凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症腺上皮细胞PTEN、Rb2/p130表达影响

目的:通过凋膜止崩液对人离体子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞PTEN、Rb2/p130基因表达的影响,探讨其对EH的治疗机理。方法:分离、培养30例原代人子宫内膜增生症(EH)腺上皮细胞并采用CK-19鉴定,将纯化后的腺上皮细胞随机分为4组:空白对照组、凋膜止崩液大剂量组(50μg/mL)、凋膜止崩液中剂量组(25μg/mL)、凋膜止崩液小剂量组(12.5μg/mL),分别于用药24、48、72 h观察下列指标的变化:四甲基偶氮噻唑兰(MTT)法检测3个时间点各组细胞的增殖率、实时定量聚合酶连反应(RT-PCR)以及Western blot分别检测各组细胞PTEN、Rb2/p130 m RNA及蛋白表达的差异。结果:与空白对照组比较,凋膜止崩液各组腺上皮细胞的增殖率明显降低,且呈时间和剂量依赖性(P0.05);凋膜止崩液组EH腺上皮细胞中PTEN、Rb2/p130 m RNA及蛋白的表达明显增加,与空白对照组相比差异显著(P0.05)。结论:凋膜止崩液能明显抑制EH腺上皮细胞的增殖,其抑制作用与上调细胞抑癌基因PTEN、Rb2/p130的表达有关。     

凋膜止崩方对无排卵型功能失调性子宫出血大鼠模型子宫内膜细胞凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响

目的观察凋膜止崩方对无排卵型功能失调性子宫出血（ADUB）大鼠模型子宫内膜细胞凋亡及凋亡基因bcl-2、bax表达的影响,探讨凋膜止崩方治疗ADUB子宫内膜增生症的机制。方法采用去势大鼠雌激素负荷法建立ADUB模型,随机分成空白组、模型组、实验小剂量组和实验大剂量组共4组。造模成功后第3天,宫腔注药处死,采用TUNEL法检测细胞凋亡,免疫组化法检测bcl-2、bax基因的表达。结果（1）模型对照组与空白组相比,凋亡指数增高（P〈0．05）;大、小剂量组与模型组相比,凋亡指数均明显升高（均P〈0．05）;大、小剂量组问差异无统计学意义（P〉0．05）。（2）模型组与空白组相比,bcl-2表达明显升高,而bax表达降低,bcl-2／bax比值显著升高（均P〈0．05）。（3）实验大、小剂量组与模型组相比,bcl-2表达明显降低,bax表达明显升高,bcl-2／bax比值显著下降（均P〈0．05）。结论凋膜止崩方能够降低bcl-2mRNA的表达,而增强baxmRNA的表达,通过下调bcl-2／bax比值,诱导过度增生的子宫内膜细胞凋亡可能是其发挥祛除子宫内膜作用的分子机制。     

凋膜止崩液对雌激素负荷去势大鼠P PR的影响

目的：研究不同剂量凋膜止崩液对雌激素负荷去势大鼠孕激素（P）及其受体（PR）的影响,揭示药物在有效部位靶向干预条件下,HPOA（下丘脑-垂体-卵巢轴）调节通道靶端药物效应机制,探讨靶向药物治疗功能失调性子宫出血（DUB）的分子生物学机制。方法：将大鼠随机分为4组：空白组（A）、模型组（B）、凋膜止崩液小剂量组（C）、凋膜止崩液大剂量组（D）,采用雌激素负荷去势法建立大鼠增生过长子宫内膜动物模型,放射免疫法测定各组大鼠血清孕激素（P）水平,免疫组织化学染色观察大鼠子宫内膜细胞孕激素受体（PR）的表达。结果：血清中P的水平：B组与C组相比有显著性差异（P〈0.01）,C组与D组之间比较无统计学意义（P〉0.05）;子宫内膜PR的表达：C组、D组子宫内膜PR表达明显降低,与B组相比有显著统计学差异（P〈0.01）;C组与D组之间无明显统计学差异（P〉0.05）。结论：凋膜止崩液可能通过直接或间接的作用调节P、PR消除增生过长子宫内膜。     

Influence of the Diao-mo-zhi-beng Prescription on Expression of MMP-1 and TIMP-1 in Endometria Hyperplasia Rats

目的:探讨凋膜止崩方靶向干预前后MMP-1和TIMP-1在子宫内膜增生症模型大鼠子宫内膜组织中的表达情况.方法:建立大鼠子宫内膜增生症模型,设立空白组(A)、模型对照组(B)、实验大剂量组(C)、实验小剂量组(D),并进行相应的处理.采用Western-blotting方法检测4组大鼠子宫内膜组织中MMP-1和TIMP-1蛋白的表达.结果:模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:凋膜止崩方治疗子宫内膜增生症的机制可能是通过上调大鼠子宫内膜组织中MMP-1蛋白的表达,下调TIMP-1蛋白的表达,从而加速了子宫内膜组织中ECM的水解,导致子宫内膜崩解、脱落,达到祛除大鼠增生过长子宫内膜作用.     

凋膜止崩方对子宫内膜增生症模型大鼠子宫内膜MMP-1和TIMP-1蛋白表达的影响

目的:探讨凋膜止崩方靶向干预前后MMP-1和TIMP-1在子宫内膜增生症模型大鼠子宫内膜组织中的表达情况。方法:建立大鼠子宫内膜增生症模型,设立空白组(A)、模型对照组(B)、实验大剂量组(C)、实验小剂量组(D),并进行相应的处理。采用Western-blotting方法检测4组大鼠子宫内膜组织中MMP-1和TIMP-1蛋白的表达。结果:模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:凋膜止崩方治疗子宫内膜增生症的机制可能是通过上调大鼠子宫内膜组织中MMP-1蛋白的表达,下调TIMP-1蛋白的表达,从而加速了子宫内膜组织中ECM的水解,导致子宫内膜崩解、脱落,达到祛除大鼠增生过长子宫内膜作用。     

凋膜止崩方对无排卵功血大鼠增生子宫内膜中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:探讨凋膜止崩方宫腔靶向干预前后Bcl-2和Bax在无排卵功血(ADUB)大鼠增生子宫内膜组织中的蛋白表达情况。方法:将健康成年雌性SD大鼠40只,随机分成空白组(A)、模型组(B)、实验大剂量组(C)、实验小剂量组(D),去势大鼠雌激素负荷造模成功后宫腔注药,采用West-ern-blot方法检测4组大鼠子宫内膜组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:动情前期A组Bcl-2表达较低,B组表达较高;且A组与B组、B组与C、D组之间差异有统计学意义(P<0.05)。而动情前期A组Bax表达较高,B组表达则较低;且A组与B组、B组与D组之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:凋膜止崩方可能通过下调ADUB大鼠增生子宫内膜中Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,加速子宫内膜细胞凋亡,达到祛除子宫内膜的目的。     

The Influence of Diao-mo-zhi-beng Prescription on Expression of Bcl-2 and Bax in Hyperplastic Endometrium of Rats

目的:探讨凋膜止崩方宫腔靶向干预前后Bcl-2和Bax在无排卵功血(ADUB)大鼠增生子宫内膜组织中的蛋白表达情况.方法:将健康成年雌性SD大鼠40只,随机分成空白组(A)、模型组(B)、实验大剂量组(C)、实验小剂量组(D),去势大鼠雌激素负荷造模成功后宫腔注药,采用Western-blot方法检测4组大鼠子宫内膜组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:动情前期A组Bcl-2表达较低,B组表达较高;且A组与B组、B组与C、D组之间差异有统计学意义(P＜0.05).而动情前期A组Bax表达较高,B组表达则较低;且A组与B组、B组与D组之间差异有统计学意义(P＜0.05).结论:凋膜止崩方可能通过下调ADUB大鼠增生子宫内膜中Bcl-2蛋白表达,上调Bax蛋白表达,加速子宫内膜细胞凋亡,达到祛除子宫内膜的目的.     

活血化瘀中药靶向给药祛除大鼠子宫内膜的初步研究

目的研究子宫腔内靶向应用活血化瘀中药-祛膜止崩液祛除子宫内膜治疗“功血”的有效性。方法选择处于动情前期的成年雌性SD大鼠30只，分为空白组、大剂量组、小剂量组，测量用药前后子宫湿重、子宫指数，并观察子宫内膜的病理变化。结果所用活血化瘀中药-祛膜止崩液能不同程度的破坏成年雌性SD大鼠的子宫内膜，减轻其子宫湿重、子宫指数。结论活血化瘀中药-祛膜止崩液能祛除子宫内膜，使其不能再生，从而从根本上治愈功血。     

雌激素介导骨桥蛋白/基质金属蛋白酶9通路调节子宫内膜异位症腺上皮细胞侵袭性的研究

目的 探讨子宫内膜异位症腺上皮细胞骨桥蛋白（OPN）与基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达与子宫内膜腺上皮细胞迁移的关系。方法 选取2013年8月-2014年3月于宁夏医科大学总医院因"卵巢巧克力囊肿"行剥除术或患侧附件切除术的9例患者异位子宫内膜,同期取行输卵管绝育术的10例患者的正常子宫内膜。子宫内膜组织培养,分离子宫内膜腺上皮细胞。检测子宫内膜异位症及正常子宫内膜OPN、MMP-9蛋白及mRNA表达水平。加入最适宜浓度的17β-雌二醇,培养最适宜时间,检测子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9蛋白表达水平。子宫内膜异位症腺上皮细胞分别进行无意义链siRNA转染和siRNA-OPN转染,以无意义链siRNA转染作为对照,检测转染后子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9蛋白表达水平。原代培养的子宫内膜腺上皮细胞达到90%融合时,配置成1×106/ml细胞悬液。侵袭小室下室分别加入500 μl的17β-雌二醇（10.0 nmol/L）、siRNA-OPN及无意义链siRNA,培养后在显微镜下取16个固定位置的视野计数穿膜细胞数。结果 通过原代培养技术成功分离子宫内膜腺上皮细胞,腺上皮细胞成团生长,呈铺路石样,均在细胞胞质检测到OPN及MMP-9的表达。子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9蛋白相对表达量分别为（2.53±0.57）、（3.12±0.69）,高于正常子宫内膜腺上皮细胞,差异有统计学意义（tOPN=-2.310,tMMP-9=-1.375,P＜0.05）。子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN、MMP-9mRNA相对表达量分别为（2.91±0.73）和（3.33±0.54）,高于正常子宫内膜腺上皮细胞,差异有统计学意义（tOPN=1.681,tMMP-9=-2.362;P＜0.05）。OPN及MMP-9 mRNA均在17β-雌二醇浓度为10.0 nmol/L,培养时间为48 h时达到高峰。培养48 h后,10.0 nmol/L 17β-雌二醇干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞OPN及MMP-9蛋白表达高于未加药干预,差异有统计学意义（P＜0.05）。子宫内膜异位症腺上皮细胞经siRNA-OPN干扰后,OPN、MMP-9蛋白表达水平低于经无意义siRNA干扰,差异有统计学意义（P＜0.05）。不同干预措施处理后,子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中,17β-雌二醇干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数高于未处理干预,siRNA-OPN干预的子宫内膜异位症腺上皮细胞穿膜细胞数多于未处理干预,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 雌激素诱导的OPN蛋白表达增加导致MMP-9的表达上调,可能与子宫内膜异位症患者子宫内膜腺上皮细胞的迁移有关。     

NES1在人子宫内膜腺上皮细胞及子宫内膜癌Ishikawa细胞中的表达

目的：研究正常上皮细胞特异性-1基因（normal epithelial cell specific-1,NES1）在人正常子宫内膜腺上皮细胞和子宫内膜癌细胞Ishikawa中的表达。方法：原代培养人子宫内膜腺上皮细胞,用免疫荧光定量PCR及Western blot的方法检测NES1在子宫内膜腺上皮细胞和Ishikawa细胞中的表达。结果：成功培养人子宫内膜腺上皮细胞;NES1在正常人子宫内膜腺上皮细胞中表达,表达定位在细胞质。NES1在Ishikawa细胞中表达较在子宫内膜腺上皮细胞中明显降低（P〈0.05）。结论：NES1基因表达缺失可能是子宫内膜癌的发生机制。     

室温酶解结合差速离心法分离子宫内膜腺上皮细胞及活性评估

目的 探讨室温酶解结合改良式差速离心法分离培养人子宫内膜腺上皮细胞的效果及细胞活性评估.方法 选择子宫腺肌症患者在位增殖晚期及分泌期内膜10例,所得内膜分为两份,一份采用室温酶解结合改良式差速离心法（改良组）分离,一份采用37℃水浴消化结合筛网法（对照组）分离,通过细胞计数、细胞免疫化学及MTT法分别比较两种方法分离培养子宫内膜腺上皮细胞的数目、纯度及细胞生长活性.结果 两组中10份标本均获得成功;改良组每g内膜组织可得到（9±1.7）×10^7个腺上皮细胞,免疫细胞化学角蛋白表达阳性,纯度达（97.8±0.002）％;对照组可得到（3.9±0.78）×10^7个腺上皮细胞,角蛋白表达阳性,纯度达（88.6±0.006）％,改良组分离的腺上皮细胞数量和纯度均明显高于对照组（P＜0.05）.MTT结果显示改良组细胞在对数生长期生长活性明显高于对照组（P＜0.05）.结论 采用室温酶解结合改良式差速离心法可高纯度分离子宫内膜腺上皮细胞,并且细胞数量多,活性好,可用于子宫内膜疾病的药物干预及机制学的研究.     

p53p21MDM2蛋白在卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症中的表达及意义

目的通过检测p53、p21、MDM2蛋白在正常子宫内膜、卵巢子宫内膜异位症和子宫腺肌症组织中的表达,探讨p53、p21、MDM2基因和细胞凋亡在子宫内膜异位症发生发展中的作用,为临床诊治提供理论依据。方法应用免疫组化染色法(S-P法)检测29例正常子宫内膜、30例卵巢子宫内膜异位症和29例子宫腺肌症组织标本的p53、p21、MDM2表达情况,对p53、p21、MDM2的表达及细胞凋亡之间的关系进行分析。结果 p53蛋白在正常子宫内膜组中分泌期表达高于增生期(P0.05),在卵巢子宫内膜异位症组织和子宫腺肌症组织中增生期与分泌期表达差异无统计学意义(P0.05)。正常子宫内膜组p53蛋白表达率高于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05),差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p53蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。P21蛋白在正常子宫内膜组的表达率高于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05),差异有统计学意义。卵巢子宫内膜异位症组p21蛋白表达率与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。MDM2蛋白在正常子宫内膜组织的表达率分别低于卵巢子宫内膜异位症组(P0.05)和子宫腺肌症组(P0.05)。卵巢子宫内膜异位症组与子宫腺肌症组相比差异无统计学意义(P0.05)。在卵巢子宫内膜异位症组中p53与p21呈正相关(r=0.611,P0.01),p53与MDM2呈负相关(r=-0.541,P0.01),p21与MDM2在卵巢子宫内膜异位症组中表达无相关性(r=0.404,P0.05)。结论细胞凋亡调控蛋白p53、p21、MDM2与子宫内膜异位症和子宫腺肌症的发生发展相关,子宫内膜异位症和子宫腺肌症发病机制可能存在相同之处。     

米非司酮对子宫内膜异位症子宫内膜腺上皮细胞骨桥蛋白和基质金属蛋白酶9表达的影响

背景 目前子宫内膜异位症的治疗方法仍比较有限,而米非司酮在临床上可用于治疗子宫内膜异位症,但其具体机制尚未明确。目的 探讨米非司酮对子宫内膜异位症子宫内膜腺上皮细胞中骨桥蛋白（OPN）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达的影响。方法 选取2014年8月-2015年3月宁夏医科大学总医院妇科因卵巢巧克力囊肿行卵巢囊肿剥除术或患侧附件切除术的子宫内膜异位症患者21例为研究对象。按照术前是否接受米非司酮治疗将其分为米非司酮组（11例）和对照组（10例）。获取所有患者在位、异位内膜组织,采用免疫组化法检测其中OPN、MMP-9表达水平;取对照组患者在位子宫内膜组织,培养子宫内膜腺上皮细胞,以不同剂量（0、0.1、1.0、10.0 mmol/L）米非司酮进行干预,采用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测子宫内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9表达水平。结果 米非司酮组在位、异位内膜组织中OPN、MMP-9表达水平均低于对照组（P＜0.05）。0.1 mmol/L、1.0 mmol/L米非司酮干预子宫内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9 mRNA表达水平低于0 mmol/L（P＜0.05）;1.0 mmol/L、10.0 mmol/L米非司酮干预子宫内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9 mRNA表达水平高于0.1 mmol/L（P＜0.05）;10.0 mmol/L米非司酮干预子宫内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9 mRNA表达水平高于1.0 mmol/L（P＜0.05）。结论 米非司酮可明显下调子宫内膜异位症子宫内膜中OPN、MMP-9表达水平,从而抑制子宫内膜的侵袭、黏附以及种植性转移。     

OPN干预子宫内膜异位症腺上皮细胞中NF-κBp65表达及其对细胞侵袭性的影响

目的：探讨子宫内膜异位症（EMS）患者在位内膜腺上皮细胞中骨桥蛋白（OPN）对核因子κB（NF-κB）p65表达的影响及其与细胞侵袭的关系。方法原代分离培养12例EMS患者在位内膜原代腺上皮细胞。采用OPN siRNA干扰细胞24 h后收集,Western blot、RT-PCR方法分别检测干预前、后细胞中OPN、NF-κBp65蛋白及其mRNA表达情况;Transwell试验检测干预前、后细胞侵袭性的变化。采用相同剂量的无RNA酶水干预EMS患者在位内膜腺上皮细胞作为未干预组。结果与干预前比较,OPN siRNA干扰后细胞中OPN蛋白、mRNA的表达明显下降（t1＝7.92,t2＝9.87,P＜0.05）;与未干预组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;OPN siRNA干扰后细胞中NF-κBp65蛋白及mRNA的表达明显减弱（t1＝—2.13,t2＝— 8 .61,P＜0.05）,与未干预组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。OPN siRNA干扰后原代腺上皮细胞的侵袭性明显降低（t＝2.38,P＜0.05）,与未干预组比较差异无统计学意义（ P＞0.05）。O PN、N F-κBp65在 EM S患者在位内膜腺上皮细胞中的表达呈明显的正相关（ r＝0.87）。结论 OPN siRNA沉默EMS患者腺上皮细胞中的OPN后OPN、NF-κBp65的表达及细胞的侵袭性均明显降低,且二者呈明显正相关,揭示二者极有可能在异位细胞的侵袭中发挥同步协调作用。     

siRNA靶向EZH2 抑制子宫内膜癌细胞生长和侵袭

目的探讨靶向抑制EZH2 表达对子宫内膜癌细胞生长及侵袭的影响及其分子机制。方法实时荧光定量PCR检测
EZH2 在子宫内膜癌与癌旁子宫内膜组织中的表达差异。利用化学合成siRNA 转染子宫内膜细胞,靶向抑制EZH2 表达。
MTT、流式细胞仪检测细胞增殖和细胞周期改变。Boyden小室检测细胞侵袭情况的变化。Western blotting检测细胞周期因子
及基质金属蛋白酶2（MMP2）表达改变。结果相比于癌旁子宫内膜组织,EZH2基因在子宫内膜癌中表达相对增高。SiRNA在
子宫内膜癌细胞中抑制EZH2 表达后,细胞增殖能力明显降低,且细胞周期也阻滞在G1期。Boyden 小室分析显示,在抑制
EZH2表达后,细胞的侵袭能力也明显降低。机制分析显示,在抑制EZH2表达后,细胞周期因子E2F1及MMP2表达明显降低,
而抑癌基因p21 表达明显升高。结论EZH2 在子宫内膜癌中表达明显升高。SiRNA 靶向抑制EZH2 之后通过下调E2F1、
MMP2及上调p21表达后,能明显减慢子宫内膜癌细胞增殖和侵袭速度。
     

骨桥蛋白与基质金属蛋白酶9在子宫内膜异位症患者内膜中的表达情况及孕激素对其表达的影响

目的 探究子宫内膜异位症（EMs）患者内膜中骨桥蛋白（OPN）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达情况及二者的相关性,以及不同剂量孕激素对其表达的影响。方法 选取2006-2015年在宁夏医科大学总医院住院治疗的符合纳入标准的EMs患者105例,术前1 d行诊刮术获得在位内膜（EMs在位内膜组）,由卵巢囊肿剥除术或患侧附件切除术切除组织获得异位内膜（EMs异位内膜组）。另选取同期行输卵管绝育手术的患者90例作为对照,绝育手术前1 d行诊刮术获取子宫内膜（正常子宫内膜组）。采用免疫组化法检测3组内膜中OPN及MMP-9表达情况,并分析EMs在位内膜组、EMs异位内膜组OPN与MMP-9的相关性。2013年1-3月,从105例患者中随机选取9例患者的在位内膜组织进行后续试验,采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测不同剂量（0、1、10、100、1 000 nmol/L）孕激素干预后在位内膜腺上皮细胞中OPN、MMP-9 mRNA表达水平。结果 免疫组化法染色结果显示,正常子宫内膜组在位内膜DAB染色后腺上皮细胞呈淡黄色,OPN、MMP-9均主要表达于内膜腺上皮细胞中;EMs在位内膜组DAB染色后腺上皮细胞染色加深,呈棕黄色;EMs异位内膜组腺上皮细胞染色进一步加深,呈棕黑色,OPN和MMP-9主要表达于EMs腺上皮细胞中。EMs异位内膜组OPN、MMP-9表达情况强于EMs在位内膜组、正常子宫内膜组（u值分别为7.553、-6.153、-9.754、-10.240,P＜0.001）;EMs在位内膜组OPN、MMP-9表达情况强于正常子宫内膜组（u值分别为7.164,8.816,P＜0.001）。Spearman相关分析结果显示,EMs在位内膜组、EMs异位内膜组中OPN与MMP-9表达水平均呈正相关（rs值分别为0.657、0.745,P＜0.05）。0、1、10、100、1 000 nmol/L孕激素分别干预EMs腺上皮细胞后,其OPN及MMP-9表达水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 OPN、MMP-9在EMs患者在位、异位内膜中表达均增强,但不同剂量孕激素对EMs患者在位内膜腺上皮细胞OPN、MMP-9表达水平影响不明显。     

左旋炔诺孕酮对人子宫内膜细胞体外增殖及细胞间通讯的影响

 【目的】探讨左旋炔诺孕酮对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞增殖、间隙连接细胞间通讯（gap iunction intercellular communication，GJIC）及连接蛋白（connexin，Cx）43、32表达的影响。【方法】采用MTT法观察LNG对人子宫内膜细胞的增殖调节作用，采用划痕染料标记示踪技术，观察左旋炔诺酮（1evonorgestrel，LNG）对原代培养的人子宫内膜腺上皮细胞及问质细胞GJIC的影响，采用激光共聚焦显微镜扫描技术，观察LNG对Cx43、Cx32表达的影响。【结果】LNG浓度为5×10^-5 mol／L时，对子宫内膜间质和上皮细胞均有抑制生长作用（P〈0．05），体外培养的人子宫内膜问质细胞的GJIC功能较腺上皮细胞强（P〈0．05），LNG可显著提高人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞间荧光黄染料的扩散（P〈0．05）；同种Cx腺上皮细胞表达较间质细胞强（P〈0．05），LNG对两种细胞Cx的表达没有影响（P〉0．05）。【结论】LNG可抑制人子宫内膜腺上皮细胞及间质细胞体外增殖，显著促进细胞GJIC功能，提示其在逆转子宫内膜增殖性病变的阶段扮演重要角色；LNG未影响子宫内膜细胞Cx43、Cx32的表达，提示Cx表达量不能完全反映GJIC功能。     

子宫腺肌病中PTEN和Akt的表达及其相关性研究

目的探讨子宫腺肌病病灶中10号染色体缺失张力蛋白磷酸酶(PTEN)和蛋白激酶B（PKB/Akt）的蛋白表达情况,旨在为子宫腺肌病的发生发展以及治疗提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测子宫腺肌病异位内膜(30例)、在位内膜（27例）、正常子宫内膜(20例)的腺上皮细胞和间质细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt （P Akt）蛋白的表达并进行比较。结果PTEN蛋白在腺上皮细胞中的表达,正常子宫内膜表达高于在位内膜和异位内膜（P＜0.05,P＜0.01）,子宫腺肌病在位内膜的表达高于子宫腺肌病异位内膜的表达（P＜0.01);Akt、P Akt蛋白在子宫腺肌病异位内膜的腺上皮细胞中的表达强度高于在位内膜（P＜0.05）和正常子宫内膜(P＜0.01),其在位内膜腺上皮细胞中的表达强度高于正常子宫内膜(P＜0.01)。PTEN蛋白在间质细胞中的表达,正常子宫内膜明显高于子宫腺肌病的在位内膜和异位内膜（P＜0.05）,但在位内膜与异位内膜之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;Akt、P Akt蛋白在间质细胞中的表达,异位和在位内膜明显高于正常内膜,异位内膜和在位内膜两组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。PTEN与Akt、PTEN与P Akt在子宫腺肌病异位内膜、在位子宫内膜和正常子弓内膜中的表达均呈负相关（r＝-0.444;r＝-0.546）。结论PTEN蛋白表达在子宫腺肌病的在位、异位内膜中减少;Akt、P Akt蛋白表达增加。PTEN蛋白低表达不能有效的抑制Akt的激活,从而对子宫腺肌病的发生与发展起重要的作用。     

透明带3多肽诱导的免疫性卵巢早衰小鼠模型子宫组织中Ki-67、ER的表达

目的以透明带3多肽（pZP3）诱导的免疫性卵巢早衰（POF）小鼠为研究对象,观察其子宫Ki-67、雌激素受体（ER）的表达,
以进一步探讨免疫性卵巢早衰患者辅助生殖相关的子宫预处理方案。方法取7~8周龄的健康雌性BALB/c小鼠40只,随机分
为对照组和模型组。通过阴道脱落细胞涂片、血清性激素、卵巢组织形态及抗卵巢ZP3抗体鉴定建模成功。检测两组小鼠子宫
组织形态变化及子宫Ki-67、雌激素受体α亚型（ERα）及雌激素受体β亚型（ERβ）的表达。结果8周后80%小鼠建模成功。与对
照组相比,模型组子宫萎缩,内膜变薄,单位面积内腺体数量减少。模型组子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞中Ki-67
的表达较对照组减弱,且有胞核转位至胞浆现象。对照组小鼠子宫内膜上皮细胞、腺上皮细胞及间质细胞的胞浆强表达ERα,
而模型组呈阴性表达。两组小鼠子宫内膜ERβ均呈阴性表达。结论pZP3可以诱导小鼠成功构建免疫性卵巢早衰疾病模型,
同时引起子宫内膜上皮细胞及间质细胞的增殖降低和ERα表达减弱。
     

神经生长因子对子宫腺肌病基质细胞生存率及雌激素受体α表达的影响

目的研究神经生长因子（NGF）对子宫腺肌病患者离体培养在位子宫内膜基质细胞雌激素受体仅表达的影响。方法用10ng／ml、50ng／ml和100ng／ml的神经生长因子分别对体外原代培养人子宫内膜细胞进行干预,用MTT法测定内膜基质细胞生长的增殖情况,用Westen—blotting测定50ng／mlNGF对病例组基质细胞雌激素受体仪表达的变化。结果50ng／ml的NGF可促进子宫内膜基质细胞增殖,细胞存活率为82．61％,比其他浓度NGF显著升高（P〈0．05）;50ng／mlNGF对病例组和对照组不同细胞雌激素受体表达有影响,病例组腺上皮细胞和基质细胞总体均数差异均具有统计学意义（P〈0．01）。结论50ng／ml的NGF可促进子宫腺肌病在位内膜基质细胞增殖及腺上皮细胞和基质细胞雌激素受体仅表达。