8号染色体。然而,人类肿瘤中至今未发现ETS 2癌基因重排和扩增,为此作者对一例ANLL的ETS2癌基因进行了研究。患者化疗前抽取骨髓,将其分成两份。一份按常规方法进行细胞遗传学研究。从另一份标本提取高分子量DNA,经EcoRI消     

T细胞受体Dβ-JβsjTRECs连接区多样性

目的了解T细胞受体Dβ-Jβ重排形成的T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)连接区序列特点。方法利用巢式PCR分别扩增10例正常人外周血单个核细胞和3例正常胸腺细胞DNA中不同的Dβ片段和Jβ重排时形成的TRECs的情况,PCR产物进一步进行克隆和序列分析以确定结合区的序列。结果获得Dβ1与5个Jβ1基因片段、Dβ2与4个Jβ2基因片段分别形成的sjTRECs连接区序列,部分所形成sjTRECs的Jβ与Dβ之间存在核苷酸的随机插入(N区)等多样性。结论Dβ-Jβ sjTRECs的连接并非简单的头对头拼接方式,部分连接时存在N区而形成结合区多样性。