重组人粒细胞集落刺激因子在甲巯咪唑所致粒细胞缺乏症中的治疗作用探讨

对６例甲巯咪唑所致粒细胞缺乏症用ｒｈＧ－ＣＳＦ和抗生素等治疗，并与另６例非ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗组比较，结果发现：ｒｈＧ－ＣＳＦ组未出现阶血症，粒细胞恢复时间平均为６．８±３．９天，明显短于非ｒｈＧ－ＣＳＦ组（１２．２±５．８天）。提示ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗可促进粒细胞恢复，缩短病程，从而减少机体合并感染的机会，改善预后。     

粒单核细胞集落刺激因子在骨髓移植中的应用

报告异基因骨髓移植（ａｌｌｏ－ＢＭＴ）后接受重组人粒单核细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）的患者２５例。ｒｈＧＭ－ＣＳＦ自骨髓移植后第６天开始静脉持续点滴，用量５μｇ／（ｋｇ·ｄ）连用２０天或用至连续３天粒细胞＞１．０×１０￣９／Ｌ或白细胞＞２．０×１０￣９／Ｌ为止。结果：粒细胞升至０．５×１０￣９／Ｌ及１．０×１０￣９／Ｌ的时间，试用组平均为１７．７天及２０．９天；对照组为２２．８天及２９．８天（Ｐ均＜０．００１）。白细胞升至＞１．０×１０￣９／Ｌ及２．０×１０￣９／Ｌ的时间，试用组平均为１８．３天及２３．０天；对照组平均为２３．８天及３３．３天（Ｐ＜０．００１及０．００５）。两组血小板的回升及输血小板次数均无显著差异。结论是ａｌｌｏ－ＢＭＴ后应用ＧＭＣＳＦ有明显促进白细胞（包括粒细胞）的恢复作用。     

重组人粒细胞集落刺激因子在甲巯咪唑所致粒细胞缺乏症中的治疗作用…

对６例甲巯咪唑所致粒细胞缺乏应用ｒｈＧ－ＣＳＦ和抗生素等治疗，并与另６例排ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗组比较，结果发现：ｒｈＧ－ＣＳＦ组未出现败血症，粒细胞恢复时间平均为６．８±３．９天，明显短于非ｒｈＧ－ＣＳＦ组。提示ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗可促进粒细胞恢复，缩短病程，从而减少机体合并感染的机会，改善预后。     

外周血干细胞的动员和采集及移植后造血重建研究

对２４例外周血干细胞（ＰＢＳＣ）移植的三种动员方案、采集及移植后的ＰＢＳＣ数量与造血重建关系进行研究。２４例中急性白血病１３例，多发性骨髓瘤６例，非霍奇金淋巴瘤４例，晚期乳癌１例。三组动员方案：化疗＋四氢叶酸＋氟美松；化疗＋ｒｈＧＭ－ＣＳＦ＋氟美松；化疗＋ｒｈＧ－ＣＳＦ＋氟美松。用流式细胞仪双染色直接免疫荧光法测定ｒｈＧ－ＣＳＦ组中９例ＣＤ３４＋ＣＤ３３＋细胞。结果表明：ｒｈＧ－ＣＳＦ组ＰＢＳＣ产率最高，平均每例单个核细胞（９．８６±６．０１）×１０８／ｋｇ，ＣＦＵ－ＧＭ（２１．０８±１６．８６）×１０４／ｋｇ，ＣＤ３４＋细胞数与ＣＦＵ－ＧＭ正相关（ｒ＝０．６８）。动员后再用ｒｈＧ－ＣＳＦ１周，ＣＤ３４＋细胞显著增多，可连续每日采集，当≥５×１０６／ｋｇ即可停止；采集与回输的ＰＢＳＣ数与造血重建时间密切相关。     

急性髓细胞白血病细胞GM－CSF受体与增殖效应的研究

应用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ法标记重组人粒－巨集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ），并以此检测了髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞受体，发现该类细胞膜表面有高低两种亲和力不同的ＧＭ－ＣＳＦ受体，前者缔和常数（ｋｄ＿１）为１２～７１ｐｍｏｌ／Ｌ，受体数为１７４～６０２／ｃｅｌｌ；后者缔和常数（ｋｄ＿２）为０．５～２．７ｎｍｏｌ／Ｌ，受体数为１１３７～６０２０／ｃｅｌｌ。分子量分别为１５００００，１１５０００和９５０００，推测１５００００带为高亲和力受体带，１１５０００和９５０００带为低亲和力受体带。观察了ｒｈＧＭ－ＣＳＦ对２４例ＡＭＬ患者白血病细胞体外原代培养的影响及１６例膜表面受体数与增殖效应的相关性研究，发现８例体外原代培养中ｒｈＧＭ－ＣＳＦ加入与否没有或极少有集落形成，但ｒｈＧＭ－ｃｓＦ促使１４例白血病细胞体外增殖，集落数增加，增殖效应与细胞表面ＧＭ－ＣＳＦ受体数无相关性。     

造血生长因子对脐血CD34^＋细胞的体外扩增作用

为探讨造血生长因子不同组合方式对脐血ＣＤ３４＋细胞的扩增作用、扩增细胞性能改变及合理的扩增时机，利用吸附单克隆抗体——磁珠分离系统分选出９５％～９９％纯度的脐血ＣＤ３４＋细胞，在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）３、ＩＬ－６、粒－巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的不同组合扩增１～３周。结果表明，脐血ＣＤ３４＋细胞具有良好的扩增效应，细胞总数、集落形成细胞（ＣＦＣｓ）和ＣＤ３４＋细胞可分别扩增５００．０±８２．５倍、９４．０±２８．６倍和２４．０±３．８倍；ＳＣＦ是扩增最重要的生长因子，ＳＣＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋Ｇ－ＣＳＦ＋Ｅｐｏ组合的扩增效率最高；ＣＦＣｓ和ＣＤ３４＋细胞在１～２周维持在较高水平，以后即快速衰减；此外，扩增也加速了细胞的分化，至第３周时９３％ＣＦＣｓ为ＣＦＵ－ＧＭ，极少部分形成ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＥＭＭ。因此，合理组合生长因子，把握适宜扩增时机，将有助于扩增细胞在质和量上满足移植和基因治疗等的要求。     

不同造血生长因子对脐血有核细胞体外扩增作用的实验研究

目的：探讨造血生长因子不同组合方式对脐血有核细胞的扩增作用以及脐血扩增后Ｔ淋巴细胞和ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞变化情况。方法：在脐血有核细胞体外培养体系中分别加入不同组合的细胞因子，观察细胞数、ＣＤ３４＋细胞、ＣＦＵ－ＧＭ、Ｔ４（ＣＤ４＋ＣＤ８－ＣＤ３＋）细胞、Ｔ８（ＣＤ４－ＣＤ８＋ＣＤ３＋）细胞以及ＨＬＡ－ＡＢ、ＤＲ阳性细胞的变化。结果：脐血有核细胞在体外液体培养体系中，经重组人干细胞因子（ｒｈＳＣＦ）、白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）和红细胞生成素（Ｅｐｏ）的作用下扩增效果最佳。结论：脐血有核细胞在各种造血生长因子的协同作用下可以在体外扩增。脐血扩增后Ｔ４、Ｔ８细胞减少，可能会降低脐血移植急性ＧＶＨＤ发生，但ＨＬＡ－ＡＢ和ＨＬＡ－ＤＲ阳性细胞数急剧上升，增加了免疫排斥的可能性。     

FLT3配基—FL研究进展

ＦＬＴ３配基（ＦＬ）是一种新近发现的与造血调控密切相关的细胞因子。在体外单独ＦＬ对造血的调控作用有限，但ＦＬ可与ＩＬ－３，Ｇ－ＣＳＦ，ＣＳＦ－１，ＧＭ－ＣＳＦ，ＳＣＦ及ＩＬ－６协同促进骨髓及脐血ＣＤ３４＾＋细胞形成粒－巨噬细胞集落，粒细胞集落或巨噬细胞集落；可与ＳＣＦ，ＩＬ－７或ＩＬ－１１协同促进Ｂ淋巴祖细胞的增殖与分化。ＦＬ有望用作造血干祖细胞体外扩增的辅助因子，在临床上用作造血细胞动员剂、免疫     

某些细胞因子在骨髓移植中的应用

某些细胞因子在骨髓移植中的应用汪月增迄今已发现并克隆了２０多种细胞因子，它们在体内构成复杂的免疫网络，参与多种生理及病理过程。在骨髓移植中应用较多的有重组的粒／巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）、粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和巨噬细胞集落刺...     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在早期判断糖尿病大血管病变的临床意义

采用放射免疫法测定了２１例健康人（Ａ组），６０例非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者（Ｂ组），１９例无糖尿病的冠心病患者（Ｃ组）的血浆粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）。Ｂ组中按是否合并冠心病再分为三组：糖尿病不合并冠心病（１６例，Ｂ１组）；糖尿病合并可疑冠心病（１８例，Ｂ２组）；糖尿病合并冠心（２６例，Ｂ３组）。Ｃ组又分成两组：冠心病组（１１组，Ｃ１组）和可疑冠心病（８例，Ｃ２组）组。结果显示：Ｂ组ＧＭ－ＣＳＦ较Ａ组明显升高，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）；糖尿病组中，Ｂ３组较Ｂ２组和Ｂ１组明显升高，三组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０１、Ｐ＜０．０５）；Ｃ组中，Ｃ１组与Ｃ２组差异无显著性，但较Ａ组明显升高（Ｐ＜０．０５）。提示血浆ＧＭ－ＣＳＦ的改变与血管病变成正相关，尤其是糖尿病时更明显；ＧＭ－ＣＳＦ的测定将可能成为预测糖尿病大血管病变存在的一项指标。     

急性髓细胞白血病细胞GM—CSF受体与增殖效应的研究

应用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ法标记重组人粒－巨集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ），并以此检测了髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞受体，发现该类细胞膜表面有高低两种亲和力不同的ＧＭ－ＣＳＦ受体，前蜊缔和常数（ｋｄ１）为１２～７１ｐｍｏｌ／Ｌ，受体数为１７４～６０２／ｃｅｌｌ；后缔和常数（ｋｄ２）为０．５～２．７ｎｍｏｌ／Ｌ，受体数为１１３７～６０２０／ｃｅｌｌ。分子量分别为１５００００，１１５０００和９５     

rhGM-CSF对放化疗后动物血象的影响

目的探讨重组人粒细胞／巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对放疗化疗后动物血象等的影响。方法利用家犬和小白鼠分别服用环磷酰胺和６０Ｃｏ照射制造的动物模型，测定注射ｒｈＧＭ－ＣＳＦ后动物白细胞、血小板、红细胞、血红蛋白、网织细胞、脾集落数、骨髓有核细胞、巨噬细胞及病理组织变化等。结果注射１２和２４μｇ／ｋｇ剂量的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ显著抑制家犬由环磷酰胺所致白细胞和血小板的减少；注射７５、１５０、３００μｇ／ｋｇ剂量ｒｈＧＭ－ＣＳＦ显著增加６０Ｃｏ照射后小鼠脾细胞集落、外周白细胞、骨髓有核细胞和巨噬细胞。结论ｒｈＧＭ－ＣＳＦ有明显抑制环磷酰胺及６０Ｃｏ照射所致白细胞减少的作用，且与进口升白能药效相似。     

环磷酰胺联合重组人粒细胞集落刺激因子动员自体外周血干细胞

目的：观察环磷酰胺（ＣＴＸ）联合重组人粒细胞集落刺激因子对自体外周血干细胞（ＡＰＢＳＣ）的动员效果。方法：ＣＴＸ３．７±０．２ｇ／ｍ＾２第１天静滴，白细胞（ＷＢＣ）降至最低点时开始皮下注射ｒｈＧ－ＣＳＦ４．５±０．６μｇ．ｋｇ＾－１．ｄ＾－１，直至采集结束前一天，ＷＢＣ恢复至２．５×１０＾９／Ｌ以上时开始连日采集ＡＰＢＳＣ，采集用ＣＳ３０００ｐｌｕｓ或Ｃｏｂｅ血细胞分离机，当累计采集的单个核细胞（     

慢性再生障碍性贫血患者血清粒细胞集落刺激因子水平的研究

目的：从粒系角度探讨再生障碍性贫血的发病机制与治疗。方法：通过自行制备抗ｒｈＧ－ＣＳＦ单克隆抗体，建立ＥＬＩＳＡ法，对５４例慢性再生障碍性贫血（ＣＡＡ）患者（男３１例，女２３例，平均年龄３６岁）进行血清Ｇ－ＣＳＦ测定与研究。结果：７０．４％ＣＡＡ患者血清Ｇ－ＣＳＦ水平升高（２７２．７６±５８．３９ｎｇ／Ｌ），其血清Ｇ－ＣＳＦ水平与白细胞计数呈负相关（ｒ＝－０．５３５，Ｐ＜０．０１），对其中的１２例患者进行了ＣＦＵ－ＧＭ的测定，结果ＣＦＵ－ＧＭ较正常对照明显降低（为１７．９２±１０．２８／２×１０５有核细胞）。结论：ＣＡＡ患者粒系造血祖细胞受损，Ｇ－ＣＳＦ靶细胞及靶细胞受体受损；部分患者白细胞降低Ｇ－ＣＳＦ并不升高，可能是由于微环境中内皮、成纤维细胞受损，或由于免疫缺陷产生某些因子抑制内皮、成纤维细胞的上调作用，因此对于这类患者的治疗除应用Ｇ－ＣＳＦ外，尚可应用免疫抑制剂及改善微环境的治疗。     

干细胞因子的研究进展

干细胞因子的研究进展柳柏林综述宋增璇审校近年来，细胞因子是科学研究的热点之一，而以参与造血调控的各种因子研究得最多也最深入。这些因子包括白细胞介素３（ＩＬ－３）和白细胞介素７（ＩＴ－７），粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ），粒系集落刺激因子（Ｃ...     

重组人单链白细胞介素12融合基因的构建、真核表达及生物学活性测定

目的 探讨用生物学技术获取具有生物学活性的重组人白细胞介素１２（ｒｈＩＬ－１２）的方法。方法 从经佛波醇酯（ＰＤＢｕ）刺激的ＥＢ病毒转化的人Ｂ淋巴母细胞株ＮＣ－３７中提取ｍＲＮＡ,经逆转录－聚合酶链反应分别获得ｈＩＬ－１２ｐ４０和ｐ３５亚单位编码序列的ｃＤＮＡ,运用重组聚合酶链反应技术。将两段基因通过多肽接头（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３ＤＮＡ序列连接后进行基因重组,构建了重组人单链ＩＬ－１２融合基因（ｒｈ－ｓｃＩＬ－１２）。进一步将ｒｈｓｃＩＬ－１２融合基因插入ｐｃＤＮＡ３．１（＋）真核表达载体中,构建ｒｈｓｃＩＬ－１２真核表达载体「ｐｃＤＮＡ３．１（＋）－ｒｈｓｃＩＬ－１２」,转染ＣＯＳ－７细胞,结果 经Ｇ４１８筛选获ＣＯＳ－ｒｈｓｃＩＬ－１２融合蛋白稳定表达株,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ显示该融合蛋白相对分子质量为７     

小鼠骨髓细胞体外扩增及其造血重建的研究

目的：观察干细胞因子（ＳＣＦ）与白细胞介素（ＩＬ）－１或ＩＬ－３联合对经５氟尿嘧啶（５ＦＵ）处理的骨髓细胞的体外扩增作用和体外扩增细胞移植的小鼠造血恢复能力。方法：在含有细胞因子的液体培养体系中培养５ＦＵ处理的骨髓细胞，观察粒－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）和高增殖潜能集落形成细胞（ＨＰＰ－ＣＦＣ）数量的增加以及移植扩增细胞的小鼠外周血细胞恢复。结果：单用ＳＣＦ无扩增作用，但ＳＣＦ与ＩＬ－１或ＩＬ－３联合时，与对照组相比较ＣＦＵ－ＧＭ分别增加３３．７±１８．１倍和１８．１±６．３倍。ＨＰＰ－ＣＦＣ分别扩增１７．８±１０．５倍和１２．７±９．１倍。移植体外扩增细胞组与对照组比较，外周血细胞恢复时间缩短１～３天，并且生存率也显著提高。结论：在液体培养体系中ＳＣＦ与ＩＬ－１或ＩＬ－３联合对造血细胞扩增有协同作用，并且体外扩增后的骨髓细胞能加速移植受体的早期造血重建。     

造血细胞生长因子治疗化疗后粒细胞减少的疗效观察

通过于１８例血液系统恶性肿瘤使用ｒｈＧ－ＣＳＦ或ｒｈＧＭ－ＣＳＦ，分析了集落刺激因子在治疗化疗后粒细胞减少中的作用，发现不单使化疗后患者的骨髓抑制时间缩短，外周血粒细胞恢复加快，化疗间隔时间缩短，且观察外周血ＡＮＣ增加的程度，对判断化疗后可能出现的粒细胞减少，感染的预防及决定一个化疗方案有较大帮助。     

脐血清GM-CSF、IL-3和IL-6水平检测及意义

目的：探讨脐血的造血支持作用及其作用机理,为脐血的临床应用提供理论依据。方法：采用固相ＥＬＩＳＡ法检测３４例脐血清和２０例成人血清的ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３和ＩＬ－６含量。结果：脐血清ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－３和ＩＬ－６含量分别为１９．１±１４．８、１９．２±１２．７和５７．５±２９．１ｐｇ／ｍｌ,成人血清ＧＭ－ＣＳＦ和ＩＬ－６未测出,ＩＬ－３含量为２．２±２．９ｐｇ／ｍｌ,差异均有极显著意义（Ｐ均＜０．００１）。结论：脐血含有丰富的造血生长因子,可用于再生障碍性贫血和化疗等原因引起的粒细胞减少的治疗。     

CD34+造血祖细胞的定向诱导分化研究

目的：探讨不同细胞因子组合定向诱导ＣＤ３４＋细胞向红系、粒系、巨核系及树突状细胞（ＤＣ）分化的能力。方法：利用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＋细胞，在液体培养体系中经不同细胞因子组合的诱导，检测各系祖细胞及ＤＣ的扩增倍数。结果：干细胞因子、白细胞介素（ＩＬ）３、ＩＬ６、粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）、粒细胞集落刺激因子、红细胞生成素、血小板生成素的不同组合，可使红系、粒系或巨核系细胞优势生长，其祖细胞可分别被扩增１４．９７±２．８９，１４．４６±３．１９及３４．６７±４．６２倍，ＣＤ４１ａ＋细胞增加了１７．２９±２．３４倍，ＦＬＴ３配基＋ＧＭＣＳＦ＋ＩＬ４＋肿瘤坏死因子α的组合可诱导ＣＤ３４＋细胞形成大量树突状细胞，ＣＤ１ａ＋细胞的比例增至２４．２８％±２．１４％（对照组为０．３６％±０．２８％）。结论：不同细胞因子组合可定向诱导ＣＤ３４＋细胞向红系、粒系、巨核系及树突状细胞分化，这在造血调控研究、造血细胞支持治疗及肿瘤免疫治疗中具有广阔的应用前景