茶黄素调节AMPK/SIRT1/NF-κB信号通路对膝骨关节炎大鼠的治疗作用

目的:探讨茶黄素调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠的治疗作用。方法:向63只SD大鼠右膝关节注射50μL的碘乙酸钠(MIA)0.01mg/μL制备KOA大鼠模型，另取13只大鼠仅膝关节注射生理盐水作为空白组，两周后随机从造模和空白组挑选3只大鼠，进行HE染色、 Mankin和lequesne MG评分，以鉴定KOA模型是否制备成功。剩余造模成功大鼠随机分为模型组、茶黄素低剂量组(20mg/kg茶黄素)、茶黄素中剂量组(40mg/kg茶黄素)、茶黄素高剂量组(80mg/kg茶黄素)、塞来昔布组(18mg/kg阳性药塞来昔布)、抑制剂组(80mg/kg茶黄素+0.2mg/kg AMPK抑制剂Compound C)。茶黄素低、中、高剂量组以及塞来昔布组灌胃相应剂量药物，空白组和模型组灌胃等体积的蒸馏水，抑制剂组除灌胃相应剂量茶黄素外还需尾静脉注射相应剂量Compound C,每天1次，连续给药4周。在第15天(造模后1天),第29天(给药第14天)和第43天(给药第28天)检测大鼠机械疼痛阈值和大...     

柴胡疏肝散对抑郁症模型大鼠前额叶皮层SIRT1/NF-κB信号通路的作用研究

目的 观察柴胡疏肝散对抑郁症模型大鼠SIRT1/NF-κB信号通路的作用,探讨柴胡疏肝散抗抑郁可能机制.方法 将大鼠随机分为空白组、模型组、西酞普兰组和柴胡疏肝散组,除空白组外,其他各组制备抑郁症模型.西酞普兰组给予草酸艾司西酞普兰片制成的药液,柴胡疏肝散组给予柴胡疏肝散药液,空白组和模型组给予等体积的纯水.采用旷场实...     

电针额区对血管性痴呆大鼠认知功能及SIRT1/NF-κB信号通路的影响

目的 观察电针额区对血管性痴呆大鼠认知功能及SIRT1/NF-κB信号通路的影响,初步探讨其作用机制.方法 选取60只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组、模型组、西药组和电针组,动物模型的制作方法采取改良的2-VO法造模.电针组参照于致顺教授头针疗法,选取VD大鼠头部额区丛刺并连接脉冲电疗仪,西药组给予脑复康治...     

地塞米松对小鼠急性胰腺炎中miRNA-155及NF-κB信号通路的影响

目的 探讨地塞米松（dexamethasone,DEX）对急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）小鼠模型胰腺组织中miRNA-155及核因子-κB（NF-κB）信号通路的影响。方法 利用蛙皮素建立小鼠AP动物模型,实验分组为对照组、模型组、地塞米松组（DEX组）,分别连续3次予生理盐水、蛙皮素（10μg/mL浓度按50μg/kg）、蛙皮素（剂量同模型组）+DEX（1 mL/kg）腹腔注射。利用ELISA法检测各组动物胰腺组织及血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）、白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）的含量;利用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测各组动物胰腺组织中miRNA-155 mRNA的表达情况;利用Western blot检测各组胰腺组织中磷酸化p65及IκBα蛋白的表达情况。结果ELISA检测结果显示,与模型组比较,DEX组动物胰腺组织及血清中IL-1β、TNF-α与IL-6的含量显著降低,对照组最低。RT-qPCR结果显示,与模型组相比较,DEX组胰腺组织中miRNA-155 mRNA的表达显著降低,对照组最低。Western blot结果显示,与模型组相比较,DEX组胰腺组织中磷酸化p65及IκBα蛋白的表达均显著降低。结论 DEX可能通过抑制miRNA-155的表达,进而抑制p65及IκBα蛋白的磷酸化,从而抑制NF-κB信号通路的活化,减少炎症因子如IL-1β、TNF-α与IL-6等的合成与释放,对胰腺腺泡细胞起到保护作用。     

keap1-Nrf2与NF-κB信号通路相关性研究进展

keap1是细胞内信号通路中一种非常重要的调节蛋白,其最常见的靶标蛋白是核转录因子Nrf2,主要介导细胞抗氧化应激反应。keap1除了能调节Nrf2,还能直接影响NF-κB信号通路,与炎症、肿瘤、白血病、神经系统疾病等关系密切。keap1可以介导不同的信号通路,协调不同信号通路的反应。本文主要就keap1-Nrf2与NF-κB信号通路相关性的研究进展做一简要综述。     

TLR4/NF-κB通路在异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中的作用

目的探讨TLR4/NF-资B信号通路在异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护中的作用，为防治心肌缺血/再灌注损伤提供新的理论依据。方法将成年雄性SD大鼠40只随机分成5组：假手术组（S组）、缺血再灌注损伤组（IR组）、异氟醚预处理组（ISO组）、TLR4抑制剂TAK-242组(T组)、异氟醚+TAK-242预处理组（ISOT组），每组8只。S组左冠状动脉前降支只穿线不结扎；IR组只进行缺血再灌注；ISO组：吸入1.0MAC异氟醚30min，停止吸入15min；T组：予尾静脉注射TLR4受体抑制剂TAK-242（10mg/kg）；ISOT组：吸入异氟醚前1min尾静脉注射TAK-242（10mg/kg），之后建立缺血再灌注模型。再灌注完成后取出心脏，HE染色在光学显微镜下观察心肌组织形态学变化并测定各组大鼠心肌梗死面积；分别采用RT-PCR和Westernblot技术检测心肌组织中TLR4受体在转录和蛋白水平上的变化，以及NF-资B的表达情况。结果与IR组比较，其余各组TLR4mRNA和TLR4表达水平均明显降低（均P＜0.01）；与ISO、T组比较，ISOT组TLR4mRNA和TLR4表达显著降低（均P＜0.01）；与ISO组比较，T组TLR4mRNA和TLR4表达显著降低（均P＜0.01）。与IR组比较，其余各组NF-资B的表达显著降低（P＜0.01）；与T、ISOT组比较，ISO组NF-资B的表达均明显降低（均P＜0.01）。与IR组比较，其余各组心肌梗死面积均明显减少（P＜0.01）；与ISO组和T组比较,ISOT组心肌梗死面积显著减小（P＜0.01）；而ISO组和T组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论TLR4/NF-资B信号通路参与了异氟醚预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。     

盘龙七片调控SIRT1/NF- κB通路对骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的 观察盘龙七片对骨关节炎（osteoarthritis,OA）小鼠沉默信息转录调控因子（silent information regulator type 1,SIRT1）/核因子- κB（nuclear factor- kappa B,NF- κB）通路及软骨细胞凋亡的影响。方法 手术切除右膝关节内侧半月板和前交叉韧带复制小鼠OA模型。将小鼠分为正常对照组,模型组,阳性对照组,盘龙七片低、中、高剂量组。通过番红O- 快速绿染色观察膝关节结构变化,进行Mankin评分评估关节炎严重程度,流式细胞术检测软骨细胞凋亡指数,qRT- PCR检测Bax、Bcl- 2、Caspase- 3 mRNA表达水平,Western blot法检测软骨细胞 SIRT1、NF- κB蛋白表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组小鼠膝关节软骨细胞凋亡率增加,Bax、Caspase- 3 mRNA和NF- κB蛋白表达水平显著增加,Bcl- 2 mRNA和SIRT1蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义（P<0.05）;与模型组比较,阳性对照组与盘龙七片低、中、高剂量组小鼠膝关节软骨细胞凋亡率显著降低,Bax、Caspase- 3 mRNA和NF- κB蛋白表达水平显著降低,Bcl- 2 mRNA和SIRT1蛋白表达水平显著增加,差异均有统计学意义（P<0.05）,盘龙七片的作用呈明显的剂量依赖性。结论 盘龙七片可抑制OA小鼠膝关节软骨细胞凋亡,其作用机制可能与调节SIRT1/NF- κB信号通路相关。     

结核分枝杆菌对miR-21和TLR-4/NF-κB信号通路的影响研究

目的 研究结核分枝杆菌(Mtb)H37Rv及BCG感染RAW264.7和THP-1细胞后,对miR-21表达及Toll样受体(TLR)-4/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响.方法 体外培养RAW264.7和THP-1细胞及Mtb H37Rv、BCG;建立Mtb感染RAW264.7和THP-1细胞模型;RAW26...     

白术多糖对类风湿性关节炎大鼠的抗炎作用及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨白术多糖(PAMK)对类风湿性关节炎(RA)大鼠的抗炎作用及其对Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法 采用Ⅱ型胶原诱导建立RA大鼠模型,造模成功后将大鼠分为模型组、阳性药物组(雷公藤多苷片)、PAMK低、高剂量组,同时设置正常对照组,每组12只。给予雷公藤多苷片或PAMK灌胃给药,1次/d,连续4周。测量大鼠体质量、足趾容积和关节炎指数;计算胸腺指数和脾脏指数;HE染色观察踝关节滑膜组织病理学变化;ELISA法检测血清及踝关节滑膜组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot检测踝关节滑膜组织中总蛋白Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、磷酸化核因子κB p65[p-NF-κB p65(Ser536)]及核蛋白NF-κB p65表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠可见滑膜增生、层次不清等病理学改变,体质量降低(P<0.05),足趾容积、关节炎指数以及胸腺、脾脏指数升高(P<0.05),血清及踝关节滑膜组织中IL-1β、...     

中药调控NF-κB信号通路干预胃溃疡研究进展

胃溃疡(gastric ulcer, GU)是一种临床常见多发病。GU易反复发作,长期应用抑酸药治疗不良反应大。中医药对于GU的治疗具有多靶点、多疗效、不良反应少等优点。研究表明,胃溃疡发生机制与氧化应激、炎性反应等密切相关,核因子-κB (nuclear factor-kappa B,NF-κB)作为炎性反应的核心因子,参与多种炎性、氧化反应。故本文以中医药为基础,NF-κB为切入点,总结中医药干预NF-κB信号通路治疗GU相关文献,发现抑制NF-κB信号通路,可通过调控炎症、氧化、细胞凋亡等机制,下调肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)等因子,降低超氧化物歧化酶(auperoxide dismutase, SOD)、过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO),促细胞凋亡蛋白、caspase-3活性,增加还原型谷胱甘肽(glutat...     

NF-κB/IκB信号通路与皮肤病

核因子-κB (nuclear factor kappa binding,NF-)是广泛存在于细胞中的具有多向调节作用的蛋白质分子,可调节100多种靶基因的表达,其中的大多数均参与了宿主的免疫和炎症反应.NF-κB抑制蛋白 (inhibitor of NF-κB,IκB) 是NF-κB的抑制因子.本文主要就NF-κB/IκB信号通路的概况及其在某些皮肤病发病机制中的作用进行综述.     

地氟醚预处理对缺氧/复氧损伤ECV304细胞NF-κB活性的影响

目的探讨地氟醚预处理对缺氧/复氧(A/R)损伤ECV304细胞NF-κB活性的影响。方法选用ECV304细胞株.实验分为两部分:(1)将细胞分为空白对照组及TNF-α不同持续时间刺激组共6组,用West-ernblot法分析NF-κB的抑制因子IκB蛋白的降解和磷酸化。(2)将细胞分为5组,即空白对照组(Ⅰ组)、A/R组(Ⅱ组)、A/R TNF-α10ng/mL刺激组(Ⅲ组)、地氟醚1.0MAC预处理 A/R组(Ⅳ组)和地氟醚1.0MAC预处理 A/R TNF-α10ng/mL刺激组(Ⅴ组)。用间接免疫荧光法检测各组细胞NF-κB/p65亚基的定位。结果TNF-α刺激ECV304细胞后,IκB-α蛋白降解的时间高峰为30min,而IκB-α磷酸化的时间高峰为1h。A/R损伤可激活ECV304细胞中NF-κB的活性,而经1.0MAC地氟醚预处理后,由TNF-α激活的上述变化可受到抑制。免疫荧光分析显示,TNF-α刺激可使NF-κB/p65荧光标记由胞浆区转入胞核区,而经地氟醚预处理后,NF-κB/p65入核明显减少。结论抑制NF-κB的激活可能是地氟醚预处理减少ECV304细胞缺氧/复氧损伤的机制之一。     

Tempol对心肌肥厚大鼠NF-κB信号通路的影响

目的探讨2,2,6,6-四甲基-4-哌啶醇(tempol)对大鼠心肌肥厚NF-κB信号通路的影响。方法通过腹腔注射异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)(5 mg/kg,每日2次,维持2周)的方法建立大鼠心肌肥厚模型。选择42只SD雄性大鼠随机分为3组:正常对照组,心肌肥厚模型组(ISO+生理盐水组),tempol干预组(ISO+tempol组)。相应药物干预8周后,测定全心重量指数(heart weight index,HWI)和左心室重量指数(left ventricular weight index,LVWI),应用HE染色观察心肌细胞形态及纤维化,Masson染色检测大鼠心肌纤维化情况,应用qRTPCR法分别检测心肌组织中TNF-α、IL-6 mRNA的转录水平,Western blot分别测定大鼠心肌组织IκBα、p-p65、p65蛋白的表达水平。结果与正常对照组比较,模型组的HWI、LVWI增加(P0.05),TNF-α、IL-6 mRNA的转录水平,p-p65/p65的表达均明显增加,NF-κB抑制蛋白IκBα表达减少(P0.05),心肌HE染色见肌纤维增粗、心肌结构紊乱、心肌细胞表面积增大,心肌Masson染色见心肌纤维化加重,心肌间质胶原纤维增加;与模型组比较,tempol组HWI、LVWI减小(P0.05),TNF-α、IL-6 mRNA的转录水平,p-p65/p65的表达均有不同程度降低,IκBα表达增加(P0.05),心肌HE染色见心肌结构紊乱、心肌细胞肥大程度降低,心肌Masson染色见心肌纤维化程度改善,间质胶原纤维减少。结论 Tempol可改善ISO诱导的心肌肥厚,这可能与抑制NF-κB信号通路活性密切相关。     

基于NF-κB/COX-2信号通路探讨芍药内酯苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的影响

目的:基于NF-κB/COX-2信号通路探讨芍药内酯苷对溃疡性结肠炎模型大鼠的影响.方法:采用5％2,4,6-三硝基苯磺酸(80 mg·kg-)和体积分数50％乙醇混合液灌肠制备大鼠溃疡性结肠炎模型,造模成功后将其随机分为模型组、美沙拉嗪组(0.36 g·kg-1)、芍药内酯苷高剂量组(60 mg·kg-1)、芍药内酯...     

TLR4/NF-κB信号通路在儿童过敏性紫癜发病机制中的研究

目的 探讨TLR4/NF-κB信号通路及其下游炎症因子IL-6、IL-17水平变化在过敏性紫癜(HSP)及紫癜性肾炎(HSPN)发病机制中的作用和意义。方法 选取HSP、HSPN患儿各30例为实验组,入组患儿均为首发并且近1个月内无糖皮质激素、免疫抑制剂或细胞毒性药物等特殊药物使用史,另选取我院儿童保健门诊健康体检儿童30例作为正常对照组,均于无菌操作下采集清晨空腹静脉血6 ml分3支管,1支用于流式细胞仪检测TLR4蛋白的表达量,另1支采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测NF-κB。再取1支2 ml肝素抗凝管离心用于ELISA法检测的IL-6、IL-17含量。结果 (1)HSPN组和HSP组TLR4蛋白表达量分别是：(54.13±6.95)%、(39.37±4.35)%,NF-κB水平分别是：(207.78±121.23)ng/L、(163.33±65.45)ng/L,均高于对照组TLR4:(12.31±1.63)%、NF-κB:(98.24±35.64)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HSPN组和HSP组血清IL-6:(28.29±3.30)ng/L、(2...     

芦荟大黄素调控Notch-1/Akt/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响

目的:观察芦荟大黄素调控Notch-1/AKT/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响。方法:实验分为对照组(正常培养SGC-7901细胞)、芦荟大黄素低剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素10 mg·L^-1)、芦荟大黄素中剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素30 mg·L^-1)及芦荟大黄素高剂量组(SGC-7901细胞+芦荟大黄素50 mg·L^-1)。噻唑蓝比色法检测各组细胞培养后的增殖抑制率;Transwell小室检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞仪检测细胞周期分布;Annexin V-APC/7-AAD双染法检测细胞凋亡情况;Western blot法检测Notch-1/AKT/NF-κB信号通路蛋白及凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达。结果:与对照组比较,芦荟大黄素低剂量组、中剂量组、高剂量组细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞穿膜个数和划痕闭合率明显降低(P<0.05),G0/G1期肿瘤细胞比例增加(P<0.05),细胞凋亡AI值升高(P<0.05),Notch-1、p-Akt、P65、Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值降低,Bax表达升高(P<0.05)。结论:芦荟大黄素可能通过阻滞SGC-7901细胞在G0/G1期,抑制其增殖能力,降低迁移和侵袭能力,并通过抑制Notch-1/AKT/NF-κB信号通路起到诱导细胞凋亡作用。     

绿原酸通过TLR4/NF-κB信号通路调控脓毒症大鼠肠上皮细胞屏障功能的研究

目的 观察绿原酸通过调控TLR4/NF-κB信号通路减轻脓毒症(sepsis)大鼠肠道氧化应激损伤、改善肠上皮细胞屏障功能的作用。方法 选取SD大鼠60只,采用随机数字表法分成假手术组、模型对照组、绿原酸(低、高剂量)组,每组15只。术后24 h,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-10;比色法测定小肠组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用Western blotting法测定小肠组织中的蛋白表达[密封蛋白-1(Claudin-1)、闭锁连接蛋白-1(ZO-1)及TLR-4/NF-κB通路相关的蛋白]。结果 与模型对照组[(4.45±0.14)分]比较,低剂量组[(4.17±0.22)分]、高剂量组[(1.95±0.08)分]Chiu评分明显下降(t=4.159、60.048,均P<0.001);高剂量组血清TNF-α、IL-6、IL-10水平及小肠组织中NO、MDA含量均显著降低(均P<0.05),SOD含量、Claudin-1、ZO-1蛋白表达量及MyD88...     

罗布麻总黄酮干预p38MAPK/NF-κB信号通路治疗大鼠动脉粥样硬化作用及机制研究

目的:观察罗布麻叶总黄酮对动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中p38MAPK/NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响,探讨罗布麻叶总黄酮干预AS的作用及其可能的作用机制。方法:72只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组及罗布麻叶总黄酮低、中、高剂量组。除正常对照组外,其他各组连续3天注射维生素D3后喂饲高脂饲料9周,进行造模,造模结束后各组分别给药4周。实验结束后,取大鼠胸主动脉,常规制备石蜡标本,HE染色,光镜下观察大鼠胸主动脉的病变情况;分光光度法检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平;Western-bloting法检测p38MAPK、p-p38MAPK、NF-κB、IL-6蛋白的表达。结果:罗布麻叶总黄酮中、高剂量组能显著改善胸主动脉壁病变,减少胸主动脉内皮下泡沫细胞及脂质空泡,并可降低大鼠血清中LDL-C、TC、TG水平以及hs-CRP的含量,提高HDL-C;同时发现罗布麻叶总黄酮中、高剂量组可以抑制p38MAPK的磷酸化,降低NF-κB、IL-6蛋白的表达。结论:罗布麻叶总黄酮对大鼠动脉粥样硬化具有明显的治疗作用,其抗AS的作用可能是通过干预p38MAPK/NF-κb信号通路下调相关蛋白来实现的。