干扰素治疗前丙肝患者血清及外周血单个核细胞中HCV—RNA的检测

本文采用ＲＴ－ＰＣＲ方法对２６例干扰素治疗前丙肝患者血清ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，并对１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性的标本进行外周血单个核细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测，发现２６例血清标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率为２６．９％，而１４例血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性标本，其ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ有３例阳性，阳性率为２１．１％。因此，ＰＢＭＣ中ＨＣＶ－ＲＮＡ是丙肝病毒血症的又一个诊断指标，是否可作为干扰素疗效判断的     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式［ＨＣ非编码区（５′ＮＣＲ）与ＮＳ５联合］ＰＣＲ技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献血员及３７例输血后丙型肝患者的血清ＨＣＶＲＮＡ。结果１０例抗ＨＣＶ阳性献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物及套式ＮＳ５－１＋ＮＳ５－４引物扩增时，其ＲＮＡ检出率分别为５／１０、６／１０、７／１０、８／１０和９／１０；而３７例输血后丙型肝炎患者中３５例ＲＮＡ阳性，检出率为９５％，其中１８例１ｂ型和１９例２ａ型样品的检出率分别为１００％和８９％。结论ＨＣＶＮＳ５区的ＲＮＡ检出率与引物的选择有关     

磁捕获RNA技术在丙型肝炎诊断中的应用

采用磁捕获ＲＮＡ技术，结合逆转录－多聚酶链反应检测１００例非甲非乙型肝炎患者血清中ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性５４例。同样病例用第二代ＥＬＩＳＡ试剂检测抗－ＨＣＶ阳性４０例。在６０例抗－ＨＣＶ阴性者，ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性率３８％。ＨＣＶ－ＲＮＡ和抗ＨＣＶ阳性共６３例，其中有血及血制品应用史者３９例。     

丙型肝炎病毒RNA非结构区套式聚合酶链反应

目的探讨不同引物对ＨＣＶＲＮＡ检出率的影响，建立敏感的ＮＳ５区基因扩增技术。方法选择不同引物，采用非结构５（ＮＳ５）区套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）及联合式「ＨＣＶ非编码区（５ＮＣＲ）与ＮＳ５联合」技术检测１０例抗ＨＣＶ阳性献赠及３７例输血后丙型肝炎患 血清ＨＣＸＶＲＮＡ。结果 １０例抗ＨＣＶ阳性一献血员应用联合式ＰＣＲ，以ＮＳ５－３＋ＮＳ５－４、ＳＦ２＋ＮＳ５－４、Ｋ１＋ＮＳ５－４、ＮＳ５－１＋ＮＳ     

HGV／GBV—C与HCV混合感染者肝组织中相关病毒表达的 …

了解ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ与ＨＣＶ混合感染者肝组织中ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ相关抗原的分布状况,探讨ＨＧＶ－ＧＢＶ－Ｃ对肝脏的损害机制,方法以抗ＨＧＶ／ＧＢＶ－Ｃ ＮＳ５单克隆抗体或抗ＨＣＶ ＮＳ３单克隆抗体为试剂,采用免疫组织化学方法检测肝炎病人肝组织中ＨＧＶ／ＧＶ、ＨＣＶ相关抗原表达。     

丙型肝炎患者抗HCV IgM、IgG及HCV RNA的检测

丙型肝炎患者抗ＨＣＶＩｇＭ、ＩｇＧ及ＨＣＶＲＮＡ的检测南通市传染病防治院（２２６００６）吴月平本文试用ＳＰＡ吸收结合免疫酶法检测丙肝患者血清中的ＩｇＭ抗体。经阻断试验和２－巯基乙醇耐性试验及与ＨＣＶＲＮＡ结果的相关性分析证明本法检出的抗体系丙肝特异性...     

丙型肝炎病毒基因分型研究

为了解青岛地区丙型肝炎病毒基因型分布以及ＨＣＶ－５；ＮＣ和ＨＣＶ－ＮＳ５ｂ两区域分型结果间的差异。本文对采１４７例各型佩肝患者和７例有偿供血者的１５４份ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性血清，同时进行了ＨＣＶ－５’ＮＣ和ＨＣＶ－ＮＳ５ｂ两个区域酶切分型研究。     

复合PCR检测乙型肝炎和丙型肝炎病毒

设计了ＨＢＶ和ＨＣＶ各一对引物，建立了复合ＰＣＲ，并对临床标本进行检测，５例ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体均阳性者，其ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０例单ＨＢｓＡｇ阳性标本，１１例单ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性，５例ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性；２０份单ＨＣＶ抗体阳性者，ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性，３例合并ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性；１０例慢性ＮＡＮＢ抗ＨＣＶ阴性肝炎标本８份ＨＣＶ－ＲＮＡ，１例ＨＢＶ－ＤＮＡ和     

血清丙型肝炎病毒核心抗原、ＮＳ３抗原的检测及临床意义

目的　为检测病人血清中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心抗原、ＮＳ３抗原井探讨其临床意义。方法　用基因工程表达的ＨＣＶ核心蛋白、ＮＳ３抗原制各其单克隆抗体，建立检测病人血清中ＨＣＶ核心抗原、ＮＳ３抗原的ＥＬＩＳＡ法。结果　６０例慢性丙型肝炎患；２５０例杭—ＨＣＶ—１８Ｇ阳性；３０例抗—ＨＣＶ—ＩｇＧ、ＩｇＭ均阳性；２００例透析病人；２０例白血病病人；１５０例普通病人中ＨＣＶ核心抗原、ＮＳ３抗原阳性检出率分别为：６．６％、８．４％、１６．７％、４％、５％、２％和１３．３％、１０．４％、２３．３％、３．０％、５．０％、２．６％。结论ＨＣＶ核心抗原、ＮＳ３抗原的检测，可作为现有检测方法的补充，能更好地反映患体内ＨＣＶ的活动情况。     

血透患者检测抗HCV IgM的临床意义

为探讨丙型肝炎ＩｇＭ抗体测定在血液透析患者中的临床意义,采秀间接ＥＬＩＳＡ法检测抗ＨＣＶ ＩｇＭ。同时采用ＥＬＩＳＡ测抗ＨＣＶ ＩｇＧ,ＲＴ－ＰＣＲ法测ＨＣＶ ＲＮＡ,并进行比较。结果示６２例血液透析病人中,抗ＨＣＶ ＩｇＭ阳性２７例（４３．６％）,抗ＨＣＶ ＩｇＧ阳性２９例（４６．８％）,ＨＣＶ ＲＮＡ阳性３４例（５４．８％）,任一项阳性３７例（５９．７％）;抗ＨＣＶ ＩｇＭ与ＨＣＶ ＲＮＡ检测     

应用双抗原夹心法检测抗－HCV抗体

目的建立检测抗－ＨＣＶ抗体的双抗原夹心酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）方法。方法用基因工程手段，在大肠杆菌中表达ＨＣＶ抗原表位与大肠杆菌噬菌体ＭＳ２ＤＮＡ聚合酶（ＭＳ２－Ｐｏｌ）的融合蛋白，纯化后作为包被抗原，可溶性表达的ＨＣＶ抗原表位与霍乱毒素Ｂ亚基（ＣＴＢ）的融合蛋白经辣根过氧化物酶标记后作为酶结合物，建立双抗原夹心ＥＬＩＳＡ。结果ＭＳ２－Ｐｏｌ融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达并进行了纯化，所建立的双抗原夹心ＥＬＩＳＡ系统用于检测１４份ＨＣＶ阳性血清样品，抗－ＨＣＶ抗体检出率１００％；检测２１份ＨＣＶ阴性血清，没有假阳性结果。ＣＴＢ抗体不干扰反应。结论双抗原夹心法与采用二抗的ＥＬＩＳＡ系统具有相近的灵敏度和更好的特异性。可以避免由于二抗干扰带来的非特异性。     

逆转录套式ＰＣＲ检测丙型肝炎病毒感染者ＨＣＶ ＲＮＡ

目的　探讨人血清和外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ与血清ＩｇＧ和ＩｇＭ抗体联合检测对丙型肝炎的诊断价值。方法对以ＥＬＩＳＡ方法检测所得的４６例ＨＣＶ—ＩｇＧ阳性的标本用逆转录套式聚合酶锭反应（ＲＴ—ＮｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测血清和ＰＢＭＣ中ＨＣＶＲＮＡ，同时用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ。结果血清中有１７例ＨＣＶ　ＲＮＡ阳性和６例ＨＣＶ—ＩｇＭ阳性，而ＰＢＭＣ中有１９例ＨＣＶＲＮＡ阳性。结论血清中ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为丙型肝炎的初筛诊断，ＨＣＶ—ＩｇＭ可作为ＨＣＶ近期感染的指标，但二者均不能准确反映病毒在体内的存在情况，而套式ＰＣＲ方法检测ＨＣＶＲＮＡ可直接反映ＨＣＶ在体内的活动情况，其中ＰＢＭＣ中检测ＨＣＶＲＮＡ的阳性率高于血清，提示ＨＣＶ可能在ＰＢＭＣ中潜伏乃至复制。     

逆转灵—套式聚合酶链反应检测丙型肝炎病毒RNA

采用逆转录－套式聚合酶链反应检测２８０例疑为ＨＣＶ感染的病人血清，并同时做抗－ＨＣＶ－ＩｇＧ检测。结果５１例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性，其中２６例抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阳性；在２５４例抗ＨＣＶ－ＩｇＧ阴性血清中有２５例ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性。     

不同血清学标志血清中HBV DNA和HCV RNA的分析研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测４８１例乙肝血清学五项指标至少一项阳性血清中ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ，结果显示ＨＢＶＤＮＡ的检出率为９１．５％，ＨＣＶＲＮＡ的检出率为１５．４％，并提示（１）当乙肝患者血清中抗ＨＢｅ阳性甚至抗ＨＢｓ阳性时，仍有相当部分的ＨＢＶ存在且仍在复制；（２）ＨＢＶ和ＨＣＶ感染可相互增加其易感性；ＨＢｓＡｇ阳性与否与抗ＨＣＶ可能有一定关系；（３）ＰＣＲ检测ＨＢＶＤＮＡ、ＨＣＶＲＮＡ具有较高的敏感性。     

逆转录聚合酶链反应检测血清中丙型肝炎病毒RNA

本文用本所自己合成的引物，对３０份怀疑ＨＣＶ感染血清进行ＨＣＶＲＮＡＲＴ－ＰＣＲ检测。该３０份血清中，２２份抗－ＨＣＶ阳性，其中１８份ＨＣＶＲＮＡ为阳性，８份抗－ＨＣＶ阴性血清及怀疑阳性血清中，２份ＨＶＣＲＮＡ为阳性。结果提示，抗－ＨＣＶ抗体试剂盒用于检测急性ＨＣＶ感染有其不足之处，结合ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ的方法可提高急性ＨＣＶ感染的检出率。     

血液病患者输血与庚型肝炎病毒感染的研究

目的：了解血液病患者输血后的庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染情况。方法：对６３例血液病患者采用ＲＴＰＣＲ方法检测ＨＧＶＲＮＡ、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ，应用ＥＬＩＳＡ方法检测抗ＨＧＶ、ＨＢｓＡｇ。结果：ＨＧＶＲＮＡ阳性率为７．９％，抗ＨＧＶ阳性率６．３％；ＨＣＶＲＮＡ阳性率为４６．０％。ＨＧＶ感染通常伴有ＨＣＶ感染及丙氨酸转氨酶升高。ＨＧＶ感染与输血量有关，与血液病种类无关。结论：血液病输血可引起ＨＣＶ、ＨＧＶ的传播     

乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞及血清内HBV－DNA的检测及其意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测急性和慢性乙肝患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＢＶ－ＤＮＡ，阳性率为６３．８％。其中，急肝患者阳性率为７８．６％；慢迁肝患者为５６．３％；慢活肝患者为５７．１％。ＰＢＭＣ中ＨＢＶ－ＤＮＡ与血清ＨＢＶ－ＤＮＡ和ｅ抗原有一致性，但ＨＢｅＡｇ阴性者中也有部分患者的ＰＢＭＣ中有ＨＢＶ－ＤＮＡ存在。本法消除了血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ和ＰＢＭＣ自身ＤＮＡ的干扰，并且与传统分子杂交方法相比，工作量大大减少。     

HCV感染基因型病毒复制程度与肝病关系的研究

采用限制性内切酶Ｓａｕ３Ａｌ和ＨａｅⅢ对５４例ＲＴ－ＰＣＲ法ＨＣＶＲＮＡ阳性的５＇ＮＣ区扩增产物进行酶切分型；ＰＣＲ滴定法半定量分析ＨＣＶＲＮＡ含量。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶⅠ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ、Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅠ、Ⅱ／Ⅲ、Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４），ＨＣＶⅡ型感染阳性率在ＡＨ、ＣＡＨ、ＬＣ三组间无显著差异（     

天津市3622例不同人群丙型肝炎病毒抗体检测结果分析

目的：了解丙型肝炎的流行病学情况。方法：采用ＥＬＩＳＡ法对天津市３６２２例不同人群进行丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）检测。结果：自然人群（１组）、普通患者（２组）、肝病患者（３组）抗－ＨＣＶ阳性率组间比较，均Ｐ〈０．０１，且随年龄增长有递增趋势。１、２、３组用血及血制品者抗－ＨＣＶ阳性率明显高于未用者，均Ｐ〈０．０１。在抗－ＨＣＶ阳性组和阴性组中，ＨＢｓＡｇ阳性率，１、２组Ｐ〉０．０５，３组Ｐ〈０     

丙型肝炎病毒不同区抗原酶免疫试剂研究

目的　探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ） 不同区抗原的反应性,为建立抗ＨＣＶ 酶免疫测定（ＥＩＡ） 确认试剂提供依据。方法　利用基因工程技术,重组所表达的ＨＣＶ 不同区抗原片段（ ＨＣＶＣ、ＮＳ３ 、ＮＳ４ 、ＮＳ５） ,建立了ＨＣＶ 单片段抗原ＥＩＡ 检测方法,检测了７４７ 份四川地区献血员血清。对其中３７３ 份血清,用２ 个厂生产的经批检合格的抗ＨＣＶＥＩＡ 试剂进行检测比较,对个别结果不符的样品进一步进行逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ ＰＣＲ） 分析。结果　献血员中抗ＨＣＶＣ 等４ 种抗体阳性检出率分别为４ ．６８ ％ （３５／７４７） 、５ ．２ ％ （３９／７４７） 、１ ．１ ％ （８／７４７） 、１ ．２ ％ （９／７４７） ,２ 家试剂阳性检出率均为４ ％（１５／３７３） 。结论　ＨＣＶ 不同区抗原片段的抗体检出率差异较大,ＮＳ３ 检出率最高,其次为Ｃ 区、ＮＳ５ 、ＮＳ４ 。说明抗ＨＣＶＥＩＡ 检测试剂以ＨＣＶ ＮＳ３ 区和Ｃ 区为主要抗原片段。