烫伤早期脑水肿家兔脑组织水通道蛋白4表达与磁共振成像结果相关性研究

目的 观察水通道蛋白4(AQP4)在严重烫伤早期合并脑水肿家兔脑组织中的表达规律以及与磁共振成像(MRI)信号变化的联系,探讨严重烫伤早期脑水肿水的跨膜转运特征. 方法 将35只健康新西兰大白兔按照随机数字表法分为正常对照组(5只)及烫伤组(30只),其中烫伤组家兔均造成50％TBSAⅢ度烫伤(经病理切片证实存在脑水肿).伤后1、2 3、4、5、6h,烫伤组家兔(每时相点5只)行MRI颅脑检查并动态检测表观弥散系数(ADC)值；烫伤组家兔取额叶、顳叶及顶叶皮质,基底节区及小脑组织,采用免疫组织化学法及RT-PCR分别检测AQP4蛋白和AQP4 mRNA的表达.正常对照组家兔同上进行检测.对数据进行单因素方差分析,对AQP4蛋白与ADC值进行一元线性相关分析和Pearson线性相关分析. 结果 与正常对照组比较,伤后6h内烫伤组家兔MRI图像(T1加权像、T2加权像、扩散加权成像)未见明显改变,伤后4～6 h烫伤组家兔脑组织各部位中ADC值均明显降低(F值为0.492～2 271,P值均小于0.05).烫伤组家兔伤后2～6 h脑组织各部位中AQP4蛋白表达趋势大体一致,均明显高于正常对照组(0.164±0.022 -0.247±0.018),其中伤后3 h或4 h达高峰(0.237±0.042-0.306±0.026),F值为2.420～11.439,P值均小于0.05.AQP4蛋白在脑组织各部位的表达均与相应ADC值变化呈显著负相关,其r值为-0.489 - -0.337P ＜0.05或P ＜0.01.烫伤组家兔伤后各时相点脑组织各部位中AQP4 mRNA表达均明显高于正常对照组(F值为39.992～238.584,P值均小于0.05),伤后2h达高峰,且在脑组织各部位表达趋势大体一致. 结论 家兔严重烫伤后早期脑水肿(伤后6h以内)以细胞毒性脑水肿为主,AQP4可能在其形成过程中发挥重要作用.ADC值对于反映AQP4变化,进而无创、便捷评估脑水肿发展状况可能具有重要参考价值.     

烫伤大鼠脾脏高迁移率族蛋白B1表达对调节性T淋巴细胞免疫功能的影响

目的 探讨严重烫伤大鼠延迟复苏后脾脏高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达对调节性T淋巴细胞(Treg)表型及其介导T淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将104只Wistar大鼠按随机对照表法分为正常对照组8只、假烫组32只、烫伤组32只、丙酮酸乙酯(EP)治疗组32只.后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,伤后6 h腹腔注射林格液或EP液延迟抗休克,伤后12 h起每隔12 h给予4 mL林格液或EP液至伤后48 h;假烫组除于37℃模拟烫伤外其余处理同烫伤组.于伤后1、3、5、7 d处死各致伤组大鼠,另处死正常对照组大鼠,免疫磁珠法分离大鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg,ELISA法检测脾脏HMGBI含量及T淋巴细胞上清液中IL-2水平,采用流式细胞仪检测Treg表面分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)表达,同时检测T淋巴细胞增殖活性(数据以吸光度值表示).对数据进行多组间方差分析和2组独立样本间的t检验.结果 (1)烫伤组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d显著高于假烫组,其中第1天达峰值[(46.7±8.3)ng/mg蛋白];EP治疗组大鼠脾脏HMGBI含量伤后1～7 d明显低于烫伤组.(2)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～5 d CTLA-4表达明显增强(t值分别为10.459、12.051、4.029,P<0.05或P<0.01);EP治疗组伤后1～7 d CTLA-4表达较烫伤组显著降低(t值分别为2.796、9.913、9.581、10.022,P<0.05或P<0.01).(3)与假烫组比较,烫伤组大鼠伤后1～7 d脾脏T淋巴细胞增殖活性明显受抑,其中伤后1 d达低谷(0.167±0.059);IL-2水平伤后1～7 d显著下降,其中伤后5 d达低谷(44±24)pg/mL.与烫伤组比较,EP治疗组伤后各时相点脾脏T淋巴细胞增殖受抑状态明显缓解,且IL-2水平明显上升.结论 严重烫伤后HMGB1产生可诱导Treg向成熟发展,从而介导T淋巴细胞增殖反应低下,免疫功能抑制.EP通过抑制HMGB1的合成与释放,改善烫伤延迟复苏大鼠的细胞免疫功能紊乱.     

休克期切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响

目的观察不同时相点切痂对烫伤大鼠外周血淋巴细胞凋亡及单核细胞抗原呈递功能的影响。方法将136只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(8只)、单纯烫伤组(64只)、休克期切痂组(40只)、非休克期切痂组(24只)。对照组不作烫伤处理;其他组均造成30％TBSAⅢ度烫伤,其中后两组分别于伤后36、120 h行切痂植皮术。单纯烫伤组分别于伤后6、12、24、72、120、168、216、288 h处死;两个切痂组分别于伤后72～288 h、168～288 h(时间间隔同上)处死,留取血液标本检测淋巴细胞凋亡率、单核细胞主要组织相容性抗原(MHC)Ⅱ类分子阳性表达率、干扰素(IFN)γ及白细胞介素(IL)4浓度的变化,并行相关性分析。结果伤后6 h开始,单纯烫伤组淋巴细胞凋亡率迅速升高,24 h达峰值(18．19±1．42)％,之后迅速回落,于伤后72 h降至低谷(8．25±0．56)％,随着时间延长又逐渐升高,288 h时(17．81±1．99)％接近峰值,均明显高于对照组(P<0．05);伤后168～288 h两个切痂组淋巴细胞凋亡率明显低于单纯烫伤组(P<0．01)。单纯烫伤组伤后6 h单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率急剧下降,伤后24 h已低于对照组[(37．2±2．4)％]的20％,之后逐渐升高,伤后288 h为(18．8±2．8)％,明显低于两个切痂组(P<0．01)。伤后6 h开始,单纯烫伤组血浆IFN-γ浓度迅速上升,24 h时达峰值(440．8±25．1)ng／L,之后逐渐回落,288 h降至低谷(51．3±37．0)ng／L;而IL-4水平则呈线性上升,于伤后288 h达峰值(78．1±2．8)ng／L;伤后72～288 h单纯烫伤组单核细胞MHC-Ⅱ类分子阳性表达率与休克期切痂组IFN-γ／IL-4比值呈明显的负相关(r= -0．96,P<0．05)。结论大鼠烫伤后切痂能明显抑制淋巴细胞凋亡,减缓IFN-γ／IL-4倒置的趋势,改善单核细胞抗原呈递功能。其中在单核细胞免疫功能恢复方面,休克期切痂较非休克期切痂效果显著。     

早期应用冬眠合剂对严重烫伤大鼠小肠的保护作用

目的 了解早期应用冬眠合剂对严重烫伤大鼠小肠的保护作用.方法 将66只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假伤组6只、烫伤组30只、烫伤+冬眠合剂组30只.麻醉后,将后2组大鼠造成30%TBSAⅢ度烫伤,假伤组37℃水浴模拟烫伤.3组大鼠伤后均立即腹腔注射乳酸钠林格液(2 mL·kg-1·%TBSA-1)复苏;同时烫伤+冬眠合剂组皮下注射冬眠合剂(50 mg/mL哌替啶、25 mg/mL氯丙嗪、25 mg/mL异丙嗪各1 mL加入125 mL生理盐水中)12 mL/kg,假伤组和烫伤组注射生理盐水12 mL/kg.分别于伤后3、6、12、24、48 h取烫伤组与烫伤+冬眠合剂组大鼠各6只(假伤组伤后3 h取材),采集血液和小肠组织标本.观察烫伤组与烫伤+冬眠合剂组大鼠伤后24 h、假伤组伤后3 h小肠组织病理变化,并用免疫组织化学法检测小肠组织胞间黏附分子1(ICAM-1)和CD68的表达.采用ELISA法测定各组大鼠血浆D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、IL-1β、TNF-α、IL-10水平.数据行单因素方差分析.结果 (1)伤后24 h,烫伤组大鼠小肠黏膜轻度出血,炎症细胞浸润、上皮细胞脱落;烫伤+冬眠合剂组较烫伤组肠绒毛排列规则,无明显充血、水肿表现.(2)烫伤组小肠ICAM-1和CD68阳性表达率分别为(1.69±0.27)%和(0.80±0.09)%,均显著高于假伤组的(0.77±0.10)%和(0.30±0.05)%(F值分别为77.303、66.933,P<0.05或P<0.01)与烫伤+冬眠合剂组的(0.53±0.09)%和(0.32±0.06)%(F值同前,P值均小于0.01).(3)烫伤+冬眠合剂组大鼠伤后12、24 h D-乳酸水平明显低于烫伤组(F值分别为20.936、19.854,P值均小于0.01).烫伤+冬眠合剂组DAO水平于伤后3、12 h显著低于烫伤组(F值分别为21.930、11.342,P值均小于0.05).(4)烫伤组各时相点IL-1β、TNF-α水平均明显高于假伤组(P值均小于0.01),烫伤+冬眠合剂组伤后6、12、24 h IL-1β、TNF-α水平均低于烫伤组(F值分别为96.517、17.365、79.715与21.328、17.682、28.424,P<0.05或P<0.01);烫伤+冬眠合剂组各时相点IL-10水平均高于烫伤组,并在6、24 h时差异具有统计学意义(F值分别为8.668、19.634,P<0.05或P<0.01).结论 早期应用冬眠合剂可减轻严重烫伤大鼠小肠黏膜水肿和损害,该机制可能与其降低肠道ICAM-1的表达和血液炎症介质水平、减少肠道局部炎症细胞数量有关.     

牛磺酸对烫伤大鼠心肌线粒体成分和酶活性的保护作用

目的 了解牛磺酸对大鼠烫伤后心肌线粒体成分和酶活性变化的影响.方法 将120只大鼠背部脱毛后造成30%TBSA的Ⅲ度烫伤.分为烫伤组(60只),伤后腹腔注射等渗盐水(4mL·kg-1·1%TBSA-1);牛磺酸治疗组(60只),伤后腹腔注射20 g/L牛磺酸液(200 mg/kg).伤后1、3、6、12、24、48 h处死大鼠.取心肌组织检测心肌线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素c氧化酶(CCO)、超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-腺苷三磷酸酶(ATPase)活性和细胞色素c、细胞色素aa3、丙二醛(MDA)、细胞质及线粒体内ca2+含量.另取10只大鼠作为对照组,模拟烫伤不予补液,1 h后处死大鼠取心肌组织检测以上指标.结果 烫伤组大鼠伤后1 h CCO活性即开始下降,伤后6、12 h下降最明显,而SDH活性在伤后6 h下降最明显,且各时相点均低于对照组;牛磺酸治疗组CCO和SDH下降不明显,伤后3、6、12 h CCO活性与烫伤组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).伤后3、6、12、及24 h烫伤组心肌线粒体细胞色素c和细胞色素aa3均显著降低.而牛磺酸组虽然有所下降,但以上4个时相点的值均高于烫伤组(P＜0.05).烫伤组SOD活性在伤后3、6、12 h均显著性下降,ca2+ATPase活性在伤后3、6、12及24 h均有不同程度下降;而牛磺酸治疗组虽然有所下降,但以上4个时相点SOD、Ca2+-ATPase值均高于烫伤组(P＜0.05).伤后3～48 h烫伤组、牛磺酸治疗组MDA值均高于对照组(P＜0.05),但牛磺酸治疗组低于烫伤组(P＜0.05).伤后1 h烫伤组大鼠心肌线粒体中Ca2+即开始升高为13.7±1.5,伤后3、6、12、24 h分别为24.8±2.6、29.7±3.1、16.3±1.9及13.5±1.7.均高于对照组(10.7±1.6,P＜0.05);心肌细胞质中ca2+在伤后3、6、12、24 h也明显高于对照组(P＜0.05).伤后3、6、12及24 h牛磺酸治疗组大鼠心肌线粒体中ca2+浓度分别为16.8±2.8、18.7±1.9、10.5±1.8及13.3±1.7,均低于烫伤组.结论 牛磺酸对烫伤大鼠心肌线粒体成分和酶活性破坏具有保护作用,其机制与提高线粒体清除氧自由基的能力和减轻Ca2+超载有关.     

家兔严重烫伤早期血管内皮细胞结构和功能的变化

本实验通过建立家兔严重烫伤模型,观察家兔伤后早期内皮素/NO系统变化及血管内皮细胞(VEC)超微结构的改变,探讨严重烫伤对VEC损害的形成机制. 1 材料与方法 1.1 实验分组及处理 健康家兔(扬州大学医学院实验动物中心)21只,雌雄不拘,体质量2.5～3.0 kg.分笼饲养1周后将家兔按随机数字表法分为:对照组6只,不作任何处理,抽取静脉血待测;烫伤组15只,按文献[1]方法制作家兔背部烫伤模型.伤后单笼饲养,不限饮水和进食.于伤后即刻和6、12、24、48h抽取静脉血待测.     

家兔严重烫伤早期血管内皮细胞结构和功能的变化

本实验通过建立家兔严重烫伤模型,观察家兔伤后早期内皮素/NO系统变化及血管内皮细胞(VEC)超微结构的改变,探讨严重烫伤对VEC损害的形成机制. 1 材料与方法 1.1 实验分组及处理 健康家兔(扬州大学医学院实验动物中心)21只,雌雄不拘,体质量2.5～3.0 kg.分笼饲养1周后将家兔按随机数字表法分为:对照组6只,不作任何处理,抽取静脉血待测;烫伤组15只,按文献[1]方法制作家兔背部烫伤模型.伤后单笼饲养,不限饮水和进食.于伤后即刻和6、12、24、48h抽取静脉血待测.     

家兔严重烫伤早期血管内皮细胞结构和功能的变化

本实验通过建立家兔严重烫伤模型,观察家兔伤后早期内皮素/NO系统变化及血管内皮细胞(VEC)超微结构的改变,探讨严重烫伤对VEC损害的形成机制. 1 材料与方法 1.1 实验分组及处理 健康家兔(扬州大学医学院实验动物中心)21只,雌雄不拘,体质量2.5～3.0 kg.分笼饲养1周后将家兔按随机数字表法分为:对照组6只,不作任何处理,抽取静脉血待测;烫伤组15只,按文献[1]方法制作家兔背部烫伤模型.伤后单笼饲养,不限饮水和进食.于伤后即刻和6、12、24、48h抽取静脉血待测.     

烫伤大鼠结肠动力基本功能单位细胞损害和内质网应激研究

目的 了解严重烫伤大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间从cajal间质细胞(ICC)-平滑肌细胞超微结构改变以及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)表达情况,探讨其在烫伤大鼠结肠动力损伤中的可能机制.方法 采用简单随机法将50只SD大鼠分为烫伤组(40只):大鼠造成30%TBSA Ⅲ度烫伤,伤后腹腔注射乳酸林格液(50 mg/kg)复苏.于伤后3、6、12、24 h处死大鼠,在距盲肠约5 cm处剪取近端结肠4 cm肠管,取中间各1 cm分别用体积分数3%戊二醛及体积分数10%甲醛固定.对照组(10只)除不烫伤外,其余处理同烫伤组.取戊二醛固定的标本,透射电镜下观察大鼠肠道细胞变化情况.取甲醛固定的标本,采用免疫组织化学法检测结肠壁中GRP78和caspase-12的表达.结果 透射电镜下,对照组大鼠结肠平滑肌细胞排列整齐,肌细胞内细胞器丰富,核居中,常染色质均匀,线粒体嵴较多、滑面内质网较少,肌间丛神经元细胞器丰富,紧邻肌让丛神经元可见ICC;烫伤组肠道平滑肌细胞形状不规则,排列紊乱,核周隙增宽,细胞内有溶解性大空泡,线粒体空泡样变,嵴溶解、固缩,粗面内质网扩张并部分溶解,ICC核周细胞质明显减少.烫伤组伤后3、6、12 h GRP78评分分别为(4.3±0.9)、(6.0±0.7)、(4.8±1.1)分,均高于对照组[(2.4±0.7)分,P<0.05];烫伤组伤后6～24 h caspase-12评分均高于对照组(P<0.05).对照组细胞均有GRP78表达,烫伤组强度染色主要出现在黏膜和肌间神经丛、间质细胞,而平滑肌细胞多呈轻中度染色.烫伤后3、12 h GRP78呈阳性表达,伤后6 h呈强阳性.caspase-12在伤后3 h阳性表达不明显,伤后6、24 h表达呈弱阳性,伤后12 h表达呈阳性;对照组未见caspase-12表达.结论 严重烫伤后大鼠结肠壁内神经运动末梢-肌间丛ICC-平滑肌细胞存在明显病理改变,这与内质网过度应激启动caspase-12凋亡通路致细胞损伤可能有关.     

口服补液复苏对严重烧伤家兔心肌力学指标的改善作用

目的 了解口服补液复苏对严重烧伤家兔心脏功能的保护作用. 方法 150只家兔随机分为正常对照组(6只)、烧伤组(42只)、立即补液组(42只)、延迟补液组(30只)和延迟快速补液组(30只).正常对照组不致伤不补液.其余4组家兔均造成40%TBSAⅢ度烧伤,烧伤组不补液,余下3组伤后用灌胃的方式进行口服补液复苏.经家兔颈动脉左心室内置管,测量正常对照组及4组致伤家兔伤后2、6、8、12、24、36、48 h的平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)以及左心室压力最大上升/下降速率(LV±dp/dt max),另检测休克期尿量. 结果烧伤组家兔LVSP、LV±dp/dt max较正常对照组显著下降.立即补液组和延迟快速补液组上述指标在伤后24 h内高于烧伤组,其中立即补液组LV+dp/dt max在伤后8 h达峰值[(892±116)kPa/s,1 kPa=7.5 mm Hg],LV-dp/dt max在伤后6 h达峰值[(724±149)kPa/s];伤后8 h,延迟快速补液组LV±dp/dt max均达峰值.延迟补液组伤后各时相点LVSP、LV±dp/dt max与烧伤组接近.各组家兔MAP、伤后第1个24 h尿量的比较情况大致与以上指标相似.烧伤组与其余4组比较,各时相点LVEDP差异无统计学意义(P>0.05). 结论严重烧伤家兔伤后24 h内给予有效的口服补液,可改善心肌力学指标;延迟复苏的家兔按照延迟复苏补液公式预估补液量,才能进行有效复苏.     

Proteomic change of peripheral lymphocytes from scald injury and Pseudomonas aeruginosa sepsis in rabbits

Background: Increased susceptibility to infection has been related to impairment of lymphocyte-regulated immune responses after severe burn. The aim of this study is to identify the differential expression of proteins in circulating lymphocytes from scald injury and Pseudomonas aeruginosa sepsis in rabbits to provide a basis for pathogenesis of burns and sepsis. Methods: Rabbits were subjected to sham burn (A), 30% scald (B), A + bacterial challenge (C) or B + bacterial challenge (D). Bacterial challenge was inflicted by an injection of 2.0 × 10⁸ CFU P. aeruginosa (ATCC27853) in the auricular vein 22 h after the burn procedure. The animals were sacrificed 24 h later. Lymphocytes were isolated, and the differential proteins in the lymphocytes from the experimental and control animals were identified by two-dimensional electrophoresis (2-DE) coupled with matrix-assisted laser desorption ionisation time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS), two of which were confirmed by Western blotting. Results: Nineteen differential protein spots were found by 2-DE and 12 spots (11 proteins) were identified. Differential expression of peroxiredoxin and annexin I was validated by Western blotting. Among the identified proteins, the expression levels of cofilin, cyclophilin A, ubiquitin, nucleoside diphosphate kinase, glutamate dehydrogenase and annexin I were down-regulated in group B, excessively down-regulated in group D, but mildly in group C, and peroxiredoxin was up-regulated in groups B and D. Conclusions: Proteome changes in lymphocytes from P. aeruginosa sepsis in the scalded rabbits were revealed, which are related to immune suppression and the pathogenesis of sepsis after scald injury.     

高氧液对大鼠烫伤后肠黏膜下调蛋白质的影响

目的观察高氧液对烫伤大鼠肠黏膜下调蛋白质的影响,为伤后早期应用高氧液治疗提供理论依据。方法制作大鼠35%TBSAⅢ度烫伤模型,设烫伤后普通补液组(烫伤组)、伤后输入高氧液为干扰因素组(高氧液组)和正常对照组,每组6只。利用高分辨双向电泳(2DE)对肠黏膜组织进行蛋白质分离,采用Imagemaster2DElite图像分析软件进行分析,应用生物质谱、蛋白质库及文献分析等方法研究高氧液对大鼠烫伤后肠黏膜下调蛋白质的影响。结果烫伤组大鼠明确下调的34个蛋白质点中,高氧液组出现明确上调的蛋白质点数为9。它们是线粒体乌头酸酶、丙酰辅酶A羧化酶、短链羟酰基辅酶A脱氢酶、雌二醇安息香酸盐转录因子、磷酸丙糖异构酶1、T淋巴细胞受体Vδ6和类动力蛋白5。结论高氧液可以上调大鼠严重烧伤后早期肠黏膜中的下调蛋白质,进而部分恢复肠黏膜的屏障功能。     

烫伤大鼠心肌细胞一氧化氮生成对心肌的保护作用

目的了解氨基胍对烫伤大鼠心肌的影响。方法将72只Wistar大鼠随机分为烫伤组、氨基胍组。2组大鼠均造成30％TBSAⅢ度烫伤后常规补液，氨基胍组伤前20min腹腔内注射氨基胍（40mg／kg）。于伤前及伤后1、3、6、12、24h取大鼠动脉血检测血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）浓度、一氧化氮（NO）浓度，另取心肌组织测定NO浓度；观察氨基胍组、烫伤组伤后6h大鼠的心功能水平。结果伤后3h烫伤组大鼠血清NO浓度[（59．6±5．4）μmol／L]明显高于伤前[（24．6±0．8）μmoL／L，P〈0．01]，6h达峰值，24h明显回落，均明显高于氨基胍组（P〈0．01）；心肌组织NO浓度的变化趋势同上。与烫伤组比较，氨基胍组伤后各时相点cTnI浓度明显升高。与烫伤组伤后6h比较，氨基胍组大鼠该时相点的心功能抑制加重。结论氨基胍可抑制NO生成，加重了烫伤大鼠的心肌损害并使其心功能下降，提示NO对烫伤后早期心肌可能具有保护效应。     

高氧液治疗缺血性心肌功能的研究

目的　观察高氧液对家兔烫伤后缺血性心肌功能的治疗作用并探索其机制。　方法　制作 30 %Ⅲ度TBSA家兔烫伤模型和心肌缺血模型。将动物随机分成烫伤心肌缺血高氧液治疗组 (A)、烫伤心肌缺血等渗盐水治疗组 (B)、单纯烫伤对照组 (Cb)和正常对照组 (Ch)。动态监测心功能、血液流变学、血气分析及心肌梗死 /缺血面积比值。　结果　 (1)与Ch 组相比 ,B组心功能指标明显下降 (P <0 .0 1) ,A组较B组下降幅度减轻 ,两者存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;(2 )与Ch 组相比 ,各组的全血黏度 (ηb)均有显著性升高 (P <0 .0 5 ) ,尤以B组为重。A组与B组相比 ηb值有明显的下降 (P <0 .0 1) ,与Cb 组相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;(3)A组PO2 明显高于B组和C组 (Cb、Ch,P <0 .0 1) ;(4 )A组的梗死 /缺血比值明显低于B组 (P <0 .0 1)。　结论　高氧液对烫伤后心肌缺血有确切的治疗作用 ,其作用机制可能是迅速改善重要脏器的缺氧状态 ,同时降低血液黏度 ,加速侧枝循环的建立。     

吡那地尔对烫伤大鼠心肌线粒体结构及呼吸功能的影响

目的　观察吡那地尔预处理后对烫伤大鼠心肌线粒体结构及呼吸功能的影响。方法将75只健康Wistar大鼠随机分为对照组(9只,腹腔注射50μg/kg等渗盐水)、单烫组(33只,仅作烫伤)及预处理组(33只,腹腔注射吡那地尔50μg/kg后再作烫伤)。透射电镜观察3组大鼠心肌线粒体结构的变化,用生物氧特性微机测量分析系统检测大鼠线粒体的呼吸控制率,并检测大鼠心肌线粒体中丙二醛(MDA)和超氧阴离子的含量。　结果　伤后3h预处理组大鼠心肌线粒体病理损害程度较单烫组轻;伤后1—6h其呼吸控制率显著高于单烫组(P<0. 05或0. 01);MDA和超氧阴离子含量分别于伤后3、6h和伤后1、3、6h低于单烫组(P<0. 05或0. 01)。伤后3h预处理组MDA、超氧阴离子含量各为(0. 60±0. 09 )μmol/g、0. 127±0. 020, 明显低于单烫组( 0. 83±0. 07 )μmol/g、0 169±0. 015(P<0. 01).　结论　吡那地尔预处理对烫伤大鼠心肌产生了明显的保护作用,其机制可能与线粒体中对腺苷三磷酸敏感的钾离子通道提前开放有关。     

小肠集合淋巴结细胞凋亡对严重烫伤小鼠肠道免疫屏障的影响

目的观察严重烫伤小鼠小肠集合淋巴结(Peyer patches,PP结)细胞凋亡的变化规律,探讨其在肠黏膜免疫屏障功能障碍中的作用。方法将40只BALB／c小鼠随机分为正常对照组及烫伤后12、24、72 h组,每组10只。各致伤组小鼠背部造成20％TBSAⅢ度烫伤后,按时相点处死并留取全部PP结。对照组小鼠处死后亦留取相同标本。分别行HE染色、DNA琼脂糖凝胶电泳,标记PP结细胞作流式细胞仪(FCM)检测。结果HE染色见烫伤小鼠PP结生发中心有大量淋巴细胞凋亡。DNA琼脂糖凝胶电泳显示烫伤组各时相点有“梯形”条带。FCM结果显示对照组和烫伤各组PP结细胞凋亡率分别为(4．9±2．1)％、(26．7±3．1)％、(21．6±4．0)％、(12．8±2．0)％,伤后12 h为峰值。结论严重烫伤小鼠PP结淋巴细胞早期凋亡为细胞的主要死亡模式,在严重烫伤后早期肠黏膜免疫屏障功能损伤中起重要作用。     

高原地区烧伤后延迟复苏氧化应激对大鼠肠上皮细胞凋亡及bax和bcl-2基因表达的影响

Objective To explore influence of oxidative stress reaction on apoptosis rate and expres-sion of apoptosis-related genes bax and bcl-2 of enterocytes in severely burned rats with delayed resuscitation on the plateau. Methods One hundred and twenty rats subjected to 30% TBSA full-thickness scald on the back were derided into plateau experimental group (PE, altitude 3840 m) and Lanzhou experimental group (LE, altitude 1517 m). Then LE and PE groups were subdivided into Lanzhou immediate fluid resus-citation group (LIFR, with immediate intraperitoneal injection of isotonic saline after scald, 40 mL/kg), Lanzhou delayed fluid resuscitation group [LDFR, with intraperitoneal injection of isotonic saline at 6 post scald hour (PSH), 40 mL/kg], and plateau immediate fluid resuscitation group (PIFR, with immediate in-traperitoneal injection of isotonic saline after scald, 40 mL/kg), plateau delayed fluid resuscitation group (PDFR, with intraperitoneal injection of isotonic saline at 6 PSH, 40 mL/kg). Another 12 rats were divided into Lanzhou sham scald group (LS) and plateau sham scald group (PS), with 6 rats in each group. Rats in LS and PS groups were sham scalded in a water bath for 15 s without fluid infusion. Rats were sacrificed at 6, 12, 24, 48, 72 PSH for collection of small intestine samples to determine the contents of malonaldehyde (MDA) and total hydrosulfide (TSH). The apoptosis of enterocytes was determined by TUNEL, and the ex-pression of bax and bcl-2 in epithelial cells were observed by immunohistochemical method. Intestinal sample of LS and PS groups were collected to determine the contents of MDA and TSH. Results After being scal-ded, content of MDA in intestinal tissue of rats in LDFR group and PDFR group was respectively greater than that in LIFR group and PIFR group (P<0.05 or P<0.01). Intestinal tissue content of MDA of rats in LDFR group (9.8±4.0 nmol/mg) and PDFR group (10.2±1.3 nmol/mg) was respectively greater than that in LIFR group (9.5±2.7 nmol/mg) and PIFR group (9.6±1.1 nmol/mg) (P<0.05) at 24 PSH. After being scalded, intestinal content of TSH of rats in PE group and PDFR group was respectively smaller than that in LE group and LIFR group (P<0.05). A multitude of brown positive apoptotic cells were ob-served in PDFR at 6 and 12 PSH. Absorbance values in LDFR group, PIFR group, and PDFR group were higher than that in LIFR group at each time point (P<0.05 or P<0.01). A multitude of bax positive cells were observed in intestinal mucous membrane in PDFR at 6 and 12 PSH. Expression of bal-2 was nega-tive in PE group, and LIFR and LDFR groups at 6, 12 PSH, and it was weakly positive in LIFR and LDFR groups at 24, 48, 72 PSH. Conclusions Enhancement of bax expression and weakening of bcl-2 expres-sion in enterocytes are induced by the severe oxidative stress reaction in intestinal mucous membrane after burn with delayed resuscitation on the plateau, which may be one of the important reasons in inducing an in-crease in apoptosis of enterocytes.     

大鼠烫伤后补锌对血清和组织锌、钙离子的影响

目的 探讨大鼠烫伤后补锌对血清和组织锌离子、钙离子的影响及其意义。方法 SD大鼠80只随机分为对照组和烫伤后正常进食组、创面补锌组、口饲补锌组,伤后1、3、7天活杀大鼠,留取标本检测血清、肝脏、骨骼及烫伤皮肤等组织中Zn^2＋、Ca^2＋含量。结果 烫伤后正常进食组、创面补锌组血清Zn^2＋明显下降,约低于伤前1／3,而口饲补锌组明显上升,高达13．1～16．2μmol／L。肝Zn^2＋各组均呈上升趋势,以口饲补锌组最明显,补锌第1天升至41．6μg／g。肝脏Ca^2＋正常进食组、创面补锌组增加,烫伤第1天正常进食组升至30．8mg／g,口饲补锌组低于伤前和正常进食组、创面补锌组。骨Zn^2＋、骨Ca^2＋在烫伤后各组均呈递减趋势,以正常进食组最明显,烫伤后第7天,骨Zn^2＋和Ca^2＋分别降至41．5μg／g和50．2μg／g。烫伤皮肤Zn^2＋在伤后第1天正常进食组、创面补锌组下降,口饲补锌组却明显升高至27．1μg／g,第3、7天,各组均逐渐上升,以创面补锌组最明显,达34．3μg/g。烫伤皮肤Ca^2＋各组均呈大幅度递增,其中以正常进食组最明显,烫伤后第7天升至5．4mg／g,高出对照组67．5倍,创面补锌组明显低于正常进食组。结论 烫伤后及补锌血清、组织中的Zn^2＋、Ca^2＋含量均出现明显的变化,不同途径补锌对组织中Ca^2＋含量也有影响,其机制需进一步探讨。