脾虚大鼠脑内催产素受体基因表达变化及归脾汤的影响

目的：观察脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的催产素受体基因表达变化及归脾汤的影响作用。方法：实验于2002—03／2005-03在北京中医药大学基础医学院完成。清洁级雄性Wistar大鼠30只，体质量（160&;#177;10）g，常规适应性饲养1周后，随机抽签法分成正常组.模型组.治疗组，每组10只。采用苦降泻下.饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型，模型组每日灌胃造模药7．5g／（kg&;#183;d）；治疗组造模处理加胃饲归脾汤7．5g／（kg&;#183;d）。每日上午对除正常组外的2个组胃饲造模药，正常组予等量生理盐水；下午予治疗组胃饲相应中药。连续6周。原位杂交法检测下丘脑腹侧核.海马CA1区.前额叶皮层催产素受体mRNA表达变化。结果：纳入大鼠30只，均进入结果分析。①模型组上述脑区催产素受体mRNA表达阳性反应物明显升高，与正常组比较差异显著（模型组：19．60&;#177;3．51，29．62&;#177;3．98，20．13&;#177;3．22；正常组：8．11&;#177;1．23，11．00&;#177;1．42，4．94&;#177;0．54；P〈0．01）。②治疗组上述脑区的催产素受体mRNA表达阳性反应物明显降低，与模型组比较差异显著（治疗组：9．59&;#177;1.34，13.00&;#177;1．67．5．38&;#177;0.96；模型组：19.60&;#177;3．51．29.62&;#177;3.98．20.13&;#177;3.22：P〈0.01），与正常组比较无显著差异。结论：脾虚模型学习记忆下降变化，与其脑内对学习记忆有促进作用的催产素受体基因表达改变有关．归脾汤可能通过调节催产素受体基因表达而影响其学习记忆能力。     

归脾汤的临床新用

主要介绍归脾汤治疗病毒性心肌炎、风湿性关节炎和肾病综合征的临床体会。     

大鼠脑海马CA1区神经元诱发放电过程中催产素与阿片受体的参与和调制作用

背景：中枢内催产素可作为一种神经递质或调质参与学习记忆、性行为、痛觉调节以及阿片耐受与依赖，海马内催产素能系统与阿片系统具有一定的相互作用。 目的：探讨侧脑室注射催产素对大鼠脑左背侧海马CA1区神经元诱发放电的影响以及催产素与阿片受体之间可能的相互作用。 设计：随机对照实验。 单位：广东医学院生理教研室，武汉大学医学院生理系，武汉大学医学院病理学教研究。 材料：实验于2002-09／2003-09在武汉大学医学院生理系完成，选用雄性SD大鼠36只。随机分为6组，生理盐水对照组、催产素处理组（0．2，2，20mg／L）、催产素受体拮抗剂＋催产素（2mg／L）组、纳洛酮＋催产素（2mg／L）组，每组6只。 方法：脑海马CA1区细胞外记录采用玻璃微电极记录：用微电极推进器将电极插入脑海马CA1区。神经元放电经微电极放大器放大后，显示在示波器上进行观察。记录到神经元放电后，经双极不锈钢电极每隔5min刺激坐骨神经1次，共刺激50min 10次。催产素O．2，2，20mg／L处理组通过侧脑室给药管匀速而缓慢注入催产素O．2，2，20mg／L5μL。催产素受体拮抗剂＋催产素（2mg／L）组：侧脑室预先注射80mg／L催产素受体拮抗剂2．5μL，然后再注射2mg／L催产素2．5μL。纳洛酮＋催产素（2mg／L）组：侧脑室预先注射400mg／L纳洛酮2．5μL，然后再注射2mg／L催产素2．5μL。以放电频率变化率为观察指标，检测不同剂量催产素对海马CA1区神经元诱发放电的影响及催产素受体拮抗剂、纳洛酮对催产素的作用。主要观察指标：各组大鼠刺激前后脑海马CA1区神经元诱发放电频率的变化率。 结果：36只大鼠均进入结果分析。①侧脑室分别注射0．2，2，20mg／L催产素5μL使海马CA1神经元诱发放电频率明显降低，剂量依赖关系明显。②催产素（2mg／L）对CA1神经元诱发放电的抑制作用可被侧脑室预先注射催产素受体拮抗剂（80mg／L，2．5μL）所阻断。③侧脑室注射纳洛酮（400mg／L，2．5μL）可明显减弱催产素（2mg／L）的作用。 结论：催产素通过激活催产素受体可抑制海马CA1神经元对外周传入电信号的反应，中枢内阿片系统也参与催产素的抑制作用，当用纳洛酮阻断阿片受体后，催产素的抑制作用明显减弱。     

实验性癫痫大鼠脑电调制与侧脑室注射催产素的作用

目的：观察催产素对大鼠癫痫的作用效应并探讨其可能的作用机制。方法：实验在武汉大学医学院生理学电生理实验室完成。采用青霉素诱发的大鼠癫痫模型，动物随机分为6组，每组6只，第1组为对照组，第2，3，4组分别侧脑室注射催产素1，10，100ng，第5组注射催产素受体拮抗剂[d(CH2)5—OVT]1μg，第6组注射[d(CH2)5—OVT]1μg+催产素100ng。同步观察大脑额叶皮质和海马CA3区脑电图痫样波的发放频率、幅度以及放电形式的变化。结果：催产素100ng可明显增加痫样放电的频率[由(22．83&;#177;0．70)次／min升至(39．67&;#177;2．53)次／min，t=5．777，P&;lt;0．01]和幅度[由(428．50&;#177;40．88)μV升至(540．24&;#177;71．12)μV，t=3．168，P&;lt;0．051；催产素10ng可使痫样放电的幅度增加[(538．90&;#177;55．95)μV，t=4．004，P&;lt;0．05]；[d(CH2)5—OVT]可阻断催产素的易化效应。结论：侧脑室注射一定剂量的催产素，可通过其受体作用加重实验性癫痫大鼠痫样放电。     

归脾汤治疗频发性早搏28例

归脾汤始载于宋代严用和《济生方》，具有益气补血、健脾养心的功效。用于治疗思虑过度、劳伤心脾、健忘、怔忡等病证。2001年5月-2003年9月，笔者运用归脾汤治疗频发性早搏28例，取得较满意的效果，现报道如下。     

实验性癫痫大鼠脑电调制与侧脑室注射催产素的作用

目的:观察催产素对大鼠癫痫的作用效应并探讨其可能的作用机制。方法:实验在武汉大学医学院生理学电生理实验室完成。采用青霉素诱发的大鼠癫痫模型,动物随机分为6组,每组6只,第1组为对照组,第2,3,4组分别侧脑室注射催产素1,10,100ng,第5组注射催产素受体拮抗剂犤d(CH2)5-OVT犦1μg,第6组注射犤d(CH2)5-OVT犦1μg+催产素100ng。同步观察大脑额叶皮质和海马CA3区脑电图痫样波的发放频率、幅度以及放电形式的变化。结果:催产素100ng可明显增加痫样放电的频率犤由(22.83±0.70)次/min升至(39.67±2.53)次/min,t=5.777,P<0.01犦和幅度犤由(428.50±40.88)μV升至(540.24±71.12)μV,t=3.168,P<0.05犦;催产素10ng可使痫样放电的幅度增加犤(538.90±55.95)μV,t=4.004,P<0.05犦;犤d(CH2)5-OVT犦可阻断催产素的易化效应。结论:侧脑室注射一定剂量的催产素,可通过其受体作用加重实验性癫痫大鼠痫样放电。     

红花黄色素、阿魏酸对痛经模型大鼠催产素受体及加压素受体mRNA表达的影响

目的探讨红花黄色素、阿魏酸在抗痛经作用中的相关作用机制。方法 70只雌性SD大鼠按体重随机分为7组:正常组、模型组、田七痛经胶囊组(田七组)、红花黄色素高剂量组(红高组)、红花黄色素低剂量组(红低组)、阿魏酸高剂量组(阿高组)及阿魏酸低剂量组(阿低组),每组10只。除正常组外,大鼠股部皮下注射己烯雌酚复制大鼠痛经模型,田七组在皮下注射己烯雌酚开始时给予田七胶囊2 g·kg-1,红高组、红低组于注射第7天分别给予红花黄色素0.02 g·kg-1·d-1、0.01 g·kg-1·d-1,阿高组、阿低组于注射第7天分别给予阿魏酸0.12 g·kg-1·d-1、0.06 g·kg-1·d-1。共注射11 d。采用酶联免疫法(ELISA)检测各组大鼠子宫组织前列腺素E2(PGE2)、前列腺素F2a(PGF2a)、血浆血栓素B2(TXB2)、6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a),采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测子宫组织催产素受体(OTR)mRNA及加压素受体(VPR)mRNA的表达情况。结果与模型组比较,各药物处理组扭体反应均有所改善,但无统计学差异(P均>0.05)。与模型组比较,田七组、阿高组、阿低组PGE2含量均有不同程度升高(P<0.01或P<0.05);而田七组、阿高组、阿低组、红高组PGF2a含量及PGF2a/PGE2的比值均有不同程度降低(P<0.01或P<0.05);各药物处理组TXB2及TXB2/6-keto-PGF1a的比值均显著降低(P均<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠子宫OTRmRNA和VPRmRNA相对表达量显著增高(P均<0.01);与模型组比较,田七组OTRmRNA、VPRmRNA相对表达量均下降(P均<0.05),阿高组OTRmRNA相对表达量下降(P<0.05);其他组组间比较无统计学差异(P均>0.05)。结论阿魏酸抗痛经作用可能与调节前列腺素系统及调节痛经大鼠子宫OTR表达有关,红花黄色素可调节前列腺素系统但对OTR及VPR表达无明显影响。     

大鼠脑海马CA1区神经元诱发放电过程中催产素与阿片受体的参与和调制作用

背景中枢内催产素可作为一种神经递质或调质参与学习记忆、性行为、痛觉调节以及阿片耐受与依赖,海马内催产素能系统与阿片系统具有一定的相互作用.目的探讨侧脑室注射催产素对大鼠脑左背侧海马CA1区神经元诱发放电的影响以及催产素与阿片受体之间可能的相互作用.设计随机对照实验.单位广东医学院生理教研室,武汉大学医学院生理系,武汉大学医学院病理学教研室.材料实验于2002-09/2003-09在武汉大学医学院生理系完成,选用雄性SD大鼠36只.随机分为6组,生理盐水对照组、催产素处理组(0.2,2,20 mg/L)、催产素受体拮抗剂+催产素(2 mg/L)组、纳洛酮+催产素(2 mg/L)组,每组6只.方法脑海马CA1区细胞外记录采用玻璃微电极记录用微电极推进器将电极插入脑海马CA1区.神经元放电经微电极放大器放大后,显示在示波器上进行观察.记录到神经元放电后,经双极不锈钢电极每隔5 min刺激坐骨神经1次,共刺激50min 10次.催产素0.2,2,20mg/L处理组通过侧脑室给药管匀速而缓慢注入催产素0.2,2,20 mg/L 5 μL.催产素受体拮抗剂+催产素(2 mg/L)组侧脑室预先注射80 mg/L催产素受体拮抗剂2.5μL,然后再注射2 mg/L催产素2.5μL.纳洛酮+催产素(2 mg/L)组侧脑室预先注射400 mg/L纳洛酮2.5μL,然后再注射2 mg/L催产素2.5μL.以放电频率变化率为观察指标,检测不同剂量催产素对海马CA1区神经元诱发放电的影响及催产素受体拮抗剂、纳洛酮对催产素的作用.主要观察指标各组大鼠刺激前后脑海马CA1区神经元诱发放电频率的变化率.结果36只大鼠均进入结果分析.①侧脑室分别注射0.2,2,20 mg/L催产素5 μL使海马CA1神经元诱发放电频率明显降低,剂量依赖关系明显.②催产素(2 mg/L)对CA1神经元诱发放电的抑制作用可被侧脑室预先注射催产素受体拮抗剂(80 mg/L,2.5μL)所阻断.③侧脑室注射纳洛酮(400 mg/L,2.5μL)可明显减弱催产素(2 mg/L)的作用.结论催产素通过激活催产素受体可抑制海马CA1神经元对外周传入电信号的反应,中枢内阿片系统也参与催产素的抑制作用,当用纳洛酮阻断阿片受体后,催产素的抑制作用明显减弱.     

加味归脾汤治疗失眠43例临床观察

随着社会竞争日益激烈,工作压力增大,生活行为方式的改变,失眠的发病率越来越高,并且患者有年轻化的趋势.1998年以来,我们试用自拟加味归脾汤治疗失眠,取得了较好的疗效.     

四君子汤修复脾虚大鼠线粒体细胞色素氧化酶的作用及机制

目的：运用灌服耗气破气中药联合饥饱失节复合因素建立脾虚大鼠模型，观察四君子汤对脾虚大鼠线粒体细胞色素含量及其氧化酶活性的影响。方法：实验于2004-04／2005-02在广州中医药大学第一附属医院内科实验室和广州中医药大学基础医学实验室完成。①选取清洁级1月龄SD大鼠40只，随机数字表法分成4组：正常组、脾虚模型组、自然复健组、四君子汤治疗组，10只／组。②除正常组以普通饲料进行常规喂养外，其余3组均建立脾虚模型。脾虚模型组隔日喂食，并以小承气汤（厚朴、枳实、大黄比例为3：3：2，制成100％水煎剂）灌胃，每次3mL／只．隔日1次，共30周。自然复健组前26周同脾虚模型组，后4周同正常组。四君子汤治疗组前26周同脾虚模型组，后4周以四君子汤（党参、白术、茯苓、甘草按1：1：1：1制成100％水煎剂）灌胃，每次4mL／只。③检测各组大鼠骨骼肌、心肌、肝脏、胃黏膜4种不同组织线粒体细胞色素a，b，c，c1含量及细胞色素氧化酶水平，提取线粒体DNA，进行细胞色素氧化酶亚基COXⅠa, COXⅡ和COXⅢ序列分析。结果：40只SD大鼠全部进入结果分析。①不同组织线粒体各种细胞色素含量检测结果：实验第30周，脾虚模型组骨骼肌、心肌、肝脏、胃黏膜部位的线粒体细胞色素a，b，c，c1均显著低于正常组（P〈0．05）；自然复健组均有所升高，接近正常组（P〉0．05）；四君子汤治疗组显著升高，超过正常组水平（P〈0．05）。②不同组织线粒体细胞色素氧化酶含量检测结果：四君子汤治疗组骨骼肌、心肌、肝脏、胃黏膜部位的细胞色素氧化酶含量均高于脾虚模型组、自然复健组（P〈0．01或0．05），与正常组基本相似（P〉0．05）。③线粒体细胞色素氧化酶基因序列分析：脾虚模型组和自然复健组COXⅠa, COXⅡ，COXⅢ存在突变现象，正常组和四君子汤组未见COX亚基突变。结论：四君子汤能够修复脾虚所导致的mtDNA编码COX亚基损伤，提高细胞色素含量及其氧化酶的活性。     

四君子汤修复脾虚大鼠线粒体细胞色素氧化酶的作用及机制

目的:运用灌服耗气破气中药联合饥饱失节复合因素建立脾虚大鼠模型,观察四君子汤对脾虚大鼠线粒体细胞色素含量及其氧化酶活性的影响。方法:实验于2004-04/2005-02在广州中医药大学第一附属医院内科实验室和广州中医药大学基础医学实验室完成。①选取清洁级1月龄SD大鼠40只,随机数字表法分成4组:正常组、脾虚模型组、自然复健组、四君子汤治疗组,10只/组。②除正常组以普通饲料进行常规喂养外,其余3组均建立脾虚模型。脾虚模型组隔日喂食,并以小承气汤(厚朴、枳实、大黄比例为3∶3∶2,制成100%水煎剂)灌胃,每次3mL/只,隔日1次,共30周。自然复健组前26周同脾虚模型组,后4周同正常组。四君子汤治疗组前26周同脾虚模型组,后4周以四君子汤(党参、白术、茯苓、甘草按1∶1∶1∶1制成100%水煎剂)灌胃,每次4mL/只。③检测各组大鼠骨骼肌、心肌、肝脏、胃黏膜4种不同组织线粒体细胞色素a,b,c,c1含量及细胞色素氧化酶水平,提取线粒体DNA,进行细胞色素氧化酶亚基COXⅠ、COXⅡ和COXⅢ序列分析。结果:40只SD大鼠全部进入结果分析。①不同组织线粒体各种细胞色素含量检测结果:实验第30周,脾虚模型组骨骼肌、心肌、肝脏、胃黏膜部位的线粒体细胞色素a,b,c,c1均显著低于正常组(P<0.05);自然复健组均有所升高,接近正常组(P>0.05);四君子汤治疗组显著升高,超过正常组水平(P<0.05)。②不同组织线粒体细胞色素氧化酶含量检测结果:四君子汤治疗组骨骼肌、心肌、肝脏、胃黏膜部位的细胞色素氧化酶含量均高于脾虚模型组、自然复健组(P<0.01或0.05),与正常组基本相似(P>0.05)。③线粒体细胞色素氧化酶基因序列分析:脾虚模型组和自然复健组COXⅠa,COXⅡ,COXⅢ存在突变现象,正常组和四君子汤组未见COX亚基突变。结论:四君子汤能够修复脾虚所导致的mtDNA编码COX亚基损伤,提高细胞色素含量及其氧化酶的活性。     

补中益气汤调节脾虚大鼠胃壁细胞胃泌素受体的相关健脾机制

胃泌素通过胃泌素受体介导,刺激胃酸的分泌,又维持胃黏膜的完整性.胃泌素与脾虚的关系密切,脾虚病理过程中胃泌素水平处于紊乱状态.本研究观察到脾虚大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合位点数下降而受体亲和力升高;与胃黏膜保护机制相关的一氧化氮在胃黏膜中含量下降;经五肽胃泌素腹腔注射刺激后的胃酸分泌反应性显著升高.经益气健脾复方补中益气汤治疗后,以上紊乱状态均获得一定程度的恢复.另证明体外补中益气汤含药血清给药能与胃泌素受体竞争性结合.总之,文章阐明了补中益气汤的健脾机制与调节胃泌素相关.     

四君子汤对脾虚大鼠肝、心肌、胃黏膜和骨骼肌细胞线粒体损伤的修复作用

背景:脾与线粒体具有相关性,中医脾主运化不仅仅是指食物在胃肠的消化吸收,更重要的是线粒体的生物氧化产能过程。目的:分析经典健脾益气方剂四君子汤对脾虚大鼠肝、心肌、胃黏膜和骨骼肌细胞线粒体损伤的修复作用。设计:随机对照观察。单位:广州中医药大学第一附属医院二内科和广州中医药大学。材料:实验于2004-06/12在广州中医药大学第一附属医院内科实验室和广州中医药大学测试中心完成。选择SD大鼠40只,由广州中医药大学动物中心提供。小承气汤由厚朴、枳实、大黄(比例3∶3∶2)组成;四君子汤由党参、白术、茯苓、甘草(比例2∶2∶2∶1)组成,均由广州中医药大学第一附属医院药剂科提供,并由该院制剂室制成100%煎剂。方法:大鼠饲养1周后按随机数字表法分成4组,即正常对照组、脾虚模型组、自然复健组和四君子汤组。除正常对照组外,其余3组均制作大鼠长期脾虚模型。①正常对照组大鼠常规喂养,生理盐水3mL/(次·只)灌胃,隔日1次,共34周。②脾虚模型组大鼠小承气汤3mL/(次·只)灌胃,隔日1次,同时隔日喂食,共34周。③自然复健组喂养方法前26周同脾虚模型组,26周后改为常规饲养,共34周。④四君子汤组喂养方法前26周同脾虚模型组;26周后改为常规饲养,同时用四君子汤灌胃8周,4mL/(次·只),1次/d。于实验34周末麻醉断头处死大鼠后,迅速取出骨骼肌、肝脏、胃黏膜、心肌组织,用双缩脲法测定线粒体悬液的蛋白量,并根据组织质量计算出每克组织的线粒体含量;应用透射电镜观察线粒体形态。主要观察指标:各组大鼠的骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织线粒体含量及超微形态。结果:40只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①实验34周末各组大鼠骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织线粒体含量比较:脾虚模型组大鼠各组织线粒体含量均显著低于正常对照组(P<0.01);自然复健组显著高于脾虚模型组(P<0.05～0.01);四君子汤组大鼠各组织线粒体含量最高,除显著高于脾虚模型组和自然复健组外(P<0.05～0.01),并显著高于正常对照组(P<0.01)。②实验34周末各组大鼠骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织线粒体形态比较:脾虚模型组大鼠心肌细胞线粒体高度肿胀;肝细胞线粒体致密质粒减少或消失,嵴断裂;骨骼肌细胞线粒体数量减少,线粒体变小,线粒体膜结构破坏;胃壁细胞线粒体减少,线粒体内部结构不清,胃主细胞线粒体峭断裂。自然复健组大鼠各组织的线粒体形态改变较轻,四君子汤组与正常对照组接近。结论:四君子汤具有提高脾虚大鼠骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织细胞线粒体含量,修复线粒体损伤的作用。     

四君子汤对脾虚大鼠肝、心肌、胃黏膜和骨骼肌细胞线粒体损伤的修复作用

背景：脾与线粒体具有相关性，中医脾主运化不仅仅是指食物在胃肠的消化吸收，更重要的是线粒体的生物氧化产能过程。 目的：分析经典健脾益气方剂四君子汤对脾虚大鼠肝、心肌、胃黏膜和骨骼肌细胞线粒体损伤的修复作用。 设计：随机对照观察。 单位：广州中医药大学第一附属医院二内科和广州中医药大学。 材料：实验于2004—06／12在广州中医药大学第一附属医院内科实验室和广州中医药大学测试中心完成。选择SD大鼠40只，由广州中医药大学动物中心提供。小承气汤由厚朴、枳实、大黄（比例3：3：2）组成；四君子汤由党参、白术、茯苓、甘草（比例2：2：2：1）组成，均由广州中医药大学第一附属医院药剂科提供，并由该院制剂室制成100％煎剂。 方法：大鼠饲养1周后按随机数字表法分成4组，即正常对照组、脾虚模型组、自然复健组和四君子汤组。除正常对照组外，其余3组均制作大鼠长期脾虚模型。 ①正常对照组大鼠常规喂养，生理盐水3mL／（次&;#183;只）灌胃，隔日1次，共34周。②脾虚模型组大鼠小承气汤3mL／（次&;#183;只）灌胃，隔日1次，同时隔日喂食，共34周。③自然复健组喂养方法前26周同脾虚模型组，26周后改为常规饲养，共34周。④四君子汤组喂养方法前26周同脾虚模型组；26周后改为常规饲养，同时用四君子汤灌胃8周，4mL／（次&;#183;只），1次／d。于实验34周末麻醉断头处死大鼠后，迅速取出骨骼肌、肝脏、胃黏膜、心肌组织，用双缩脲法测定线粒体悬液的蛋白量，并根据组织质量计算出每克组织的线粒体含量；应用透射电镜观察线粒体形态。 主要观察指标：各组大鼠的骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织线粒体含量及超微形态。 结果：40只大鼠全部进入结果分析，无脱失。（里）实验34周末各组大鼠骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织线粒体含量比较：脾虚模型组大鼠各组织线粒体含量均显著低于正常对照组（P＜0．01）；自然复健组显著高于脾虚模型组（P＜0．05～0．01）；四君子汤组大鼠各组织线粒体含量最高，除显著高于脾虚模型组和自然复健组外（P＜0．05～0．01），并显著高于正常对照组（P＜0．01）。②实验34周末各组大鼠骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织线粒体形态比较：脾虚模型组大鼠心肌细胞线粒体高度肿胀；肝细胞线粒体致密质粒减少或消失，嵴断裂；骨骼肌细胞线粒体数量减少，线粒体变小，线粒体膜结构破坏；胃壁细胞线粒体减少，线粒体内部结构不清，胃主细胞线粒体峭断裂。自然复健组大鼠各组织的线粒体形态改变较轻，四君子汤组与正常对照组接近。 结论：四君子汤具有提高脾虚大鼠骨骼肌、肝、心肌、胃黏膜组织细胞线粒体含量，修复线粒体损伤的作用。     

参七汤对大鼠缺血心肌内皮素基因表达的影响

目的:研究参七汤对心肌缺血大鼠心肌内皮素影响的分子机制。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、缺血组和参七汤组,利用垂体后叶素造模,分别测定各组心肌内皮素浓度及内皮素-1基因的表达。结果:参七汤组心肌内皮素浓度明显低于缺血组(2.28±0.50,6.87±1.70,P<0.01)。免疫组化显示缺血组心肌内皮素-1染色灰度值明显低于参七汤组(心房肌:167.63±4.28,182.75±7.74,P<0.01;心室肌:154.38±4.05,182.97±2.14,P<0.05)。结论:参七汤可显著降低缺血心肌内皮素浓度,可能是参七汤所代表的益气补元活血法能有效抑制缺血心肌内皮素-1基因的表达及蛋白合成。     

补肾方对肾虚型大鼠膝骨关节炎软骨病变基因表达谱的影响

背景:遗传学研究表明骨关节炎属于多基因、多因子遗传病.目的:从补肾中药作用后的基冈表达谱角度探讨补肾中药治疗肾虚型骨关节炎的靶向作用和分子机制.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-09/2006-03在广州中医药大学实验中心完成.材料:4月龄末孕清洁级健康雌性SD大鼠14只,体质量(220±20)g,随机不等分为切卵巢模型组6只,未切卵巢模型组4只,中药组4只.补肾方由补骨脂、骨碎补、牛膝,当归、熟地、木瓜、茯苓、白术、防风、炙甘草等10味中药组成,其提取物,按照人与大鼠体表面积折算,含牛药量837.7 g/L,由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供.方法:除未切卵巢模型组外,其余各组大鼠切除双侧卵巢.所有大鼠均切断有膝前后交叉韧带、内侧副韧带,建立肾虚型膝骨关节炎模型.术后1个半月,中药组按6 mL/kg灌中药,未切卵巢模型组灌同体积生理盐水,1次/d.切卵巢模型组大鼠分别于术后2,4,6周各取2只取血,用于确定肾虚型骨关节炎造模成功.术后18周未切卵巢模型组和中药组大鼠,取右侧膝关节股骨和胫骨干骺端的软骨组织行基因芯片检测.主要观察指标:采用基因芯片技术检测补肾中药作用后的.肾虚型骨关节炎关节软骨的基因表达.结果:补肾方治疗肾虚型骨关节炎有显著差异表达的基因有52个,其中上调的有25个,下调的有27个.结论:补肾中药能上调软骨细胞抗凋亡和增殖基因,抑制蛋白酶基因,抑制炎性因子,增强机体免疫功能,重建衰老免疫稳态,重塑基因表达良性平衡,延缓软骨退行性变.     

局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43表达与滋补肝肾中药的干预效应

目的:观察局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43表达与滋补肝肾中药合剂干预效果的关系。方法:实验于2004-06/2005-06在山东大学医学院药理实验室、山东中医药大学中西医结合肿瘤防治中心实验室完成。雄性Wistar大鼠49只按随机数字表法随机分为假手术组、模型组(分设1,2,3周时间点)、中药组(分设1,2,3周时间点),每组7只。模型组与中药组进行右侧近端大脑中动脉电凝术造成大鼠局灶性脑缺血模型,假手术组行同样开颅术,但不凝闭大脑中动脉,其余操作同模型组。于造模成功后第6天起中药组灌胃给予滋补肝肾中药复方,剂量为9g/(kg·d),余2组分别灌胃给予同等量生理盐水,1次/d。假手术组大鼠于术后1周时麻醉下断头处死,模型组与中药组分别于给药1,2,3周时处死,取材后用免疫组化法观察局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白的表达。结果:纳入大鼠49只,造模不成功或死亡14只,最后每组5只共35只大鼠进入结果分析。模型组生长相关蛋白阳性信号密度值在给药1周、2周及3周组与假手术组比较差异均无显著性意义[(15.7±1.4)%,(15.3±1.3)%,(15.4±1.1)%,(15.1±1.3)%,P>0.05];中药组在治疗1周后生长相关蛋白阳性信号密度值较假手术组及模型组差异尚无显著性,但2周及3周组表达显著增强,与模型组和假手术组比较,差异有显著性意义[(23.4±1.3)%,(24.1±1.4)%,P<0.01]。结论:滋补肝肾中药复健片能增强局灶性脑缺血大鼠脑内生长相关蛋白43的表达,从而促进缺血性脑卒中后的神经功能重塑。     

健脾益肾方联用中药灌肠对改善慢性肾衰竭患者免疫功能的效果观察

目的:观察健脾益肾方联合中药灌肠对改善慢性肾衰竭患者免疫功能的效果。方法:将65例慢性肾衰竭患者随机分为两组,治疗组33例给予健脾益肾方和中药灌肠;对照组32例仅予中药灌肠。治疗前后检查患者肾功能三项、血红蛋白、免疫球蛋白IgA、IgG、IgM及血清补体C3、C4水平,并观察食欲、睡眠及二便情况等。结果:健脾益肾方与中药灌肠联用能更显著地降低肾功能三项,提升血红蛋白、血清补体C3及免疫球蛋白IgG、IgM水平,两组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:健脾益肾方与中药灌肠联用能明显改善慢性肾衰竭患者的临床症状,保护肾功能,调节其免疫功能状态,从而治疗及延缓肾衰竭。