大鼠乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证病证结合模型研究

探讨乳腺癌癌前病变肝郁肾虚证病证结合模型的造模方法。方法:SD大鼠分为空白对照组、二甲基苯蒽造模组、二甲基苯蒽+雌激素造模组、二甲基苯蒽+雌激素病证结合模型组,检测不同造模方法大鼠模型乳腺组织雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达及上皮生长因子受体(EGFR)及转录激活因子3(STAT3)的蛋白表达。结果:与空白对照组比较,各造模组ER、PR表达增高(P0.05)。与二甲基苯蒽组比较,二甲基苯蒽+雌激素组、病证结合组ER、PR表达增高,差异有统计学意义(P0.05),病证结合组EGFR、STAR3的表达亦增高,差异有统计学意义(P0.05);与二甲基苯蒽+雌激素组比较,病证结合组各项指标表达增高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:EGFR/STAT3通路参与乳腺癌癌前病变的发病,肝郁肾虚在发生过程中起重要作用,病证结合造模具有可行性。     

肺积方调节CD4+CD25+Treg 细胞及T 淋巴细胞增殖与抗Lewis 肺癌移植鼠肿瘤生长作用研究

目的:观察肺积方联合化疗对Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长情况及脾脏CD4+CD25+Treg细胞、胸腺T淋巴细胞增殖变化的影响,探讨肺积方联合化疗抗肺癌免疫逃逸的作用机制。方法:采用随机对照研究方法,将64只Lewis肺癌移植小鼠随机分为对照组、肺积方组、综合组(肺积方联合顺铂)、顺铂(DDP)组,每组16只,并分别以生理盐水、肺积方、肺积方联合DDP、DDP药物干预,观察小鼠瘤体变化,流式细胞术检测小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞含量,MTT法检测小鼠胸腺和脾脏T淋巴细胞增殖情况。结果:DDP组、肺积方组、综合组小鼠瘤体、瘤重均小于对照组(P<0.05),综合组瘤体、瘤重均小于DDP组和肺积方组(P<0.01);第10、21天DDP组、肺积方组、综合组小鼠胸腺、脾脏T淋巴细胞增殖指数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中肺积方组、综合组T淋巴细胞增殖指数增高,而DDP组T淋巴细胞增殖指数降低;DDP组干预后T淋巴细胞增殖指数明显低于干预前(P<0.05);而肺积方组、综合组第21天与第10天T淋巴细胞增殖指数组内比较无明显变化(P>0.05)。第10、21天DDP组、肺积方组、综合组荷瘤小鼠胸腺CD4+CD25+Treg细胞比例均较对照组降低(P<0.05);DDP组第21天胸腺CD4+CD25+Treg细胞比例较第10天明显升高(P<0.05);综合组脾脏CD4+CD25+Treg细胞比例较低,与肺积方组、DDP组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肺积方联合化疗具有抗Lewis肺癌移植小鼠肿瘤生长的作用,该作用可能与其下调CD4+CD25+Treg细胞含量相关。     

加味当归补血汤对正常小鼠免疫功能的作用研究

[目的] 探究加味当归补血汤对正常小鼠免疫功能的影响。[方法] 将120只BALB/c小鼠随机分成3组,即免疫Ⅰ组、免疫Ⅱ组、免疫Ⅲ组,每个免疫组小鼠按体质量随机分为正常对照组、加味当归补血汤1.4 g·kg-1组、加味当归补血汤1.9 g·kg-1组、加味当归补血汤2.3 g·kg-1组。连续灌胃30 d后,检测免疫Ⅰ组小鼠行为学指标,脾脏和胸腺系数,脾脏T淋巴细胞增殖能力,NK细胞活性,血常规指标,血清免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)和免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)含量,外周血和脾脏中T、B淋巴细胞比例;检测免疫Ⅱ组小鼠溶血空斑数、半数溶血值;检测免疫Ⅲ组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬功能和脾脏中CD4、CD8表达量。[结果] 与正常对照组比较,加味当归补血汤3个剂量均可明显升高小鼠自主活动次数和抓力,脾脏系数和胸腺系数(P<0.05,P<0.01);增强脾淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性(P<0.01);增加溶血空斑数、半数溶血值、腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数(P<0.01);升高全血淋巴细胞(lymphocyte,LYMPH)、白细胞(white blood cell,WBC)、红细胞(red blood cell,RBC)数量,血清中IgM、IgG含量(P<0.05,P<0.01);降低外周血和脾脏CD3+T、CD8+T细胞占比,减少CD8阳性表达量(P<0.05,P<0.01);升高外周血CD19+B细胞占比,外周血和脾脏CD4+/CD8+比值,以及脾脏CD4/CD8阳性表达比值(P<0.05,P<0.01)。[结论] 加味当归补血汤能增强特异性免疫和非特异免疫,有助于增强免疫力。     

金匮肾气丸对STZ糖尿病模型大鼠免疫功能的影响

目的 观察金匮肾气丸对糖尿病大鼠免疫功能的影响.方法 2月龄雌性SD大鼠分为4组,每组10只:对照组,模型组,金匮肾气丸低、高剂量组.采用STZ诱发大鼠糖尿病模型,测定各组大鼠体质量,血糖,血清TNF-α、IL-6水平,血CD4+、CD8+T细胞计数,以及体外巨噬细胞吞噬率,胸腺、脾指数.结果 与模型组比较,金匮肾气丸组大鼠体质量,血CD4+、CD8+T细胞计数,巨噬细胞吞噬率,胸腺、脾指数明显升高(P＜0.05或P＜0.01);血糖,血清TNF-α、IL-6水平明显下降(P＜0.05或P＜0.01).结论 金匮肾气丸具有增强糖尿病大鼠免疫功能的作用.     

甲醛吸入对小鼠免疫功能影响的研究

目的:通过吸入染毒来观察甲醛对小鼠免疫功能的影响.方法:选用健康清洁级昆明种小鼠48只,随机分成4组,即阴性对照组、低剂量组(21mg/m3)、中剂量组(42mg/m3)和高剂量组(84mg/m3染毒组),每组12只,用静式吸入染毒方式染毒12w处死后,计算脾脏系数、胸腺系数;测定巨噬细胞吞噬功能、NK 细胞活性及脾淋巴细胞增殖反应.结果:甲醛吸入染毒可以引起小鼠脾脏系数、胸腺系数减小(P<0.05或P<0.01);巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性及脾淋巴细胞增殖反应均随染毒剂量的升高而下降(P<0.05或P<0.01).结论:吸入甲醛可导致小鼠免疫功能的损伤.     

姜黄素对二甲基苯并蒽诱发新西兰大白兔口腔癌的预防疗效

目的:探讨姜黄素对二甲基苯并蒽(DMBA)诱发的新西兰大白兔口腔癌的预防作用。方法:通过DMBA诱发新西兰大白兔口腔癌模型,同时用1.0、0.3 g/kg姜黄素进行干预,进行口腔肿瘤发生率、癌变率、微核细胞率、细胞增殖核抗原(PCNA)和上皮生长因子受体(EGFR)检测。结果:高剂量姜黄素组(1.0%)、低剂量姜黄素组(0.3%)平均抑制肿瘤的能力即简称肿瘤负荷抑制率分别为75.6%、61.2%;癌变率、微核细胞率和增殖细胞核抗原(PCNA)标记指数与阳性对照组比较明显降低,然而对上皮生长因子受体(EGFR)的表达无干扰。结论:姜黄素对二甲基苯并蒽(DMBA)诱发的新西兰大白兔口腔癌有良好的干预效应,同时不影响新西兰大白兔本身的成长。     

大豆异黄酮对DMBA诱导高脂饮食幼龄大鼠乳腺肿瘤的作用

目的研究大豆异黄酮(Soy isoflavones,SI)对二甲基苯蒽(7,12-dimethylbenz(α)anthrancence,DMBA)诱导的高脂饮食幼龄SD雌性大鼠乳腺癌发病率的影响。方法将46只幼龄SD雌性大鼠随机分成模型组、SI组、高脂组及SI+高脂组。用DMBA灌胃诱导致癌后每天进行乳腺触诊、记录体质量和饲料摄入量。11周后处死大鼠,比较4组大鼠间血脂含量、乳腺癌发病率及免疫组织化学的表达情况。结果 SI组与模型组相比,SI+高脂组与高脂组相比,其乳腺肿瘤PCNA、C-erbB-2阳性表达面积显著降低(P0.05)。结论补充摄入大豆异黄酮可降低DMBA诱导高脂饮食幼龄大鼠乳腺肿瘤的恶性程度。     

GTC对DMBA诱发大鼠乳腺增生性病变抑制作用的动态观察

目的 :绿茶提取物GTC对用致癌剂DMBA诱发的SD大鼠乳腺增生性病变的抑制作用。方法 :170只7周龄雌性SD大鼠 ,按体重分层后随机分为4组 ,即A(空白对照组 )、B(模型组 )、C(GTC对照组 )、D(实验组 )。于实验开始日 ,B组和D组每只大鼠接受一次性DMBA油溶液灌胃 ,剂量为7mg/100g 体重 ;同时C组和D组每只大鼠接受GTC水溶液灌胃 ,剂量为80mg/只/天 ,A组和B组大鼠自由饮用自来水至20周末实验结束。于实验第4、8、12、16、20周末分批处死各组大鼠 ,取乳腺组织常规制片 ,HE染色。结果 :各时间点上 ,饮茶组 (C组和D组 )和非饮茶组 (A组和B组 )相比 ,其增生性病变较少 ;这种差异在接受致癌剂的B组和D组之间 ,具有显著性 (P<0.05 ,而在对照A组和C组之间差异无显著性 (P>0.05) ;B组和D组之间的增生性病变 (芽体 实团 )计数的差值呈现随时间延长而增加的趋势。结论 :GTC对DMBA诱导产生的大鼠乳腺增生性病变具有一定的抑制作用且这种抑制作用呈现时间依赖性递增。     

二甲基苯并蒽诱导大鼠原位胰腺癌模型的建立

目的：探讨化学致癌剂二甲基苯并蒽（DMBA）诱导Sprague-Dawley（SD）大鼠原位胰腺癌模型建立的有效性。方法：220只SD大鼠，根据术中二甲基苯并蒽用量的不同，随机分为模型组I（6mg组，80只）和模型组Ⅱ（9mg组，80只）和对照组（60只）。模型组I、Ⅱ于胰体尾部切开胰腺被膜后，分别置入6mg、9mg的二甲基苯并蒽。对照组仅行胰腺被膜切开。模型组术后7个月内每月处死大鼠10只、对照组平均每月处死7只，观察腹腔及胰腺病变，切取胰腺标本。结果：包埋DMBA4个月后大鼠胰腺开始出现腺癌，胰腺癌模型组I和组Ⅱ相比，术后6个月癌发生率为70％（7／10），实验大鼠死亡率低，致癌率较高。结论：采用6mg剂量的二甲基苯并蒽（DM—BA）直接置入胰腺被膜下的实质内，可在短期内获得发生率较高的鼠胰腺癌模型。     

口服云芝多糖对小鼠免疫器官及血液CD4~+和CD8~+ T细胞的影响

目的探讨口服云芝多糖(CVPS)对小鼠免疫功能的影响。方法将48只小鼠随机分为T1、T2、T3组和对照组,每组12只。T1、T2、T3组分别口服不同剂量CVPS(125、250、500mg·kg-1·d-1),每日1次,连续28d;对照组给予等体积双蒸馏水。分别于7、14、21、28天取各组小鼠胸腺、脾脏测质量及采用流式细胞术测血液中CD4+、CD8+T细胞。结果 T1、T2和T3组胸腺指数高于对照组(P<0.05,P<0.05,P<0.01),T3组胸腺指数高于T1和T2组(P<0.05,P<0.01);T2组脾脏指数高于对照组(P<0.05);T2和T3组CD4+、CD8+T细胞均高于对照组(P<0.05)。T1组21d胸腺指数高于对照组及7d(P<0.05);T2组21d胸腺指数和脾脏指数高于7d(P<0.05);T2和T3组21d胸腺指数和脾脏指数高于对照组(P<0.05);T3组21d胸腺指数和脾脏指数高于14d(P<0.05)。T2和T3组21dCD4+T细胞高于对照组(P<0.05),T2组21dCD4+T细胞高于7d(P<0.05);T2和T3组21d血液CD8+T细胞高于对照组及7d(P<0.05)。结论口服CVPS可增强小鼠免疫功能,为临床用药提供参考及理论依据。     

草苁蓉多糖的抗肿瘤作用及免疫调节作用

目的：观察草苁蓉多糖对荷瘤小鼠免疫器官的调节作用及对免疫功能的影响。方法：接种肝癌细胞H₂₂的荷瘤小鼠随机分为50、100、200和400 mg•kg^-1•d^-1草苁蓉多糖组、阴性对照组及阳性对照组（环磷酰胺组），按剂量给药。10 d后处死小鼠，分别称量脾重、胸腺重，检测荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数；采用MTT法测定NK细胞活性；淋巴细胞转化实验测定T淋巴细胞转化率(LTT)；中性红比色法观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力；通过称量各小鼠实体瘤的重量，计算抑瘤率。结果：草苁蓉多糖能够显著抑制肿瘤生长，抑瘤率达38.86%;与阴性对照组比较,实验组荷瘤小鼠的脾脏指数显著提高(P<0.01)，胸腺指数则有降低趋势，T淋巴细胞的转化率、NK 细胞的活性、巨噬细胞的吞噬能力显著增强(P<0.01)，与给药剂量存在正相关关系。结论：草苁蓉能抑制肿瘤生长，对小鼠免疫功能具有调节作用。     

免疫口服液对小鼠细胞免疫功能的调节作用

目的：观察免疫口服液对环磷酰胺（CTX）免疫抑制小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法：用不同剂量免疫口服液给正常小鼠和CTX抑制小鼠灌胃，检测小鼠巨噬细胞吞噬功能和T细胞的增殖作用。结果：免疫口服液能显著增设CTX免疫抑制小鼠的巨噬细胞吞噬功能和T细胞的增殖作用。结论：免疫口服液对CTX免疫4抑制小鼠的细胞免疫功能具有一定的正调节作用。     

紫菜多糖PY4对免疫细胞增殖的影响

目的：分析紫菜多糖的性质,测定其对免疫细胞增殖的影响。方法：将纯化得到的紫菜多糖PY4,用紫外和红外光谱进行鉴定。采用体外培养方法测定了PY4对小鼠骨髓细胞,脾 脏细胞,胸腺细胞的生长以及混合淋巴细胞反应的影响。结果：在骨髓细胞,脾脏淋巴细胞和胸腺淋巴细胞的增殖试验中给药组与对照组之间有非常显著的差异,而混合淋巴细胞反应中两者没有差异。结论：多糖PY4对小鼠骨髓细胞,脾 脏淋巴细胞和胸腺淋巴细胞增殖有一定的抑制作用,而对混合淋巴细胞反应没有明显的影响。     

云南虫草菌粉免疫调节作用的实验动物研究

目的 研究人工培养云南虫草菌粉(yunnan cordyceps sinensis,YNCS)的免疫调节作用.方法 ICR小鼠随机分组,每天用不同剂量的YNCS灌胃,用环磷酰胺(CY)诱导免疫功能低下模型,通过观察免疫器官、吞噬细胞功能、淋巴细胞增殖、血清凝集素、T细胞亚群等指标变化来判断YNCS对机体的免疫调节作用.结果 YNCS对小鼠的胸腺指数和脾指数有上调作用;YNCS低剂量对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能有增强作用;低、中剂量YNCS组ConA、LPS刺激淋巴细胞增殖比模型对照组显著增高(P＜0.01);YNCS低、中剂量对小鼠L3T4+T淋巴细胞有上调作用,并使L3T4+淋巴细胞和L3Tg+/Lyt2+比值恢复接近正常水平.YNCS低、中、高剂量组对小鼠凝集素有明显提高作用(P＜0.01).结论 YNCS可以上调免疫功能抑制小鼠胸腺指数和脾指数,促进T淋巴细胞的增殖,调节小鼠T细胞亚群,增加血清凝集素水平,从而调节小鼠免疫功能.同时,高剂量的YNCS对免疫有一定的抑制作用.     

低剂量环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠CD4+CD25+Treg细胞功能的影响

目的：研究低剂量环磷酰胺（CTX）单次注射对Lewis肺癌小鼠CD4⁺CD25⁺Treg细胞功能的影响,探讨CD4⁺CD25⁺Treg 细胞与肿瘤发生、发展的关系。方法：将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠右腋皮下,建立Lewis肺癌模型,随机分成3组：CTX组、肿瘤组、单纯对照组。采用CTX单次注射,观测各组肿瘤体积动态变化;采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量变化;采用半定量RT-PCR方法检测各组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖功能;采用LDH释放法检测脾脏特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)细胞的杀伤活性。结果：与未治疗肿瘤组相比,CTX治疗可延缓荷19 d Lewis肺癌小鼠的肿瘤生长;CTX组小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞数量低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏Foxp3 mRNA表达水平明显低于肿瘤组（P< 0.05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞功能明显高于肿瘤组（P<0. 05）;CTX组小鼠脾脏T淋巴细胞杀伤活性比肿瘤组略高,但变化不显著（P>0.05）。结论：CTX单次注射可降低Lewis肺癌小鼠脾脏CD4⁺CD25⁺Treg细胞的数量及Foxp3 mRNA表达,使T淋巴细胞增殖功能及脾细胞中CTLs杀伤功能增强。     

三七皂苷单体Rg1对D-半乳糖模型鼠学习记忆和免疫功能的影响

目的 :探讨三七皂苷单体 Rg1对 D-半乳糖 ( D- gal)所致衰老模型鼠学习记忆行为和免疫功能的影响。方法 :Balb/c小鼠随机分为 4组 :衰老模型组、正常对照组、实验 组和实验 组。应用跳台和 Y-型迷路方法测定 D-半乳糖衰老模型鼠学习记忆行为 ;采用 3 H- Td R掺入法测定小鼠胸腺、脾细胞的增殖能力 ;生物活性检测法测定 IL- 2和 TNF- α水平的变化。结果 :三七皂苷单体 Rg1能明显提高衰老模型鼠对电刺激的逃避能力 ,改善 D- gal所致学习记忆能力下降。同时三七皂苷Rg1能明显增强衰老模型鼠胸腺和脾细胞增殖能力 ,对 IL- 2水平有所提高 ,血清 TNF- α的细胞毒作用较模型组降低。结论 :三七皂苷单体 Rg1能改善衰老模型鼠学习记忆能力并调节免疫功能。     

广西灵芝对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的：探讨广西灵芝水煎剂对正常小鼠和免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法：用不同剂量灵芝液给正常小鼠和环磷酰胺免疫抑制小鼠灌胃，检测小鼠免疫器官重量、巨噬细胞吞噬功能、T淋巴细胞增殖及NK细胞的活性。结果：灵芝水煎剂对正常小鼠免疫功能无明显影响，但能显著增加环磷酰胺免疫抑制小鼠的胸腺和脾脏重量及胸腺指数和脾指数，增加巨噬细胞吞噬功能，促进T淋巴细胞增殖和NK细胞活性。结论：灵芝水煎剂对正常小鼠免疫功能无明显影响，对环磷酰胺免疫抑制小鼠的免疫功能具有正调节作用。     

斑蝥合剂对H22肝癌小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的:探讨斑蝥合剂对H22肝癌小鼠的抑瘤作用及其免疫调节的机制。方法:选择移植性肝癌H22小鼠为模型,观察斑蝥合剂的抑瘤作用,检测T淋巴细胞增殖功能、NK细胞杀伤功能、T淋巴细胞表型变化及γ干扰素、白细胞介素-4含量。结果:斑蝥合剂对荷瘤小鼠肿瘤有显著的抑制作用,抑瘤率为65.76%;斑蝥合剂治疗组小鼠T淋巴细胞转化刺激指数和NK细胞杀伤百分数均高于模型对照组(P<0.01);斑蝥合剂治疗组与模型对照组相比,斑蝥合剂治疗更能改变T淋巴细胞亚群比例;斑蝥合剂治疗组小鼠T细胞分泌γ干扰素及白细胞介素-4能力均有升高(P<0.05,P<0.01)。结论:斑蝥合剂具有抑制肿瘤生长的作用,并且对荷瘤小鼠的免疫功能有一定调节作用。其作用机制包括增强小鼠体内T细胞免疫功能、NK细胞的杀伤功能及体液免疫功能。     

桑黄粗多糖对小鼠免疫功能影响的研究

目的研究桑黄粗多糖对小鼠免疫功能的影响。方法将40只健康小鼠小鼠随机分组,①蒸馏水组②桑黄粗多糖高、中、低剂量组。观察计算腹腔巨噬细胞吞噬指数及吞噬率、外周血淋巴细胞转化率、血清溶血素水平、以及血清中细胞因子TNF-а、IL-4含量。结果桑黄粗多糖高、中、低剂量组能明显提高荷瘤小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬指数与吞噬率、外周血淋巴细胞转化率及血清溶血素水平,并能提高血清中细胞因子TNF-a含量,对血清中细胞因子IL-4含量的影响作用不显著。结论桑黄粗多糖具有增强小鼠免疫功能的作用。     

长期心理应激对大鼠血浆皮质酮、儿茶酚胺水平及免疫功能的影响

①目的研究长期心理应激对大鼠血浆皮质酮、儿茶酚胺水平以及免疫功能的影响并探讨其机制。②方法将40只成年大鼠随机分为3组：心理应激组、普通应激组和正常对照组,对实验组动物施以8周的长期应激刺激,检测各组大鼠血浆皮质酮、肾上腺素和去甲肾上腺素水平以及大鼠胸腺指数、脾脏指数和体外脾淋巴细胞转化率。③结果心理应激组大鼠血浆皮质酮水平显著低于普通应激组与正常对照组,肾上腺素、去甲肾上腺素水平显著高于普通应激组和正常对照组,而胸腺指数、脾脏指数及脾淋巴细胞。H—TdR掺人量均显著低于普通应激组和正常对照组（F=4．13～8．66,q=3．02～5．42,P〈0．01、0．05）。④结论长期心理应激可显著降低大鼠的免疫功能。