儿茶酚抑素对慢性心力衰竭大鼠室性心律失常的影响

 目的：探讨儿茶酚抑素(CST)治疗对慢性心力衰竭(CHF)大鼠室性心律失常(VA)的影响。方法：雄性SD大鼠51只,随机分为对照(CTL)组(n=17)和CHF组(n=34)。CHF组给予连续7 d注射异丙肾上腺素(ISO) (5 mg·kg-1·d-1, ip),CTL组则用生理盐水作为对照 (1 mL·kg-1·d-1, ip),造模结束2周后,进一步将CHF组再随机分为未治疗组(n=17)和CHF治疗组(CST组)(n=17)。治疗组给予连续3周注射CST(2 nmol·kg-1·d-1, ip),未治疗组注射0.9%生理盐水(1  mL·kg-1·d-1, ip)。动物完成药物注射后,在整体心脏Langendorff灌流条件下行离体电生理研究,分别记录和测量左室前游离壁(LAF)心外膜单相动作电位(MAP)和心室有效不应期(VERP);行程控增频电刺激以观察动作电位时程(APD)电交替(ALT);给予Burst快速电刺激进行VA的诱发。用酶解法分离获得LAF处单个心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术记录L型Ca2+通道电流(ICa-L)。结果：与CTL组相比,未治疗组ICa-L峰电流密度、90%单相动作电位时程(MAPD90)、VERP、诱发APD-ALT最大起搏周长(PCLmax)中位数及VA诱发率均显著增大(均P<0.01);而CST组MAPD90和VERP均增大(P<0.01),其它指标差异无统计学意义(均P>0.05);与未治疗组相比,CST组ICa-L峰电流密度、MAPD90、VERP、诱发APD-ALT的PCLmax中位数(80 ms vs 100 ms)及VA诱发率均减小(均P<0.05),而VERP/MAPD90增大。结论：CST治疗可减少CHF大鼠VA诱发率,其机制可能与CST抑制CHF大鼠ICa-L有关。     

通心络对心肌梗死大鼠心室缝隙连接蛋白43重构及室性心律失常的影响

目的:探讨通心络(TXL)对心肌梗死大鼠心室缝隙连接蛋白43(Cx43)重构及室性心律失常(VA)的影响。方法:雄性SD大鼠100只,随机分为假手术(sham)组(n=25)和手术组(n=75)。手术组动物结扎冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型,假手术组只开胸不结扎。将手术后存活3 d的大鼠随机分为TXL治疗组(TXL组)和心肌梗死组(MI组)。TXL组给予TXL(2 g·kg-1·d-1)连续4周灌胃治疗,MI组和sham组则给予等体积生理盐水灌胃。药物干预结束后,采用酶联免疫吸附法检测梗死周边区心肌组织白细胞介素-1β(IL-1β)及内皮素-1(ET-1)的水平;免疫组化法检测Cx43的分布;Western blotting法检测Cx43表达;RT-PCR法检测Cx43 mRNA的表达;采用Burst刺激诱发VA。结果:与sham组相比,MI组梗死周边心肌的IL-1β和ET-1水平均显著升高,而Cx43的mRNA及蛋白表达均显著降低,Cx43分布无规律性且侧面化分布增多,VA诱发率也明显升高(P0.05);与MI组相比,TXL组梗死周边心肌IL-1β和ET-1水平明显降低,Cx43的mRNA及蛋白表达均显著增加,Cx43部分呈线性分布于心肌细胞闰盘处,VA诱发率也明显降低(P0.05)。结论:TXL可降低心肌梗死大鼠VA的发生率,其机制可能与TXL抑制心肌梗死后Cx43重构有关。     

儿茶酚抑素对间歇低氧高血压大鼠的影响及机制

目的:探讨儿茶酚抑素(CST)对间歇低氧高血压大鼠的作用及机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为3组:control组、IH(间歇低氧组)组和IH+CST组(于低氧前3 d皮下埋植含CST 20 nmol·kg~(~(-1))·d~(-1)的微量渗透泵)。后2组置于间歇低氧舱中,舱内氧浓度为(5±0.5)%~(21±0.5)%,低氧-复氧循环时间为120 s(60 s+60 s),8 h/d,共3周。颈总动脉插管测收缩压(SP)、舒张压(DP)和平均压(MP),检测血浆中氧化/抗氧化损伤指标,Western blot法检测主动脉和肾组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达的变化。结果:SP、DP及MP,IH组均比control组高(P0.01),而IH+CST组则显著低于IH组(P0.01)。IH组的MPO和MDA含量显著高于control组(P0.05),而SOD和羟自由基抑制率显著低于control组(P0.01);IH+CST组的MPO和MDA明显低于IH组(P0.05),SOD和羟自由基抑制率显著高于IH组(P0.01)。与control组相比,IH组大鼠主动脉和肾组织胞浆、胞核中Nrf2蛋白的表达均显著下调(P0.05);IH+CST组与IH组相比,胞浆中Nrf2蛋白的表达显著下调(P0.05),而胞核中Nrf2蛋白的表达显著上调(P0.05)。结论:CST有减轻间歇低氧致大鼠高血压的作用,该作用可能与其通过Nrf2-ARE信号通路调节氧化应激反应有关。     

钼对大鼠心室肌细胞动作电位的影响

用克山病区粮(低Se)、非病区粮加W、病区粮加Mo喂养大鼠,分别复制低Se、低Mo及低Se高Mo的动物模型。病区粮组血Se浓度低于对照组(P<0.001);非病区粮加W组血Mo浓度低于对照组(P<0.001);病区粮加Mo组血Se浓度低于对照组(P<0.001)而血Mo浓度高于对照组(P<0.001)。采用浮置微电极技术,观察各组动物在体心肌细胞动作电位变化,结果显示;低Se与低Mo组APA均降低,且低Se加Mo组APA恢复正常,并使APD_(90)延长,提示Mo与Se对心肌细胞膜有类似功能。     

TNFα对单个大鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的探讨TNFα对心肌细胞L型钙电流的影响。方法分离大鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳方法检测TNFα对单个心室肌细胞L型钙电流的影响。结果 TNFα使单个大鼠心室肌细胞L型钙电流持续增强,促进细胞外钙离子持续向细胞内流动。结论 TNFα与感染性休克心脏收缩性改变相关。     

抗钠钙交换体特异位点抗体对大鼠单个心室肌细胞钙瞬变的影响

目的:观察抗钠钙交换体(Sodium calcium exchanger,NCX)特异位点124HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145 抗体对正常成年大鼠心室肌细胞钙瞬变的影响。方法:利用Langendorff 灌流方法,分离得到单个大鼠心室肌细胞;负载荧光染料Fura-2/ AM 和2%牛血清白蛋白后,利用离子影像分析系统记录激发光为340 nm 和380 nm 时心室肌细胞成对系列图像,计算钙瞬变峰值(F340/ F380)、细胞钙恢复90%时程(TR90 )以及钙敏感性(F340/ F380 与细胞缩短数值的比值)。结果:抗NCX 特异位点抗体可以增加正常成年大鼠单个心室肌细胞F340/ F380,缩短TR90 ,对钙敏感性无显著影响;尼卡地平和KB-R7943 分别预处理心室肌细胞可以抵消大部分抗体对F340/ F380 和TR90 的增加或缩短效应,联合使用二者预处理心室肌细胞后,该抗体对钙瞬变不再有显著影响。结论:抗NCX 特异位点124 HNFTAGDLGPSTIVGSAAFNMF145 抗体可以增加心室肌细胞钙瞬变峰值,同时缩短细胞钙恢复时程,这种效应主要与其激动L-型Ca2+通道和NCX 的作用有关。     

冬虫夏草对豚鼠心室肌细胞胞浆钙浓度及L-型钙电流的影响

目的 :冬虫夏草 (CodycepsSinensis ,CS)为麦角科真菌 ,是我国传统的名贵药材。它已被研究证明具有抗多种心律失常的作用 ,尤其适用于难治性缓慢型心律失常、传导阻滞。本实验旨在研究冬虫夏草水提液对豚鼠单个心室肌细胞内钙信号及L型钙电流的影响 ,从而探讨其抗心律失常的机制。方法 :急性分离 (使用胶原酶Ⅱ )豚鼠单个心室肌细胞 ,将细胞以Fluo - 3/AM做荧光标记 ,在激光扫描共聚焦显微镜timeseries程序下对细胞XY平面进行扫描 ,以荧光强度值变化表示 [Ca2 + ]i变化。进一步应用全细胞膜片钳技术测定单个心室肌细胞L -型钙电流 ,实…     

家兔陈旧性心肌梗死心室肌细胞钾离子电流的变化

目的:探讨陈旧性心肌梗死(HMI)心律失常的发生机制,观察HMI非梗死区心肌细胞动作电位时程(APD)、瞬时外向钾电流(I_to)、延迟整流钾电流(I_K)和内向整流钾电流(I_K1)的变化。方法: 12只家兔随机分为2组,陈旧性心肌梗死组(HMI)开胸结扎冠状动脉左回旋支,假手术组开胸但不结扎冠状动脉。3个月后应用全细胞膜片钳技术记录非梗死区心肌细胞的APD、I_to、 I_K和I_K1。 结果: (1)HMI组心肌细胞的膜电容明显高于假手术组;(2)HMI组心肌细胞的APD显著延长,并有早期后除极(EAD)出现;(3)HMI组心肌细胞I_to 、I_K,tail和I_K1的电流密度分别为(4.03±0.33)pA/pF、(1.14±0.11)pA/pF和(17.6±2.3)pA/pF,显著低于假手术组的(6.72±0.42)pA/pF、(1.54±0.13)pA/pF和(25.6±2.6)pA/pF(P<0.01)。结论: HMI非梗死区心室肌细胞I_to 、I_K,tail、和I_K1的电流密度的降低是其APD延长和EAD出现的离子流基础,而APD延长和EAD的出现,可能在HMI恶性心律失常的发生中起着重要作用。     

缺氧对急性心肌梗死后3周大鼠心室肌细胞持续性钠电流的影响

目的：研究缺氧对急性心肌梗死（AMI）大鼠心室肌细胞持续性钠电流的影响，以期更进一步探讨急性心肌梗死后心律失常的发生机制。 方法： 采用结扎大鼠冠状动脉左前降支建立AMI动物模型,应用膜片钳全细胞记录方法,观察AMI 3周心室肌外膜梗死区细胞持续性电流（INap）的变化。 结果： 常氧条件下，假手术组（n=9）的INap电流密度为0.144±0.022（pA/pF）,心梗组（n=9）的INap电流密度为0.121±0.013（pA/pF）,明显低于假手术组(P<0.01), 以上两组的INap 均可被河豚毒素（TTX）阻断。缺氧条件下，假手术组和心梗组的INap均随着缺氧时间的延续而增大，但假手术组INap的增大明显大于心梗组，两组的INap均可被谷胱甘肽（1 mmol/L）所阻断。 结论： 急性心肌梗死后，无论是在常氧或是再次缺氧情况下，心肌梗死区与非梗死区细胞INap的大小均存在差异，造成心肌复极离散度增大，可能是导致AMI后出现折返性室性心律失常的原因之一。     

氨氯地平对大鼠心室肌细胞动作电位及细胞内钙离子浓度的影响

目的探讨不同旋体氨氯地平（Aml）对Spraque—Dawley大鼠心室肌细胞动作电位（AP）及细胞内钙离子浓度的影响。方法采用酶消化法获得大鼠耐钙心室肌细胞，以全细胞膜片钳技术分别记录加入0．1、0．5、1、5和10μmol／L左旋、右旋和混旋Aml后大鼠心室肌细胞AP的变化。并用荧光探针Fura-2／AM测定细胞内钙离子浓度，比较1、5、10、50和100μmol／L左旋、右旋和混旋Aml对细胞内钙离子浓度的影响。结果①加入0．1、0．5、1、5和10μmol／L左旋、右旋和混旋Aml后，AP最大上升速率、AP幅度和超射无明显变化（P〉0．05）。②加入0．1、0．5、1、5和10μmol／L左旋后，50％的AP时程（APD50）分另0为（36．2±8．2）、（33．9±7．7）、（30．2±6．8）、（22．6±5．1）和（15．1±3．4）ms（P〈0．05）；加入混旋Aml后，APD。分别为（39．2±9．2）、（36．7±7．9）、（33．8±7．2）、（25．4±5．9）和（21．7±5．2）ms（P〈0．05）；加入右旋Aml后，APD50分别为（45．1±11．3）、（46．2±10．8）、（44．9±7．3）、（44．8±8．2）和（45．7±9．4）ms（P〉0．05）。③左旋Aml和混旋Aml可降低细胞内钙离子浓度，不同浓度右旋Aml对细胞内钙离子浓度无影响。结论左旋Aml和混旋Aml对L-型钙通道有阻滞作用，从而缩短APD，而右旋Aml对L-型钙离子通道无阻滞作用，因而对APD无影响。     

心力衰竭家兔心室动作电位时程整复性变化对室性心律失常的影响

 目的：探讨压力负荷诱导的兔慢性心力衰竭(CHF)模型离体心室动作电位时程整复性(APDR)变化对室性心律失常(VA)的影响。方法：雄性新西兰大耳兔20只,随机分为对照(CTL)组和CHF组,每组10只。CHF模型制备采用经腹主动脉缩窄术,造模结束4周后行心脏超声检查评价造模结果。在整体心脏Langendorff灌流条件下行离体电生理研究,分别记录和测量心室不同位点的单相动作电位(MAP)及有效不应期(ERP),并绘制APDR曲线;对2组心脏进行快速电刺激,观察室性心律失常（VA）的诱发。结果：与CTL组相比,CHF组心室相同部位90%单相动作电位时程(MAPD90)、ERP及APDR曲线最大斜率(Smax)均明显增大(均P<0.01),且VA更容易诱发(均P<0.05);此外,CHF组动物APDR曲线Smax的变异系数(COV-Smax)均较CTL组增大(均P<0.05)。结论：CHF时心室APDR曲线Smax及COV-Smax均增大,促进室性心律失常的发生。     

高钾高钙对黄鳝心室肌细胞跨膜电位的影响

在体和离体心脏实验表明,钾钙之间和钾钠之间都有相互拮抗作用。临床上对于高血钾引起的心脏中毒可用钙盐与钠盐治疗。但是它们作用的机制不很清楚。Hoffman等与李少如等曾先后在狗与兔身上作过一些观察。本文观察高钾、高钙对黄鳝心肌细胞跨膜电位的影响,试图从不同动物细胞水平的电活动探讨共机制。 实验共用黄鳝(100—125克)16条,毁损脑脊髓仰卧固定于术极上,暴露心脏,分别结扎左右前膣静脉和左右腔静脉,然后在右后腔静脉插入直径3mm左右塑料管灌注     

ω-3多不饱和脂肪酸对大鼠心室肌细胞动作电位的影响

目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸对大鼠心室肌细胞动作电位（AP）的影响。方法①在自制心脏灌流装置上，采用三步法行逆行主动脉灌流获得单个耐钙心肌细胞；②以全细胞膜片钳技术分别记录加入10、20、40、60、80、100、120和200μmol·L^-1ω-3多不饱和脂肪酸二十二碳六稀酸（DHA）后大鼠心室肌细胞AP的变化。结果成功记录到大鼠心室肌细胞外膜、中膜和内膜AP。外膜、中膜和内膜心室肌细胞动作电位时程（APD）逐渐延长（P〈0．05），其中外膜APD25、APD50和APD50分别为（3．6±1．2）ms、（10．3±2．1）ms和（46．3±4．8）ms；中膜分别为（6．4±1.8）ms、（14．7±2．4）ms和（69．4±8．3）ms；内膜分别为（13．8±2．1）ms、（45．3±10．2）ms和（152．1±33．4）ms；②DHA浓度在0～30μmol·L^-1时，随着DHA浓度增加，APD延长不明显（P〉0．05）；当DHA浓度大于30μmol·L^-1时，APD逐渐延长，且呈浓度依赖性（P〈0．05）。结论大鼠外膜、中膜和内膜心室肌细胞AP形态存在分层差别，ω-3多不饱和脂肪酸DHA对AP的影响可能是其抗心律失常作用机制之一。     

乌头碱心室局部应用诱发室性心律失常

为开展消除局部致心律失常病灶的实验研究,我们建立了心室局部心外膜给予乌头碱滤纸片,诱发出严重的持续性室性心律失常的动物模型,观察了心律失常特点和激光的消融作用,并探讨了本法的优点和乌头碱的作用机理。12只犬心共进行了36次乌头碱诱发室性心律失常和激光消融实验,每次均诱发出单一形态室速,这     

5—羟色胺对大鼠心肌单机动作电位及室性心律失常的影响

为探讨５－ＨＴ与缺血性室性心律失常的关系，观察了外源性５－ＨＴＹ对大鼠在体缺血心肌单机动作电位（ＭＡＰ）及心电图的影响。结果证实（１）５－ＨＴ使心肌缺血动物ＤＶＡ的ＶＥ数目增加，ＶＴ、ＶＦ持续时间延长，而不造成非心肌缺血动物的室性心律失常。（２）５－ＨＴ对缺血心脏ＤＶＡ的影响不是通过ＭＡＰＤ的延长，而是与缺血心肌Ｖｍａｘ及ＭＡＰＡ有关。     

5-羟色胺对大鼠心肌单相动作电位及室性心律失常的影响

为探讨5-HT与缺血性室性心律失常的关系,观察了外源性5-HT对大鼠在体缺血心肌单相动作电位(MAP)及心电图的影响。结果证实(1)5-HT使心肌缺血动物DVA的VE数目增加,VT、VF持续时间延长,而不造成非心肌缺血动物的室性心律失常。(2)5-HT对缺血心脏DVA的影响不是通过MAPD的延长,而是与缺血心肌Vmax及MAPA有关。     

Apelin-13对大鼠缺血心室肌细胞瞬时钠电流的影响

 目的：观察apelin对正常和缺血心室肌细胞瞬时钠电流（INa）的影响以及其对室性心律失常和心脏功能的影响。方法：应用Landgendorff逆灌流系统酶解分离大鼠左室心肌细胞,采用全细胞膜片钳技术观察大鼠左室心肌细胞INa,通过改变电极外液的方法来模拟正常/缺血细胞状态,分正常组（N组）、正常apelin组（N+A组）、缺血组（I组）和缺血apelin组（I+A组）（各组n=10）,分别观察apelin-13对正常/模拟缺血心室肌细胞INa的影响;另建立Langendorff灌流离体缺血大鼠心脏模型分为4组（各组n=4）：N组、N+A组、I组、I+A组,观察apelin-13对各组大鼠离体灌流心脏模型心功能和室性心律失常的影响。结果：Apelin-13（100 nmol/L）在N+A 组和I+A组均能增加INa幅度,I-V曲线分析显示N+A组比N组INa幅度增大32%［（-86±13）pA/pF］,I+A组比I组INa幅度增大18% ［（-52±15）pA/pF］;然而I-V曲线分析Apelin-13并未改变最大传导速度,N、N＋A、I和I+A组分别为（3.2±0.2）pS/pF、（3.1±0.3）pS/pF、（2.9±0.1）pS/pF和（2.8±0.4）pS/pF（P＞0.05）;各组的半激活电压（V1/2）分别为（-21.9±0.6）mV、（-28.7±0.3）mV、（-30.5±0.7）mV和（-36.8±0.2）mV;Boltzmann曲线各组斜率分别为5.6±0.3、 5.1±0.4、 4.3±0.3和4.9±0.6（P＞0.05）;V1/2值N+A组比N组改变（-5.9±0.8）mV,I+A组V1/2比I组改变（-7.7±1.3）mV（P＜0.05）。室性心律失常开始时间、室性心动过速持续时间、心室颤动持续时间及心律失常评分情况,N+A组与N组比较、I+A组与I组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;N+A组LVEDP低于N组,LVDP高于N组,dp/dtmax和dp/dtmin高于N组;I+A组LVEDP低于I组,LVDP高于I组,dp/dtmax和dp/dtmin高于I组;以β-肌动蛋白（β-actin）作为内参照,4组β-actin表达水平差异无统计学意义,4组Na+通道蛋白Vα亚单位的表达灰度值分别为28.8±3.6、 29.4±4.1、 30.1±2.9和31.3±3.8,组间差异无统计学意义。结论：Apelin-13可能是通过改变Na+通道门控特性增加INa峰值,使正常和缺血组心室肌细胞Na+通道更容易开放。Apelin-13对缺血相关室性心律失常无影响,对正常和缺血心肌均有正性肌力作用。     

灯盏花素对大鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的： 研究灯盏花素对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响,在离子通道水平探讨灯盏花素的抗心律失常作用机制。方法： 用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录钠通道电流(INa)。结果： (1) 灯盏花素呈浓度依赖性抑制INa,在-30 mV时,含1、3、30、100 mg·L-1灯盏花素的细胞外液分别灌流细胞3 min,分别阻断INa峰电流(7.98±0.60)%、(37.73±2.31)%、(65.58±2.90)% 和(88.09±5.60)%。INa激活电位为-70 mV,最大峰电位为-30 mV,翻转电位为5 mV,激活和失活过程呈电压和时间依赖性。30 mg·L-1灯盏花素使电流电压曲线明显上移,峰值电流从（13.49±1.25）pA/pF 减少至（4.78±0.85）pA/pF,n=8,P<0.05,冲洗后可以不完全恢复。（2）灯盏花素能使钠电流失活曲线明显左移。（3）灯盏花素使钠电流激活曲线明显右移。（4）灯盏花素使钠电流复活明显减慢。结论： 灯盏花素能够抑制心肌细胞钠通道电流,并呈浓度依赖性。     

正常大鼠心室肌细胞钠、钙和钾离子流记录和特点

目的研究正常Sprague—Dawley大鼠外膜、中膜和内膜心室肌细胞钠离子电流（INa）、L-型钙离子电流（ICa-L）、瞬时外向钾离子电流（I60）、延迟整流性钾离子电流（IK）、内向整流性钾离子电流（IK1）的特点。方法采用酶消化法获得大鼠外膜、中膜和内膜心室肌细胞,以全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞INa、ICa-L、Ito、IK和IK1。结果外膜至内膜心室肌细胞Ito电流密度逐渐减小,而外膜至内膜心室肌细胞INa、ICa-L、IK和IK1的电流密度无差异（P〉0．05）。结论大鼠心室肌细胞Ito存在分层差别,INa、ICa-L、IK和IK1不存在分层差别。     

花生四烯酸对家兔心室肌细胞动作电位和L-型钙电流的影响

目的：研究花生四烯酸(AA)对家兔单个心室肌细胞动作电位和L-型钙电流的影响。方法：酶解法分离家兔单个心室肌细胞，用全细胞膜片钳技术记录其动作电位和L-型钙电流。结果：①AA明显缩短动作电位时程（APD），而对静息电位（RP）和动作电位幅值（APA）无明显影响。②AA使L- 型钙电流峰电流密度从(10.21±3.15) PA/PF减少到（6.53±2.17）PA/PF(n=6,P＜0.05）,I-V关系曲线上移，其形状和峰值电压保持不变。结论：花生四烯酸能抑制L-型钙电流，缩短动作电位时程，这可能是其心血管作用的重要机制之一。