瑞芬太尼改善异氟醚致新生大鼠神经毒性的机制

 目的  研究瑞芬太尼对异氟醚引起的新生大鼠海马神经毒性急性期和远期影响及其可能机制。方法  将出生7天的大鼠随机分成4组:对照组(Sham组)、异氟醚组(Iso组)、异氟醚+切开组(Iso+I组)及异氟醚+切开+瑞芬太尼组(Ref组),采用每天2 h连续3天的处理方式模拟临床多次麻醉暴露。在第3天麻醉结束后6 h取新鲜海马组织用Western blot检测NF-κB p65蛋白入核的比例,q-RT-PCR检测炎症因子IL-1β、IL-6和 TNF-α的mRNA的相对表达量;灌注取脑后用免疫荧光计数离子钙接头蛋白抗原分子-1 (ionized calcium binding adaptor molecule 1,IBA1)阳性细胞数量。大鼠在出生后的第65天进行被动回避实验,观察其学习与记忆能力。结果   与Sham组相比,Iso组和Iso+Ⅰ组NF-κB p65蛋白入核的比例显著增加,IL-1β与TNF-α的mRNA的表达量上调,而且这种神经毒性在幼鼠成年后表现为学习与记忆障碍,然而瑞芬太尼显著改善由异氟醚多次暴露所致的神经炎症反应及学习记忆障碍。结论   瑞芬太尼改善异氟醚致新生大鼠神经炎症反应,可能通过NF-κB p65通路发挥作用。     

一氧化氮与地塞米松对内毒素肺损伤治疗作用的比较

目的比较一氧化氮(NO)与地塞米松(Dex)对内毒素所致大鼠肺损伤的治疗作用及机制。方法将30只大鼠随机分成对照组、内毒素(LPS)组、Dex组、NO组、Dex NO组,每组6只。通过LPS静脉注射制备大鼠肺损伤模型,观察不同干预方式(Dex腹腔注射和/或NO吸入)对肺损伤的治疗作用。结果LPS组大鼠肺组织出现水肿、出血,大量炎症细胞浸润及弥漫性肺泡塌陷,支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)及IL-8水平显著升高,肺组织中核因子κB(NF-κB)核阳性表达细胞增多,糖皮质激素受体(GR)核阳性细胞表达下降,与对照组比较有显著差异(P均<0.05)。予以Dex腹腔注射或/和NO吸入干预后,大鼠肺组织肺泡水肿、炎症细胞浸润及出血均不同程度减轻;BALF中TNF-α、IL-1β及IL-8水平较LPS组降低(P均<0.05);肺组织中NF-κB核阳性表达细胞减少,与LPS组比较有显著差异(P<0.05);干预组肺组织GR核阳性细胞较LPS组明显增多(P<0.01),其中NO组肺组织GR阳性表达高于Dex组(P<0.05)。结论NO及Dex能有效减轻LPS所致的肺部炎症反应,NO还能提高肺损伤时肺组织内GR的表达,增强糖皮质激素的抗炎效果。     

不同浓度异氟醚长时间吸入致妊娠中期胎鼠大脑异常凋亡

目的:模拟妊娠中期妇女非产科手术的临床麻醉,对妊娠第14天母鼠进行长时间吸入异氟醚麻醉,观察不同浓度的异氟醚对其胎鼠大脑的影响。方法:选取50只SD雌性大鼠,定时受孕至妊娠第14天,随机分为5组:Iso1.0组、Iso1.5组、Iso2.0组,Oxy组和Control组,每组10只。各组母鼠分别吸入不同浓度异氟醚及100%氧气混合气体4 h,Control组不作任何处置。吸入气体结束4 h后行剖宫取胎术。每只母鼠随机选择2只胎鼠,取其大脑组织切片。TUNEL法检测胎鼠神经细胞凋亡量,计算凋亡细胞数与总细胞数的比率。结果:各组胎鼠大脑凋亡细胞比率存在显著性差异(P<0.05)。与Control组比较,吸入异氟醚的各组,即Iso1.0组、Iso1.5组和Iso2.0组,凋亡细胞比率均呈升高(P<0.05);Oxy组与Control组相似(P>0.05)。Iso1.5组与Iso2.0组相似(P>0.05);Iso1.0组显著低于Iso1.5组及Iso2.0组(P<0.05)。结论:妊娠第14天母鼠持续吸入异氟醚4 h可致胎鼠大脑神经元凋亡显著增加;异氟醚致胎鼠大脑神经元凋亡增加可能存在剂量依赖性。     

异氟醚后处理对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠远期认知功能及脑组织IGF-1、BDNF、NGF表达水平的影响

目的研究异氟醚后处理对缺血缺氧性脑损伤新生大鼠远期认知功能及脑组织胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)的影响,探讨异氟醚后处理对新生大鼠缺血缺氧脑损伤的保护作用及作用机制。方法 125只新生7 d的SD大鼠,随机分为假手术组、模型组(HIBD组)、1%异氟醚组(Iso1组)、2%异氟醚组(Iso2组)、3%异氟醚组(Iso3组),每组25只,各组大鼠均麻醉后切开颈部皮肤,假手术组找到左侧颈总动脉不结扎,其他各组均结扎。除假手术组,其他各组大鼠均持续吸入8%O2和92%N2的低氧气体2 h,制备新生大鼠缺血缺氧脑损伤模型。手术结束后,Iso1、Iso2、Iso3组分别于半密闭容器中吸入1%、2%、3%异氟醚,假手术组与模型组吸入30%O2及70%N2混合气体,吸入时间均为1 h,造模后第20天开始对各组大鼠进行Morris水迷宫定位航行试验,记录各大鼠的逃避潜伏期、总路程及空间探索力,连续5 d,对第5天的试验数据作为认知功能结果进行对比;水迷宫试验结束后,处死大鼠,取海马组织,镜下观察大鼠海马CA3区左、右侧组织神经元密度;RT-PCR法检测大鼠海马体中IGF-1、BDNF、NGF的mRNA表达情况。结果与假手术组对比,HIBD组大鼠逃避潜伏期、总路程显著延长,空间探索力下降,差异均有统计学意义(P0.05)。与HIBD组对比,Iso1、Iso2、Iso3组逃避潜伏期、总路程显著下降,空间探索力提高,Iso2、Iso3组变化更加显著,差异有统计学意义(P0.05)。HIBD组大鼠海马体组织中神经密度下降,Iso1、Iso2、Iso3组较HIBD组有所改善。HIBD组大鼠海马体中IGF-1、BDNF、NGF表达较假手术组升高,Iso1、Iso2、Iso3组海马体中IGF-1、BDNF、NGF表达较HIBD组提高,Iso2、Iso3组变化更加显著,差异有统计学意义(P0.05)。结论异氟醚后处理对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤具有保护作用,可改善大鼠远期认知功能,这种作用可能与调节大鼠脑组织IGF-1、BDNF、NGF的表达,保护神经元相关。     

ω-3多不饱和脂肪酸对脂多糖诱导的脑损伤新生大鼠的神经保护作用

目的探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 PUFA)对脂多糖(LPS)诱导的脑损伤新生大鼠的神经保护作用。方法将48只3日龄Sprague-Dawley新生大鼠随机分为对照组、LPS组、ω-3 PUFA组和ω-6 PUFA组,每组12只。LPS组、ω-3 PUFA组和ω-6 PUFA组大鼠腹腔注射0.6 mg·kg~(-1)LPS建立脑损伤模型,然后分别立即腹腔注射等容积的生理盐水、ω-3 PUFA和ω-6 PUFA;对照组大鼠腹腔注射等容积的生理盐水。24 h后处死各组大鼠,取海马组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测各组大鼠海马组织中Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6的mRNA和蛋白表达。结果 LPS组、ω-3 PUFA组、ω-6 PUFA组新生大鼠海马组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA和蛋白表达均高于对照组(P<0.05);ω-6 PUFA组新生大鼠海马组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA和蛋白表达高于LPS组(P<0.05);ω-3 PUFA组新生大鼠海马组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β及IL-6 mRNA和蛋白表达均低于LPS组和ω-6 PUFA组(P<0.05)。结论ω-3 PUFA能下调大鼠海马组织中TLR4/NF-κB信号通路,减少炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6释放,对LPS所致的脑损伤新生大鼠有神经保护作用。     

七氟醚后处理对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及对Toll样受体4/核因子-κB信号通路的影响

目的探讨七氟醚后处理对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠的保护作用及对Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法将60只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、CIRI组和七氟醚后处理组(Se组),每组20只。CIRI组和Se组大鼠采用线栓法制备CIRI损伤模型,假手术组大鼠不给予线栓。Se组大鼠于再灌注即刻给予体积分数2. 5%七氟醚和氧气持续吸入30 min,氧流量1 L·min-1;假手术组和CIRI组大鼠持续吸入氧气30 min,氧流量1 L·min-1。再灌注24 h后采用改良神经功能缺损评分(m NSS)评估大鼠的神经功能,评估结束后取血并处死大鼠取出脑组织;检测各组大鼠脑梗死体积比、细胞凋亡指数、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10和IL-1β水平、脑组织中丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。Western blot法检测大鼠脑组织中Caspase-3、Bax、Bcl-2、TLR4及NF-κB p65蛋白的表达水平。结果 CIRI组和Se组大鼠m NSS评分、脑梗死体积比及细胞凋亡指数高于假手术组(P <0. 05); Se组大鼠m NSS评分、脑梗死体积比、细胞凋亡指数低于CIRI组(P <0. 05)。与假手术组比较,CIRI组和Se组大鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平升高,IL-10水平降低(P <0. 05);与CIRI组比较,Se组大鼠血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平降低,IL-10水平升高(P <0. 05)。与假手术组比较,CIRI组和Se组大鼠脑组织中MDA水平及Caspase-3、Bax、TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高,SOD、GSH-Px活性及Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P <0. 05);与CIRI组比较,Se组大鼠脑组织中MDA水平及Caspase-3、Bax、TLR4、NF-κB p65蛋白表达水平显著降低,SOD、GSH-Px活性及Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P <0. 05)。结论七氟醚对CIRI大鼠脑组织具有一定的保护作用,其作用机制可能是通过抑制TLR4/NF-κB介导的炎性级联反应,减少炎性因子的释放,降低炎症和氧化应激反应,从而抑制细胞凋亡。     

异氟醚对体外循环炎性细胞因子的影响

目的:观察异氟醚吸入麻醉药对体外循环(CPB)早期炎性反应和晚期炎性反应的影响。方法:选取40例先天性心脏病房-室间隔缺损患者按麻醉维持不同随机分为两组异氟醚组(Iso组)和异丙酚组(Pro组),每组20例,Iso组以吸入体积分数为1.0%~1.5%异氟醚为主;Pro组主要用异丙酚维持。分别于以下6个时点采集动脉血,麻醉诱导后(T1)、切皮前(T2)、升主动脉开放后(T3)、CPB术后2h(T4)、CPB术后24h(T5)、CPB术后48h(T6)用放射免疫法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6);采用免疫印迹法(Westerblot)检测HMGB1。结果:Iso组切皮前(T2)TNF-α明显下降,差异有显著性(P<0.05);T2~T4的值明显低于Pro组(P<0.05)。各组TNF-A、IL-6在CPB中及术后均较切皮前(T2)升高(P<0.05);两组间各时间点IL-6的差异无显著性(P>0.05);两组高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在T1~T4时间点差异无显著性(P>0.05);在T5~T6时两组均显著增高,但Iso组均明显低于Pro组,差异具有显著性(P<0.05)。结论:异氟醚不仅可以抑制早期炎症细胞因子TNF-α、IL-6等的释放,同时也可以抑制晚期炎性介质HMGB1的释放,对CPB术中及术后炎性表达具有明显的抑制作用。     

JNK信号通路在异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡的作用

目的 探讨c-Jun氨基末端激酶(the c-Jun N-terminal kinase,JNK)信号通路对异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡以及对磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 48只出生后7d(Py7)的新生大鼠按照随机数的方法随机均分为DMSO对照组(D组)、JNK抑制剂SP600125对照组(SP30组)、异氟醚+DMSO组(Iso+D组)和异氟醚+SP600125组(Iso+ SP30组).对照组吸入空气,异氟醚组吸入1.1％异氟醚4h.麻醉前20 min,幼鼠根据分组分别侧脑室注射SP600125 30 μg或者12％ DMS0 5μl.麻醉结束后6h,部分幼鼠灌注取脑,TUNEL荧光染色检测脑海马CA1区神经细胞凋亡(n=6);部分幼鼠取新鲜脑皮质,Western blotting法检测磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化(n=6).组间资料的比较采用单因素方差分析.结果 幼鼠海马CA1区的TUNEL阳性细胞数比较,Iso+D组[(135.72±21.26)个/mm2]比D组[(24.07±1.35)个/mm2]增加5倍(P＜0.01);与Iso+D组相比,Iso+ SP30组[(42.49±5.56)个/mm2] CA1区的TUNEL阳性细胞数降低了84％ (P＜0.05).Iso+D组磷酸化JNK P46表达比D组增加44.1％ (P＜0.01),而Iso+ SP30组显著降低了磷酸化JNK P54 (p＜ 0.05)和P46(P＜ 0.01)的表达.Iso+D组Bax表达比D组增加1.5倍(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达比D组下降42.2％ (P＜0.05);而Iso+ SP30组Bax表达下降(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P＜0.01).D组与SP30组TUNEL阳性细胞数,磷酸化JNK,Bcl-2和Bax蛋白表达差异均无统计学意义.结论 JNK信号通路激活促进了异氟醚诱导发育期大鼠海马神经细胞凋亡,SP600125通过维持Bcl-2,降低Bax表达产生抑制凋亡作用.     

异氟醚对未成熟兔缺血再灌注心肌细胞间黏附分子-1、核因子-κB表达的影响

目的:探讨异氟醚对幼兔缺血再灌注心肌细胞间黏附分子-1,NF-κB的影响及其对心肌缺血再灌注保护的作用机制。方法:取32只日本大耳白幼兔随机分为4组,假手术组只穿线不结扎;缺血再灌注组:结扎30 min,再灌注2h;异氟醚预处理组:缺血前吸入1.1%异氟醚30min,洗脱15min后处理同缺血再灌注组;格列苯脲组:异氟醚吸入前于耳缘静脉注射格列苯脲0.5m g/kg后处理同异氟醚预处理组。观察心肌细胞凋亡和细胞间黏附分子-1,NF-κB蛋白表达情况,电镜观察超微结构。结果:异氟醚预处理组细胞凋亡较缺血再灌注组和格列苯脲组明显减少(P<0.05),异氟醚预处理组细胞间黏附分子-1,NF-κB的表达明显较缺血再灌注组和格列苯脲组低(P<0.05),电镜显示异氟醚预处理组细胞损伤程度小于缺血再灌注组和格列苯脲组。结论:异氟醚预处理对幼兔缺血再灌注心肌损伤有明显的保护作用,其机制通过下调细胞间黏附分子-1,NF-κB蛋白表达并与促K+ATP通道开放有关。     

孕酮通过NF-κB调控脑损伤后大鼠海马神经元COX-2和Caspase-3的表达

目的研究NF-κB对脑损伤大鼠海马神经元环氧合酶-2(COX-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达调控作用,探讨孕酮(progesterone,PROG)对脑损伤(TBI)后大鼠海马神经元保护作用及其可能机制。方法雄性SD大鼠45只按抛硬币法分为假手术组、损伤组和PROG组,按照改良的Feeney自由落体损伤装置制作大鼠脑损伤模型,用Nissl染色法、免疫组织化学法及免疫蛋白印记法,观察大鼠伤侧海马CA1区NF-κB、COX-2以及Caspase-3的表达变化和孕酮对上述指标变化的影响。结果损伤组大鼠海马CA1区NF-κB(24.0±2.5)、COX-2(35.9±2.7)、Caspase-3(25.1±2.7)阳性神经元的数量较假手术组NF-κB(1.9±0.9)、COX-2(1.5±0.7)、Caspase-3(1.8±0.8)显著增加(P<0.05);PROG组与损伤组比较,海马CA1区NF-κB(14.2±1.8)、COX-2(16.6±2.7)、Caspase-3(11.2±2.4)阳性神经元的数量明显减少(P<0.05)。结论NF-κB对脑损伤后大鼠海马神经元COX-2和C...     

流感病毒介导的巨噬细胞SIRT1/NF-κB调控机制的研究

目的研究巨噬细胞SIRT1-NF-κB信号转导途径在流感病毒感染中的调节机制,为干预流感病毒感染提供新思路。方法以小鼠巨噬细胞Ana.1为研究对象,分别用流感病毒蛋白HA、NP以及NF-κB的抑制剂(PDGF-BB)和激活剂(SC7273)、SIRT1的抑制剂(EX527)和激活剂(SRT1720)处理Ana.1细胞,Western blot观察TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18、SIRT1、NF-κB蛋白相对表达水平,免疫荧光检测SIRT1、NF-κB蛋白在细胞内空间的分布。结果 HA、NP蛋白可诱导Ana.1细胞中SIRT1高表达以及NF-κB的低表达,同时SIRT1与NF-κB在细胞核内都有明显聚集;进一步研究发现,NF-κB被激活时SIRT1表达降低,而NF-κB被抑制时SIRT1表达升高;此外IL-6、IL-1β、IL-18、TNF-α被发现在SIRT1被激活及NF-κB被抑制的情况下表达下调,而在相反情况及流感病毒HA、NP刺激后表达升高。结论流感病毒可能通过HA与NP蛋白激活巨噬细胞SIRT1并进一步抑制NF-κB的表达,形成NF-κB负反馈的现象进而影响机体的炎症反应或免疫应答。     

银杏内酯B对抑郁样行为大鼠炎症反应及氧化应激的调控作用

目的:研究银杏内酯B对抑郁样行为大鼠炎症反应及氧化应激的调控作用.方法:将72只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组及银杏内酯B低、中、高剂量组,每组12只.除正常对照组外,其他各组采用慢性应激刺激法建立抑郁样行为大鼠模型.灌胃给予相应药物6周后,通过旷场实验测定大鼠直立次数及跨越方格数,糖水实验计算大鼠糖水偏爱度.酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及海马组织前列腺素E2(PGE2)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧(ROS)水平.苏木精—伊红(HE)染色法观察大鼠海马组织病理改变.RT-qPCR法测定大鼠海马组织NF-κBP65、TNF-α及IL-1β mRNA相对表达量.Western blotting法测定大鼠海马组织NF-κBP65、TNF-α及IL-1β蛋白表达.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠直立次数、跨越方格数、糖水偏爱度、海马组织CAT和SOD水平均显著降低,血清IL-1β、TNF-α水平,海马组织PGE2水平和ROS相对水平,NF-κBP65、TNF-α和IL-1βmRNA和蛋白表达量显著升高(均P＜0.05),海马组织出现明显病理性改变.与模型组比较,银杏内酯B各剂量组及氟西汀组大鼠直立次数、跨越方格数、糖水偏爱度、海马组织CAT及SOD水平均显著升高,血清IL-1β和TNF-α水平,海马组织PGE2水平和ROS相对水平,NF-κBP65、TNF-α及IL-1βmRNA和蛋白表达量显著降低(均P＜0.05),海马组织病理改变明显改善.结论:银杏内酯B能够显著降低抑郁样行为大鼠体内炎症反应和氧化应激,从而缓解大鼠抑郁状态.     

异氟醚对东莨菪碱致空间认知障碍大鼠胆碱能毒蕈碱受体活性的影响

目的观察异氟醚对东莨菪碱致空间认知障碍大鼠脑皮层和海马组织中胆碱能毒蕈碱受体(M-R)活性的影响.方法雄性SD大鼠56只随机分为8组:对照/1d组,异氟醚/1d组,东莨菪碱/1d组,异氟醚 东莨菪碱/1d组;对照/7d组,异氟醚/7d组,东莨菪碱/7d组,异氟醚 东莨菪碱/7d组.异氟醚组、异氟醚 东莨菪碱组大鼠每天吸入1MAC(1.5%)异氟醚2h,连续4d.在末次给药后1d,对东莨菪碱/1d组、异氟醚 东莨菪碱/1d组大鼠腹腔注射东莨菪碱0.8mg/kg,连续3d;在末次给药后7d,对东莨菪碱/7d组、异氟醚 东莨菪碱/7d组大鼠给予相同处理.给药完毕后急性断头处死大鼠,分离脑皮层和海马,放射配体结合分析法测定M-R的活性.结果与对照/1d组和异氟醚/1d组相比,东莨菪碱/1d组、异氟醚 东莨菪碱/1d组海马M-R活性降低(P＜0.01).与对照/1d组相比,异氟醚/1d组海马M-R活性增高(P＜0.05).与东莨菪碱/1d组相比,异氟醚 东莨菪碱/1d组海马M-R活性增高(P＜0.01).与对照/7d组和异氟醚/7d组相比,东莨菪碱/7d组、异氟醚 东莨菪碱/7d组海马M-R活性降低(P＜0.05).结论大鼠持续吸入1.5%异氟醚4d(每天2h)可增加海马M-R的活性.     

右美托咪定可能通过SIRT1信号通路减轻老龄大鼠的术后认知功能障碍

目的评价沉默信息调节因子1（SIRT1）信号通路在右美托咪定（DEX）减轻老龄大鼠术后认知功能障碍（POCD）中的作 用。方法取清洁健康的雄性SD大鼠72只,18~20月龄,体质量500~700 g,采用随机数字表法分为4组。正常对照组（Control 组）：未经处理的正常老龄大鼠;POCD组：手术处理建立的POCD模型大鼠;DEX组：术前DEX预处理的POCD模型大鼠;SIRT1 抑制剂组（EX527组）：术前DEX和EX527预处理的POCD模型大鼠,18只/组。DEX组和EX527组术前30 min腹腔注射右美托 咪定25 μg/kg,Control组和POCD组腹腔注射等量的生理盐水。30 min后POCD组、DEX组及EX527组行剖腹探查术,维持手 术时间30 min。EX527组术前5 min静脉注射EX527 1 μg/kg。Control组不做任何处理。分别于术后1 d（T1）、3 d（T2）和5 d（T3） 时每组随机选取6只大鼠进行Morris水迷宫实验,记录逃避潜伏期和穿越平台次数以测定认知功能,之后立即处死大鼠并取其 海马,采用ELISA法测定各组大鼠海马组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的含量,Western blot法分别检测海 马神经元SIRT1和NF-κB的表达。结果与Control组相比,POCD组和EX527组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,TNF-α、 IL-6含量升高,海马神经元SIRT1表达下调,NF-κB表达升高（P<0.05）;与POCD组相比,DEX组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数 增加,TNF-α、IL-6含量降低,海马神经元SIRT1表达上调,NF-κB表达降低（P<0.05）,EX527组与POCD组相比上述指标差异无 统计学意义（P>0.05）;与DEX组相比,EX527组逃避潜伏期延长,穿越平台次数减少,TNF-α、IL-6含量升高,海马神经元SIRT1 表达下调,NF-κB表达升高（P<0.05）。结论右美托咪定减轻老龄大鼠术后认知功能障碍可能通过SIRT1信号通路发挥作用。     

地氟醚预处理对缺氧/复氧损伤ECV304细胞NF-κB活性的影响

目的探讨地氟醚预处理对缺氧/复氧(A/R)损伤ECV304细胞NF-κB活性的影响。方法选用ECV304细胞株.实验分为两部分:(1)将细胞分为空白对照组及TNF-α不同持续时间刺激组共6组,用West-ernblot法分析NF-κB的抑制因子IκB蛋白的降解和磷酸化。(2)将细胞分为5组,即空白对照组(Ⅰ组)、A/R组(Ⅱ组)、A/R TNF-α10ng/mL刺激组(Ⅲ组)、地氟醚1.0MAC预处理 A/R组(Ⅳ组)和地氟醚1.0MAC预处理 A/R TNF-α10ng/mL刺激组(Ⅴ组)。用间接免疫荧光法检测各组细胞NF-κB/p65亚基的定位。结果TNF-α刺激ECV304细胞后,IκB-α蛋白降解的时间高峰为30min,而IκB-α磷酸化的时间高峰为1h。A/R损伤可激活ECV304细胞中NF-κB的活性,而经1.0MAC地氟醚预处理后,由TNF-α激活的上述变化可受到抑制。免疫荧光分析显示,TNF-α刺激可使NF-κB/p65荧光标记由胞浆区转入胞核区,而经地氟醚预处理后,NF-κB/p65入核明显减少。结论抑制NF-κB的激活可能是地氟醚预处理减少ECV304细胞缺氧/复氧损伤的机制之一。     

大黄素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制

目的：探讨大黄素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用,阐明其作用机制。方法：将60只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组（给予生理盐水）,模型组（给予生理盐水,建模）,阳性对照组（给予5mg·kg^-1地塞米松,建模）,低、中和高剂量大黄素组（给予10、20和40 mg·kg^-1大黄素,建模）（n=10）。采用大脑中动脉阻断法（MCAO）建立局灶性脑缺血大鼠模型。检测各组大鼠行为学评分,采用TTC染色法检测各组大鼠脑梗死体积百分比,ELISA法检测各组大鼠缺血侧海马组织中肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）和白细胞介素6（IL-6）水平,Western blotting法检测各组大鼠缺血侧海马组织中核转录因子κB （NF-κB） p65和核转录因子κB抑制蛋白α（IκBα）蛋白表达水平。结果：假手术组大鼠未发现神经功能缺损症状和脑梗死;与假手术组比较,模型组大鼠缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显升高（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与模型组比较,阳性对照组,中和高剂量大黄素组大鼠行为学评分降低（P<0.05）,脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）,缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与低剂量大黄素组比较,中和高剂量大黄素组大鼠行为学评分降低（P<0.05）、脑梗死体积百分比明显减小（P<0.05）,缺血侧海马组织中IL-6、IL-1β和TNF-α水平明显降低（P<0.05）,NF-κB p65蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,IκBα蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。结论：大黄素对大鼠局灶性脑缺血损伤有一定的保护作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路和降低炎症因子分泌有关。     

miR-138通过靶向LCN2在七氟醚诱导的大鼠认知障碍中的作用及机制

目的 探讨miR-138通过靶向LCN2在七氟醚诱导的大鼠认知障碍中的作用及机制。 方法 将90只7周龄SD大鼠随机分为对照组(n=20)、七氟醚组(n=20)、七氟醚+NC mimic组(n=20)、七氟醚+miR-138 mimic组(n=20)、七氟醚+miR-138 mimic组+vector组(n=5)、七氟醚+miR-138 mimic+pcDNA-LCN2组(n=5)。构建七氟醚诱导的大鼠认知障碍模型,七氟醚诱导的大鼠分别注射10 μL miR-138 mimic、NC mimic慢病毒悬液。采用Morris水迷宫实验分析潜伏期、跨台时间和游泳速度;HE染色检测海马神经元的病理变化;TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况;实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR)检测miR-138、脂质运载蛋白2（LCN2）的mRNA水平表达;双荧光素酶报告基因系统用于检测miR-138和LCN2之间的关系;Western blotting 检测海马组织中LCN2、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、Bax、Bcl-2、p-JAK2和p-STAT3蛋白水平;ELISA实验检测海马组织中IL-6、TNF-α、IL-1β。 结果 与对照组比较,七氟醚组中miR-138表达水平显著降低（P<0.05）;大鼠逃避潜伏期显著增加,穿越平台次数显著减少,海马神经元损伤,海马神经元凋亡数量显著增加,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax蛋白水平显著升高,Bcl-2显著降低,IL-1β、TNF-α、IL-6水平升高,p-JAK2和p-STAT3蛋白水平降低（均P<0.05）。与七氟醚+NC mimic组比较,七氟醚+miR-138 mimic组中大鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,神经元病理损伤减轻,海马神经元凋亡数量显著减少,cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax蛋白水平降低,Bcl-2水平升高,IL-1β、TNF-α、IL-6水平降低,p-JAK2和p-STAT3蛋白水平升高（均P<0.05）。双荧光素酶报告基因结果显示LCN2 是miR-138的靶基因,过表达LCN2可显著逆转miR-138对七氟醚诱导的认知障碍大鼠凋亡的作用（P<0.05）。 结论 miR-138靶向LCN2通过JAK2/STAT3通路对七氟醚诱导的认知障碍具有神经保护作用。     

吡咯烷二硫代氨基甲酸盐对癫痫大鼠海马NF-κB及相关炎症因子表达的影响

目的 探讨癫痫大鼠海马组织核转录因子κB(NF-κB)随给药时间的变化规律及NF-κB信号传导通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-a)和白细胞介素1β(IL-1β)的影响.方法 应用Western blotting检测戊四氮(PTZ)致痫大鼠海马核蛋白中NF-κB p65在不同时点( 14d、21d、28d、35d)及PDTC干预癫痫大鼠后的表达;应用实时定量PCR及ELISA检测TNF-α、IL-1βmRNA和蛋白水平在PDTC干预前后的变化.结果 NF-κB p65在癫痫大鼠海马核蛋白中含量于14d开始增高,持续至28d,35d后恢复至14d水平;PDTC干预后,NF-κB 165在干预组不同时间点的含量分别为[(0.54±0.07)、(0.65±0.08)、(0.78±0.10)、(0.78±0.10)],低于模型组[(1.20±0.11)、(1.42±0.14)、(1.88 ±-0.16)、(1.25 ±0.10)],差异具有统计学意义(P＜0.01).癫痫发作后海马组织内TNF-α、IL-1β mRNA分别为[(1.34±0.13,0.81±0.17)、(1.64 ±0.17,1.56 ±0.20)、(2.03±0.16,1.65±0.18)、(1.40±0.10,1.30±0.13)],明显高于对照组(P＜0.01),PDTC干预后显著降低TNF-α、IL-1β mRNA的表达[分别为(0.96±0.1,0.57±0.07)、(1.36±0.15,1.09±0.18)、(1.47±0.14,1.25±0.16)、(1.12±0.12,0.85 ±0.12)],与模型组相比差异具有统计学意义(P＜0.01).ELISA检测海马组织内TNF-α、IL-1β蛋白含量与上述结果相似.结论 癫痫发作可诱发海马组织NF-κB的核转位及TNF-α、IL-1β的表达,PDTC能明显抑制癫痫诱发的NF-κB核转位及TNF-α、IL-1β的表达.     

常压高浓度氧对脑缺血-再灌注大鼠缺血核心区核转录因子-κB的适度调节作用

目的 探究常压高浓度氧治疗（normobaric hyperoxia,NBO）对脑缺血-再灌注大鼠脑内白细胞介素-1β（interleukin 1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、核转录因子（nuclear factor-κB,NF-κB）及其抑制蛋白（inhibitor of κB,IκB）表达的影响,探讨NBO治疗对脑缺血后NF-κB介导的炎性反应损伤的作用。方法 将15只健康雄性SD大鼠（280~320 g）依据数字表法随机分为3组：假手术组（Sham,n=3）、正常氧浓度组（Normoxia,n=6）和NBO （n=6）组,应用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,缺血90 min再灌注24 h。Sham组和Normoxia组大鼠术后呼吸普通空气,NBO组大鼠术后至再灌注前呼吸100%常压氧气。采用免疫荧光染色和Western blotting的检测方法,研究NBO治疗对脑缺血核心区炎性因子IL-1β、TNF-α和转录调节因子NF-κB及其抑制蛋白IκB表达的影响。结果 免疫荧光结果显示：1与Sham组相比,Normoxia组缺血核心区IL-1β、TNF-α及核移位NF-κB p65阳性细胞数目明显增多（P<0.05）,荧光强度增强;2与Normoxia组相比,NBO组缺血核心区IL-1β、TNF-α及核移位NF-κB p65阳性细胞数目明显减少（P<0.05）,荧光强度减弱。Western blotting结果显示：1与Sham组相比,Normoxia组缺血核心区NF-κB p65显著升高,IκB明显降低（P<0.05）,2与Normoxia组相比,NBO组缺血核心区NF-κB p65水平显著降低,IκB明显升高（P<0.05）。结论 NBO治疗可能通过调节缺血核心区转录调控因子NF-κB的适度活化来抑制脑缺血再灌注炎性损伤,从而实现脑神经保护作用。     

芍药甘草汤对坐骨神经慢性压迫性损伤大鼠痛阈和脊髓SIRT1表达的影响

[目的]观察芍药甘草汤(shaoyao-gancao decoction,SGD)对坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠机械痛敏和热痛敏的影响,并研究SGD对CCI大鼠脊髓沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)表达的影响。[方法]SD大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、CCI组、SGD组、SGD+SIRT1-si RNA(small-interfering RNA,si RNA)和SGD+MM-si RNA(阴性对照)组,SGD组大鼠在CCI模型建立前6h开始灌胃给予40g·kg-1 SGD,1次/d,连续4d,而Sham组和CCI组大鼠则灌胃给予同体积的0.9%生理盐水;SGD+SIRT1-si RNA组大鼠除灌胃给予40g·kg-1 SGD,还鞘内给予10μL(2.5μg)的SIRT1-si RNA,SGD+MM-si RNA组则给予同剂量的MM-si RNA。各组分别在术前和术后第1、3、5、7d测定机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),手术结束后提取大鼠脊髓测定SIRT1和Ac-NF-κB/NF-κB的蛋白表达。[结果]和Sham组相比,CCI组术后MWT及TWL均下降(P0.05),SGD组与CCI组相比,MWT和TWL在术后1、3和7d均明显增加(P0.05)。和Sham组相比,CCI组SIRT1和Ac-NF-κB/NF-κB表达降低(P0.01),和CCI组比较,SGD+SIRT1-si RNA组SIRT1和Ac-NF-κB/NF-κB表达增加(P0.01),而鞘内预先给予SIRT1 si RNA组则可逆转SGM的作用(P0.05,P0.01)。[结论]SGD能抑制CCI大鼠的机械痛敏和热痛敏,其作用可能和增加脊髓SIRT1的表达有关。