不同前体来源的人淋巴细胞经IL－2及抗肿瘤iRNA激活后抗肿瘤活性的体外研究

本文报道用ＩＬ－２及抗肿瘤ｉＲＮＡ作用于人胎儿肝、脾、胸腺及成人外周血淋巴细胞，用ＬＤＨ释放法测定其对Ｋ５６２及ＡＧＺＹ－８３ａ的杀伤作用，结果胎脾、肝效应细胞活性与成人外周血无显著差异，胸腺效应细胞的活性低于上述细胞。ＩＬ－２与ｉＲＮＡ联合诱导的效应细胞杀伤活性显著高于二者单独应用的活性。     

人胎脾抗癌效应细胞及相关细胞因子的胚胎发育动力学研究

对不同胎龄胎脾抗癌效应细胞及相关细胞因子的胚胎发育动力学进行了系统观测。结果显示：２０周龄前基本无ＮＫ活性和Ｍ杀伤功能，但可随胎龄增长而逐渐加强，至出生前后已接近成人水平，ＬＡＫ活性在１６周龄即与成人基本相同。ＩＬ－２，ｒＦＮ－α和ＩＬ－６能分别促进ＮＫ和ＬＡＫ活性。胎脾Ｍ２０周龄即合成高水平ＩＬ－６，出生前已显著高于成人，３２周龄时分泌ＩＬ－１的能力达成人水平，ＴＮＦ活性达高峰。ＦＳＭＣ合成ＩＬ－２的能力在３６周龄才达成人水平，合成的ＩＬ－６至出生前仍低于成人。ＦＳＭＣ的ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达显著低于成人。因此以胎脾细胞作为抗癌效应细胞来源是安全、有效、可行的。     

IL—2,IL—4和IL—7体外诱导人外周血淋巴因子激活的杀伤细胞效应…

比较了淋巴因子ＩＬ－２、ＩＬ－４和ＩＬ－７ 在体外诱导健康人外周血淋巴因子激活的杀伤（ＬＡＫ）细胞活性的效应。结果表明，ＩＬ－７可单独，亦可与ＩＬ－２、ＩＬ－４协同诱导ＬＡＫ细胞，而且ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞的效应不被抗ＩＬ－２、抗ＩＬ－４所抑制。ＩＬ－７单独诱导的ＬＡＫ细胞活性高峰迟于ＩＬ－２或ＩＬ－４所诱导的活性高峰，且与增殖反应曲线一致。抗ＣＤ８抗体明显抑制ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞的效应，而ＩＬ     

IL-2、IL-4和IL-7体外诱导人外周血淋巴因子激活的杀伤细胞效应的比较

比较了淋巴因子ＩＬ－２、ＩＬ－４和ＩＬ－７在体外诱导健康人外周血淋巴因子激活的杀伤 （ＬＡＫ）细胞活性的效应。结果表明，ＩＬ－７可单独，亦可与ＩＬ－２、ＩＬ－４协同诱导ＬＡＫ细胞，而且ＩＬ－７ 诱导ＬＡＫ细胞的效应不被抗ＩＬ－２、抗ＩＬ－４所抑制。ＩＬ－７单独诱导的ＬＡＫ细胞活性高峰迟于ＩＬ－ ２或ＩＬ－４所诱导的活性高峰，且与增殖反应曲线一致。抗ＣＤ８抗体明显抑制ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞 的效应，而ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞的效应不能被抗ＮＫＨ－１所抑制。提示：ＩＬ－７ 激活ＬＡＫ细胞的效应 机制不依赖ＩＬ－２和ＩＬ－４，并很可能成为肿瘤过继治疗中的重要淋巴因子。     

IL—2—绿脓杆菌外毒素融合蛋白增强杀伤细胞活性

实验证实了白细胞介素２－绿脓杆菌外毒素融合蛋白ＩＬ２－ＰＥ４０ＲＥＤＬＫ、ＩＬ２－ＰＥ４０ＫＤＥＬ、ＩＬ２－ＰＥ６６4GluＲＥＤＬＫ、ＩＬ２－ＰＥ６６4GluＫＤＥＬ对含高亲和力ＩＬ－２受体靶细胞的杀伤效应是借助于ＩＬ－２与其受体的特异性结合和ＰＥ的杀伤活性介导的，而且同一靶细胞对这些融合蛋白的敏感性有较大的差异，对人外周血ＰＨＡ体外活化的淋巴母细胞的杀伤活性，ＩＬ２－ｐＥ６６4GluＫＤＥＬ要比ＩＬ２－ＰＥ４０ＲＥＤＬＫ强约４０倍，还发现若将ＩＬ２－ＰＥ融合蛋白羧基末端的ＲＥＤＬＫ氨基酸突变为ＫＤＥＬ可增强其杀伤细胞的活性，对ＣｏｎＡ活化的小鼠脾母细胞的杀伤活性，ＩＬ２－ＰＥ４０ＫＤＥＬ要比ＩＬ２－ｐＥ４０ＲＥＤＬＫ强８倍。     

输精管结扎6月与25月家兔T淋巴细胞与巨噬细胞功能的观察

本文应用输精管结扎６月，２５月家兔的动物模型，观察了海马培养上清胸腺细胞调节因子活性，胸腺细胞自身增殖反应性与脾脏的Ｔ，Ｂ细胞功能，及外周血巨噬细胞功能的变化。结果表明，（１）海马培养上的清胸腺细胞调节因子活性，胸腺细胞自身增殖反应，输精管结扎６月组和输精管结扎２５月组与相应的对照组比较差异均无显著性；（２）ＣｏｎＡ诱导的脾细胞增殖反应性和ＩＬ－２，ＩＬ－６活性，输精管结扎６月组均呈低值，且ＩＬ－     

白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内诱导杀伤细胞活性及细胞因子产生的实验研究

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后体内免疫效应细胞（包括ＣＴＬ、ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞）抗肿瘤活性及其分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－ｒ、ＴＮＦ及ＧＭ－ＣＳＦ）水平的变化，荷瘤后第１５天小鼠脾细胞ＮＫ活性及经诱导后的ＬＡＫ活性有所降低，而经诱导后的ＣＴＬ杀伤活性显著升高，荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤活性及其分泌的ＩＬ－１水平也明显升高；在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰，实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制是因为ＩＬ－４基因的导入及ＩＬ－４的分泌使体内ＣＴＬ及巨噬细胞杀伤活性提高，因而使机体抗肿瘤免疫功能得以增强。     

转移因子和免疫核糖核酸对LAK细胞抗肿瘤活性的影响

本研究用重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）联合转移因子（ＴＦ）或抗肿瘤免疫核糖核酸（ｉＲＮＡ）作用于外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），测定其对Ｋ５６２，Ｒａｊｉ及Ｈ７４０４细胞的杀伤活性。结果发现，高浓度ＴＦ（０．２５ｕ／ｍｌ）可抑制ＬＡＫ活性，ＴＦ进一步稀释（０．１２５ｕ／ｍｌ）可使其抑制作用消失。ＴＦ和抗肿瘤ｉＲＮＡ不能进一步提高最适剂量ｒＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ活性，但能显著增强亚适剂量ｒＩＬ－２（２００ｕ／ｍｌ）诱导的ＬＡＫ活性，诱导ＬＡＫ活性增高的ＴＦ最适剂量为０．０３１ｕ／ｍｌ。ＴＦ或抗肿瘤ｉＲＮＡ单独不能诱导出ＬＡＫ活性，而当两者联合应用可诱导ＰＢＭＣ产生ＬＡＫ活性。本文为ＴＦ及抗肿瘤ｉＲＮＡ协同ＬＡＫ细胞疗法在临床应用提供实验基础。     

iRNA及S—TF对肿瘤病人细胞因子的调节作用

本文观察ｉＲＮＡ，Ｓ－ＴＦ及化疗对３３例肿瘤病人ＩＬ－１，ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ的影响。结果发现，①肿瘤病人的ＩＬ－１，ＩＬ－２及ＩＦＮ－②正常人各细胞因子间呈正相关，肿瘤病人仅ＩＬ－１与ＩＬ－２相关；③免疫治疗后各细胞因子活性显著增强，ＷＢＣ明显增加，且ＩＬ－１活性，ＩＬ－２活性及ＷＢＣ增加明显高于化疗者。研究表明，宿主细胞因子低下或失调，可能与肿瘤的发生发展有关；应用抗瘤ｉＲＮＡ及Ｓ－ＴＦ，可恢     

脂质体介导的IL—2基因疗法的建立及其免疫增强作用

用反相蒸发技术制备出包裹有ＩＬ－２ＤＮＡ的脂质体，将其直接注射至小鼠腹腔中，经１０ｄ后发现，腹腔细胞体外培养的上清中含有较高水平的ＩＬ－２，腹腔巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的活性明显增强，脾细胞体外增殖、脾细胞ＮＫ活性及体外诱导的ＬＡＫ活性均明显高于对照组；同时经脂质体转染ＩＬ－２基因的脾脏细胞具有较高的内源性ＬＡＫ活性。这表明，脂质体能将目的基因经腹腔途径直接转染体内细胞，表达出基因产物－ＩＬ－２。这种     

IL－12对肿瘤病人PBMC增殖和杀瘤活性的实验研究

主要观察了ＩＬ－１２与ＩＬ－２联合对健康人和肿瘤病人ＰＢＭＣ增殖和体外杀瘤活性的影响。实验结果表明，单独应用ＩＬ－１０２对肿瘤病人ＰＨＡ活化ＰＢＭＣ增殖活性很小，如与低剂量ＩＬ－２合用，则可明显促进其增殖效应，表明ＩＬ－２可增强ＩＬ－１２的作用。与单用ＩＬ－１２相比，当ＩＬ－１２与低浓度ＩＬ－２合用时，健康人和肿瘤病人ＰＢＭＣ对Ｋ５６２细胞和Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性均明显增强，且对Ｋ５６２细胞株杀伤活性明显强于对Ｒａｊｉ细胞株的杀伤活性。上述结果表明，ＩＬ－１２与ＩＬ－２合用对健康人和肿瘤病人ＰＢＭＣ增殖及杀瘤活性影响的格局基本一致。本实验为进一步研究ＩＬ－１２协同其它因子增强肿瘤病人ＬＭ和ＴＩＬ等免疫细胞抗肿瘤效应并进而使ＩＬ－１２过渡到临床肿瘤病人治疗提供了重要的实验依据。     

IL—12对肿瘤病人PBMC增殖和杀瘤活性的实验研究

主要观察了ＩＬ－１２与ＩＬ－２联合对健康人和肿瘤病人ＰＢＭＣ增殖和体外杀瘤活性的影响，实验结果表明，单独应用ＩＬ－１２对肿瘤病人ＰＨＡ活化ＰＢＭＣ增殖活性很小，如与低剂量ＩＬ－２合用，则可明显促进其增殖效应，表明ＩＬ－２可增强ＩＬ－２的作用，与单用ＩＬ－１２相比，当ＩＬ－１２与低浓度ＩＬ－２合用时，健康和肿瘤病人ＰＢＭＣ对Ｋ５６２细胞和Ｒａｊｉ细胞杀伤活性活性明显增强，且对Ｋ５６２细胞株杀伤活性明     

iRNA及S－TF对肿瘤病人细胞因子的调节作用

本文观察ｉＲＮＡ、Ｓ－ＴＦ及化疗对３３例肿瘤病人ＩＬ－１、ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ的影响。结果发现，①肿瘤病人的ＩＬ－１、ＩＬ－２及ＩＦＮ－γ活性均显著低于正常人；②正常人各细胞因子间里正相关，肿瘤病人仅ＩＬ－１与ＩＬ－２相关；③免疫治疗后各细胞因子活性显著增强，ＷＢＣ明显增加，且ＩＬ－１活性、ＩＬ－２活性及ＷＢＣ增加明显高于化疗者。研究表明，宿主细胞因子低下或失调，可能与肿瘤的发生发展有关；应用抗瘤ｉＲＮＡ及Ｓ－ＴＦ，可恢复肿瘤病人的细胞因子水平，这对预防肿瘤的发生发展及提高化疗抗瘤效果，可能具有一定作用。     

猪苓多糖与IL—2协同诱导PBMC杀伤肿瘤细胞活性的实验研究

研究了猪苓多糖与ＩＬ－２协同诱导人外周血单个细胞成为具有较高杀伤肿瘤活性的细胞，其培养体系总杀伤单位明显高于ＬＡＫ细胞，其诱导细胞的杀伤活性可能与其分泌ＩＦＮ和ＴＮＦ有关。此研究为ＰＵＰＳ与ＩＬ－２协同诱导细胞的进一步研究和临床应用打下理论基础。     

MTT比色法检测IL－2和杀伤细胞活性的研究

本文采用ＭＴＴ比色法测定了ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞培养上清ＩＬ－２活性及ＬＡＫ细胞介导对体外培养的白血病细胞株的杀伤活性。结果表明ＬＡＫ细胞和ＴＩＬ细胞培养上清有较高的ＩＬ－２活性，可用于支持培养ＩＬ－２依赖株的生长；ＬＡＫ细胞对体外培养的白血病细胞株有明显的杀伤作用。其杀伤效应随效靶比例增加而增高；同时亦证明：活的白血病细胞数与ＭＴＴ甲赞形成产物呈直线相关性，提示通过ＭＴＴ法测定ＯＤ值能较好地反映活细胞数目及细胞毒效应。     

MTT比色法检测IL—2和杀伤细胞活性的研究

本文采用ＭＴＴ比色法测定了ＬＡＫ和ＴＩＬ细胞培养上清ＩＬ－２活性及ＬＡＫ细胞介导对体外培养的白血病细胞株的杀伤活性。结果表明ＬＡＫ细胞和ＴＩＬ细胞培养上清有较高的ＩＬ－２活性，可用于支持培养ＩＬ－２依赖株的生长；ＬＡＫ细胞对体外培养的白血病细胞株有明显的杀伤作用。其杀伤效应随效靶比例增加而增高；同时亦证明：活的白血病细胞数与ＭＴＴ甲赞形成产物呈直线相关性，提示通过ＭＴＴ法测定ＯＤ值能较好地反映活细     

人白细胞介素4诱导杀伤细胞的研究

人重组白细胞介素４（ｒｈＩＬ－４）在ＰＨＡ协同下，从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）诱导出明显的ＬＡＫ活性，其对Ｋ５６２、Ｒａｊｉ细胞的杀伤力低于ＩＬ－２诱导者，对ＴＢＬ－Ｅ，ＰＨＡ活化的淋巴母细胞（ＰＨＡ－ｂｌａｓｔｓ）的杀伤力和ＩＬ－２诱导者相似。在ＰＨＡ介导的４小时５１Ｃｒ杀伤试验中，加入ＰＨＡ后，ＩＬ－４－ＬＡＫ对ＰＨＡ－ｂｌａｓｔｓ的杀伤力提高２．３倍，而ＩＬ－２－ＬＡＫ对ＰＨＡ－ｂｌａｓｔｓ的杀伤力无变化，提示ＩＬ－４主要诱导ＣＴＬ样活性，而ＩＬ－２主要诱导ＮＫ样活性，ＩＬ－４诱导效应ＣＴＬ的能力强于ＩＬ－２。我们的实验同时证实，在淋巴细胞活化的早期，ＩＬ－４抑制ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ活性，淋巴细胞活化后，ＩＬ－４与ＩＬ－２有协同作用，增强ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ活性。     

脂质体介导的IL－2基因疗法的建立及其免疫增强作用

用反相蒸发技术制备出包裹有ＩＬ－２ＤＮＡ的脂质体，将其直接注射至小鼠腹腔中，经１０ｄ后发现，腹腔细胞体外培养的上清中含有较高水平的ＩＬ－２，腹腔巨噬细胞杀伤肿瘤细胞的活性明显增强，脾细胞体外增殖、脾细胞ＮＫ活性及体外诱导的ＬＡＫ活性均明显高于对照组；同时经脂质体转染ＩＬ－２基因的脾脏细胞具有较高的内源性ＬＡＫ活性。这表明，脂质体能将目的基因经腹腔途径直接转染体内细胞，表达出基因产物──ＩＬ－２。这种靶细胞表达的基因产物可作用于体内免疫系统，调节机体的免疫功能。本文结果为细胞因子的基因治疗的研究提供了一种简便有效的方法。     

L7212白血病小鼠IL-2活性、IL-2 mRNA表达及复方中药清毒饮对其影响的研究

目的：探讨Ｌ７２１２白血病小鼠及其受体鼠──近交系６１５小鼠ＩＬ－２活性和ＩＬ－２ｍＲＮＡ的表达及复方中药清毒饮对其影响。方法：采用ＩＬ－２依赖株ＣＴＬＬ－２及细胞原位杂交的方法检测了由ＣｏｎＡ诱导的脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性及脾细胞ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达。结果：发现由ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２的白血病小鼠脾细胞培养上清中ＩＬ－２活性明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０５;其脾细胞中ＩＬ－２ｍＲＮＡ表达也明显低于６１５小鼠,Ｐ＜０．０１。清毒饮显著提高ＣｏｎＡ诱导的Ｌ７２１２白血病小鼠脾细胞培养上清中的ＩＬ－２活性,Ｐ＜０．００１,并能显著提高其ｍＲＮＡ表达水平,Ｐ＜０．００１。结论：清毒饮可以作为生物反应调节剂用于白血病的临床治疗。     

白血病细胞相关抑制活性对IL—2分泌细胞和IL—2受体表达的…

本文用免疫酶标法测定ＩＬ－２分泌细胞和细胞膜ＩＬ－２受体。其结果表明急性非淋白血病细胞条件培养液（即含白血病细胞相关抑制活性）对ＰＨＡ诱导的正常人外周血ＩＬ－２分泌细胞和细胞膜ＩＬ－２受体表达均有明显抑制作用，但对ＰＨＡ诱导的正常人外周血单个核细胞培养上清的ＩＬ－２活性无明显影响。