补肾中药对人成骨细胞钙离子摄取和钙化能力的影响

目的研究补肾中药对人成骨细胞增殖、分化、钙摄取和矿化能力的影响。方法用酶消化法从成人髂骨松质骨,分离人成骨细胞,以细胞形态学、碱性磷酸酶染色和体外成骨能力的检测鉴定成骨细胞。在成骨细胞培养液内分别加入含有高、中、低不同浓度的补肾中药鼠血清,以正常鼠血清作为对照。培养30min后,进行成骨细胞胞内钙离子变化的检测;培养3d后,用流式细胞仪检测成骨细胞增殖、分化情况;培养28d后,进行Von-Kossa染色,观察成骨细胞钙化结节的形成情况。结果与对照组相比,培养30min后,高、中、低3种浓度的补肾中药血清均能提高成骨细胞钙离子摄取能力;培养3d后,中药组处于增殖期的成骨细胞明显升高,和对照组相比具有明显的统计学差异。培养28d后,中药组成骨细胞钙化结节形成的数量也相对增多,其中,高浓度补肾中药血清处理组的钙化结节的数量与对照组相比有明显增加(P<0.05)。结论补肾中药血清能提高成骨细胞钙离子摄取能力,刺激成骨细胞增殖分化,增加成骨细胞钙化结节的形成。     

补肾活血中药对成骨细胞的影响

骨质疏松是以单位体积内骨组织量减少为特点的代谢性骨病变,成骨细胞与破骨细胞的动态平衡是维持正常骨量的关键,其中成骨细胞起到主要作用。中医认为骨质疏松的发病以肾虚为本,血瘀为标,治疗上予以标本兼治,补肾活血为法,多用补肾活血中药治疗取得良好的疗效。现对补肾活血中药对成骨细胞增殖分化及活性的影响研究进行总结,为今后的进一步深入研究提供科研思路。     

饲补肾中药大鼠血清对成骨细胞-破骨细胞共育系中破骨细胞功能的影响

目的探讨喂饲补肾中药大鼠血清在成骨细胞-破骨细胞培养体系中对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法取SD大鼠的胎鼠颅骨与四肢骨分别分离、培养成骨细胞和破骨细胞,利用共育系使二者生活在同一环境中,施加高、中、低剂量的饲补肾中药大鼠血清,并与对照组及单独培养的破骨细胞进行比较,酶动力学法测定培养上清中抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的活性,利用甲苯胺蓝对骨吸收陷窝染色并在Leica Quantimet 500图像分析仪下测定骨吸收陷窝的面积和数目。结果共育系中对TRACP活力的抑制及骨陷窝面积与数目的减少以中剂量组作用最为明显(与对照组比较P<0.01),单独培养3个剂量组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),以中剂量组作用最为明显(P<0.01)。结论饲补肾中药大鼠血清可以抑制共育系中破骨细胞的骨吸收功能。     

喂饲补肾中药大鼠的血清对成骨细胞的生物学作用

目的 探讨喂饲补肾中药大鼠的血清对体外培养的成骨细胞的生物学作用。方法 在新生SD大鼠头颅骨第2代成骨细胞培养液中加入不同浓度(低、中、高)的中药血清,并与空白组对照,分别观察成骨细胞的增殖、分化和矿化功能。结果 补肾中药血清具有刺激成骨细胞增殖的作用,可提高碱性磷酸酶活性并增加矿化结节形成的数量。结论 补肾中药血清具有刺激体外培养的成骨细胞增殖及分化成熟的功能。     

补肾中药骨灵丸对成骨细胞矿化功能及骨桥蛋白基因表达的影响

目的探讨含补肾中药-骨灵丸大鼠血清对体外培养成骨细胞(OB)矿化功能及骨桥蛋白基因表达的影响。方法取SD乳鼠颅骨,采用改良胰酶-胶原酶消化法分离培养;根据血清药理学的方法制备含不同剂量(高、中、低剂量)骨灵丸血清,并以空白组(灌喂生理盐水)为阴性对照、雌二醇(E2,10-8 mol／L)组为阳性对照;将制备好的各组血清分别加入第二代OB的培养液中进行培养,采用Westem-blot及RT-PCR的方法观察补肾中药血清对OB骨桥蛋白及基因表达的影响,利用茜素红染色方法测定矿化结节形成的数量。结果含骨灵丸(中、高剂量组)血清均能上调OB骨桥蛋白及基因的表达,使钙结节的数目增加,与空白对照组相比较具有统计学意义(P<0．05);空白对照组及补肾中药低剂量组对骨桥蛋白表达及矿化结节的形成无影响。结论骨灵丸可上调骨桥蛋白基因的表达,这可能是骨灵丸促进钙结节形成、影响骨代谢的机理之一。     

补肾中药醇提活性部位对成骨细胞Cbfa1基因表达的影响

【目的】观察补肾中药提取物(AS-RKCB)对体外培养人的成骨细胞株TE85和编码因子(Cbfal)基因表达的影响。【方法】原位杂交组织化学技术。【结果】(1)TE85细胞经AS-RKCB(10-7g/L)培养液培养9 d后Cbfal mRNA表达的阳性细胞数高于空白对照组,与对照组比较有统计学意义;(2)检测同期培养液中的骨钙素分泌值显著高于对照组,细胞中骨钙素分泌量在CbfalmRNA高表达3 d后达峰值。【结论】Cbfal基因表达与成骨细胞标志物表达之间的时差关系,提示Cbfal基因在成骨细胞增殖和分化中有重要作用。     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX 补充雌激素组、OVX 补充孕激素组和OVX 补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX 补充雌激素组和OVX 补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.     

雌激素对卵巢切除大鼠肾脏VDR mRNA表达的影响

目的 探讨雌激素对卵巢切除(OVX)大鼠肾脏维生素D受体(VDR)mRNA表达的影响.方法 25只成年雌性SD大鼠随机分为为假手术组、OVX组、OVX+补充雌激素组、OVX+补充孕激素组和OVX+补充雌、孕激素组(n=5).于分组处理2月后处死大鼠取肾脏组织,RT-PCR检测各组VDR mRNA的相对表达量.结果 OVX组大鼠肾脏VDRmRNA表达显著低于假手术组(P<0.05);与OVX组相比,OVX+补充雌激素组和OVX+补充雌、孕激素组大鼠肾脏VDR mRNA表达显著增加(P<0.05).结论 OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA表达减少;雌激素能促进OVX大鼠肾脏组织VDR mRNA的表达.     

补肾中药对大鼠腺垂体生长激素蛋白表达的影响

目的：观察滋阴泻火中药及益肾填精中药对大鼠腺垂体生长激素（GH）蛋白表达水平的影响。方法：将青春期SD雌性大白鼠分为3组，对照组（喂饲生理盐水）；滋阴泻火药组（喂饲滋阴泻火中药合剂）；益肾填精药组（喂饲益肾填精中药合剂），疗程1个月。采用免疫组织化学技术检测腺垂体GH的蛋白表达水平。数据经图像处理，对比各组间阳性细胞数、单个细胞面积及阳性细胞面积。结果：滋阴泻火药组其垂体GH蛋白表达水平明显下调（P＜0．05）；而益肾填精药组则相反，垂体GH蛋白表达水平明显上调（P＜0．05）。结论：补肾中药可在蛋白合成水平调节垂体GH的合成及释放。     

东亚人群VD受体基因ApaI多态性与银屑病易感性的Meta-分析

目的采用Meta-分析的方法对东亚人群VDR基因ApaI多态性与银屑病易感性的关系进行综合评价。方法系统检索所有2012年1月前在PubMed、中国生物医学文献数据库（CBM）上发表的ApaI多态性与银屑病关联分析的文献,然后按一定的标准选择合格的研究并从每个纳入研究中提取相关信息。对于ApaI多态位点,我们进行基于等位基因、显性遗传模式和隐性遗传模式关联研究的Meta-分析。通过固定或随机效应模型计算合并的优势比（Odds ratio,OR）。通过敏感性分析确定异质性并探索其来源。用漏斗图和Egger检验检测出版偏倚。结果有4个研究符合我们的标准进入本Meta-分析。基于等位基因、显性及隐性遗传模式关联研究的Meta-分析结果显示：在东亚人群中,等位基因A不是银屑病发病的危险因素：异质性χ2=14.48,P=0.002,I2=79.3%;OR随机效应模型=1.110,95%CI=0.667～1.847,z=0.40,P=0.689;基因型AA与aa均与银屑病发病不相关：显性遗传模式,异质性χ2=13.76,P=0.003,I2=78.2%,OR随机效应模型=1.034,95%CI=0.547,1.955,z=0.10,P=0.918;隐性遗传模式,异质性χ2=10.61,P=0.014,I2=71.7%,OR随机效应模型=1.406,95%CI=0.514,3.848,z=0.66,P=0.507。敏感性分析显示来自韩国的一个研究是异质性的主要来源,当排除该研究后,同样表现了上述趋势。另外,本Meta-分析所纳入的文献均不存在显著的出版偏倚。结论在东亚人群中,维生素D受体基因ApaI位点不是银屑病的易感位点。     

中药联合根除疗法治疗难治性血小板减少性紫癜18例

目的：观察中药联合根除幽门螺杆菌（HP）疗法治疗难治性血小板减少性紫癜（RITP）的疗效。方法：对合并HP感染的36例RITP患者随机分两组,在常规治疗的基础上,治疗组中药联合根除幽门螺杆菌（HP）,对照组只清除HP治疗,观察两组血小板上升情况。结果：治疗组有效率72.2%,对照组有效率50.0%,两组比较血小板上升有显著差异（P〈0.05）,治疗组血小板上升明显。结论：中药联合清除HP感染,治疗RITP有较好的疗效。     

类风湿关节炎中医主要证候分析

目的分析类风湿关节炎（RA）的证候分布相关因素。方法采用横断面调查研究的方法,对201例RA患者进行调查,并研究中医证候与主要症状以及实验室指标之间的关系。结果类风湿关节炎在中医不同证型间病程与关节肿痛数、畸形数等基本无关联,P〉0.05或呈散点状分布;5个证型与关节肿痛数、畸形数、RF、CRP、ESR间具有一定的统计学差异（P〈0.05或P〈0.01）。结论类风湿关节炎患者中医主要证候分布及病情反复发作与其寒热错杂、虚实互见的病理特征关系密切,早期以邪气痹阻之肿胀疼痛为虐,中后期则以瘀滞不通之功能障碍为患。     

基质金属蛋白酶-3和维生素D受体的基因多态性与腰椎间盘退变的易感性

目的探索基质金属蛋白酶-3（MMP-3）和维生素D受体（VDR）的基因多态性与腰椎间盘退变的关系。方法采用病例对照研究方法,以CT确诊腰椎间盘退变患者178人为病例组,随机选择体检人员中无腰背痛史且腰椎功能正常者284人为对照。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法分析MMP-3和VDR的基因多态性。结果MMP-3和VDR-Apa的等位基因5A和A在病例组中的分布明显高于对照组（P〈0．05）,其OR值分别为1．96和1．70。而VDR-Taq的等位基因t在两组间分布没有统计学差异（P〉0．05）。分层分析显示男性腰椎间盘退变仅与MMP-3基因多态性有关,而女性则与MMP-3和VDR-Apa基因多态性均有关。叉生分析显示MMP-3的等位基因5A和VDR-Apa的等位基因A同时存在对腰椎间盘退变有交互促进作用。结论MMP-3和VDR-Apa的多态基因型是腰椎间盘退变的危险基因。     

养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠肾脏Smad2、Smad3、Smad7表达的影响

目的观察养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat,SHR）肾脏smad2、smad3、smad7表达的影响,探讨养肝益水颗粒保护肾脏的机制。方法将40只12周雄性SHR大鼠随机分为模型组、贝拉普利组（每日1.8 mg/kg）、养肝益水颗粒低剂量组（每日5.4 g/kg）、养肝益水颗粒高剂量组（每日27 g/kg）,每组10只;并设Wista-rKyoto（WKY）大鼠10只作正常对照组;模型组和正常对照组给予等容积生理盐水灌胃,每天1次,共6周。采用免疫组织化学法检测各组大鼠肾脏smad2、smad3、smad7的表达水平。结果与正常组相比,模型组肾脏Smad2、Smad3的表达明显上调（P〈0.01）,Smad7的表达明显下调（P〈0.01）;各治疗组与模型组相比,肾脏Smad2、Smad3的表达明显下调（P〈0.01）,Smad7的表达明显上调（P〈0.01）,且养肝益水颗粒低剂量组与贝拉普利组相比疗效相近（P〉0.05）,养肝益水颗粒高剂量组疗效优于养肝益水颗粒低剂量组与贝拉普利组（P〈0.05,或P〈0.01）。结论养肝益水颗粒可能是通过下调肾脏Smad2、Smad3和上调肾脏Smad7的表达以阻断转化生长因子及其受体（transforming growth factor-transfor-ming growth factor receptor,TGF-β-TβR）-Smads信号转导通路而抗高血压肾脏纤维化。     

滋阴泻火中药对青春期大鼠子宫与卵巢ER、IGF-I、AR基因及蛋白表达的影响

目曲：从基因及蛋白水平研究滋阴泻火中药对青春期大鼠子宫、卵巢雌激素受体（ER）、胰岛素生长因子-I（IGF-I）、芳香化酶（AR）表达的影响,从雌激素和胰岛素生长因子调控及雌激素合成酶途径探讨滋阴泻火中药防治性早熟的机制。方法：将动物分为对照组和中药组,中药组喂饲滋阴泻火中药每次3ml,每日1次,对照组仅给予等量的0．9％NaCl溶液;末次给药24h后剥离子宫称重,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time fluorescence quantitativePCR,rQPCR）法观察子宫、卵巢ER、IGF-I、ARmR-NA的表达,采用免疫组化法观察子宫、卵巢ER、IGF-I、AR蛋白的表达。结果：给予滋阴泻火中药干预后,青春期大鼠子宫重量、子宫／体质量比下降,子宫、卵巢ER、IGF-I、AR的mRNA和蛋白的表达量均明显下调。结论：滋阴泻火中药能够显著下调靶器官雌激素受体、胰岛素样生长因子及雌激素合成酶（芳香化酶）,这可能是其治疗儿童性早熟的作用机制之一。     

中医药防治系统性红斑狼疮的基因水平研究进展

从患者体质、中医辨证、治疗以及基因组学研究四个方面对中医药防治系统性红斑狼疮在基因水平上的研究情况进行总结,并对分子生物学技术在中医药防治系统性红斑狼疮研究领域内的应用前景进行思考和展望。     

中药合剂免疫调节作用的实验研究

研究了自拟中药合剂对小鼠血象及巨噬细胞Ｃ＿３ｂ和Ｆｃ受体活性的影响，以探讨该合剂的免疫调节作用。结果表明，该合剂可使受化疗损伤小鼠ＷＢＣ明显提高，与化疗对照组相比具有显著的差异（Ｐ＜０．０５）；使用该中药合剂的小鼠腹腔巨噬细胞ＹＣ花环形成率（２３．１０±７．０５％）和ＥＡ花环形成率（２５．４７±５．５５％）较化疗对照组均有明显提高（Ｐ＜０．０１）。认为该中药合剂具有升高ＷＢＣ的作用和免疫调节作用     

中医药院校大学生创新基地建设探讨

随着国家对大学生创新创业训练计划的关注与投入不断增加,中医药院校承担的大学生创新创业训练项目也大幅增加,因此中医药院校如何构建适应中医药现代研究的大学生创新基地成为亟待解决的问题。该文从以国家重点学科科研基地为依托建设大学生创新基地、以中医药科研三级实验室为依托建设中医药院校大学生创新基地、设立大学生创新基地项目和大学生创新基地建设的模式四个方面对中医药大学生创新基地的建设进行了探讨。