核因子E2相关因子2过表达对间充质干细胞抗缺氧和抗凋亡能力的影响

目的研究核因子E2相关因子2(Nrf2)对间充质干细胞(MSCs)的抗缺氧及抗凋亡能力的影响。方法将过表达Nrf2的重组质粒及辅助质粒转染人胚肾细胞(293FT),获得过表达Nrf2的高滴度慢病毒。MSCs分别转染过表达Nrf2慢病毒以及空载体慢病毒,构建稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs(Nrf2过表达组)以及绿色荧光蛋白(GFP)-MSCs(对照组)。采用荧光显微镜观察两组细胞的绿色荧光表达情况。采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测两组细胞中Nrf2蛋白的表达水平。采用光学显微镜观察两组细胞的抗缺氧能力,采用流式细胞术检测两组细胞的抗凋亡能力。结果成功构建了稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs,Western Blot法检测结果显示Nrf2过表达组细胞的Nrf2蛋白表达水平明显高于对照组(P0.01)。缺氧处理15 h后,Nrf2过表达组的细胞活力明显高于对照组。流式细胞术检测表明Nrf2过表达组细胞的凋亡率为(30.9±1.4)%,明显低于对照组细胞的(61.3±1.3)%(P0.05)。结论稳定过表达Nrf2的Nrf2-MSCs在低氧环境中具有一定的抗缺氧、抗凋亡能力。     

巨噬细胞移动抑制因子过表达对成骨细胞骨形态蛋白-2和血管内皮生长因子表达的影响

目的 观察巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在成骨细胞中的表达及其对成骨细胞骨形态蛋白-2(BMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 提取5例人髂骨成骨细胞,PcDNA3.0构建MIF过表达系统导入成骨细胞中,检测MIF、BMP-2和VEGF的表达.结果 MIF的稳定转染使成骨细胞的MIF过表达(P＜0.05).MIF基因mRNA和蛋白表达在转染组的表达量显著高于对照组中的表达量(P＜0.05);VEGF和BMP-2的mRNA和蛋白的表达量在转染组也明显增高(P＜0.05).结论 MIF过表达在成骨细胞中上调VEGF和BMP-2的表达.     

TAMs/MCF-7细胞共培养体系VEGF过表达对裸鼠移植瘤Bcl-2表达的影响

目的 :探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)/MCF-7细胞共培养体系中VEGF过表达对裸鼠移植瘤Bcl-2表达的影响。方法:应用PMA及IL-4体外诱导活化TAMs细胞;Transwell非接触式共培养TAMs和MCF-7细胞;MCF-7细胞分为对照组、VEGF组和共培养细胞上清组,分别建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,计算促瘤率;Western blot法检测移植瘤中Bcl-2表达情况。结果:VEGF组和共培养细胞上清组平均瘤重较对照组均明显增加(P0.01),促瘤率分别为61.57%和66.61%。Bcl-2蛋白在VEGF组和共培养细胞上清组移植瘤组织中均呈高表达,且明显高于对照组(P0.01)。结论:乳腺癌细胞可过分泌VEGF等趋化因子,招募并活化TAMs,通过VEGF/Bcl-2旁分泌环路作用,抑制肿瘤细胞的凋亡,促进肿瘤进展。     

过表达核转录因子Kr(u)ppel样因子4下调胃癌AGS细胞血管内皮生长因子的表达

目的 观察过表达核转录因子Kr(u)ppel样因子4(KLF4)是否下调胃癌AGS细胞血管内皮生长因子(VEGF)的表达.方法 体外培养人胃癌AGS细胞,分为4组:转染空质粒24 h对照组、转染空质粒48 h对照组、转染KLF4表达质粒24 h组、转染KLF4表达质粒48 h组.构建KLF4表达质粒,脂质体LipofectamineTM2000分别转染空质粒、KLF4表达质粒到AGS细胞,24、48 h后提取总RNA和蛋白,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western blot法分别检测KLF4和VEGF mRNA和蛋白水平的表达.结果 AGS细胞在24 h转染率为65%-75%,48 h转染率为40%～45%.实验组与对照组转染24、48 h后,KLF4 mRNA的表达量分别为:563.584±250.744比4.997±5.729(P＜0.05);351.852±212.439比2.4420±1.3770(P＜0.05).VEGF mRNA表达量分别为:0.008 929±0.003 810比0.002 294±0.000720(P＜0.05);0.018 375±0.008 263比0.002 193±0.001 698(P＜0.05);胃癌AGS细胞KLF4蛋白表达量显著性增加,相对应地VEGF蛋白表达水平显著性降低(P＜0.05).结论 体外胃癌AGS细胞过表达KLF4导致VEGF mRNA和蛋白表达下调,KLF4可能参与抑制调节胃癌AGS细胞VEGF的表达.     

血管生成因子及其受体过表达与瘢痕疙瘩侵袭性生长

目的　探讨瘢痕疙瘩组织中血管生成因子及其受体表达异常与侵袭性生长的关系。方法　将 17例患者的瘢痕疙瘩 (Ke)标本分成老化部组 (Ke A ,n =9)、增生部组 (Ke P ,n =13)、浸润部组 (Ke I,n =9)、Ke周围正常皮肤组 (Ke N ,n =10 )和非Ke患者正常皮肤组 (NS ,n =10 ) ,采用组织学、免疫组化染色和计算机图像分析方法 ,检测碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)及其受体 Flg ,血管内皮生长因子 (VEGF)及VEGF KDR复合物 (11B5 ) ,血小板源性生长因子 (PDGF A)和受体 PDGFR α以及α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)表达水平。结果　组织中的成纤维细胞 (Fb)、单核 巨噬细胞 ,血管内皮细胞和周细胞、表皮细胞和附属器上皮细胞对bFGF、Flg、VEGF、11B5、PDGF A和PDGFR α均有表达。 5组标本强弱依次为 :Ke I >Ke N≌Ke P >Ke A≌NS(P <0 0 5～ 0 0 1) ,Flg >bFGF≌PDGFR α >PDGF A >≌ 11B5 >VEGF(P <0 0 1) ,仅在Ke I组α SMA阳性的肌成纤维细胞强表达11B5和VEGF。组织学微血管呈现内膜过度增生和血管闭塞 ,伴有浅层血管过度扩张和出血征象。结论 :　瘢痕疙瘩侵袭生长可能与血管生成因子及其受体过表达有关 ,肌成纤维细胞异常表达 11B5可能是其具有肿瘤生长特性的重要因素 ,阻断其生物学作用可能对开展临床治疗     

腰椎间盘中血管内皮生长因子的表达及其意义

目的 :观察并探讨腰椎间盘中内源性血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的表达分布规律及其意义。方法 :采用免疫组织化学技术检测 1 6例胎儿期、8例生长期、1 2例成熟退变期和 42例突出椎间盘中VEGF的表达。结果 :胎儿椎间盘脊索细胞和纤维环外层血管内皮细胞出现阳性免疫染色 ,阳性率为 87 5 % ;生长期和成人期椎间盘未见阳性表达 ;退变突出组总阳性率为 83 3 %。VEGF表达主要出现于破裂型和游离型椎间盘突出 (P <0 0 1 ) ,其细胞来源主要是突出椎间盘组织中毛细血管内皮细胞、髓核内的类软骨细胞及单核巨噬细胞。年龄与VEGF表达阳性率关系不大 (P >0 0 5)。病程超过 1年者VEGF阳性率明显低于 1年以内者 (P <0 0 5)。结论 :胎儿期和破裂型 (包括游离型 )突出椎间盘组织可产生内源性VEGF ,突出椎间盘中VEGF的阳性表达与病程、突出类型密切相关     

黑色素瘤缺乏因子2通过磷酯酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路调控胰腺癌细胞增殖、凋亡的作用机制

目的探讨黑色素瘤缺乏因子2(AIM2)对胰腺癌恶性细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法通过慢病毒转染技术构建AIM2稳定过表达的胰腺癌细胞株BxPC-3和PANC-1, 并分别通过定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)验证AIM2的mRNA及蛋白水平。通过BrdU增殖实验、划痕实验、Transwell侵袭实验、细胞凋亡以及细胞周期实验检测过表达AIM2对胰腺癌细胞株功能的影响。通过转录组测序探究AIM2在胰腺癌中的作用机制并进行验证, 使用基因表达差异分析评估多组样本之间的差异, 组间差异采用t检验分析。结果慢病毒转染可成功构建AIM2稳定过表达的胰腺癌细胞株。BrdU增殖实验结果表明, BxPC-3和PANC-1细胞LV-AIM2-OE组的增殖能力显著低于LV-NC组(吸光度值:0.502±0.006比0.543±0.005、0.956±0.032比1.235±0.091, t=5.568、2.903, P<0.05);划痕及Transwell实验结果表明, 过表达AIM2后BxPC-3、PANC-1细胞的迁移[(51.960±4...     

组织因子表达与直肠癌肝转移的关系及其调控

目的探讨组织因子(TF)在原发直肠癌中的表达意义,初步分析血管内皮生长因子(VEGF)对人直肠癌细胞(HT-29)TF表达的调控作用。方法(1)应用免疫组织化学染色法研究40例原发直肠癌组织、6例直肠良性腺瘤组织TF表达特点,分析其与转移和预后的关系;(2)以VEGF(25ng/ml)孵育HT-29细胞,分别应用免疫印记法、细胞免疫组织化学染色法和促凝血活性分析法检测不同时间点HT-29细胞TF的表达水平及活性。结果(1)40例原发直肠癌中20例(50%)TF表达阳性,正常黏膜和直肠良性腺瘤无TF表达,多因素回归分析表明,TF是影响原发直肠癌预后的因素之一(P=0.024);(2)直肠癌同时性和异时性肝转移组TF的表达均与肝转移显著相关(P=0.002和0.001);(3)Logistic回归分析表明,TF为直肠癌肝转移的影响因素(P=0.003);(4)静止状态下HT-29细胞存在TF基础表达,VEGF(25ng/ml)可诱导HT-29细胞TF表达增强,6h达高峰,刺激效应可维持24～32h。结论(1)TF可能参与原发直肠癌肝转移的生物学过程,其阳性表达可能作为高危患者术后肝转移的预测指标应用于临床;(2)TF是影响原发直肠癌预后的因素之一;(3)VEGF可能参与直肠癌细胞组织因子表达的上调过程。     

合并前列腺炎的前列腺增生组织中COX-2、VEGF的表达

目的 研究环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长冈子(VEGF)在合并前列腺炎的前列腺增乍组织中的表达及分析它们的相互关系,探讨前列腺炎对前列腺增生影响的可能机制.方法 收集60例经尿道前列腺电切术(TURP)的前列腺增生患者的前列腺标本,常规HE染色后.光镜下观察其合并前列腺炎情况,根据是否合并前列腺炎,将标本分为单纯前列腺增乍组(A组)和合片前列腺炎的前列腺增生组(B组),采用免疫组织化学和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测环氧化酶一2(COX一2)和血管内皮生长因子(VEGF)在前列腺组织中的表达情况.结果 (1)免疫组织化学结果:COX-2、VEGF在A组和B组组织中都有表达,且在B组组织中表达均显高于A组组织中的表达(P<0.05);COX-2和VEGF在B组组织中表达有正相关性(R=0.92,P<0.05)(2)COX-2 mBNA在A组中的相对比值:0.141±0.019,在B组中相对比值:0.161±0.013,VEGF mBNA在A组中的相对比值:0.254±0.015,在B组中的相对比值:0.341±0.012.COX-2 mRNA、VEGF mBNA在B组组织中的表达均明显高于A组组织中的表达(P<0.05).结论 炎症因子COX-2和增生因子VEGF在合并前列腺炎的前列腺增生组织的表达明显上调且两者表达水平有正相关性,COX-2可能通过上调VEGF的表达参与前列腺增生的发展进程.     

人参皂甙Rb1在核因子NF-E2相关因子2/血红素氧合酶-1通路减轻肠缺血再灌注致急性肺损伤中的分子机制

目的 探讨人参皂甙Rb1对肠缺血/再灌注致急性肺损伤的保护效应及核因子NF-E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)通路参与该效应的分子机制.方法 成年雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:假手术组(S组);肠缺血/再灌注组(I/R组);再灌注+Rb1组(I/R +Rb1组);全反式维甲酸(ATRA)+再灌注组(ATRA+ I/R组);ATRA+再灌注+Rb1组(ATRA+ I/R+Rb1组).采用肠缺血/再灌注模型,Western blot检测肺组织Nrf2、HO-1表达变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肺组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-10水平;检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;检测肺湿/干比及肺组织病理损伤评分.结果 与S组比较,其他4组Nrf2、HO-1蛋白表达,TNF-α、IL-6、MDA含量,肺组织湿/干重比及肺组织病理评分增高(P＜0.05);与1/R组比较,1/R+ Rb1组Nrf2,HO-1蛋白表达,TNF-α,IL-6,MDA含量,肺组织湿/干重比及肺组织病理评分降低(P＜0.05);与I/R+ Rb1组比较,ATRA+ I/R组,ATRA+ I/R+ Rb1组Nrf2、HO-1蛋白表达,NF-α、IL-6、MDA含量,肺组织湿/干重比及肺组织病理评分增高(P＜0.05).SOD活性、IL-10水平与上述变化相反.结论 肠缺血/再灌注可引起急性肺损伤,人参皂甙Rb1后处理能通过激活Nrf2/HO-1通路减轻肠缺血/再灌注所致肺损伤.     

微小RNA-200c对人胰腺癌干细胞上皮-间充质转化的作用

目的观察微小RNA-200c(miR-200c)在人胰腺癌干细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用。方法应用流式细胞术(FACS)在人胰腺癌细胞株PANC-1中分选出以CD24⁺CD44⁺ESA+作为标志物的胰腺癌干细胞。将miR-200c前体片段和阴性对照片段分别转染到胰腺癌干细胞中。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)和miR-200c的表达。Transwell试验检测细胞的侵袭能力。采用t检验。结果人胰腺癌细胞株PANC-1中分选出CD24⁺CD44⁺ESA+细胞(0.8%)。miR-200c在胰腺癌干细胞中的相对表达值(0.15±0.01)显著低于PANC-1细胞(1.00±0.09),差异有统计学意义(t=3.306,P<0.05)。胰腺癌干细胞平均穿膜细胞数[(321.00±7.62)个]明显高于PANC-1细胞[(70.00±16.47)个],差异有统计学意义(t=2.152,P<0.05)。转染miR-200c前体片段24 h后的胰腺癌干细胞中miR-200c的相对表达值(3.70±0.42)明显高于转染阴性对照片段的胰腺癌干细胞中miRNA-200c的相对表达值(0.22±0.21),差异有统计学意义(t=2.073,P<0.05)。E-cadherin、vimentin、ZEB1 mRNA在转染miRNA-200c前体片段的胰腺癌干细胞中的表达分别为(3.12±0.02)×10^-4、0.36±0.15、(0.38±0.07)×10^-4,在转染阴性对照片段的胰腺癌干细胞中的表达分别为(1.31±0.05)×10^-4、1.16±0.08、(1.13±0.03)×10^-4,两组比较差异有统计学意义(t=1.941、2.165、2.308,P<0.05)。转染miR-200c前体片段后的胰腺癌干细胞的平均穿膜细胞数[(80.00±5.35)个]明显低于转染阴性对照片段的干细胞[(310.00±19.41)个],两组比较差异有统计学意义(t=2.613,P<0.05)。结论miR-200c过表达可以抑制胰腺癌干细胞的上皮-间充质转化,逆转其侵袭能力。     

成纤维细胞生长因子5对胰腺癌细胞生长和肝转移能力的影响

目的:观察成纤维细胞生长因子5 (FGF5)对人胰腺癌细胞生长和肝转移能力的影响。方法:利用高表达FGF5的人胰腺癌PANC-1细胞系(北京大学第一医院外科大肠癌实验室提供),通过短发卡RNA(shRNA)稳定转染技术,构建FGF5低表达细胞系PANC-1-FGF5 -,并以未转染质粒和转染对照粒的PANC...     

吞噬和细胞运动蛋白2对胰腺癌细胞趋化性和转移能力的影响

目的:观察吞噬和细胞运动蛋白2(ELMO2)对胰腺癌细胞株人源胰腺癌细胞系-1(PANC-1)的趋化运动能力、细胞黏附能力和侵袭能力的影响,探讨其作用机制。方法:2018年9月至2019年7月应用小干扰RNA技术对PANC-1中ELMO2蛋白进行敲减。采用配对设计方法,分为ELMO2蛋白敲减组、阴性敲减链对照组和空白对...     

血管生成相关因子在大鼠布加综合征肝纤维化模型中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血管生成素(Angpt)-1及内皮素(ET)-1在大鼠布加综合征(BCS)肝纤维化模型中的表达及意义。方法结扎雄性SD大鼠肝后段下腔静脉建立BCS动物模型,按数字表法分为对照组(20只)、实验组(80只)和假手术组(80只),实验组及假手术组又各分4个亚组(实验1、3、6、12周,各20只)。各组行免疫组织化学、苏木精-伊红(HE)及马松(Masson)染色,以实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测ET-1、VEGF、iNOS及Angpt-1的表达量。各因子水平在各组间差异采用方差分析,亚组间两两比较采用LSD检验,以皮尔逊(Pearson)及斯皮尔曼(Spearman)法做相关性分析。结果实验组1、3、6、12周VEGF(1.41±0.18、6.54±0.78、4.19±0.41、2.16±0.25)、iNOS(2.06±0.21、8.88±0.95、4.85±0.51、2.79±0.28)及Angpt-1(9.57±0.91、6.20±1.39、4.53±0.49、2.55±0.33)的mRNA水平均高于对照组(VEGF:0.97±0.08;iNOS:1.01±0.11;Angpt-1:1.01±0.10)及假手术组(VEGF:F=366.124、412.266;iNOS:F=443.326、1170.864;Angpt-1:F=213.868、503.210,P<0.05),差异有统计学意义。实验组内的VEGF(1.41±0.18、6.54±0.78、4.19±0.41、2.16±0.25)、iNOS(2.06±0.21、8.88±0.95、4.85±0.51、2.79±0.28)及Angpt-1(9.57±0.91、6.20±1.39、4.53±0.49、2.55±0.33)的mRNA表达差异均有统计学意义(F=293.799、346.260、137.121,P<0.05),亚组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。ET-1、VEGF、iNOS及Angpt-1在各组间及组内的蛋白表达变化规律与相应mRNA表达一致。VEGF(1.41±0.18、6.54±0.78、4.19±0.41、2.16±0.25)与iNOS(2.06±0.21、8.88±0.95、4.85±0.51、2.79±0.28)、Angpt-1(9.57±0.91、6.20±1.39、4.53±0.49、2.55±0.33)正相关(r=0.983、0.364,P<0.05),iNOS(2.06±0.21、8.88±0.95、4.85±0.51、2.79±0.28)与Angpt-1(9.57±0.91、6.20±1.39、4.53±0.49、2.55±0.33)正相关(r=0.377,P<0.05)。结论BCS模型中的iNOS、Angpt-1及VEGF高表达且互为正相关,三者参与调控BCS肝内外血管生成及肝纤维化进程。     

微小RNA-214-3p介导神经营养酪氨酸激酶受体2型通路调节血管内皮生长因子旁分泌在骨关节炎发展中的作用

目的:探讨微小RNA(miR)-214-3p在骨关节炎(OA)软骨细胞中的表达及其调节内皮细胞迁移和血管生成的机制。方法:选取2020年6月至2020年12月在郑州大学第一附属医院接受全膝关节置换的16例OA患者及12例无膝关节疾病但因创伤导致下肢截肢的患者分别作为OA组和健康组,获取软骨标本,提取软骨细胞。采用蛋白印...     

分选蛋白17对胰腺癌细胞生物学性状的影响

目的:探讨分选蛋白(SNX)17通过激活表皮生长因子受体(EGFR)影响胰腺癌细胞侵袭、增殖和迁移能力。方法:采集3例人胰腺癌组织及癌旁组织样本,自2021年1月至2021年3月收集于贵州医科大学附属医院肝胆外科,用免疫组织化学(IHC)染色检测癌组织与癌旁组织中SNX17的表达量。用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-...     

吉西他滨白蛋白纳米粒对胰腺癌微血管生成的影响

目的：研究吉西他滨白蛋白纳米粒（GEM-NP）对胰腺癌微血管生成的影响。方法：以人胰腺癌裸鼠移植瘤为对象,分为5个给药组：110nm—GEM—NP组（n=6）、406nm—GEM—NP组（n=6）、GEM组（n=6）、NP组（n=6）及无药对照组（n=6）;运用CD34免疫组化检测微血管密度（MVD）,RT—PCR法检测血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达。结果：5个组给药后MVD依次为1．80±0．90、2．58±1．10、3．92±1．13、6．61±1．65及9．56±2．99;其中3个GEM阳性给药组与2个无GEM组间均有显著差异（P〈0．05）,110nm—GEM—NP组与GEM组间也具有显著差异（P〈0．05）。而各组间VEGFmRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：GEM—NP对胰腺癌微血管生成有较显著的抑制效应。     

微小RNA-618通过靶向羧基末端结合蛋白2抑制胰腺癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨微小RNA(miR)-618及羧基末端结合蛋白2(CtBP2)对胰腺癌增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测胰腺癌细胞中miR-618的表达;分别转染miR-618 inhibitor和mimics后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆集落形成及Tr...     

G1通过核因子E2相关因子2减轻神经元氧糖剥夺损伤

目的:探讨G1对原代神经元氧糖剥夺损伤后氧化应激指标的影响及核因子E2相关因子2（nuclear factor-E2-related factor 2, Nrf2）在其中的作用。方法:将培养7 d的C57BL/6胎鼠皮质原代神经元细胞按随机数字表法分为6组（每组6孔）：对照组（C组）、氧糖剥夺/复氧（oxygen gl...     

重组腺相关病毒载体表达抗表皮生长因子受体抗体对胰腺癌细胞株抑制作用的研究

目的 构建能在体内长期表达抗表皮生长因子受体(EGFR)抗体的重组腺相关病毒(rAAV)载体,观察其对人胰腺癌细胞株的抑制作用.方法 将抗人EGFR单链抗体可变区(SCFV)基因插入腺相关病毒载体的Kpn Ⅰ和BglⅡ位点,构建成含抗EGFR单链抗体基因的重组腺相关病毒载体(rAAV-anfiEGFR).设立对照组(rAAV1-EGFP组)和实验组(rAAV1-anti EGFR组),观察抗EGFR单链抗体蛋白的表达情况.采用Western blot检测抗体蛋白的表达、CCK-8法和流式细胞仪检测6种人胰腺癌细胞株(PCT-3、SW1990、Capan-1、ASPC-1、MiaPaCa-2及PANC-1细胞)的抑制率和凋亡率.两组比较采用t检验.结果 抗EGFR单链抗体蛋白能在6种人胰腺癌细胞株中表达,对照组和实验组胰腺癌ASPC-1细胞抑制率分别为1.1%±2.4%和15.1%±3.5%,两组比较,差异有统计学意义(t=6.598,P＜0.05).对照组和实验组PANC-1细胞凋亡率分别为7.0%±3.0%和11.4%±2.5%,两组比较,差异无统计学意义(t=1.952,P＞0.05);对照组和实验组SW1990、ASPC-1、Capan-1、PCT-3、MiaPaCa-2细胞凋亡率分别为1.1%±0.8%、1.5%±0.7%、1.7%±1.2%、1.1%±0.7%、2.2%±1.1%和17.6%±2.2%、46.9%±3.9%、20.0%±2.8%、12.1%±1.6%、31.1%±2.5%,两组比较,差异均有统计学意义(t=12.208,19.846,10.405,10.909,18.327,P＜0.05).结论 成功构建了携带抗EGFR单链抗体基因的rAAV载体,其表达的抗EGFR单链抗体蛋白对人胰腺癌细胞株有明显的抑制作用.