新的肝炎病毒TTV在各类肝病人群中的感染状况

为观察输血传播病毒TTV在各类肝病病人中的感染状况,在日本TTVORF1保守区设计了两对套式引物,采用巢式聚合酶链反应两次扩增血清TTV DNA,并对产物进行分子克隆和基因序列分析.结果显示:在非甲-戊型和非庚型肝炎病人、血清HBsAg阳性的肝炎病人、正常献血员、肝炎肝硬化病人、原发性肝癌病人中,血清TTV DNA阳性率分别为43.2%(16/37)、28.8%(15/52)、9.3%(4/43)、51.9%(14/27)、38.5%(5/13)、35.0%(14/40).和17.3%(8/45).其中非甲-戊型和非庚型肝炎病人、血清HBsAg阳性肝炎病人的ALT平均为(472±276)u·L-1和(385±218)u·L-1;肝炎肝硬化病人TTV DNA阳性率显著高于HBsAg阳性肝炎病人.提示:TTV感染和ALT升高存在一定的关系;TTV在慢性乙型肝炎向肝硬化发展过程中的作用,应进一步研究.     

TTV在非甲至非庚型肝炎中感染的检测和分析

目的 研究新近报导的1种与输血后肝炎有关的病毒（TTV）在中国郑州地区非甲至非庚型肝炎患中的感染和基因序列变异情况。方法 采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应（nested-PCR)方法对非甲至非庚型肝炎患和正常人血清标本进行检测，并对非甲至非庚型肝炎患中的TTV分离株进行序列测定。结果 TTV DNA在40例非甲至非庚型肝炎患中检出18例，阳性率为45％，在96例正常人中检出17例，阳性率为17.7%，两组阳性率相比差异有统计学意义。TTV分离株序列与日本株（CLON22）相对应位置的核苷酸同源性为99.1%。结论 TTV在非甲至非庚型肝炎患中的感染率较高，可能是非甲至非庚型肝炎的主要致病因子。TTV分离株与日本株可能属同一基因型。     

佛山地区TTV感染情况调查

目的：调查佛山地区TT病毒（TTV）感染的情况，了解TTV与肝炎的关系。方法：选取非甲-庚肝炎患者、慢性乙型肝炎患者、静脉药瘾者及健康人群（健康义务献血员）血清作TTV-DNA扩增，微板核酸杂交-ELISA技术作TTV检测及TTV基因分型。了解不同人群TTV感染率及TTV的基因分布情况。结果：非甲-庚肝炎患者中检出29例，阳性率7.13％。慢性乙型肝炎患者中检出23例，阳性率6.46％。静脉药瘾者中检出11例，阳性率13.25％。健康人群中检出1例，阳性率0.63％。对64例TTV阳性标本进行基因分型，其中Ⅰ型60例，Ⅱ型4例。64例TTV感染者中6例肝功能检查ALT正常。结论：佛山地区存在TTV感染，基因型以I型为主。其中非甲-庚肝炎患者、慢性乙型肝炎患者、静脉药瘾者的感染率较高，为TTV感染的高危人群。TTV为非甲-庚肝炎的病原之一，存在着无症状携带状态。其传播似与血液途径有密切关系，可单独或混合感染致病，其在人群中的感染似与HBV感染存在与否无关。     

TTV感染形式及致病性分析

目的 :探讨非甲 -戊型、非庚型肝炎病原诊断 ,了解慢性乙肝、献血员和体检者TTV现症感染状况 ,分析 TTV感染表现形式。方法 :对比调查非甲 -戊型、非庚型肝炎患者2 5例、慢性乙肝 63例、献血员 3 0例及体检者 3 2例 TTV感染情况。结果 :4组中 TTV DNA检出率各为 5 2 .0 0 % (1 3 / 2 5 )、1 5 .87% (1 0 / 63 )、1 0 .0 0 % (3 / 3 0 )和 3 .1 3 % (1 / 3 2 ) ,非甲 -戊型、非庚型肝炎组与其它 3组比较 P均 <0 .0 1。结论 :TTV系非甲 -戊型 ,非庚型肝炎病因之一 ,其致病力较弱。单纯 TTV感染引起慢性肝炎 47.0 6% (8/ 1 7) ,急性肝炎 2 3 .5 3 % (4 /1 7)、病原携带状态或隐性感染 2 3 .5 3 % (4 / 1 7) ,重型肝炎最少 5 .88% (1 / 1 7)明显少于慢性肝炎 (P<0 .0 1 )。     

输血传播病毒及其对肝脏的致病作用

目的研究输血传播病毒(transfusion transmitted virus, TTV)在供血员及各型病毒性肝炎中的感染率及对肝脏的致病作用.方法检测49名供血员和165例肝炎患者血清中的TTV DNA(采用套式PCR技术).结果 TTV在供血员中的感染率为24.5%,病毒性肝炎中的感染率分别为:甲25.0%,乙29.3%,乙+丁23.8%,丙66.7%,戊10.0%,庚80.0%,非甲～非庚36.1%.非甲～非庚肝炎中TTV阳性者的肝损(ALT,SB)与全阴性者相比无显著差异(P＞0.05).TTV分别和各型肝炎混合感染及各型肝炎病毒单独引起的肝损相比无显著差异(P＞0.05).结论 TTV在人群中感染率较高,尤其在输血后易感.但TTV可能不是非甲～非庚病毒以外造成肝损的主要原因,甲～庚肝炎患者再感染该病毒可能不会进一步加重肝损.     

PCR法检测非甲-庚型肝炎患者血清输血传播病毒及临床意义

目的:探讨输血传播病毒(transfusiontransmittedvirus,TTV)的实验室诊断及临床特点。方法:用半巢式聚合酶链反应方法检测50例非甲-庚型肝炎患者血清中TTV-DNA。结果:50例非甲-庚型肝炎患者血清中,有11例检出TTV-DNA。TTV感染者病程有轻有重,表现为急性无黄疸性肝炎、急性黄疸性肝炎及轻度慢性肝炎。结论:非甲-庚型肝炎患者血清中存在TTV的感染,并可能是致病原因。临床表现为急性或轻度慢性肝炎,组织学上可见肝细胞变性、坏死和肝组织淋巴细胞浸润、纤维增生、汇管区炎症。TTV除血传播外,可能存在其他的传播方式。     

Enteric transmission of transfusion- transmitted virus

目的　最近在输血后肝炎病人中发现了一种新型肝炎病毒 ,并命名为输血传播的病毒即TTV。我们在一次经肠道传播的非甲非戊型肝炎暴发流行的病人粪便和血清中也检测到了这一病毒。本文旨在于回顾这种新型病毒的流行病学特征和实验感染。方法　主要收集我们的资料 ,并参照世界各地有关论著。结果　在一次经肠道传播的非甲非戊型肝炎的暴发流行中 ,从 381名学生 (6 0 7% )的血清和粪便标本中检测到TTV病毒的片段 ,该职校中无症状携带者的血清阳性率为 32 1% ,而粪便阳性率为 2 4 6 % ,提示有潜在的传染源存在。来自中国北方与南方的两个偏远农村人群流行病学调查 ,其阳性率分别为 9 2 %和 10 6 % ,表明中国是TTV感染的地方性流行区。我们用TTV阳性肝炎病人的粪便滤过液分别经灌胃和静脉接种两种途径成功地使两组恒河猴 (每组 3只 )感染了TTV ,并对其中两只恒河猴进行了研究 ,分别在它们的肝、脾、小肠和结肠组织中检测到TTV ,而单链的复制中间体 ,仅仅在肝和小肠中检测到。结论　这种无包膜的DNA病毒可能经血液和肠道途径传播 ,根据其广泛分布和高的流行率 ,我们推测肠道传播是更为重要的     

非甲—非庚型肝炎患者中TTV感染的研究

目的 了解TTV在我院非甲－非庚型肝炎患中的感染状况,研究TTV感染对非甲－非庚型肝炎临床表现的影响,探讨TTV在病毒性肝炎中的致病作用。方法 采用聚合酶链反应（PCR）斑点杂交法对我院108例非甲－非庚型肝炎患血清标本进行TTV DNA检测。结果 非甲－非庚型肝炎患TTV DNA阳性率为14．8％（16／108）,急、慢性肝炎及重型肝炎患中TTV DNA的检出率无统计学差异。TTV阳性组与TTV阴性组肝脏临床及生化指标无显性差异。结论 TTV可能并非是导致肝脏功能损害的真正病原。     

乙型肝炎及其与戊型肝炎重叠感染临床对照

目的了解乙型肝炎患者重叠戊型肝炎感染状况及重叠感染对病情的影响. 方法对单纯HBV感染者与HBV重叠HEV感染者进行临床对照研究.结果 726例乙型肝炎患者血清抗-HEV阳性率为12.25%(89/726).其中重型肝炎、肝硬化患者中抗-HEV阳性率分别为22.41%和18.83%;急性肝炎和慢性肝炎分别为8.69%和7.24%.重型肝炎、肝硬化患者抗HEV阳性率高于急性肝炎和慢性肝炎(P<0.01).各型肝炎重叠感染戊型肝炎后其肝功能恢复正常时间延长(P<0.05),且在乙型肝炎基础上重型肝炎和肝硬化重叠感染戊型肝炎血清胆红素明显升高(P<0.01).重叠感染者并发症及病死率较单纯感染者高. 结论乙型肝炎重叠感染戊型肝炎是病情加重及重症化的因素之一.     

献血员、肝炎患者TTV DNA检测及部分TTV基因序列分析

目的了解献血员、肝炎患者中的输血传递病毒(TTV)感染状况及基因型别。方法设计合成引物采用半套式聚合酶链反应（hemi-nestPCR）方法,对195份献血员血清、72份不同型别的肝炎患者血清进行了TTVDNA的PCR检测,并对部分阳性株进行序列测定及计算机分析。结果①在血清丙氨酸转氨酶（ALT）异常,HBsAg及抗HCV阴性的99份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本36份,阳性检出率为36.3%;而在ALT正常的96份献血员血清标本中,检出TTVDNA阳性标本16份,阳性检出率为16.6%,明显低于ALT异常献血者。②在72例不同肝炎患者中,共检出39例TTVDNA阳性血清,总检出率为54.16%,在非甲-非庚型肝炎患者中TTVDNA阳性率为87.5%,而在明确诊断为甲-庚型肝炎的患者中TTVDNA阳性率为50%,两组相比差异显著（P<0.05）。对8株阳性株序列分析结果显示,测序的8个分离株与9个G1、G2代表株核酸的同源性为60.4%～99.1%,氨基酸的同源性为55.4%～98.6%。经系统发育分析表明,这8个TTV分离株中有7株可分属于G1、G2两个基因型的5个亚型,而另1株为G1型的新亚型。结论①献血者中存在TTV感染,提示TTV可以导致感染个体的肝功能异常,TTV可能与HBV感染相似,亦存在“健康携带状态”。②非甲-非庚型肝炎患者的TTV感染率明显高于明确病原的甲-庚型肝炎患者,TTV感染与肝炎有关,可能是非甲-非庚型肝炎的病原之一。③8个TTV分离株中7个分属于G1、G2两个基因型中的5个亚型,另有1株为G1型的新亚型。     

不同转移倾向肿瘤亚株细胞内的微核观察

为了探讨恶性肿瘤转移与微核现象间的关系,本实验首次运用微核试验(MT)检测了小鼠腹水型肝癌(N_(22))及其肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))、淋巴结转移倾向亚株(N_(22)SL_(10))。小鼠子宫颈癌(U_(14))及其肺转移倾向亚株(U_(14)AP_(11))瘤细胞内的微核。比较了经活体筛选的上述亚株与未经筛选的原瘤株的微核细胞率(MNF)、总微核率,结果上述两项指标H_(22)SP_(10)及H_(22)SL_(10)均显著高于H_(22)(P值分别为<0.002、<0.005;<0.005、<0.001);U_(14)AP_(11)也显著高于U_(14)(P分别为<0.001、<0.001),而H_(22)SL_(10)与H_(22)SP_(10)(P>0.05、>0.05)。它表明在异质性N_(22)及U_(14)细胞群体中具有器官倾向性转移的细胞染色体畸变较重,可能为肿瘤演进的结果。     

大豆皂甙和人参茎叶皂甙对糖尿病大鼠血SOD和LPO的影响

本实验取雄性Wistar大鼠,分四组,即正常组,糖尿病组(DM组),人参茎叶皂甙(GS)+DM组(简称GS组),大豆皂甙(SS)+DM组(简称SS组)。观察其血糖、SOD、LPO的变化,结果,DM组血糖明显升高,GS组和SS组,血糖明显下降。DM组SOD含量明显减少,GS和SS使DM大鼠的SOD含量明显增加。DM组LPO含量增高,而GS组和SS组的LPO含量均明显降低。提示了GS和SS能通过自身调节增加DM大鼠SOD的含量,降低LPO,清除自由基,减轻了自由基的损伤作用,对DM大鼠有一定的防治作用。     

高效液相 (HPLC) 荧光法同时测定人血浆中4种硫醇物的浓度

 目的  建立同时测定人血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine,CysGly)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)等4种硫醇物的高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)。方法  血浆经磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)稀释后,用三(2-羧乙基)膦盐酸盐［tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride,TCEP］还原,用三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7-氟苯呋咱-4-硫酸铵盐(7-fluorobenzofurazan-4-sulfonic acid ammonium salt,SBD-F)进行衍生化反应,荧光检测器检测。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温29 ℃;流动相为甲醇:0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH=4.5,3.5∶96.5,V/V),流速为0.8 mL/min,等度洗脱。激发波长385 nm,发射波长515 nm。采用外标法定量。结果  Cys、Hcy、CysGly和GSH的线性范围分别为50~800 μmol/L、4~64 μmol/L、10~160 μmol/L和2.5~40 μmol/L。Cys、Hcy、CysGly和GSH的最低检测浓度分别为2.5 μmol/L、1.0 μmol/L、1.0 μmol/L和1.0 μmol/L。各组分日内、日间精密度RSD均<12 %。平均回收率为95.01 %~116.17 %。结论  该方法具有检测时间短、灵敏性高、精密度和准确度好的特点,适用于临床人血浆中硫醇物浓度的常规检测。     

双胸蚯蚓溶栓酶对沙鼠缺血额叶皮质超微结构及离子的影响

采用结扎沙土鼠双颈总动脉20分钟后恢复血流制做脑缺血再灌注模型。应用透射电镜对额叶皮质超微结构进行观察,并采用电镜能谱技术对神经元随机检测Na~十Ca~卄等离子含量。结果表明,缺血的对照组神经元Na~十明显增高达16.43,而缺血后腹腔注入双胸蚯蚓溶栓酶的实验组显著下降为13.02,接近正常组的11.47;Ca~卄正常组为1.03,对照组增高达3.81,而实验组下降为2.44。同时实验组超微结构的损伤性改变明显轻于对照组。     

反相高压液相色谱与荧光分光光度计朕机检测儿茶酚胺类物质

本文就高效液相与荧光分光光度计联机检测多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素的方法加以论述。     

孕周与母儿血甲状腺激素含量的关系

目的：观察不同孕周与母儿血甲状腺激素的关系。方法：应用放射免疫分析法对67例中、晚期妊娠要求引产患者，10例早产及78例孕足月自然分娩患者进行了母血及胎儿脐静脉、脐动脉血中TSH、T3、T4的测定。结果：TSH值在母血及胎儿血中随着孕周的增加而增加．T3值在胎儿血中与母血中比较，显示低T3血症，T4值接近正常母体水平。结论：测定母血中的甲状腺激素，可动态观察不同孕周甲状腺激素变化，可及时发现胎儿低甲血症。     

胰岛素降糖反应延迟机理的初步探讨

本文对10例IDDM病人皮下注射胰岛素后作了7.5小时动态观察,测定了BG、FI、G、F和GH。基础BG高者,胰岛素最大降糖作用延迟,降糖过程中,GH的升糖效应最敏感,G和F升高与血糖回升时间相一致,在BG高者,呈延迟反应。这种延迟反应可能是由于血糖高,使到达刺激后二种升糖激素分泌阈值所需的时间延长有关。     

积雪草苷对脂多糖诱导小鼠急性肺损伤的影响

目的观察积雪草苷对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)小鼠的保护效应。方法56只Balb/c小鼠随机分为对照、假手术、模型、溶媒、积雪草苷(5、15、45 mg/kg)7组,每组8只。LPS(2.5 mg/kg)气管滴注造ALI模型,24 h后HE染色观察小鼠肺组织病理改变,计算肺湿质量/干质量值;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)后行白细胞计数和分类,BCA法检测其蛋白的量;化学法检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果积雪草苷各剂量组呈剂量依赖性减轻LPS所致ALI模型肺组织病变情况,减轻肺水肿,减轻中性粒细胞的浸润,抑制蛋白渗出。抑制肺组织中MPO活性。结论积雪草苷对LPS诱导ALI有保护效应。     

褪黑素载药纳米粒的优化设计及研制

目的：探讨采用复合乳液-溶剂挥发法制备褪黑素载药纳米粒的最佳工艺条件。方法：以聚乳酸、壳聚糖可降解生物材料为载体,明胶为分散剂,span-80和tween-80混合液为微乳液,根据微粒的表面形态、粒径大小、分布、包封率、载药量选择最佳工艺条件,制备褪黑素载药纳米粒。结果与结论：原子力显微镜下可见纳米粒表面圆滑,分布均匀。正交设计效应曲线图直观分析和方差分析结果显示,搅拌速度、溶剂挥发温度、聚乳酸与褪黑素投药比、壳聚糖浓度是影响制备工艺的主要因素。在30℃,1000r／min搅拌速度,搅拌时间45min,m(褪黑素)：m(聚乳酸)为1：5,V(Tween-80)：V(Span-80)为5：1,壳聚糖质量浓度为1％条件下,可制备成平均粒径为45．84nm,包封率为38．33％,载药量为8．35％的褪黑素载药纳米粒。     

缺氧缺血(HI)新生大鼠脑损伤后NO水平的变化及GM1对其影响

目的:观察新生大鼠缺氧缺血性(HI)脑损伤后NO水平的变化,探讨单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM1)对NO水平的影响.方法: 选择新生7日龄Sprague-Dawley大鼠108只,随机分为三组:缺氧缺血组(HI组,36只),假手术对照组(Control组,36只),缺氧缺血 神经节苷脂组(GM1组,36只) .采用结扎右侧颈总动脉并吸入低氧混合气体制备HIBD模型.采用镀铜镉还原法测定血浆一氧化氮(NO)水平.结果: Control组、HI组、和GM1组新生大鼠血浆NO-2/NO-3含量分别为(41.6±8.9 ) 、(60.9±14.7 )和(43.8±10.6) μmol/L.HI组明显高于对照组和GM1组(P<0.05);GM1组与对照组比较,无明显差异(P>0.05).结论:GM1能抑制新生大鼠缺氧缺血性(HI)脑损伤后NO生成,对缺氧缺血(HI)新生大鼠的脑具有保护作用.