供者提前使用粒细胞集落刺激因子动员的异基因骨髓移植对造血重建与移植物抗宿主疾病的影响

目的 :为观察使用 G- CSF提前动员供者的异基因骨髓移植方法对造血重建及 GVHD发生的影响。　方法 :用HL A相合 ,混合淋巴细胞培养阴性的供者 ,行异基因骨髓移植 ,在预处理方案 ,GVHD的预防及支持治疗方法相同 ,比较 A组5例病人供者接受 G- CSF2 5 0 μg/d连用 7d后采髓和 B组 4例病人常规采髓的异基因骨髓移植对造血重建和 GVHD发生的作用。　结果 :在类同采髓量中 ,A组所获单个核细胞、CD34 细胞数和 CFU- GM集落数明显多于 B组 (P<0 .0 1) ,A组白细胞大于 1.0× 10 9/L和血小板大于 2 0× 10 9/L的时间分别是 (13.0± 2 .0 ) d和 (14.0± 2 .1) ,比对照组快 8.8d和 10 .3d。 GVHDII～ III度发生率是 A组为 0 ,B组 2例 ,输入的 T淋巴细胞总数无明显改变 ,但 CD4细胞明显减少 ,CD8细胞增多 (P<0 .0 1)。结论 :HL A相合的异基因骨髓移植 ,提前使用 G- CSF动员供者 ,造血重建加快。供者使用 G- CSF可能降低 GVHD发生率 ,这一作用与骨髓内 T淋巴细胞亚群变化有关。     

异基因外周血造血干细胞移植治疗慢性髓细胞白血病的临床研究

为了评价异基因外周血造血干细胞移植 (allo PBSCT)治疗慢性髓细胞白血病 (CML)的疗效 ,作者对 12例CML进行了allo PBSCT的临床研究 ,12例均为第 1次慢性期 ,中位年龄 32 .5岁 ;全部供受者HLA配型完全相合 ,供者动员用G CSF 5 μg/ (kg·d)× 5天 ,分离外周血单个核细胞 (2 .49.5 7)× 10 8/kg(中位数 5 .0× 10 8/kg) ,CD 34 + 细胞数为 (0 .72 6 6 .30 )× 10 6/kg(中位数 5 .82× 10 6/kg)。预处理方案 :9例采用全身照射 (TBI) +环磷酰胺 (CTX) +依托泊甙 (VP16 ) ,3例采用TBI +CTX ;移植物抗宿主病 (GVHD)预防采用环孢素A(CsA) +短程甲氨喋呤 (MTX)方案。全部患者均顺利造血重建 ,中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L中位数 14.5天 (142 3天 ) ,血小板 >2 0× 10 9/L中位数 16天 ;发生Ⅱ度以上急性GVHD 3例 (2 5 % ) ;慢性GVHD共 5例 ,其中局限性 3例 ,广泛性 2例 ;死亡 3例 ,2例死于感染 ,1例死于间质性肺炎 ,中位随访 6个月 ,存活 9例。Allo PBSCT急性GVHD发生率并不比异基因骨髓移植高 ,但慢性GVHD的发生应引起重视     

自体外周血干细胞动员时骨髓及外周血相关细胞亚群的动态变化研究

目的：探讨自体外周血干细胞动员时，恶性血液病患者的骨髓及外周血CD34^＋和T细胞亚群的动态变化特点。方法：16例拟行自体外周血干细胞移植患者，在应用化疗＋G—CSF方法动员外周血干细胞期间，以流式细胞仪测定骨髓及外周血CD34^＋和T细胞亚群动态变化情况。结果：化疗后应用G—CSF48h后，骨髓中CD34^＋细胞开始明显增加（P〈0．01），在应用G—CSF72h后，外周血中CD34^＋细胞开始明显增加（P〈0．01），96h后，两者达峰值。较未应用G—CSF时差异显著（P〈0．01）。T淋巴细胞亚群比例处于倒置状态且变化不明显（P〉0．05）。结论：恶性血液病患者在应用化疔＋G—CSF方法动员外周血干细胞时，其骨髓及外周血CD34^＋细胞逐渐增加，于96h后达高峰，T细胞亚群变化不明显。     

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对老年急性心肌梗死患者外周血干细胞动员效率的临床观察

目的　观察粒细胞集落刺激因子 (G CSF)对老年 (≥ 70岁 )急性心肌梗死 (AMI)患者 ,外周血干细胞动员效率。方法　 10例老年AMI患者予以G CSF 30 0 μg～ 6 0 0 μg d皮下注射 ,连续 5d ,第 6天经美国Baxter公司生产的CS30 0 0PLUS血细胞分离机 ,分离PBSC ,动员前及动员后第 3～ 7天行外周血WBC计数检查 ,经流式细胞仪测定CD34+ 的细胞数量。结果　在动员前及动员后第 3～ 7天外周血中WBC量分别为 6 .75× 10 9 L、2 8.16× 10 9 L、34.93× 10 9 L、34.4 0× 10 9 L、38.93× 10 9 L、2 1.85× 10 9 L ;CD34+ 量分别为 6 .2 5× 10 6 、5 1.10× 10 6 、92 .6 0× 10 6 、10 9.6 5× 10 6 、134.6 9× 10 6 、4 5 .0 9× 10 6 ;在动员前及动员后第 3～ 7天外周血中WBC、CD34+ 量与动员时间变化曲线均显示曲线高峰在动员后第 6天 ;患者外周血中CD34+ 细胞数量与WBC数量变化呈正相关 (r=0 .94 0 ) .结论　老年AMI患者行G CSF动员安全可行 ,外周血中CD34+ 细胞数量与WBC变化曲线高峰均出现在第 6天 ,且WBC与CD34+ 细胞数量之间具有正相关     

抗CD25抗体预防移植物抗宿主病在儿童白血病半匹配骨髓移植中的应用

目的　探讨抗 CD2 5抗体用于预防儿童白血病半匹配未去 T细胞骨髓移植重度移植物抗宿主病 (GVHD)的疗效。　方法　 10例儿童白血病患者接受 HL A2 - 3位点不合半匹配骨髓移植 ,移植方法除了供者应用粒细胞集落刺激因子 (GCSF)2 5 0μg促进骨髓及受者应用环孢素 A(CSA ) ,甲氨蝶呤 (MTX) ,抗胸腺细胞球蛋白 (ATG)和霉酚酸酯 (MMF)预防 GVHD综合措施外 ,加用抗 CD2 5单克隆抗体预防 GVHD,剂量各为 2 0 m g,在移植前 2 h和移植后第 4天应用 ,采髓后未去 T细胞输注 ,移植结果与前期未用 Simulect移植组比较。　结果　 10例移植后均获造血重建 ,粒细胞大于 0 .5× 10 9/ L 中位天数是19 d,血小板大于 2 0× 10 9/ L 的中位天数是 2 2 d,骨髓植活直接证据检测证实为完全供者造血。无 1例发生急性 ～ GVHD,未用 Sim ulect对照组急性 ～ GVHD为 5 0 % ,差异有显著性意义。可评价慢性 GVHD的 8例均发生慢性 GVHD,均为局限性慢性 GVHD。中位随访 12个月 (范围 9～ 2 4个月 ) ,2例移植相关死亡 ,1例移植后 14个月复发死亡 ,实际无病生存率是 70 % ,与对照比较差异无显著性意义。　结论　本研究儿童半匹配未去 T细胞骨髓移植应用 Sim ulect,明显降低急性重症 a GVHD发生 ,减少移植相关死亡 ,临床应用安全可行。     

急性心肌梗死患者外周血干细胞动员效率及安全性观察

目的　观察急性心肌梗死 (AMI)患者应用G CSF行自体外周血干细胞动员的效率与安全性。方法　我院 2 0 0 3年 11月至 2 0 0 4年 8月收治的 4 5例AMI患者 ,入院后在常规AMI治疗 (药物与介入治疗 )基础上给予包涵体型G CSF ,30 0～ 6 0 0 μg d皮下注射 ,连续 5d ,第 6天经美国Baxter公司生产的CS30 0 0PLUS血细胞分离机 ,分离外周血干细胞 ,然后进行经皮经腔冠状动脉内移植自体外周血干细胞进一步治疗急性心肌梗死。动员前及动员后第 3～ 7天行外周血WBC计数检查 ,经流式细胞仪测定CD34+ 的细胞数量。并在外周血干细胞动员时观察有无不良反应 ,心绞痛或心衰加重等并发症发生 ,及一些少见的并发症 :自发性脾破裂、严重化脓性感染、高凝状态、自身免疫性疾病等发生。结果　在动员前及动员后第 3～ 7天外周血中WBC量分别为 (8.4 2± 2 .5 9)× 10 9 L、(31.2 8± 8.34)× 10 9 L、(35 .2 4± 9.38)× 10 9 L、(37.0 3± 13.0 7)× 10 9 L、(35 .34± 14 .6 8)× 10 9 L、(2 0 .35± 9.2 2 )× 10 9 L ;CD34+ 量分别为 (14 .89± 11.4 6 )× 10 6 、(6 7.78± 5 0 .88)× 10 6 、(12 4 .79± 136 .13)× 10 6 、(2 0 8.92± 2 0 6 .97)× 10 6 、(2 0 6 .10± 184 .5 7)× 10 6 、(6 6 .6 3± 5 6 .5 6 )× 10     

单次和分次应用G-CSF动员供体外周血造血干细胞的效果比较

目的　研究单次与分次使用粒细胞集落刺激因子 (G CSF)Filgrastim对供体外周血干细胞的动员效果。方法　将 30例健康供体随机均分为 2组 ,分别接受皮下注射Filgrastim 5 μg/kg,每日 1次或 2 5 μg/kg ,每日 2次动员干细胞 ,共 5天。第 6天始采集干细胞 ,以流式细胞仪分析首次采集物免疫表型。结果　以供体的单位体重计算 ,单次动员组与分次动员组首次采集获得的MNC分别为2 93× 10 8/kg和 4 4 2× 10 8/kg,CD34+ 细胞分别为 2 4 6× 10 6/kg和 4 15× 10 6/kg,CD34+ CD38-细胞分别为 0 2 1× 10 6/kg和 0 73× 10 6/kg,分次动员组均高于单次动员组(P <0 0 5 )。CD34+ DR-细胞分次动员组与单次动员组比较差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　分次应用Filgrastim可更有效地动员供体外周血干细胞 ,且供体无不良反应     

G-CSF对健康人骨髓和外周血CD34+细胞和T细胞亚群影响的动态观察

目的 :探讨G -CSF对健康人骨髓及外周血CD3 4 + 细胞和T细胞亚群的影响。方法 :对 12例健康人 ,以G -CSF15 0 μg/ 12h ,皮下注射 ,连用 6d。应用流式细胞仪测定CD3 4 + 和T细胞亚群。结果 :应用G -CSF4 8h后 ,骨髓CD3 4 + 细胞开始明显增加 ,72h后外周血CD3 4 + 细胞开始明显增加 ,96h后两者达峰值 ,均较应用前差异显著 (P <0 .0 1)。T淋巴细胞亚群变化不明显 (P>0 .0 5 )。结论 :健康人应用G -CSF后骨髓及外周血CD3 4 + 细胞逐渐增加并于 96h后达到高峰 ,T细胞亚群则无明显变化。     

骨髓和动员外周血中CD34+细胞基因表达差异的研究

为探讨骨髓的造血干细胞和动员的外周血造血干细胞在基因表达水平是否有差别，作者以CD34抗原作为造血干细胞的标记，筛选出同一个供者的静息散骨髓和经G－CSF（granulocyte colony-stimulating factor）动员后的外周血CD34^ 细胞，用抑制性消减杂交（suppression subtractive hybridization,SSH）技术检测两种来源的CD34^ 细胞的基因表达差异。结果发现，动员外周血CD34^ 细胞有１１个高表达基因，主要涉及的基因有核蛋白、转录调节因子、锌指蛋白和干扰素相关的分析。提示动员外周血CD34^ 细胞与静息期骨髓CD34^ 细胞基因表达谱并不完全相同，从而导致其生物学行为的差异。因此，进一步的研究可能对造血干细胞的迁移、归巢过程有更深的了解，对如何加速造血干细胞移植后造血功能的恢复具有一定的意义。     

ABO血型不合异基因外周血干细胞移植对红系造血重建的影响

为研究ABO血型不合对Allo PBSCT患者造血重建的影响 ,将 2 0例恶性血液病(CML 9例、ALL 8例、难治性NHL 3例 )按统计学配对原则分组 ,ABO血型异同者各 10例 ,两组年龄、性别、诊断、移植前病程、疾病状态、预处理方案、输注的MNC和CD34+ 细胞量及GVHD预防方法均无明显差异(P >0 0 5 )。外周血干细胞经G CSF动员后CS 30 0 0Plus分离 ,移植后定期检查血象和血型抗体滴度。结果显示 ,血型转为供者型的中位数时间 (40 2± 2 5 )天 ,白细胞、血小板达正常水平在两组中无明显差异 (P >0 0 5 ) ,而血红蛋白 <110g/L者在ABO血型不合组明显高于ABO血型相合组 (5 5 %∶2 5 % ,P <0 0 1)。 6例ABO血型主要不合者 3例发生纯红再障。提示供受者ABO血型不合影响红系造血重建 ,主要血型抗原不合时容易发生纯红再障 ,而GVHD及移植相关死亡率与红细胞血型无关     

移植骨髓或屏蔽骨髓对照后早期肠道损伤的影响

本实验采用输注骨髓细胞或屏蔽造血组织照射腹部的方法,探讨在大剂量照射后造血组织对早期肠道损伤的作用.结果表明,输注骨髓细胞对受~(60)Co-γ线12Gy和10Gy照射小鼠的小肠重量减轻及隐窝活存率都没有明显影响.小鼠经14GyX线全身照射或照射腹部后,肠上皮细胞的减少及隐窝有丝分裂受抑制的程度相似,没有观察到由于屏蔽自身造血组织而减轻肠道的损伤.提示,在大剂量照射时,肠道的损伤主要取决于射线的直接作用并与照射剂量有关,而造血组织对它的影响不明显.     

骨髓检查和常规血液学参数在骨髓转移癌诊断中的意义

恶性肿瘤患者51例(男38例,女13例),骨髓穿刺涂片镜检发现瘤细胞者21例。在骨髓涂片瘤细胞阳性患者中,多数有贫血、血小板减少和外周血中出现幼粒、幼红细胞,并有硷性磷酸酶、乳酸脱氢酶及红细胞沉降率增高。结果表明,骨髓检查和一些血液学指标在骨髓转移癌的诊断中是有价值的。如必要时,作骨髓凝块切片、骨髓活检、X线骨照片和骨扫描检查以明确诊断。     

骨髓移植时对供髓者的观察

本文报告1例骨髓移植(BMT)的供者,以预先循环采取及回输自身血作准备,在硬膜外麻醉下自双侧髂后上棘大量抽取骨髓(BM)。经观察认为循环采取及回输自身血不仅在大量抽取BM时起到扩充血容量的作用,还有刺激造血的作用,使能取得较好质量的BM。结果还表明抽取BM后除抽髓局部的BM及GM-CFU产率于抽取BM后1个月时尚未完全恢复外,其血象、免疫学指标及局部压疼等均很快恢复。对BM的恢复情况尚需继续观察。     

异基因骨髓移植的植入证明

本文对我院1987年12月至1989年11月间进行的9例HLA相合的异基因骨髓移植供受者的植入情况做了分析。我们采用了国际骨髓移植登记处的移植成功指标,及常规的细胞遗传学检查,结果全部患者均有间接的临床植入证据,其中5例有直接的细胞遗传学证据。本文综合文献提示,细胞遗传学分析在移植证明中具有很重要的意义,但其缺陷也是显而易见的。DNA-RFLP的检测可弥补常规方法的缺陷,并获得准确可靠的植入依据。     

骨髓基质成骨细胞皮下移植的成骨作用

观察了骨髓基质成骨细胞皮上移植的成骨作用,以探索骨髓基质成骨细胞作为骨组织工程的骨源细胞的可行性。从新生兔骨髓细胞取材,体外培养、诱导后,使其生长汇合成膜状。此细胞膜的植入裸鼠背部皮下,植入４、８周行Ｘ线摄片和组织学检查,观察骨形成情况。结果显示,细胞膜状物皮下成骨作用明显。成骨方式包括膜内成骨和软骨成骨,以膜内成骨为主。说明骨髓基质成骨细胞作为良好的骨源细胞,并将在骨组织工程研究和应用中发挥重要     

高原红细胞增多症骨髓病理研究

目的与方法：本文采用Ｂ６５－０１骨髓活检针，对１２例高原红细胞增多症病人的髂后棘穿刺组织进行光镜观察；结果：骨髓明显活跃７例，占５８．３％，极度活跃５例，占４１．７％，均以红系增生为主，不同发育阶段的幼红细胞聚集成簇，中晚幼红细胞高于正常；不同发育阶段的粒系细胞则呈弥散分布，中晚幼及杆状核细胞略有减低；淋巴细胞之百分率正常；基质中脂肪细胞减少，平均为６％；血管增多，巨核细胞无改变。结论：说明长期高     

小鼠骨髓基质细胞的扫描电镜观察

光镜见小鼠骨髓细胞体外液体培养后贴壁的基质细胞呈多种形态,并有消长过程。本文以扫描电镜进一步观察骨髓基质细胞形态。实验所见支持光镜所得结果。骨髓基质细胞有多种形态,分别具有巨噬细胞样、成纤维细胞样和网状细胞样细胞的某些特征。在体外液体培养的早期,巨噬样细胞较多;而培养两周后的贴壁基质细胞中,成纤维细胞样和网状细胞样的细胞比例增多,相互交错联结成层成同,形成体外造血微环境样结构。     

骨髓移植的适宜照射剂量问题

受致死剂量(2.5～33.5Gy)照射的378只死亡狗胸骨和肋骨病理观察表明,骨髓造血组织再生的上限阈剂量,约为4.5Gy(指未给予任何治疗措施的效应狗)。经输血等对症治疗后,约为10Gy(再生发生率仅4.3%);γ线,中子混合照射后,则分别为3.27Gy和6.6Gy。骨髓再生可分为四类,轻微再生、中等再生、明显再生和基本恢复。6Gy照射后,上述四种骨髓再生分别始见于17.5、19、36和150天。作者建议,骨髓移植的适宜剂量应能几乎完全抑制受体的骨髓造血和免疫组织功能而又尽可能减少或避免受体的全身辐射损伤效应,尤其肠道损伤引起的死亡。     

茜甙对小鼠骨髓粒-巨噬祖细胞的辐射防护作用

本文报告了茜甙对小鼠骨髓GM-CFU-C的影响与辐射防护作用。给小鼠分别口服茜甙10,50,100mg/鼠,于药后1,7h和1,3,7,14天测定骨髓内GM-CFU-C的含量,并在体外照射这些骨髓细胞,观察它对射线的防护作用。实验结果表明,茜甙对骨髓内GM-CFU-C数量和辐射敏感性呈现时相性的变化,即药后早期GM-CFU-C数量稍有下降,而辐射敏感性增加,7h后其数量明显增加,辐射敏感性降低呈现防护作用,药后14天GM-CFU-C数又显著下降,而辐射敏感性增加。     

难治性淋巴瘤的治疗及自体骨髓移植

报告6例难治性淋巴瘤,采用环磷酰胺、全淋巴野照射及自体骨髓移植治疗。全部病例获得完全缓解,治疗期间无出血及感染,血象在1个月内基本恢复正常。我们认为该疗法近期效果满意。观察14个月,6例中有2例复发,其中1例死亡,1例仍在观察和治疗。其余4例已分别缓解12.5个月、11个月、9个月和8个月。如果治疗剂量更大些,长期生存率可能提高。