循环血Septin 9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用价值

目的 研究循环血Septin 9基因甲基化在结直肠癌筛查中的检出率及术后监控中的临床意义。方法 选取甘肃省人民医院2018年1月-2019年1月入院结直肠癌患者125例为实验组,74例非肿瘤患者为对照组,检测外周血Septin 9基因甲基化、癌胚抗原（CEA）、CA199、CA724,统计4项检查指标的诊断灵敏度、特异度、总符合率,观察结直肠癌患者术后4项检查指标阳性率。结果 Septin 9基因甲基化阳性检出率实验组较对照组显著升高（P<0.05）。实验组检测中Septin 9基因甲基化诊断灵敏度较其他3项检查指标显著增高（P <0.05）,4项检测指标总符合率对比Septin 9为最高（P<0.05）。结论 循环血Septin 9基因甲基化检测较CEA、CA199、CA724在结直肠癌诊断中具有更高诊断效能,可用于结直肠癌筛查以及疗效评估。     

血浆Septin9基因甲基化检测对结直肠癌诊断的价值研究

目的 探讨血浆中Septin9基因甲基化(methylated Septin 9,mSEPT9)检测在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)诊断中的应用价值。方法 收集2020年5月至2022年4月在右江民族医学院附属医院收治并经病理学诊断为非CRC患者42例和CRC患者129例,分别作为非CRC组和CRC组,分析患者血浆mSEPT9检测、大便隐血试验(FOBT)、癌胚抗原(CEA)和CA199检测结果,评价其单项检测和基于血浆mSEPT9的联合检测在CRC诊断中的应用价值。结果 (1)CRC组mSEPT9检测阳性率为58.14%(75/129),非CRC组mSEPT9检测阳性率为19.05%(8/42),两组差异具有统计学意义(P<0.001)。(2)血浆mSEPT9检测CRC的敏感度为58.14%,高于CEA(39.53%)和CA199(19.38%);特异度为80.95%,高于FOBT(47.62%),基于血浆mSEPT9检测的联合检测敏感度均高于其单项检测。结论 mSEPT9检测在CRC诊断中具有较高的敏感性和特异度,基于mSEPT9的联合检测敏感度高于...     

SEPT9基因甲基化检测联合CA199和CEA在结直肠癌诊断中的应用价值

目的 探讨SEPT9基因甲基化(mSEPT9)联合糖类抗原19-9(CA199)、癌胚抗原(CEA)在结直肠癌诊断中的应用价值.方法 选取2019年6月至2020年6月于本院肛肠科住院患者200例的血液样本,其中70例结直肠癌患者血液样本作为A组,130例结直肠腺瘤患者血液样本作为B组;同期收集本院体检中心100名健康...     

SEPT9基因甲基化在直结肠癌早期诊断中应用的临床意义

目的 集中探讨SEPT9基因甲基化对于直结肠癌早期诊断中的临床应用意义。方法 随机选取2015年3～12月因患结直肠癌于笔者医院普外科进行手术治疗的患者100例,从术中切取的癌灶、其癌旁组织和术前粪便样本中提取DNA,应用多重置换扩增（MDA）结合巢式甲基化特异性PCR扩增技术（nMPS）检测患者术前粪便样本中SEPT9基因的甲基化水平,同时比较粪便同癌灶组织中SEPT9基因甲基化在诊断结直肠癌中的敏感度及特异性。结果 针对100例患者的癌灶组织的SEPT9基因的分析的过程中,基因甲基化的发生率为84.0%;在针对癌旁组织的SEPT9基因的过程中,基因甲基化的发生率为8.0%。患者癌灶及癌旁组织SEPT9基因甲基化发生率的比较差异有统计学意义（P<0.01）;临床分期为Ⅰ、Ⅱ期的结直肠癌患者,采用SEPT9基因甲基化诊断的准确率为87.5%;临床分期为Ⅲ、Ⅳ期的结直肠癌患者,采用SEPT9基因甲基化诊断的准确率为80.0%。针对不同的临床分期,采用SEPT9基因甲基化诊断结直肠癌的准确率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 因粪便中SEPT9基因甲基化检测在结直肠癌患者中的特异性和敏感度较高,可在临床中应用于直结肠癌的早期诊断。     

结直肠癌CD146基因甲基化与患者临床病理特征和生存的关系

目的 探讨结直肠癌组织中CD146基因甲基化改变与患者临床病理特征和生存的关系。方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法,分析CD146基因甲基化。采用电化学发光法进行定量检测结直肠癌患者血清癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)含量。采用Kaplan-Meier生存曲线计算结直肠癌患者生存率。结果 与结直肠癌组相比,对照组和腺瘤组CD146基因甲基化阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。CD146基因甲基化与结直肠癌患者淋巴结转移、浸润深度和TNM分期之间,差异有统计学意义(P<0.05)。CD146基因甲基化与CEA含量之间明显相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存曲线经Log-rank检验发现,CD146基因甲基化与结直肠癌患者总体5年生存率之间存在相关性(P<0.05)。结论 CD146基因表观遗传学的改变参与了结直肠癌的发生、发展。检测CD146基因甲基化可作为反映结直肠癌患者部分恶性生物学行为和生存期的指标。     

血浆SFRP1和Septin9基因甲基化检测对结直肠癌诊断的临床价值

探讨SFRP1和Septin9基因甲基化对结直肠癌的诊断价值,收集结肠镜检查和组织病理学确诊为结直肠癌的患者47例,非结直肠癌的对照组33例;测定两组外周血浆中SFRP1和Septin9基因的甲基化状态,并且进行粪隐血检测。结果显示,SFRP1和Septin9基因甲基化诊断结直肠癌的敏感度为80.0%,特异度为95.3%,粪便免疫学检测的敏感度为86.3%,特异度为54.3%,两者结合后敏感度为97.6%,特异度为96.8%,且明显高于单独检测。故SFRP1和Septin9基因甲基化联合粪免疫学检查可提高结直肠癌诊断的敏感度和特异度,而且具有无创、采样简单、依从性强、实验方法稳定等特点,适宜于临床推广使用。     

血浆甲基化SEPT9 DNA用于筛查无症状结直肠癌

美国学者Church等对精确检测血浆中甲基化SEPT9 DNA(mSEPT9)筛查人群中结直肠患者的方法进行了前瞻性的评价.该研究选取年龄≥50岁、无临床症状的人群进行结肠镜筛查,检查前留取血浆样本,由3个设盲的独立实验室采用RT-PCR分析所有检出的结直肠癌患者和随机分层的其他筛查者血浆的DNA,并对总体的灵敏度和特异性进行标准化.研究结果显示:对53例结直肠癌和1 457例无结直肠癌的研究对象,该方法的标准化灵敏度为48.2％(95％可信区间32.4％～63.6％,粗略灵敏度为50.9％);对于Ⅰ～Ⅳ期结直肠癌患者分别为35.0％、63.0％、46.0％和77.4％.     

粪便多基因联合检测在结直肠癌早期筛查中的应用

目的 研究联合检测粪便中sFRP2、Vimentin和HPP1基因甲基化状态在结直肠癌早期筛查中的应用。 方法 将杭州市第三人民医院2017年10月—2019年10月期间收治的结直肠癌患者60例为结直肠癌组,由腺瘤性息肉患者60例及正常健康人30例组成非结直肠癌组(90例),收集清晨粪便标本,提取粪便DNA,并进行亚硫酸氢盐修饰处理,采用甲基化特异性PCR检测sFRP2、Vimentin和HPP1基因甲基化状态,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系,比较3个基因联合检测诊断敏感度及特异度。 结果 在结直肠癌患者中,检测sFRP2、Vimentin和HPP1单基因甲基化敏感度分别为46.7%、43.3%、53.3%,特异度分别为73.3%、75.6%、76.7%;联合组以3个基因中任1个基因甲基化表达阳性判为阳性,联合检测诊断结直肠癌的敏感度为83.3%,特异度为46.7%,敏感度均高于sFRP2、Vimentin和HPP1单基因甲基化检测。3个基因甲基化状态与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移及TNM分期均无关(均P>0.05)。 结论 在结直肠癌患者粪便DNA中sFRP2、Vimentin和HPP1基因异常甲基化发生率明显高于非结直肠癌患者,联合检测粪便多基因筛查结直肠癌优于单基因检测,在结直肠癌早期筛查应用中具有重要意义。      

Septin9基因与结直肠癌相关性研究进展

Septin9是一类具有三磷酸鸟苷酶活性的保守基因家族成员之一,与染色体分离、DNA修复、迁移和凋亡等许多细胞功能有关。Septin9与诸如恶性肿瘤等人类疾病发生密切相关,且Septin9已成为现阶段肿瘤相关研究的新热点。Septin9基因在结直肠肿瘤组织中高度甲基化,其甲基化异常是结直肠癌的重要分子特征,而其在外周血和粪便中的改变可用于结直肠癌的早期诊断。     

结直肠癌ZIC1和KLOTHO基因启动子甲基化检测的临床价值初探

目的:观测ZIC1和KLOTHO基因在结直肠癌组织中的表达情况,探讨检测ZIC1和KLOTHO基因启动子甲基化在结直肠癌临床诊断中的价值.方法:选取25对(包括癌和癌旁组织)结直肠癌患者手术标本组织,通过实时荧光定量RT-PCR检测ZIC1和KLOTHO mRNA在结直肠癌和癌旁相对正常组织中的表达;通过甲基化特异性PCR(MSP)检测结直肠癌和癌旁相对正常组织中ZIC1和KLOTHO基因启动子甲基化阳性率,并分析其与结直肠癌患者临床病理资料(年龄,性别,分化程度和TNM分期)的关系.结杲:ZIC1和KLOTHO mRNA在结直肠癌组织中表达较正常组织明显下调(P均<0.0001);在25例结直肠癌患者癌组织中,ZIC1甲基化阳性率为80%,KLOTHO甲基化阳性率为76%,联合检测ZIC1和KLOTHO甲基化阳性率为64%.结论:ZIC1和KLOTHO基因在结直肠癌中表达下调,肿瘤组织基因启动子甲基化高频率发生,联合检测ZIC1和KLOTHO基因甲基化有助于结直肠癌的诊断.     

外周血Septin9基因甲基化检测在结直肠腺瘤中的预测价值

目的 探讨外周血Septin9基因甲基化（mSEPT9）检测在结直肠腺瘤诊断中的预测意义。方法 收集2020年10月至2022年5月在昆明市第一人民医院病理科诊断为结直肠腺瘤的31名患者作为实验组,21例肠镜阴性受试者（消化科门诊患者）作为对照组。对2组人员进行外周血mSEPT9检测,并收集其相应外周血CEA检测结果,对检测结果采用受试者特征曲线进行统计分析。结果 mSEPT9检测对腺瘤的曲线下预测面积（AREA of the ROC:AUC）为0.720 5(P <0.05),分界值（CT值）为39.55,此时对应的敏感度为90.91%,特异度为56.67%;CEA检测对腺瘤的AUC为0.533 3(P> 0.05)。结论 外周血mSEPT9检测筛查结直肠腺瘤效果优于外周血CEA肿瘤标记物,具有较好的敏感度及特异度,一定程度上对mSEPT9筛查阳性人群再行侵入性肠镜检查,更易为该类人群接受且可早期筛查结直肠腺瘤。     

DNA甲基化与结直肠癌早期诊断的研究现状

结直肠癌中DNA甲基化异常已经被广泛地研究,特别是基因如APC的甲基化状态改变为结直肠腺瘤-癌的发展步骤之一已被广泛认同。回顾和总结国内外对结直肠癌相关基因甲基化异常改变的研究及其进展发现,结直肠癌中除有基因突变外,同时都存在启动子CpG岛的异常甲基化。现对CDKN2/p16、MGMT、p53、Maspin等基因甲基化与结直肠癌的关系及其在早期临床诊断中的应用进行综述。     

结直肠癌HOXA11基因启动子甲基化状态的研究

目的探讨结直肠癌HOXA11基因启动子异常甲基化及其与临床病理特征之间的关系。方法从89对结直肠癌组织和配对的正常肠黏膜组织中分别提取基因组DNA,采用甲基化特异PCR(MSP)检测HOXA11基因启动子区甲基化状态,比较结直肠癌及正常肠黏膜组织中HOXA11甲基化的发生率,并统计分析结直肠癌组织中甲基化水平与患者临床病理特征的关系。在体外实验中,采用甲基化转移酶抑制剂5-Aza-dC处理细胞,实时荧光定量PCR检测HOXA11mRNA表达水平的变化。结果结直肠癌组织中HOXA11基因启动子甲基化阳性率显著高于配对的正常肠黏膜组织（P＜0.01）。HOXA11基因启动子异常甲基化与直肠癌淋巴结转移（P＜0.01）及TNM分期（P＜0.01）密切相关。结直肠癌细胞经5-Aza-dC处理后HOXA11mRNA表达水平显著增高（P＜0.05）。结论在结直肠癌组织中,HOXA11基因启动子区异常甲基化抑制HOXA11基因的转录表达。HOXA11启动子区异常甲基化与结直肠癌患者的淋巴结转移及TNM分期密切相关。     

结直肠癌中PAQR3甲基化水平及mRNA表达的研究

目的：研究结直肠癌组织中抑癌基因PAQR3 mRNA表达情况及甲基化水平,探讨PAQR3基因异常甲基化与结直肠癌的关系。方法收集结直肠癌及正常组织标本54组,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测结直肠癌标本中PAQR3 mRNA表达水平;用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）法检测结直肠癌标本中PAQR3基因甲基化水平,用以分析PAQR3甲基化水平与临床病理资料的关系。结果54组结直肠癌标本中PAQR3 mRNA表达降低发生率为57.4%（31/54）,正常组织PAQR3 mRNA表达降低发生率为18.5%（10/54）,表达差异有统计学意义（P=0.000）;癌组织PAQR3基因启动子甲基化发生率为33.3%（18/54）,正常组织PAQR3基因启动子甲基化率为5.6%（3/54）,二者差异有统计学意义（P=0.000）;PAQR3基因甲基化与年龄、分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关,与性别、部位无关。结论结直肠癌组织中PAQR3表达降低,与其基因启动子发生高甲基化有关。     

MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用

目的 建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性.方法 按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较.梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立.随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响.结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%.36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%～5%甲基化.不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA.2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果.结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台.     

结直肠癌中同源盒基因B9的表达及临床意义

目的通过检测结直肠癌组织中同源盒基因B9(HOXB9)基因的表达模式,探讨HOXB9基因的表达与结直肠癌患者临床病理特征的相关联系。方法应用RT-PCR、Real-time PCR及Western blot方法分别检测HOXB9在不同转移潜能的结直肠癌细胞系、8例结直肠癌及相应癌旁组织中mRNA和蛋白表达水平的表达差异;采用免疫组化方法检测HOXB9在136例结直肠癌石蜡组织标本中的表达特点,分析其与结直肠癌临床病理特征的相关联系及意义。结果 HOXB9基因在具有较高转移潜能的结直肠癌细胞系SW620、Lovo及M5中表达明显上调;在8例结直肠癌组织中HOXB9基因在mRNA及蛋白的表达明显高于相应癌旁正常组织;免疫组化的检测结果则显示在结直肠癌组织中HOXB9蛋白表达的阳性率为83.1%(113/136),强阳性率约为58.8%(80/136),HOXB9蛋白在结直肠癌组织中的表达水平高于相应癌旁组织;统计学分析结果表明,HOXB9蛋白的高表达与结直肠癌临床分期、T分期、淋巴结转移及远处转移密切相关,而与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小及分化程度无显著相关性。结论 HOXB9在结直肠癌组织中的表达明显上调,其上调表达与结直肠癌的临床进展关系密切,提示HOXB9在肿瘤发生和转移中可能承担着关键作用。     

结直肠癌中Tiam1基因启动子区甲基化与其表达的相关性

目的分析结直肠癌中Tiam1基因启动子区甲基化情况与其蛋白表达之间的关系。方法采用亚硫酸氢盐修饰测序法(bisulfite sequencing PCR)检测2例结直肠癌细胞系、4例结直肠癌组织及其配对的正常结直肠黏膜中Tiam1基因启动子区CpG岛的甲基化情况;采用免疫组织化学S-P法检测Tiam1蛋白的表达。结果Tiam1基因启动子的CpG位点在4例结直肠癌组织、2株结直肠癌细胞中均未甲基化,而在正常结直肠黏膜中发生了甲基化;Tiam1蛋白在结直肠癌组织及细胞中表达,在正常肠黏膜组织中无表达。结论结直肠癌中Tiam1基因启动子低甲基化与其蛋白高表达间呈负相关性,Tiam1基因启动子的异常甲基化很可能在Tiam1促进结直肠癌侵袭与转移中发挥重要作用。     

血浆Septin9基因甲基化检测在结直肠癌不同病理特征中的表达差异研究

目的:比较血浆Septin9基因甲基化检测在结直肠癌不同病理特征中的表达差异。方法:前瞻性分析2017年6—10月湖南省人民医院胃肠外科进行手术治疗的48例结直肠癌患者,检测患者术前血浆Septin9基因甲基化情况,结合术后病理标本,比较各病理特征中甲基化阳性率的情况。结果:血清Septin9基因甲基化在不同淋巴结转移分期、病理分期中差异具有统计学意义(X~2=7.07、11.02,P均0.05)。特别是淋巴结转移分期越晚,病理分期越晚,其阳性率越高,其中N2a阳性率为84.6%,N2b阳性率更是达到了100%;Ⅲ期阳性率70.6%,Ⅳ期为83.3%。结论:中晚期结直肠癌患者血浆Septin9基因甲基化阳性率极高,对结直肠癌的诊断及筛查具有重要意义。     

DNA甲基化与结直肠癌

结直肠癌是由肠上皮组织细胞遗传学或表观遗传学变异引起。据大量文献显示,绝大多数结直肠癌存在DNA异常甲基化,其中,启动子区域DNA异常甲基化是结直肠癌病情的主要诱因。相关研究显示:结直肠癌中存在Cp G岛甲基化表现型,这是一个相对独特的分子群,存在高甲基化集中现象,并且DNA甲基转移酶是催化甲基化过程唯一的酶系,其活性与甲基化状态相关。近年来,DNA甲基化成为遗传学研究热点,通过检测DNA甲基化等表观遗传学改变可对结直肠癌进行早期预防、诊断以及治疗。本文就关于DNA甲基化与结直肠癌进行综述。     

结直肠癌患者门静脉血p27基因甲基化检测及其临床意义

目的 研究结直肠癌患者门静脉血、外周血中p27基因甲基化状态的变化,探讨其与临床病理特征的关系.方法 应用甲基化特异性聚合酶链反应分析技术,检测106例结直肠癌患者的门静脉血中p27基因启动子甲基化的阳性率,并结合临床病理进行分析.结果 结直肠癌患者外周血中的p27基因甲基化阳性率为24.5%(26/106),对照组为3.4%(1/29).结直肠癌患者门静脉血中p27基因甲基化阳性率为30.2%(32/106),其中Dukes分期:A+B期和C+D期阳性率分别为20.0%(11/55)和41.2%(21/51);低分化和高中分化阳性率分别为48.0%(12/25)和24.7%(20/81);有无淋巴结转移阳性率分别为41.5%(17/41)和23.1%(15/65);浸润深度:未达浆膜层和达浆膜层阳性率分别为24.1%(7/29)和32.5%(25/77).门静脉血中p27基因甲基化与结直肠癌患者的临床分期、组织分化程度及有无淋巴结转移均有关(P＜0.05),但与患者的性别、年龄、肿瘤部位和大小均无统计学意义(P＞0.05).结论 结直肠癌的发生发展与p27基因甲基化有关.检测结直肠癌患者门静脉血中p27基因甲基化程度,可为临床分期及预后的判断提供依据.